正常妊娠妇女及子痫前期病人胎盘组织HIF-2а表达

目的 了解缺氧诱导因子2а(HIF-2а)在正常妊娠妇女及子痫前期病人胎盘组织中的表达及其在子痫前期发病机制中的作用.方法 采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化法.检测30例子痫前期病人(子痫前期组,其中轻度11例,重度19例)胎盘组织中HIF一2a mRNA和蛋白的表达水平,并以37例正常妊娠妇女(其中早期妊娠组12例,中期妊娠组10例,晚期妊娠组15例)作为对照.结果 正常妊娠妇女早期妊娠组HIF-2аmRNA的表达水平较晚期妊娠组低,差异有统计学意义(F=5.323,q=4.574,P<0.01);其余各组间比较差异均无统计学意义(P>0.05).正常妊娠早期妊娠组HIF-2а蛋白表达水平高于中期妊娠及晚期妊娠组,差异有统计学意义(F=11.862,q=6.230、5.672,P<0.01);中期妊娠组与晚期妊娠组比较差异无统计学意义(P>0.05).子痫前期胎盘组织HIF-2а蛋白表达水平高于晚期妊娠组(t=5.174,P<0.01).重度子痫前期与轻度子痫前期组比较差异无显著性(P>0.05).结论 胎盘HIF-2а在正常妊娠胎盘发育过程中发挥作用;胎盘HIF-2а蛋白表达参与子痫前期的病理生理过程.     

子痫前期患者胎盘中核因子κB和缺氧诱导因子1α的表达及其关系

目的研究子痫前期患者胎盘中核因子κB(NF-κB)及缺氧诱导因子1α(HIF-1α)的表达及其关系。方法采用免疫组化和反转录聚合酶链反应检测子痫前期和正常对照组胎盘中NF-κBp65及HIF-1α的表达水平。结果①反转录聚合酶链反应:子痫前期各组及对照组胎盘中NF-κBp65mRNA表达水平间差异无统计学意义(P>0.05);子痫前期组HIF-1αmRNA表达水平较对照组显著增强(P<0.05),且重度组显著高于轻度组(P<0.05)。②免疫组化:子痫前期组胎盘NF-κBp65及HIF-1α蛋白表达均较对照组显著增强,差异有统计学意义(P<0.05),且重度组显著高于轻度组(P<0.05)。③子痫前期各组HIF-1α表达与NF-κB活性呈正相关(P<0.05)。结论NF-κB与HIF-1α参与了子痫前期发病过程。子痫前期患者胎盘NF-κB活性增强,导致HIF-1α表达增多,引起机体进一步的病理生理改变。     

单核细胞趋化蛋白-1及其受体与子痫前期发病关系

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其受体(CCR2)与子痫前期发病的关系。方法选择在我院住院分娩的子痫前期孕妇60例,其中重度子痫前期30例,轻度子痫前期30例,以同期分娩的正常晚期妊娠孕妇30例为对照组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测两组孕妇血清MCP-1浓度,采用实时PCR技术检测两组孕妇胎盘组织中MCP-1及CCR2mRNA表达水平。结果子痫前期组孕妇血清MCP-1浓度显著高于对照组(t=3.4,P<0.05),轻度子痫前期组与重度子痫前期组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。子痫前期组孕妇胎盘组织中CCR2mRNA的表达显著高于对照组(t=6.1,P<0.05),轻度子痫前期组与重度子痫前期组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。子痫前期组孕妇胎盘组织中MCP-1mRNA的表达与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论孕妇血清中MCP-1及胎盘组织CCR2mRNA的表达与子痫前期发病密切相关,但与疾病严重程度无明显关系。     

子痫前期产妇胎盘床HIF-1α蛋白的表达与母体外周血vWF浓度的变化

目的:研究子痫前期产妇胎盘床低氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α, HIF-1α)蛋白的表达与母体外周血血管性假血友病性因子(von Willbrand Factor, vWF)浓度的变化,并探讨它们在子痫前期发病机制中的作用.方法:选取正常妊娠产妇、子痫前期轻度及子痫前期重度产妇各20例,采用Western印迹方法检测胎盘床HIF-1α蛋白的表达,酶联免疫吸附法(ELISA)检测母体外周血vWF的浓度;Spearman相关分析比较两者的相关性.结果:HIF-1α蛋白在子痫前期重度组胎盘床中的表达最高,其次是子痫前期轻度组,对照组最低,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.001).vWF浓度在子痫前期重度组母体外周血中最高,其次是子痫前期轻度组,对照组最低,组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).胎盘床HIF-1α蛋白的表达与母体外周血vWF浓度呈正相关(r_1=0.65,P＜0.001);母体外周血vWF浓度与子痫前期的病情程度呈正相关(r_2=0.61,P＜0.001).结论:HIF-1α和vWF可能在子痫前期的发生和发展中起协同作用.     

缺氧诱导因子1α及其靶基因在子痫前期患者胎盘组织中表达的意义

目的:研究缺氧诱导因子1α(HIF-1α)及其靶基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)在子痫前期患者胎盘组织中的表达和相关性,探讨HIF-1α、VEGF在子痫前期发病机制中的作用。方法:采用免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化酶连接法(SP)法对20例子痫前期患者(子痫前期组)和15例正常妊娠妇女(对照组)胎盘组织中HIF-1α、VEGF蛋白表达进行半定量分析;应用RT-PCR技术检测两组胎盘组织中HIF-1α、VEGFmRNA的水平并进行相关性分析。结果:(1)免疫组化结果显示,子痫前期组HIF-1α蛋白表达明显增强,其中( )阳性表达率分别为45%,显著高于对照组13.3%(P<0.05),而VEGF蛋白表达明显减弱,其中( )阳性表达率为15%,显著低于对照组(P<0.01)。(2)子痫前期组HIF-1αmRNA的水平为(0.604±0.013),显著高于对照组的(0.208±0.007),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),VEGF mRNA表达水平虽有升高,但与对照组相比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HIF-1α在子痫前期胎盘组织中的表达明显升高,可能通过调节靶基因VEGF的转录影响滋养细胞的浸润功能和胎盘血管重铸,在子痫前期的发病过程中发挥重要作用。     

HIF-1α,ET-1及iNOS在子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的：本研究通过对HIF-1α、ET-1与iNOS进行蛋白表达检测，分析HIF-1α、ET-1与iNOS三者在子痫前期患者胎盘组织中的表达规律，对目前尚未完全明确的子痫前期发病机制做完善和补充。方法：通过临床收集正常妊娠产妇（对照组）、子痫前期及重度子痫前期患者胎盘组织各30例，采用 SP 免疫组化和Western-blotting方法检测各组胎盘组织中HIF-1α、ET-1及iNOS的蛋白表达部位及表达量。结果：1、免疫组化：HIF-1α及ET-1在疾病较重的胎盘组织中阳性率及阳性表达强度更高，比较三组差异有统计学意义；iNOS在各组胎盘组织中阳性率均较低，比较三组差异无统计学意义。2、Western-blotting：①重度子痫前期组中HIF-1α的表达水平明显高于正常妊娠组，差异具有统计学意义（P＜0.05）；且重度子痫前期组中HIF-1α的表达水平明显高于子痫前期组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。②与正常妊娠组相比较，ET-1的表达水平在患病组明显增强，且重度子痫前期组ET-1 的表达水平明显高于子痫前期组，差异具有统计学意义（P＜0.05）。③iNOS在重度子痫前期组中为高表达水平，与正常妊娠组相比较表达量有明显差异，差异具有统计学意义（P＜0.05），与子痫前期组相比较表达量也有明显差异，差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论：随着子痫前期严重程度的增加，HIF-1α、ET-1及iNOS的表达呈增强趋势，在重度子痫前期组中的表达明显高于正常妊娠组及子痫前期组，分析三者呈正相关，共同参与了子痫前期的发病机制，且与该病严重程度密切相关。     

缝隙连接蛋白43在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在子痫前期患者与正常妊娠妇女胎盘组织中的表达规律及其在子痫前期发病过程中可能的机制。方法随机选取子痫前期患者50例(轻度组20例,重度组30例)和正常妊娠孕妇50例(对照组),应用免疫组织化学法对3组胎盘Cx43的表达进行标记,通过彩色病理图像分析系统对染色结果进行定量检测并分析。结果 Cx43在子痫前期重度组表达低于轻度组及对照组,差异均有显著性意义(P<0.05);轻度组与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。Cx43在胎盘组织的表达与妊娠期高血压疾病病情严重程度呈负相关(r=-0.370,P<0.05)。结论子痫前期患者胎盘组织中缝隙连接蛋白Cx43的表达变化可能与子痫前期的发病机制有关。     

血清中sFlt-1、sEng水平及胎盘中Endoglin表达的变化与子痫前期相关性研究

目的:通过对子痫前期患者血清中的可溶性血管内皮生长因子受体1(sFlt-1)和可溶性Endoglin(sEng)的表达水平以及胎盘中Endoglin蛋白的表达水平的测定,探讨它们在子痫前期发生中的作用.方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)夹心法检测并比较10例轻度子痫前期患者、30例重度子痫前期患者及40例正常晚期妊娠妇女血清中的sFlt-1和sEng的水平.并通过免疫组化SP法测定三组妊娠妇女胎盘中Endoglin蛋白的表达.结果:(1)正常妊娠组血清中sFlt-1水平低于轻度子痫前期组和重度痫前期组,各组比较差异有显著性(P<0.01).但轻度子痫前期组与重度子痫前期组比较差异无统计学意义(P>0.05).(2)正常妊娠组血清中sEng水平和胎盘组织中Endoglin的平均光密度低于轻度子痫前期组,轻度子痫前期组低于重度子痫前期组,各组比较差异有显著性(P<0.01).(3)血清中sEng的水平与胎盘组织中Endoglin的表达水平(MOD值)呈正相关关系.结论:sFlt-1和sEng在子痫前期患者的外周血中高表达,Endoglin蛋白在子痫前期胎盘中的表达增高,血清中sFlt-1与sEng可能参与了子痫前期的发生和发展.     

子痫前期患者血浆晚期氧化蛋白产物水平的测定及意义

检测子痫前期患者与正常妊娠妇女血浆晚期氧化蛋白产物(advanced oxidation protein products,AOPP)的表达水平,探讨AOPP与子痫前期发病的相关性及其作用机制。方法选取行剖宫产分娩的子痫前期患者26例(子痫前期组,其中轻度子痫前期患者10例、重度子痫前期患者16例)及正常孕妇20例作为对照组。采用分光光度计法检测子痫前期患者与正常妊娠妇女血浆AOPP的表达。结果轻度和重度子痫前期患者血浆AOPP表达水平较对照组均明显增高,差异有统计学意义(P<0.05);重度子痫前期患者血浆AOPP水平与轻度子痫前期患者相比差异无统计学意义(P=0.671)。结论血浆AOPP水平增高是子痫前期的重要病理变化,可能参与子痫前期的发生及发展过程。     

肿瘤坏死因子-α在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的探讨肿瘤坏死因子-αmRNA(TNF-αmRNA)在子痫前期发病机制中的作用。方法采用RT-PCR技术检测45例正常晚期妊娠妇女及56例子痫前期患者(其中轻度子痫前期21例,重度子痫前期35例)胎盘组织中TNF-αmRNA的表达水平。结果1.轻、重度子痫前期胎盘组织中TNF-αmRNA表达水平分别为:0.371±0.12、0.892±0.347均明显高于正常妊娠组0.138±0.092(均P<0.01),重度子痫前期组高于轻度子痫前期组(P<0.01)。2.子痫前期胎盘组织中TNF-αmRNA与24小时尿蛋白、血压、新生儿体重及胎盘重量均有明显相关性。结论1.子痫前期胎盘组织中TNF-αmRNA表达水平明显升高,并且与子痫前期病情发展密切相关。2.胎盘组织TNF-αmRNA与子痫前期患者胎儿发育密切相关。     

妊娠期糖尿病胎盘组织中HIF-1α的表达及意义

目的探讨缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在妊娠期糖尿病(GDM)胎盘组织中的表达及其与GDM发病的关系。方法选取妊娠36～41周行择期剖宫产的GDM孕妇44例(GDM组)和同期分娩的正常晚期妊娠孕妇37例(对照组)。采用免疫组化PV-6003两步法和逆转录-聚合酶链反应技术分别检测胎盘组织中HIF-1α蛋白和mRNA的表达。结果两组胎盘组织中均有HIF-1α蛋白的表达,GDM组HIF-1α蛋白的表达明显增强。GDM组胎盘组织HIF-1α蛋白的阳性表达率为86.4%,显著高于对照组的32.4%(χ2=22.51,P<0.05)。GDM组胎盘组织HIF-1αmRNA表达水平为0.88±0.12,显著高于对照组的0.47±0.11(t=15.91,P<0.05)。结论 GDM胎盘组织中HIF-1α蛋白和mRNA高表达可能导致胎盘组织病理形态学的异常,从而参与了GDM的发病过程。     

HIF-1α与Bax在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义

目的检测胎盘组织中HIF-1α和Bax的表达,探讨其与妊娠期高血压疾病发病的关系。方法选择2006年12月—2007年12月在我院住院分娩的孕妇50例,分为妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组、子痫组、正常妊娠组,采用免疫组化法检测50例胎盘标本绒毛上皮组织中HIF-1α和Bax的表达。结果（1）妊娠期高血压疾病组HIF-1α与Bax表达较正常妊娠组明显升高,且差异有统计学意义（P〈0.05）;（2）妊娠期高血压疾病组胎盘HIF-1α的表达与Bax的表达呈正相关（P〈0.05）,而正常妊娠组相关性不明显（P〉0.05）。结论胎盘组织中HIF-1α与Bax的表达升高与妊娠期高血压疾病的发病有关。     

子痫前期患者胎盘组织中内皮分化基因2的表达

目的:探讨子痫前期患者胎盘组织中内皮分化基因(Edg)2蛋白和mRNA的表达及意义。方法:应用免疫组化SP和RT-PCR方法检测20例正常晚孕妇女、20例子痫前期轻度和20例子痫前期重度患者胎盘组织中Edg2蛋白和mRNA的表达。结果:3组胎盘绒毛滋养和蜕膜细胞中Edg2蛋白以及胎盘组织Edg2mRNA的表达差异有统计学意义(F/χ2=19.063、19.063和2232.999,P<0.001),子痫前期轻度和重度组高于正常晚孕组,子痫前期重度组高于子痫前期轻度组。结论:胎盘组织中Edg2的异常表达可能与子痫前期的发生和发展有关。     

Wnt2基因启动子DNA甲基化在子痫前期发病机制中的作用

目的 检测胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度,探讨Wnt2基因与子痫前期发病的关系。方法 收集产科病房经剖宫产分娩的早发型重度子痫前期患者30例作为早发型重度子痫前期组(ZPE),晚发型重度子痫前期患者30例作为晚发型重度子痫前期组(WPE),同期住院经剖宫产分娩的正常晚期妊娠妇女30例作为对照组(NC)。采用甲基化特异性PCR技术检测三组胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度。结果 与NC组相比,ZPE组及WPE组Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度均显著升高(P<0.05);ZPE组及WPE组差异无统计学意义。结论 正常晚期妊娠妇女、早发型及晚发型重度子痫前期患者的胎盘组织中,均存在Wnt2基因启动子区的DNA不完全甲基化。与正常晚期妊娠妇女相比,早发型重度子痫前期及晚发型重度子痫前期患者胎盘组织中Wnt2基因启动子区的DNA甲基化程度均明显增加。     

吲哚胺2,3-双加氧酶在子痫前期病人胎盘组织表达

目的探讨吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在胎盘组织表达与子痫前期发病的关系。方法采用免疫组化法分别检测30例轻度子痫前期病人、30例重度子痫前期病人和38例正常晚孕妇女胎盘组织IDO蛋白表达,并采用Motic Med 6.0数码医学图像分析系统分析各组图片IDO阳性细胞的平均吸光度值;RT-PCR法检测各组孕产妇胎盘组织IDO mRNA的表达水平;彩色超声多普勒检测各组孕妇胎儿脐动脉血流阻力指数(RI),并分别测量各组新生儿出生体质量。结果各组孕产妇胎盘组织均有IDO蛋白表达,且主要表达于胎盘合体滋养细胞的胞质中,胎盘间质细胞及血管内皮细胞胞质中也可见少量表达。轻度子痫前期组及重度子痫前期组孕产妇胎盘组织IDO阳性细胞平均吸光度明显高于正常晚孕组,差异有显著性(F=462.895,q=3.474、11.002,P<0.01);重度子痫前期组高于轻度子痫前期组,差异有统计学意义(q=22.491,P<0.01)。轻度及重度子痫前期组胎盘组织IDOmRNA表达水平较正常晚孕组显著降低,差异均有统计学意义(F=90.032,q=8.457、16.913,P<0.01);且重度子痫前期组胎盘组织IDO mRNA表达水平明显低于轻度子痫前期组,差异有统计学意义(q=8.000,P<0.01)。子痫前期组孕产妇胎盘组织IDO mRNA表达水平与其胎儿脐动脉RI呈负相关(r=-0.445,P<0.01),与其新生儿出生体质量呈正相关(r=0.449,P<0.01)。结论子痫前期病人胎盘组织IDO表达下降可能是子痫前期发病的原因之一。     

HIF-1α与NF-κB在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达及意义

目的检测胎盘组织中HIF-1α与NF-κB的表达,探讨其与妊娠期高血压疾病发生的关系。方法选择2006年12月—2007年12月在我院住院分娩的孕妇50例,分为妊娠期高血压组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组、子痫组、正常妊娠组,采用免疫组化法检测50例胎盘标本绒毛上皮组织中HIF-1α与NF-κB的表达。结果（1）妊娠期高血压疾病组HIF-1α与NF-κB表达较正常妊娠组明显升高,且差异有统计学意义（P〈0．05）;（2）妊娠期高血压疾病组胎盘HIF-1α与NF-κB的表达呈正相关（P〈0．01）,而正常妊娠组相关性不明显（P〉0．05）。结论胎盘组织中HIF-1α与NF-κB的表达升高与妊娠期高血压疾病的发生有关。     

整合素αvβ3在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义

目的 研究正常晚期妊娠以及子痫前期(preeclampsia,PE)胎盘组织中αvβ3基因和蛋白表达的差异,探讨αvβ3与子痫前期的关系.方法 采用免疫组化及Western blot方法检测25例PE患者(其中轻度PE组10例,重度PE组15例)和20例正常足月孕妇(对照组)胎盘组织中αvβ3蛋白表达水平.采用RT-P...     

RECK基因在子痫前期患者胎盘的表达及其与MMP-2活化的关系

目的 通过检测RECK基因在子痫前期患者胎盘组织中的表达及其与MMP-2活化的关系,探讨RECK基因在胎盘滋养细胞浸润机制中的作用.方法 分别采用RT-PCR、Western blot检测正常妊娠孕妇(正常妊娠组,22例)、子痫前期孕妇(其中轻度22例,重度20例)胎盘组织中RECK mRNA和蛋白的表达;采用明胶酶谱法检测3组孕妇胎盘组织中MMP-2的活化比例.结果 轻度、重度子痫前期组胎盘组织中RECK mRNA、蛋白的表达水平均明显高于正常妊娠组,且重度子痫前期组RECK mRNA、蛋白的表达水平均明显高于轻度子痫前期组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01);而轻度、重度子痫前期组MMP-2的活化比例均明显低于正常妊娠组,且重度子痫前期组MMP-2的活化比例明显低于轻度子痫前期组,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.01).正常妊娠组、轻度子痫前期组、重度子痫前期组胎盘组织中RECK mRNA及其蛋白表达与MMP-2的活化比例均呈负相关关系(均P<0.01).结论 子痫前期孕妇胎盘组织中RECK表达异常升高,MMP-2活性受到抑制,可能参与了胎盘滋养细胞浅浸润过程.     

胎盘组织中胰岛素样生长因子II(IGF-2)的表达水平与妊娠期高血压疾病的相关性研究

目的探讨胰岛素样生长因子2(IGF-2)在妊娠期高血压疾病(HDCP)发生中的作用。方法采用免疫组化方法检测2009年9月-2011年9月于南京明基医院产科收治的妊娠期高血压患者(妊娠期高血压组)病理组织86例,包括妊娠期高血压29例,轻度子痫前期27例,重度子痫前期30例及80例正常妊娠妇女(对照组)胎盘中IGF-2表达水平,分析其与妊娠期高血压疾病严重程度及新生儿体重的相关性。结果①IGF-2在妊娠期高血压患者和对照组孕妇胎盘中表达均为阳性,二者差异无统计学意义(P>0.05),而在子痫患者胎盘组织中表达显著低于对照组,且在重度子痫患者胎盘组织中的表达量显著低于轻度子痫患者(P<0.05);②妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中IGF-2水平与妊娠期高血压疾病严重程度呈负相关(rIGF-2=-0.301,P<0.05),且均与新生儿出生体重呈正相关(rIGF-2=0.416,P<0.05)。结论胎盘组织中IGF-2水平与妊娠高血压疾病的发生发展密切相关。     

人类白细胞相关抗原G在正常妊娠者及子痫前期患者胎盘组织中的表达研究

目的:通过检测人类白细胞相关抗原G(HLA-G)在子痫前期患者与正常妊娠胎盘组织中的表达,探讨HLA-G在子痫前期患者胎盘组织中的表达意义.方法:采用半定量逆转录-聚合酶链技术(RT-PCR)及Western印迹技术分别检测了24例子痫前期患者(实验组,轻度子痫前期12例,重度子痫前期12例),24例年龄相仿的正常晚期妊娠者(对照组)胎盘组织中HLA-G的表达差异.结果:子痫前期患者胎盘组织中HLA-G基因与蛋白表达水平均显著低于正常妊娠组,两组比较差异有统计学意义(P<0.01),轻度与重度子痫前期患者比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:子痫前期患者胎盘组织HLA-G的表达明显下降,这一异常指标可能参与了子痫前期的发生和病理、生理过程.