生精细胞凋亡与P53

精子发生始于精原细胞的克隆扩增,经细胞的分化、有丝分裂、减数分裂、变态,最终形成精子。精子发生受到许多因素的调节,其中最主要受激素控制,促性腺激素释放激素(gonadotropin releasing hor-mone,GnRH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hor-mone,FSH)、黄体生成素(luteinising hormone,LH)、雄激素等是生精细胞的存活因子。细胞内分子对精子发生的调节也不容忽视,如cAMP反应元素调节子(cyclin AMP-responsive element modulator,CREM)     

小鼠生后睾丸生精细胞的凋亡及P53的表达变化

目的:观察小鼠生后生精细胞的凋亡变化规律以及凋亡相关基因P53的表达变化.方法:用生后0、1、4、7、10、13、2o、30、50天的昆明小鼠,取其睾丸,Bouin液固定后,用TUNEL法检测其生精细胞凋亡率;用免疫组织化学的方法检测凋亡相关基因P53的表达变化.结果:生后4天的小鼠生精细胞开始出现凋亡,10～20天达高峰,以后渐减少.P53的表达从生后7天的小鼠睾丸生精细胞出现阳性,20天时达高峰,以后渐减少.结论:小鼠睾丸在发育过程中有大量细胞凋亡,在其生后10～20天为高峰期.P53的表达较凋亡出现稍晚,但变化规律与凋亡近似.     

生精细胞凋亡与男性不育症

近年来,随着对细胞凋亡认识的不断加深,医疗及科研工作者越来越关注细胞凋亡与疾病之间的联系,并为此展开了一系列的试验。现已明确凋亡是人体正常生长发育所必需的,但其失衡也与许多疾病的发生关系密切。生精细胞凋亡过度可能是导致男性不育的重要原因之一。而caspases是细胞凋亡末期的共同通道,对细胞凋亡起着关键性的作用。因此,对caspases家族的活性调控研究可能为治疗男性不育提供新的诊断标准及治疗途径。     

生精细胞凋亡与基因调控

生精细胞凋亡是一个多基因调控的过程。研究表明Fas／FasL、Bel-2、p-53、C-myc、CREM等基因在生精细胞凋亡调控中有重要意义。本文对近年来生精细胞凋亡及其基因调控的研究进展作一综述。     

生精细胞的凋亡研究进展

<正>凋亡(apoptosis)是由澳大利亚病理学家Johnkerr于1972年提出的,指细胞由基因控制的主动死亡过程。形态上表现为核固缩、染色质浓集、细胞膜皱折、胞体变小,细胞成断片后,最后成为被膜包绕的凋亡小体而被邻近的细胞吞噬与降解。组织学表现为单个细胞缺失,周围没有炎症反应。生物化学表现为活化Ca~(2+)依赖的核酸内切酶,在核小体连接处将染色质DNA降解成单或寡核苷酸小体,其大小均为长度180～200bp的倍数。凋亡可以是一种生理现象,也可以是病理现象。它与因缺血、缺氧而引起的病理性细胞坏死明显不同,后者细胞器和细胞膜出现肿胀、溶解、破裂,细胞内含物释放到细胞间隙可引起炎症反应。     

生精细胞凋亡的基因调控

细胞凋亡 ( Apoptosis)是一种形态和生化特征明确的细胞主动死亡形式。随着分子生物学的不断深入 ,生殖细胞凋亡研究正日益引起人们重视。通过改变基因的表达或激素水平 ,可人为地调节生殖细胞的凋亡 ,对了解睾丸疾病及其衰老的本质和防治方法具有非常重要的意义。本文就近年来生殖细胞凋亡及其基因调控的研究进展做一综述。1　生殖细胞的凋亡睾丸精子的发生是相对不分化的精原细胞周期性地发育成熟为高度特化的精子过程。在本世纪初 ,Regaud就发现睾丸生精过程中存在着生殖细胞的变性退化。此后在大鼠、苍鼠的生精上皮中研究发现 ,生精细…     

生精细胞凋亡的基因调控

生精细胞凋亡受大量基因共同调控,深入研究睾丸生精细胞的凋亡及其基因调控是进一步了解生精细胞凋亡机制和其生物学过程的关键所在,对阐明精子发生的生理、病理及探讨男性不育有重要的意义.     

生精细胞凋亡的线粒体调控

细胞凋亡是一种形态和生化特征明确的细胞主动死亡形式。哺乳动物睾丸生精细胞在精子形成过程中的自发细胞死亡是通过生精细胞的凋亡来实现的。睾丸生精细胞凋亡及其机制的研究日益受到人们的重视,线粒体在其调控细胞凋亡进程中发挥重要的调控作用。本文就生精细胞凋亡的线粒体调控机制以及线粒体与氧化应激、Bcl-2蛋白家族、HSPs和TR3的相互协同作用进行综述。     

凋亡生精细胞的形态学观察

本文报告了凋亡生精细胞的各种形态，包括凋亡的初级精母细胞、次级精母细胞、精子细胞，并报告了凋亡的前列腺上皮细胞的形态。就生精细胞凋亡原因进行了分析     

十一酸睾酮与生精细胞的凋亡

目的探讨不同剂量的十一酸睾酮对生精细胞凋亡的影响,寻找更好的节育方法。方法将雄性小鼠随机分为4组,低、中、高剂量给药组3组和对照组,给药组每2周1次在大腿内侧肌肉注射十一酸睾酮,低、中、高剂量组每次注射剂量分别为0.25、0.5、0.75 mg/kg;对照组注射安慰剂（即精制茶油0.5mg/kg）,共3个月,末次给药2周后,内眦静脉取血,检测血睾酮的含量;用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法（TUNEL）检测睾丸生精细胞凋亡。结果实验组各组血睾酮差异无统计学意义,与对照组比血睾酮差异也无统计学意义;实验组的细胞凋亡率显著高于对照组（P〈0.05）。结论过量摄入十一酸睾酮引起雄性小鼠生精细胞凋亡增加,临床可考虑据此找到更好的节育办法。     

骨肉瘤发生中p53蛋白表达对细胞凋亡的调节

目的研究骨肉瘤发生中p53蛋白表达对细胞调亡的调节。方法利用原位脱氧核糖核酸末端转移酶(In situ terminal deoxynucleotide transferase;ISTdT)标记技术和SP免疫组织化学方法分别检测骨肉瘤和良性骨肿瘤组织中凋亡细胞和p53蛋白的表达。结果骨肉瘤中p53蛋白的阳性率(76.9%,50/65)和阳性表达强度明显高于良性骨肿瘤组织(21.1%,4/19)(分别为P＜0.01和P＜0.05),但4种亚型之间差异无显著性(P＞0.05)。骨肉瘤组织中凋亡细胞密度均明显低于良性骨肿瘤组织(P＜0.01),但各亚型之间两者亦均无明显差异(P＞0.05);骨肉瘤和良性骨肿瘤组织中p53蛋白表达与凋亡细胞密度呈明显的线性负相关(r=-0.8954,P＜0.01),其表达增强则凋亡细胞密度逐渐降低。结论在骨肉瘤发生中p53基因突变可能是一种频发事件。突变型p53基因可能是通过其蛋白过度表达抑制肿瘤细胞凋亡,导致骨肉瘤的发生和发展。     

冬凌草甲素诱导人结肠癌细胞LOVO凋亡及其对P53作用的研究

目的:探讨冬凌草甲素对LOVO细胞凋亡的诱导及其对P53表达的影响。方法:应用CCK-8法检测LOVO细胞生长抑制率,用流式细胞术检测LOVO细胞的凋亡率和P53的表达。结果:冬凌甲素对LOVO细胞生长抑制呈量效和时效的关系。其作用浓度为1.5、5和8μmol/ml时,LOVO细胞凋亡率分别为17.4%,26.6%和35.8%,与对照组比较有差异(P<0.05,P<0.01);P53的表达分别为48.4%,44.6%和17.4%,与对照组比较,差异有显著性(P<0.01)。结论:冬凌草甲素对LOVO细胞的生长有抑制作用,可诱导结肠癌细胞的凋亡并且和P53的调控有关。     

Apoptosis and P53 protein expression after rat spinal cord injury

AworkshopwasorganizedbytheNationalIn-stituteofNeurologicaDisordersandStrokeinSeptember1995.TheobjectiveofthisworkshopwastopromoteinquiryandtofosterapplicationofresearchinDNAdamageandrepairaftercentralnervoussystem(CNS)injury['].Nowinvestiga-torshavefoundthereareextensiveDNAdamageinmodelsoffocalcerebralischemiaandtraumaticbrain,withneuronsapoptosis.DNAfragmenta-tioncorrelatedgenes(hsp,IEGs,bcl-2,bax.p53)expression["']'Buttherehavebeenonlyfewstud-iesonDNAdamageandcorrelativegenesexpres…     

脑缺血再灌流后p53基因表达与细胞凋亡间的关系

用原位杂交、免疫组化及原位末端标记(TUNEL)的方法观察大鼠大脑中动脉闭塞2h后再通0～72h脑组织p53基因的表达与凋亡细胞的分布.结果发现缺血2h及再灌流1h即可见p53mRNA及其蛋白的表达和凋亡细胞,p53mRNA及其蛋白的表达高峰在缺血再灌流后24h,凋亡细胞数高峰在再灌流24h～48h.提示脑缺血再灌流后诱导p53mRNA及其蛋白的表达和细胞凋亡.     

P53蛋白调节血管紧张素Ⅱ诱导的内皮细胞凋亡

为研究p53基因在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的凋亡中是否发生了变化，取健康胎儿脐静脉内皮细胞培养至第3代，用不同浓度AngⅡ作用不同时间，发现AngⅡ同2型血管紧张素Ⅱ受体（AT2）激动剂CGP42112A一样可以诱导内皮细胞凋亡；并且凋亡强度与AngⅡ成典型的剂量依赖关系。在AngⅡ与CGP42112A作用18h后，没有观察到p53 mRNA的表达有显著的变化。在AngⅡ作用24h组，可以检测到P53蛋白显著增加，在18h、48h组未能观察到P53蛋白的显著改变。表明P53在AngⅡ诱导凋亡时通过转录后机制发生显著的改变，参与调节AngⅡ诱导的凋亡。     

膀胱癌细胞凋亡与MDM2和P53基因表达的意义

目的:研究膀胱癌细胞凋亡、MDM2、P53基因表达的意义。方法:采用免疫组织化学方法及TUNEL法检测11例“正常膀胱黏膜”和83例膀胱移行细胞癌中MDM2、P53基因的表达及细胞凋亡指数。结果:P53阳性率为50.6%,MDM2阳性率为59.03%,AI=1.4335±0.3863。MDM2阳性表达与病理分级及临床分期呈负相关(R=-0.263,P=0.016及R=-0.388,P=0.001);P53阳性表达与病理分级及临床分期呈正相关(R=0.492,P=0.001;R=0.341,P<0.01);MDM2、P53三种蛋白间表达无相关性;AI与MDM2呈负相关(R=-0.226,P=0.042);AI与病理分级及临床分期呈正相关(R=0.642,P=0.000;R=0.455,P=0.000);AI与P53无相关性。AI、P53、MDM2的表达与5a生存率有关。结论:联合运用临床分期及病理分级并检测P53、MDM2可用于判断膀胱移行细胞癌的预后。     

P53基因在羟基喜树碱致大肠肿瘤细胞凋亡中的作用

目的P53基因与大肠癌化疗药敏关系密切,而羟基喜树碱(HCPT)因其与5-FU无交叉耐药性而被逐渐用于治疗进展期大肠癌.笔者通过研究P53基因与HCPT对大肠肿瘤细胞凋亡的影响,旨在进一步探讨P53基因与化疗药物HCPT之间的关系.方法对手术切除的大肠癌22例标本,用PCR-SSCP法进行P53基因第5～8外显子检测,同时制备肿瘤单细胞悬液,加入HCPT(0.1μg/ml)和丹参(6μl)用TDT法分析HCPT对大肠癌细胞凋亡的影响.结果大肠癌P53基因突变率为45.5%(10/22例),P53基因突变与Dukes分期、性别、年龄等关系不明显.加入HCPT(0.1μg/ml)后大肠肿瘤细胞凋亡率为24.21±10.48%,HCPT加用丹参后凋亡率增至33.65±17.19%.根据P53基因有无突变分成二组后发现P53基因突变组细胞凋亡率明显低于未突变组(HCPT组13.53%vs20.79%,HCPT+丹参组26.54%vs39.57%,P＜0.01).结论HCPT是通过诱导肿瘤细胞凋亡来发挥其治疗作用的,P53基因的状态影响HCPT对大肠肿瘤的细胞凋亡率,应用丹参可较大幅度地增加HCPT对肿瘤细胞的凋亡率,从而初步说明HCPT合用丹参在治疗大肠癌方面是一种颇有前途的化疗方案.     

姜黄素通过P53通路诱导人舌鳞癌细胞的凋亡

目的:检测姜黄素对舌鳞癌细胞Tca-8113增殖和凋亡的影响,研究姜黄素对p53信号通路的影响。方法:使用浓度为10、20、40、80 mol/L的姜黄素与舌鳞癌细胞系Tca-8113共培养,在24 h和48 h后采用MTT法检测细胞的增殖情况;使用20、40 mol/L姜黄素与Tca-8113共培养24 h后,采用Western-Blot检测p53、p21和caspase9蛋白的表达。结果:姜黄素能够显著抑制Tca-8113细胞的增殖,抑制作用呈时间依赖性和药物浓度依赖性;姜黄素能够促进p53、p21和caspase 9蛋白的表达。结论:姜黄素能够抑制Tca-8113细胞的增殖并促进其凋亡,这一机制可能和p53信号通路有关。     

康尔爱片诱导人胃腺癌SGC-7901细胞凋亡及对P~(53)基因表达影响的研究

目的 :观察康尔爱片诱导人胃腺癌SGC - 90 1细胞凋亡及对P5 3基因表达的影响。方法 :应用流式细胞仪检测康尔爱片体外给药后人胃腺癌SGC - 790 1细胞DNA含量变化和P5 3基因表达情况。结果 :康尔爱片中、大剂量组细胞凋亡百分率分别为 9.0 6 %、96 .32 % ,与对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1) ;小、中、大 3个剂量组P5 3基因表达率分别为 95 .0 9%、89.47%、5 2 .0 4% ,与对照组相比有明显差异 (P <0 .0 1)。结论 :康尔爱片中、大剂量组可以明显诱导人胃腺癌SGC - 790 1细胞凋亡 ,且小、中、大 3个剂量组均可降低突变型P5 3基因表达率。