川芎嗪逆转肺癌细胞株多药耐药性的研究

目的探讨中药川芎嗪(TMP)逆转肺腺癌SPCA-1细胞株耐药性的作用.方法人肺腺癌SPCA-1细胞株,以阿霉素诱导耐药至终浓度为0.4μg/ml,MTT比色法测定TMP对耐药细胞的耐药性逆转作用.结果100mg/L和320mg/L TMP对细胞的抑制率均小于5%,两者无显著差异.100mg/LTMP加丝裂霉素(MMC)组与相应浓度MMC组比较,细胞抑制率有显著性差异(P＜0.05).加入320mg/L TMP的阿霉素(ADM)、长春地辛(VDS)、MMC组与相应浓度各药物组比较,其细胞抑制率均有显著性差异(P＜0.05),其中1PPC VDS+TMP、1PPC MMC+TMP组与相应药物组比较,差异非常显著(P＜0.01).顺铂(C-DDP)加TMP组与相应浓度C-DDP组比较,细胞抑制率均无显著性差异(P＞0.05).结论无明显细胞毒浓度的TMP可显著逆转SPCA-1人肺腺癌细胞株对ADM、VDS、MMC的耐药性,但对CDDP介导的耐药无影响.     

维拉帕米逆转肺癌细胞株多药耐药性的研究

体外实验研究钙通道阻滞剂维拉帕米对多药耐药性肺癌细胞株SPC—A1／ADM耐药性的逆转作用。结果显示，无细胞毒作用剂量的维拉帕米可逆转SPC－A1／ADM细胞对长春新碱、阿霉素的耐药性，而对顺铂的耐药性无明显影响，该逆转作用有药物浓度依赖性。表明维拉帕米可望作为一种化学增敏剂应用于肺癌的治疗。     

反义核酸逆转人白血病多药耐药细胞株的耐药性

目的采用一段人工合成的互补于人ｍｄｒ１基因的反义硫代硫酸脱氧寡核苷酸（简称反义核酸）转染白血病多药耐药细胞株Ｋ５６２／ＡＤＭ，来逆转白血病细胞的多药耐药。方法ＭＴＴ法检测Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０，流式细胞仪分析细胞内的柔红霉素含量，免疫细胞化学染色方法确定Ｐ１７０的表达水平，ＲＴ－ＰＣＲ检测ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ的相对水平（ｍｄｒ１／β２－ＭＧ）。结果浓度为２μｍｏｌ的反义核酸使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞对阿霉素的ＩＣ５０从处理前的２５．７２μｇ／ｍｌ降至处理后的６．９７μｇ／ｍｌ，相对逆转效率为７３．０１％。反义核酸亦使Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞内的柔红霉素含量增加，Ｐ１７０表达阳性率从处理前的９８．６％±１．０％降至处理后的１８．３％±０．７％，ｍｄｒ１／β２－ＭＧ下降了０．５，ｍｄｒ１－ｍＲＮＡ相对水平有所下降。结论反义核酸通过下调ｍｄｒ１基因，阻断Ｐ１７０的表达，从而降低Ｋ５６２／ＡＤＭ的耐药性。     

肿瘤多药耐药性与中药逆转研究

多药耐药是肿瘤细胞在接受化疗过程中的重要生物学行为，也是肿瘤临床化疗失败的主要原因之一。本文根据国内外文献，结合作者的研究结果，较为全面地论述了肿瘤多药耐药发生机制与中药逆转研究进展。     

川芎嗪逆转人乳腺癌细胞耐药株多药耐药性的实验研究

[目的]观察川芎嗪对抗癌剂诱导人乳腺癌细胞耐药株MCF-7/adr细胞多药耐药性的逆转作用.[方法] MTT法检测抗癌剂对乳腺癌细胞株(MCF-7)和阿霉素诱导的多药耐药细胞株(MCF-7/adr)的半数致死浓度(IC50),计算耐药指数(RI)和加川芎嗪、维拉帕米逆转剂后的逆转倍数;倒置显微镜和荧光显微镜观察川芎嗪逆转后的MCF-7/adr细胞形态;琼脂糖凝胶电泳检测川芎嗪逆转后细胞凋亡的DNA片段.[结果] 对抗癌剂阿霉素、足叶乙甙、长春新碱、紫衫醇和长春花碱,MCF-7/adr细胞株的IC50均有明显增加, RI分别为145.7、41.7、72.2、488.4和286.8;加川芎嗪后IC50均有明显降低,逆转倍数分别为4.6、2.5、6.1、9.2和5.1,与逆转前相比具有统计学意义(P<0.01);荧光显微镜可观察到川芎嗪逆转后细胞凋亡的凋亡小体;琼脂糖凝胶电泳检测出川芎嗪逆转后细胞凋亡的DNA片段.[结论] 川芎嗪有逆转抗癌剂诱导MCF-7/adr细胞的多药耐药性的作用.     

多药耐药性逆转的研究进展

肿瘤细胞多药耐药性 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＭＤＲ)是造成化疗失败的重要原因 ,寻找ＭＤＲ逆转剂成为现今肿瘤耐药研究的热门课题。ＭＤＲ逆转剂是指能全部或部分恢复耐药的肿瘤细胞对化疗药物敏感性的一类物质。利用体外培养的ＭＤＲ细胞株已经筛选出了许多种逆转剂 ,它们的作用机制和活性各有不同 ,可作用于能导致ＭＤＲ的不同环节 ,包括ＤＮＡ、ＲＮＡ和蛋白水平。现将近年来对不同种类的逆转剂及其逆转机制的研究进展综述如下。1　钙离子通道阻滞剂钙离子通道阻滞剂是最早发现具有逆转ＭＤＲ作用的药物 ,主要有维拉…     

核酶对膀胱癌细胞系多药耐药性的逆转研究

目的：探讨核酶对膀胱癌多药耐生的逆转效应。方法：设计针对ｍｄｒ１ｍＲＮＡ１９５９位ＧＵＣ的“锤头状”（Ｈａｍｍｅｒｈｅａｄ）核酶（Ｒｉｂｏｚｙｍｅｌ,ＲＺ１）基因,定点克隆于逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ的ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ位点上,重组出带有核酶基因的逆转录病毒质粒ｐＬＸＳＮ－ＲＺ１。应用脂质体ＤｏＴａｐ将ｐＬＸＳＮ－ＲＺ１导入到耐药的人膀胱癌细胞少。结论：本研究中设计的核酶能明显逆转膀胱癌细胞系多     

BSO逆转人肺腺癌细胞株多药耐药性的实验研究

目的研究谷胱甘肽(GSH)合成酶抑制剂——BSO对人肺腺癌多药耐药细胞株A549DDP细胞内GSH含量影响;探讨BSO逆转多药耐药(MDR)作用机制及逆转效果。方法GSH还原酶循环法测定BSO对细胞内GSH含量的影响。MTT比色法测定经BSO预处理后顺氯氨铂(DDP)、阿霉素(ADM)对细胞50%抑制浓度(IC50)的影响。流式细胞仪检测BSO对MDR细胞内柔红霉素(DNR)荧光强度的影响。结果耐药细胞A549DDP细胞内GSH含量较人肺腺癌A549细胞内GSH含量明显增高。BSO在一定浓度范围内(50～200μmol·L-1)对A549细胞和耐药细胞A549DDP无明显细胞毒性作用(抑制率均小于10%)。BSO呈剂量依赖性非线性抑制细胞内GSH的合成,其对MDR细胞内GSH合成影响较为显著,而对A549细胞内GSH合成影响较小。BSO在一定浓度范围内能降低DDP、ADM对A549DDP细胞的IC50,而对A549细胞的IC50无明显影响。A549DDP细胞内DNR荧光强度较A549细胞显著降低,能不同程度提高A549DDP细胞内柔红霉素荧光强度,均较未处理组显著提高;与未经BSO处理的A549细胞比较,细胞内荧光强度轻度增高,但统计学上无显著性差异。结论BSO能有效逆转A549DDP细胞的MDR,其机制与降低MDR细胞内GSH含量有关。     

蝎毒逆转人乳腺癌细胞株耐药性研究

目的：探讨东亚钳蝎毒（buthus martensii kirsch, BMK）是否能够逆转人乳腺癌细胞的多药耐药性(MDR)。 方法：采用ＭＴＴ法对蝎毒和阿霉素(ADM)合用时肿瘤细胞的半数抑制率(IC₅₀)进行检测。荧光分光光度法检测蝎毒对细胞内ADM浓度的影响。 结果：蝎毒不同组别(100~350 mg•L^-1)能分别提高MCF-7/ADM细胞株对阿霉素的敏感性 (Ｐ<0.05;Ｐ<0.01)。蝎毒不同组别(100~200 mg•L^-1)能使MCF-7/ADM细胞内ADM的浓度升高。 结论：蝎毒能部分逆转人乳腺癌耐药细胞对阿霉素的耐药性。     

逆转肺癌多药耐药的研究进展

肺癌稳居中国癌症死亡＂排行榜＂的首位,约80%的肺癌患者确诊时已属中晚期,失去手术机会,化疗是主要治疗手段,但临床治疗失败率很高,肺癌的多药耐药（Multidrug Resistance,MDR）是导致化疗失败的主要原因[1],     

黄酮类化合物逆转HeLa细胞株多药耐药性

目的　探讨黄酮类化合物对人类子宫颈癌 He L a细胞多药耐药 (MDR)的逆转作用。　方法　采用WST- 1法鉴定多药耐药亚系 Hvr1 0 0 - 6细胞对抗癌药物长春碱、阿霉素、柔红霉素及 5 -氟尿嘧啶 (5 - Fu)的耐药性 ,观察槲皮素等黄酮类化合物对其耐药的逆转作用 ;采用 RT- PCR法检测联用黄酮类化合物前后 Hvr1 0 0 - 6细胞mdr1 m RNA表达水平。　结果　 Hvr1 0 0 - 6细胞与亲本株 He L a细胞相比 ,对长春碱、阿霉素、柔红霉素均表现出显著耐药性 (P<0 .0 0 1 ) ,耐药倍数分别为 4 96 ,5 2和 1 98倍。加入槲皮素 (1 0μmol/ L )的长春碱、柔红霉素、5 - Fu组与相应浓度单用药物组比较 ,其细胞抑制率差异均有显著性 (P<0 .0 5 ) ,但细胞 m dr1 m RNA表达量在使用槲皮素前后没有变化。　结论　槲皮素对长春碱、柔红霉素、5 - Fu的细胞毒性有增敏作用 ,可逆转 He L a细胞耐药株对部分化疗药物的多药耐药     

肺癌原代细胞耐药基因的表达和化疗敏感性的研究

目的探讨ATRA与VD3逆转肺癌细胞多药耐药，提高肺癌细胞化疗敏感性的机制。方法应用原代细胞培养、MTT比色、RT—PCR等方法观察ATRA联合VD3对人肺癌原代细胞、肺腺癌A549细胞株化疗敏感性及MRP、LRP表达水平的影响。结果人肺癌原代细胞MRP、LRP高表达，其表达与肿瘤病理无明显相关，MRP表达阳性与ADM、VP-16、VCR的耐药相关，LRP表达阳性与DDP、CBP、ADM、VP-16、VCR的耐药相关。结论MRP、LRP在肺癌尤其非小细胞肺癌中高表达，可反应肿瘤细胞多药耐药性；ATRA或VD3可下调肺腺癌MRP、LRP基因的表达水平，从而提高肺腺癌的化疗敏感性。     

染料木素对非小细胞肺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及其机制

目的:探讨染料木素(genistein)对非小细胞肺癌A549/DDP细胞的耐药逆转及对肺耐药相关蛋白(LRP)和多药耐药相关蛋白(MRP)表达的影响。方法:采用细胞计数法绘制A549/DDP及A549细胞生长曲线;MTT法测定12.5μg/ml染料木素预处理对A549/DDP细胞耐药的逆转作用,并在荧光显微镜下观察细胞形态变化;用RT-PCR和Western blotting分别检测染料木素对肿瘤细胞LRP和MRP的mRNA及蛋白表达的影响。结果:A549/DDP和A549细胞生长曲线相似,倍增时间分别为(27.38±0.25)h和(18.15±0.36)h;染料木素预处理后耐药倍数从2.28倍下降至1.57倍;镜下观察细胞形态出现体积过大、伪足过度伸展、细胞边缘模糊等变化;LRP及MRP mRNA表达均出现明显下调(P<0.05),但二者蛋白表达无明显改变。结论:A549/DDP细胞基本保留了亲代细胞的生长特性;染料木素可以逆转A549/DDP细胞的耐药性,作用机制可能与下调LRP及MRP mRNA表达有关。     

肺腺癌细胞MRP基因甲基化与多药耐药的相关性

目的探讨肺腺癌SPCA-1细胞中多药耐药相关蛋白(MRP)基因甲基化状态与MRPmRNA、MRP表达的关系.方法应用限制性内切酶Ec047Ⅲ和PCR法检测人胚肺WI-38细胞、肺腺癌SPCA-1细胞及经阿霉素诱导的耐药细胞MRP基因甲基化状态;原位杂交法检测MRPmRNA表达;免疫组化法测定MRP表达.结果 WI-38细胞MRP基因启动子区处于高甲基化状态,SPCA-1肺腺癌细胞和经阿霉素诱导的耐药细胞MRP基因启动子区处于低甲基化状态.WI-38细胞、SPCA-1肺腺癌细胞、不同浓度阿霉素诱导的耐药SPCA-1细胞MRPmRNA和MRP表达的阳性率和强阳性率,经组间多重比较均有显著性差异. 结论 SPCA-1肺腺癌细胞MRP基因启动子区处于低甲基化状态,尤其5'端调控区低甲基化是导致转录活性增加的重要结构基础,参与肺癌耐药的发生.     

肺腺癌细胞MRP基因甲基化与多药耐药的相关性

目的探讨肺腺癌SPCA-1细胞中多药耐药相关蛋白(MRP)基因甲基化状态与MRPmRNA、MRP表达的关系.方法应用限制性内切酶Ec047Ⅲ和PCR法检测人胚肺WI-38细胞、肺腺癌SPCA-1细胞及经阿霉素诱导的耐药细胞MRP基因甲基化状态;原位杂交法检测MRPmRNA表达;免疫组化法测定MRP表达.结果 WI-38细胞MRP基因启动子区处于高甲基化状态,SPCA-1肺腺癌细胞和经阿霉素诱导的耐药细胞MRP基因启动子区处于低甲基化状态.WI-38细胞、SPCA-1肺腺癌细胞、不同浓度阿霉素诱导的耐药SPCA-1细胞MRPmRNA和MRP表达的阳性率和强阳性率,经组间多重比较均有显著性差异. 结论 SPCA-1肺腺癌细胞MRP基因启动子区处于低甲基化状态,尤其5'端调控区低甲基化是导致转录活性增加的重要结构基础,参与肺癌耐药的发生.     

RNA干扰逆转白血病细胞耐药性的研究

目的 用RNA干扰技术下调白血病耐药细胞系K562/A02多药耐药基因mdr1的表达以逆转白血病对化学药物的耐药性.方法 针对mdr1基因已知mRNA序列不同位点,选择两条靶序列,构建靶向mdr1 shRNA真核表达载体,脂质体介导转染白血病耐药细胞株K562/A02.实时荧光定量RT-PCR检测mRNA表达,Western blot检测细胞膜P-gp表达,柔红霉素泵出试验检测P-gp外排泵功能,MTT法检测细胞对阿霉素的敏感性.结果 构建了二条针对mdr1基因的shRNA真核表达载体,分别下调mdr1 mRNA的表达89.74%和87.18%,降低细胞膜P-gp表达,使膜外泵功能明显下降,柔红霉素在细胞内贮留明显增多,60min 时柔红泵出率为13.16%、22.02%,对照组为40.44%、45.31%,对阿霉素药物敏感性的相对逆转率为84.36%和76.69%.结论 RNA干扰技术可有效逆转mdr1所致耐药.     

热化疗联合维拉帕米对人乳腺癌耐药细胞化疗敏感性的实验研究

目的观察用热化疗与维拉帕米合用是否能抑制人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/ADM多药耐药蛋白P-gp的表达以逆转乳腺癌对化疗药的耐药性,提高化疗敏感性。方法高表达P-gp的MCF-7/ADM,在37~43℃热化疗条件下分别加入3μg/mL阿霉素(ADM)和不同浓度的逆转剂维拉帕米(VRP,0~5μmol/L),用共聚焦MRC-1024(60×物镜)观察扫描,Laserpix软件检测细胞内ADM的荧光强度,流式细胞仪检测凋亡。结果随着温度和VRP浓度的升高,MCF-7/ADM细胞内ADM荧光强度升高,凋亡率增加,且温度和浓度有协同作用。结论热化疗与维拉帕米联合可有效逆转P-gp所致耐药,提高化疗敏感性。