三七制剂对血管性痴呆大鼠海马神经元ERK的影响

目的:探讨三七制剂对血管性痴呆大鼠海马神经元ERK的影响。方法:采用改良2-VO即不同时间点分别永久性结扎左右颈总动脉的方法制备血管性痴呆大鼠动物模型;将24只Wistar雄性大鼠分为四组:正常对照组、假手术组、血管性痴呆组和三七制剂灌胃组;制作实验大鼠脑组织标本,通过HE(苏木精-伊红)染色、免疫组织化学染色方法进行观察比较。结果:①各组大鼠海马CA1区HE染色:假手术组大鼠海马HE染色观察CA1区锥体细胞体积完整,排列规则,胞核呈圆形或椭圆形,核仁显现明显,染色质质地均匀,细胞数量多,相比较模型组大鼠锥体细胞破碎不完整,坏死明显,结构松散,排列紊乱,细胞数量明显减少;治疗组大鼠正常细胞胞核呈圆形或椭圆形、核仁清晰、染色质丰富、排列较密,少见固缩变性的神经元,神经元数量较多。②各组大鼠海马CA1区免疫组化海马ERK结果:痴呆组大鼠海马CA1区神经元ERK的表达量与正常对照组和假手术组相比较,有明显降低(P<0.01);治疗组大鼠海马CA1区神经元ERK的表达量较痴呆组升高,与正常对照组和假手术组相比较ERK的表达量降低(P<0.01)。结论:三七制剂可减少血管性痴呆大鼠海马神经元的缺血坏死,减轻脑组织的不可逆损害,具有神经元保护作用,ERK参与血管性痴呆的发生发展过程。     

丁苯酞对血管性痴呆大鼠记忆功能及海马神经元代谢产物的影响

目的探究丁苯酞(3-N-butylphthalide,NBP)对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠学习记忆功能及海马神经元代谢产物的影响。方法 90只健康雄性SD大鼠,随机选取10只为假手术组,其余80只用2VO法制作大鼠VD模型。术后8周共存活48只大鼠,随机分为VD模型组、NBP低剂量组、NBP中剂量组、NBP高剂量组4组,每组各12只。术后8周NBP低、中和高剂量组大鼠分别腹腔注射NBP12.5、25和50 mg/(kg·d),VD模型组和假手术组则注射相同体积的0.5%Tween-80溶液,所有大鼠均连续注射4周。采用定位航行试验和空间探索试验考察各组大鼠行为学变化,1H-MRS法检测神经元代谢产物变化。结果定位航行试验结果表明大鼠的学习记忆能力与DBP剂量成正比,即1~5 d,NBP中、高剂量组的平均逃离潜伏期低于模型组,差异均有统计学意义(P<0.05),空间探索试验结果表明DBP高剂量组能够显著改善大鼠学习记忆能力;1H-MRS检测结果表明与给药后VD模型组相比,NBP中、高剂量组NAA/Cr、Cho/Cr和m I/Cr与模型组之间的差异均有统计学意义(P<0.05),表明中、高剂量NBP对海马内神经胶质细胞的增生有明显促进作用,而NBP低剂量组则无明显作用。结论丁苯酞可以对血管性痴呆模型大鼠的学习记能力起到改善作用,通过调节海马神经元代谢产物,达到改善VD作用。     

续断提取物对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马神经元的保护作用

目的 观察续断提取物对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马神经元的影响.方法 采用反复夹闭、再通双侧颈总动脉的同时于腹腔注射硝普钠,建立大鼠血管性痴呆模型;观察续断提取物对模型大鼠学习记忆能力、血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活力、丙二醛(MDA)的含量以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)水平和海马中Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.结果 与模型组比较,中、高剂量续断提取物能提高大鼠的学习记忆能力以及血清中GSH-Px的水平和SOD的活性,降低MDA的含量;增加海马中抗凋亡蛋白Bcl-2的表达和抑制促凋亡蛋白Bax的表达.结论 续断提取物能够改善血管性痴呆大鼠的记忆障碍,对海马神经元具有一定的保护作用.     

脑通复方制剂对血管性痴呆模型大鼠海马神经元细胞外调节蛋白激酶表达的影响

目的:探讨观察脑通复方制剂对拟血管性痴呆(VaD)模型大鼠海马神经元中分裂原激活的蛋白激酶(MAPK)信号转导系统细胞外调节蛋白激酶(ERK1/2)及其磷酸化(p-ERK1/2)表达的影响。方法:采用改良Pulsinelli四血管阻断法复制大鼠血管性痴呆模型,脑通复方制剂治疗后观察学习记忆能力,Western-blotting法测定海马神经元总ERK1/2及p-ERK1/2蛋白表达。结果:脑通复方制剂可缩短实验大鼠逃避潜伏期,增加跨越平台次数;假手术组、VaD模型组、脑通复方制剂组及多哌齐特(安立申)组的ERK1/2蛋白水平分别为(1.20±0.19)、(1.11±0.14)、(1.18±0.13)、(1.25±0.14),任意两组间比较,差异均无统计学意义(P>0.05);假手术组、VaD模型组、脑通复方制剂组及多哌齐特(安立申)组p-ERK1/2蛋白水平分别为(0.75±0.07)、(0.38±0.08)、(0.58±0.10)、(0.65±0.08),模型组与假手术组相比p-ERK1/2蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.01);脑通复方制剂组和多哌齐特(安立申)组p-ERK1/2蛋白表达较模型组升...     

活血益智片对血管性痴呆大鼠记忆障碍及海马Bcl-2蛋白表达的影响

目的研究活血益智片对血管性痴呆大鼠(VaD)认知功能及海马神经元凋亡的影响。方法Wistar大鼠腹腔注射硝普钠2.5mg·kg-1后,立即反复夹闭大鼠双侧颈总动脉,制备血管性痴呆大鼠模型,观察活血益智片组(1.55,3.1,6.2g.kg-1)及氢麦角碱组(5.4mg·kg-1)连续给药28天后,对大鼠学习记忆能力及海马中SOD、MDA活性及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。结果活血益智片组与模型组比较,可提高大鼠的学习记忆能力及SOD活性,降低MDA含量;增加Bcl-2及减少Bax蛋白表达。结论活血益智片可通过调节Bcl-2及Bax表达而发挥抗凋亡作用。     

脱氢表雄酮对血管性痴呆小鼠大脑皮层神经元凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究脱氢表雄酮(DHEA)对血管性痴呆(VD)小鼠大脑皮层神经元凋亡的影响及可能机制。方法将小鼠分为假手术组、模型组及DHEA组。DHEA组皮下注射40 mg·kg^(-1)DHEA,假手术组和模型组皮下注射等容量植物油,每日1次,连续7 d。用夹闭小鼠双侧颈总动脉20 min再灌注的方法,建立全脑缺血再灌注损伤所致的血管性痴呆小鼠模型。通过尼氏染色观察小鼠大脑皮层神经元形态和数量变化;通过原位末端标记法检测小鼠大脑皮层神经元凋亡情况;用蛋白质印迹法检测小鼠大脑皮层裂解的胱天蛋白酶3(Cl-caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达变化。结果假手术组、模型组和DHEA组的凋亡率指标分别为(8.19±1.40)%、(23.84±5.18)%、(14.80±4.04)%,差异有统计学意义(P<0.05)。假手术组、模型组、DHEA组的大脑皮层Cl-caspase-3分别为0.38±0.10、1.18±0.26、0.62±0.12;Bax分别为0.96±0.17、1.55±0.10、1.19±0.13;Bcl-2分别为3.41±0.75、1.74±0.46、3.02±0.75。假手术组和DHEA组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论DHEA具有抑制血管性痴呆小鼠大脑皮层神经元凋亡的作用,其机制可能通过上调Bcl-2和下调Cl-caspase-3、Bax表达。     

异丙酚预处理对大鼠海马神经元凋亡的影响

目的探讨异丙酚预处理对缺氧/复氧后大鼠海马神经元凋亡的影响。方法取离体培养的大鼠海马神经元,随机分成5组:正常组(A)组。CoCl2组(B)组:加入300μmol·L-1(下同)CoCl2处理4h,然后更换正常的培养基培养24h,之后更换无血清的培养基培养。脂肪乳组(C)组:加入10%脂肪乳剂90μl预处理1h后同B组。异丙酚组(D)组:加入100μmol·L-1异丙酚1h后同B组。7-NI组(E)组:如D组,但加入CoCl2的同时加入3·3μl7-NI(25g·L-1)处理4h。MTT法测定细胞增殖,流式细胞技术测定细胞的凋亡。RT-PCR技术检测神经型一氧化氮合酶和凋亡相关基因的表达情况。结果脂肪乳组与CoCl2组比较,各项指标相似(P>0·05);异丙酚可增加神经元的增殖能力,减少凋亡(P<0·05或P<0·01),上调神经型一氧化氮合酶和凋亡抑制基因bcl-2的表达,下调促凋亡基因cyclinD1的表达。而这些调节作用可被神经型一氧化氮合酶抑制剂7-NI抑制(P<0·05或P<0·01)。结论100μmol·L-1异丙酚预处理对缺氧/复氧后大鼠海马神经元有保护作用,神经型一氧化氮合酶和凋亡相关基因在其中起重要作用。     

五味子甲素通过SIRT1/PGC-1α通路对血管性痴呆大鼠海马神经元凋亡的影响

目的 探讨五味子甲素对血管性痴呆(VD)大鼠沉默信息调节因子1/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅助激活因子-1α(SIRT1/PGC-1α)通路及海马神经元凋亡的影响.方法 50只大鼠双侧颈总动脉永久性结扎法制备VD模型,造模大鼠按照随机数字表法分为模型组、五味子甲素(20、40、80 mg/kg)组、阳性对照组,每组1...     

脑力苏对血管性痴呆小鼠海马细胞增殖及凋亡表达的影响

目的:探讨脑力苏胶囊对小鼠脑组织海马细胞增殖及凋亡的影响.方法:采用双侧颈总动脉结扎反复脑缺血再灌注的方法制备血管性痴呆小鼠模型.模型成功建立后将其随机分为模型组、假手术组、西药喜得镇组、脑力苏高剂量组、脑力苏低剂量组,后3组为治疗组.给药15 d后进行行为学测验,并采用流式细胞术检测各组海马细胞增殖指数及凋亡率的变化...     

氯胺酮诱导大鼠海马神经元凋亡及机制

目的 研究氯胺酮对SD大鼠海马神经元的凋亡诱导作用,并探究其作用机制.方法 培养SD大鼠海马神经元细胞,将对数生长期的大鼠海马神经元分为对照组(不加氯胺酮)和实验组(加氯胺酮且其终浓度分别为10、20 μmol/L).24h后,缩胆囊素8肽(CCK-8)法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,蛋白质印迹法检测蛋白phospho-细胞外信号调节蛋白激酶(P-ERK)、Bax、Bcl-2的表达.结果 10、20 μmol/L实验组神经元的存活率分别为(73.7±1.5)％和(58.2±2.4)％,明显低于对照组的(97.2±1.8)％(P＜0.05);凋亡率分别为(24.5±7.4)％和(34.7±4.9)％,明显高于对照组的(4.7±2.3)％(P＜0.05);P-ERK、Bax表达量增加,Bcl-2表达量减少.结论 氯胺酮能够诱导大鼠海马神经元凋亡,可能是通过激活P-ERK、改变Bax/Bcl-2比值实现的.     

Tanshinol protects hippocampus and attenuates vascular dementia development

Tanshinol (3-(3′,4′-dihydroxyphenyl)-(2R)-lactic acid, TSL) is widely used in traditional Chinese medicine for the treatment of cardiovascular and cerebrovascular diseases. Here, we assessed whether TSL protected hippocampus and attenuated vascular dementia (VD) development in rats. The behavioral analysis showed that TSL could decrease the distance and latency time, and increase the swim speed in water maze in rats subjected to VD. TSL remarkably increased acetylcholine level and decreased acetylcholinesterase activity in rats subjected to VD. Likewise, TSL remarkably decreased malondialdehyde and increased superoxide dismutase levels in rats subjected to VD. Furthermore, treatment with TSL reduced the level of dead neurons in dentate gyrus. In addition, TSL upregulated growth-associated protein 43 (GAP43) and vascular endothelial growth factor (VEGF) expression and downregulated phosphorylated Akt (p-AKt) and phosphorylated glycogen synthase kinase (p-GSK3β) expression in hippocampus in rats subjected to VD. These results suggest that TSL may be a potential compound in VD model.     

活血益智片对血管性痴呆小鼠凋亡蛋白p53及caspase-3表达的影响

目的 研究活血益智片(抗血管性痴呆中成药)对血管性痴呆小鼠(Van)认知功能及海马神经元凋亡蛋白的影响.方法 用反复缺血再灌注小鼠模型,模拟VaD行为及病理过程,观察3个剂量(2.24,4.48,9.96 g·kg-1)活血益智片组及氢麦角碱组7.8mg·kg-1连续给药28 d后,对海马区学习记忆成绩、p53及caspase - 3蛋白表达的影响.结果 活血益智片组与模型组比较,可提高小鼠的学习记忆能力;降低p53及caspase - 3蛋白表达.结论 活血益智片可通过调节p53及caspase-3蛋白表达而发挥抗凋亡作用.     

葡萄籽原花青素对血管性痴呆大鼠空间学习记忆能力的影响

目的观察葡萄籽原花青素(GSP)对血管性痴呆(VD)大鼠空间学习记忆能力的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用改良Pulsinelli四血管阻塞法建立VD大鼠模型,造模成功后,每天灌胃给药,Wistar大鼠分为假手术组,模型组,原花青素组(50 mg/kg和150 mg/kg),银杏叶片24 mg/kg。Morris水迷宫检测VD大鼠空间学习记忆能力;比色法检测脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;实时荧光定量PCR(Real-time PCR)法检测海马Bax、Bcl-2 mRNA的表达。结果与模型组比较,原花青素可明显改善VD大鼠空间学习记忆能力;提高脑组织SOD活性、GSH含量和总抗氧化能力,降低MDA含量;提高海马Bcl-2/Bax mRNA比值。结论原花青素可改善VD大鼠学习记忆功能,其机制可能与提高机体抗氧化能力、抑制海马神经元凋亡有关。     

黄芩苷对局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠海马神经细胞凋亡的影响

目的探讨黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法Wistar大鼠随机分为假手术组、脑缺血再灌注模型组、黄芩苷组(50,100和200 mg.kg-1),以及尼莫地平0.4 mg.kg-1组。利用大鼠大脑中动脉内栓线阻断法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型,通过HE染色、流式细胞术、免疫组化及RT-PCR等方法,观察黄芩苷对缺血再灌注大鼠脑组织形态学改变、神经细胞凋亡率及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3表达的影响。结果黄芩苷50,100和200 mg.kg-1iv均可明显改善缺血再灌注损伤所致的大鼠脑组织病理形态学改变,神经细胞凋亡率从模型组的(20.6±5.4)%分别降至(14.5±3.1)%,(11.12±4.2)%及(10.2±2.6)%,促凋亡基因caspase-3 mRNA表达比模型组分别降低23.2%,36.5%及41.0%,其蛋白表达比模型组分别降低25.6%,41.2%及49.3%。结论黄芩苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用,其作用机制可能与黄芩苷抑制caspase-3表达有关。     

耳穴配合针刺治疗小儿厌食症21例

目的 观察耳穴配合针刺治疗小儿厌食症的临床疗效。方法 将21例厌食症患儿采用耳穴贴压配合针刺腧穴治疗。结果 痊愈15例,占71.4%;好转4例,占19.1%;无效2例,占9.5%。总有效率为90.5%。结论 耳穴贴压配合针刺治疗小儿厌食症疗效显著。     

补阳还五汤提高血管性痴呆大鼠海马CREB、C/EBP的DNA结合活性

目的观察补阳还五汤对血管性痴呆大鼠海马CREB(cAMP反应元件结合蛋白)、C/EBP(CCAAT/增强子结合蛋白)DNA结合活性的影响。方法实验分为假手术组、模型组、补阳还五汤组和尼莫地平组。采用改良的4血管法制备血管性痴呆模型,分别给予生理盐水、补阳还五汤、尼莫地平灌胃干预,用凝胶电泳迁移率改变分析法(EMSA)测定各组大鼠CREB和C/EBP的DNA结合活性。结果与假手术组比较,模型组大鼠海马组织CREB的DNA结合活性明显降低(P<0.01);与模型组比较,尼莫地平组与补阳还五汤组明显升高(P<0.01);尼莫地平组与补阳还五汤组之间差异无显著性(P>0.05)。结论补阳还五汤可提高VD大鼠海马组织CREB、C/EBP与DNA的结合活性。     

石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马NMDA受体及mRNA表达的影响

目的:观测石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马神经元N-甲基D-天门冬氨酸(NMDA)受体免疫组化和原位杂交变化的影响,探讨石杉碱甲干预作用的机制.方法:双侧颈总动脉线结,反复缺血-再灌注法制备模型,药物组用石杉碱甲溶液灌胃,跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变,采用免疫组化和原位杂交技术观测小鼠海马神经元NMDA受体及其mRNA的表达变化.结果:在跳台试验中,模型组小鼠学习阶段的反应时间延长、错误次数增加,记忆阶段的潜伏时间缩短、错误次数增加;水迷宫试验中,其学习阶段的游全程时间延长和错误次数增加,记忆阶段的游全程时间延长和错误次数增加(与假手术组相比,P＜0.01).石杉碱甲明显改善了模型小鼠上述学习、记忆成绩(P＜0.01).同时,药物组海马的NMDA受体及其mRNA表达也较模型组的表达明显增高(P＜0.01),且海马两者的表达在药物组与假手术组间差异无显著性.结论:石杉碱甲改善血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩与其恢复海马低水平的NMDA受体及其mRNA有关.     

复方万年青胶囊对大鼠血管性痴呆的改善作用

目的探讨复方万年青胶囊对大鼠血管性痴呆的改善作用及机制。方法采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立大鼠血管性痴呆模型,将40只SD大鼠随机分成假手术组、模型组、复方万年青胶囊0.375 g/kg组和尼麦角林0.011 g/kg组,每组10只,连续ig给药45 d,每天1次。采用Morris水迷宫实验考察大鼠寻找站台潜伏期、原象限停留时间比和距离比,并检测生化指标IL-6、乙酰胆碱酯酶(AchE)的水平。结果与模型组相比,复方万年青胶囊组大鼠在第1、2、4、5天寻找站台的潜伏期均明显缩短(P0.05),在原象限停留时间比和距离比均明显增加(P0.05),生化指标AchE水平明显降低(P0.01),细胞因子IL-6水平降低,无显著性差异。结论复方万年青胶囊具有改善大鼠血管性痴呆的作用,可能与降低AchE活性,提升乙酰胆碱水平,修复受损的中枢胆碱能神经系统有关。     

耳穴贴压配合头针治疗儿童自闭症24例

目的:观察耳穴贴压配合头针治疗儿童自闭症的疗效.方法:24例自闭症患儿均行耳穴贴压及头针治疗,3个疗程后统计疗效.结果:孤独症行为量表(ABC)总分及躯体运动、感觉、生活自理、语言、交往等5个项目得分较治疗前均明显下降(P<0.05或P<0.01).结论:耳穴贴压配合头针治疗对提高自闭症患儿的语言、交往、感觉、动作技能及生活自理能力有较好的疗效.