细胞外超氧化物歧化酶(EcSOD)

<正>在动物组织中,超氧化物歧化酶家族主要有3种:Cu-ZnSOD存在于细胞质和细胞核中;MnSOD主要存在于线粒体中;EcSOD存在于细胞外液和结缔组织细胞外基质中。它们主要的作用是清除O_2~-生成H_2O_2和O_2,H_2O_2在过氧化氢酶或过氧化物酶和还原剂的作用下生成H_2O。在生物细胞外存在着以O_2_-为主的活性氧种,其来源有:紫外线、放射线照射;一些光敏物质,是良好的提供电子的载体,可见光照射即可生成O_2_-;还有一些物质的自氧化亦可生成O_2_-等。生命体为抵抗这种     

维生素E的抗脂质过氧化作用

本研究观察到:维生素 E 能抑制 H_2O_2引起的大鼠红细胞脂质过氧化和红细胞溶血,也能抑制分别由维生素 C-NADPH 和 Fe~(2+)-半胱氨酸诱发的大鼠肝、脑微粒体的脂质过氧化,可能还有清除过氧化氢、超氧自由基和羟自由基的作用。     

五氧化二钒对大鼠肾脏毒性的机理探讨 Ⅰ.五氧化二钒诱导的脂质过氧化

本文用硫代巴比妥酸(TBA)法和荧光法研究了五氧化二钒(V_2O_5)对大鼠肾脏的脂质过氧化作用。结果表明,V_2O_5经体内和在体外给予均能诱导大鼠肾皮质细胞生物膜的脂质过氧化,体外接触后的过氧化部位主要在线粒体膜和微粒体膜,体内染毒后则主要限于微粒体膜。醋酸锌和 EDTA 在体外实验中均能抑制 V_2O_5所诱导的脂质过氧化。     

牛肝过氧化氢酶的提纯实验研究

过氧化氢酶(catalase,简称 CTS)是一种较早发现的酶,它广泛存在于动植物组织中。以动物肝与红血球含量最多,菌藻类含量亦很高。CTS 的主要生理作用是催化 H_2O_2,分解为 H_2O 和 O_2,活性很高。人体内需氧脱氢酶所催化的反应都会产生 H_2O_2。在呼吸链中及机体遭受电离辐射、氧中毒及各类炎症刺激时,常产生对机体极为有害的超氧阴离子(活性 O_(2~-))但其可被超氧化物歧化酶(简称 SOD)迅速歧化成 H_2O_2和 O_2。     

青蒿酯钠的抗疟机理

青蒿酯钠(sodium artesunate,SA)在碱性条件下可产生超氧阳离子(O_2~-)和过氧化氢(H_2O_2)等活性氧;在pH 7.4条件下虽不能产生活性氧,但可使红细胞中O_2~-和H_2O_2等活性氧的浓度升高,并能增加红细胞膜的脂质过氧化.SA使疟原虫感染红细胞的活性氧增加和膜脂质过氧化程度均比未感染红细胞显著.     

砷对人胚肺组织中抗氧化酶的影响(论著摘要)

自由基和脂质过氧化作用能损伤生物膜,攻击DNA。而机体中的抗氧化酶类,如超氧化物歧化酶(SOD),过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)等,则能有效地清除超氧自由基(O_2),过氧化氢(H_2O_2)和脂质过氧化物。这些抗过氧化酶的结构中,各含有相应的微量元素。因此,研究微量元素和酶的结构和功能的关系,对探索微量元素与肿瘤的发生发展的相关性有重要意义。 在培养的人胚肺组织中,观察0μmol/ml、1μmol/ml、3μmol/ml、5μmol/ml、10μmol/ml 砷对人     

甘草苷对过氧化氢所致SH-EP1细胞株氧化应激损伤的保护作用研究

目的:研究甘草苷对过氧化氢所致SH-EP1细胞株氧化应激损伤的保护作用。方法:培养SHEP1细胞株并随机分为对照组、过氧化氢(H_2O_2)组以及甘草苷组,分别给予不含血清的培养基、200μmol/L的H_2O_2以及100、200、400μmol/L甘草苷联合200μmol/L的H_2O_2处理。处理后测定细胞活力值以及细胞中线粒体凋亡分子、抗氧化分子的含量。结果:处理12、24、36、48后,H_2O_2组的细胞活力值均显著低于对照组(P<0.05),100、200、400μmol/L甘草苷组的细胞活力值均显著高于H_2O_2组,且甘草苷剂量越大、细胞活力值越高(P<0.05);处理24 h后,H_2O_2组中Bax、Caspase-3、Nrf2、ARE的含量显著高于对照组(P<0.05),Bcl-2、凋亡抑制蛋白(XIAP)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GHS-Px)、血红素氧合酶(HO-1)的含量显著低于对照组(P<0.05);100、200、400μmol/L甘草苷组中Bax、Caspase-3的含量显著低于H_2O_2组(P<0.05),Bcl-2、XIAP、Nrf2、ARE、SOD、GHS-Px、HO-1的含量显著高于H_2O_2组且甘草苷剂量越大,Bax、Caspase-3的含量越低(P<0.05),Bcl-2、XIAP、Nrf2、ARE、SOD、GHS-Px、HO-1的含量越高(P<0.05)。结论:甘草苷能够通过抑制线粒体途径凋亡、增强抗氧化系统功能的途径来减轻过氧化氢所致SH-EP1细胞株氧化应激损伤。     

锰对大鼠肝细胞线粒体和微粒体微量元素含量的影响

本文对亚慢性染锰后大鼠肝细胞线粒体和微粒体微量元素含量的变化进行了研究。染锰组大鼠ip MnCl_2·4H_2O 15mg/kg共84天,对照组ip等容生理盐水。按Schenkman法制备肝线粒体和微粒体,电镜鉴定后用原子吸收分光光度法分别测定肝线粒体和微粒体的锰、铜、铁、锌含量。结果显示:杂锰组大鼠肝线粒体的锰、铜和锌含量分别比对照组升高66％、57％和62％(均P<0.01),而铁无明     

栀子苷对氧化应激所致H9C2心肌细胞损伤的保护作用机制研究

目的探讨栀子苷(GE)对H9C2心肌细胞氧化应激损伤的保护作用及机制。方法研究于2016年12月—2017年9月在武汉大学心血管病研究所进行。采用过氧化氢(H_2O_2)建立H9C2细胞氧化应激损伤模型。将细胞分为3组:PBS组、H_2O_2组以及H_2O_2+GE组,分别给予磷酸缓冲盐溶液(PBS)、H_2O_2(200μmol/L)、H_2O_2+GE(100μmol/L),刺激后继续培养24 h。检测各组内超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)、活性氧簇(ROS)水平,检测Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(KEAP1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)通路及其下游的血红素加氧酶-1(HO-1)和SOD-1的mRNA水平,CCK-8检测细胞存活率,原位末端缺口标记法(TUNEL)检测细胞凋亡。结果 H_2O_2处理后,H9C2心肌细胞内SOD和GSH-Px的活性下降,与H_2O_2组比较,H_2O_2+GE组细胞SOD和GSH-Px活性增加;H_2O_2处理可导致H9C2心肌细胞MDA水平明显升高,栀子苷可抑制这种脂质过氧化产物的产生;H_2O_2可诱导H9c2细胞ROS的产生,栀子苷处理后ROS的水平显著下降。H_2O_2刺激细胞后,KEAP1转录水平上升,Nrf2、HO-1、SOD-1转录水平下降;栀子苷处理后,KEAP1转录水平下降、Nrf2、HO-1、SOD-1转录水平回升;栀子苷明显升高细胞存活率,减轻细胞凋亡。结论栀子苷可通过激活KEAP1/Nrf2通路抑制H_2O_2引起的心肌细胞的氧化损伤。     

Ⅱ.五氧化二钒对膜脂流动性的影响

本文采用DPH荧光偏振技术研究了五氧化二钒(V_2O_5)对大鼠肾皮质线粒体和微粒体膜脂流动性的影响。结果表明,V_2O_5在体外能降低线粒体和微粒体膜脂流动性,但在体内主要作用于微粒体。醋酸锌和EDTA在体外对 V_2O_5的这种作用有拮抗作用。作者讨论了膜脂流动性降低与脂质过氧化的关系及其意义。     

甘草查尔酮A对H_2O_2所致心肌细胞损伤的保护作用研究

目的探讨甘草查尔酮A(LCA)对双氧水(H_2O_2)诱导的心肌细胞损伤的保护作用及其机制。方法将原代培养的乳鼠心肌细胞随机分为空白组、模型组(H_2O_2)、LCA低剂量组(10μmol/L)、LCA中剂量组(20μmol/L)、LCA高剂量组(40μmol/L)。经LCA给药4 h后,与100μM的H_2O_2共孵育24 h后检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH),脂质过氧化物丙二醛(MDA),活性氧自由基(ROS),Na+-K+-ATP酶,Ca~(2+)-ATP酶活性,同时检测过氧化物酶体增殖子活化受体γ(PPARγ),核因子E2相关因子2(Nrf2),和血红素加氧酶-1(HO-1) mRNA的表达情况。结果 LCA对H_2O_2所致心肌细胞损伤模型有保护作用,可抑制脂质过氧化MDA,ROS的生成,抑制Na+-K+-ATP酶活性,升高Ca~(2+)-ATP酶活性,上调PPARγ,Nrf2和HO-1 mRNA表达(P 0. 05,P 0. 01)。结论甘草查尔酮A对H_2O_2所致心肌细胞损伤有显著保护作用,且其作用机制可能与激活PPARγ/Nrf2/HO-1通路,缓解线粒体氧化应激有关。     

过氧化氢对白色念珠菌酶影响的显微分光光度计定量研究

本文按细胞化学原理和方法显示白色念珠菌（C．albicans）琥珀酸脱氢酶（SDH）和酸性磷酸酶（ACP），并用显微分光光度计检测定量分析了过氧化氢（H_2O_2）对C．albicans此两酶的影响。结果表明，3.0～3.2％H_2O_2可引起C．albicans SDH和ACP反应物吸光度较对照组显著降低，说明H_2O_2能使此两酶的活性降低或含量减少。     

六味地黄汤对实验性糖尿病大鼠心、肝、肾组织中过氧化氢酶活性和过氧化脂质含量的影响

用四氧嘧啶诱导雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠为模型进行研究．结果发现，四氧嘧啶大鼠血糖明显升高，且心、肝、肾组织中过氧化氢酶活性较正常组明显降低，过氧化脂质含量在心、肝组织中明显增高，过氧化脂质与过氧化氢酶比值在心、肝、肾组织中均明显高于正常组，表明糖尿病状态下大鼠心、肝、肾组织中均自由基生成增多，氧化损伤加重．经六味地黄汤治疗后，血糖明显下降，但心、肝、肾组织中的过氧化氢酶活性无改变；而心肌中过氧化脂质含量和过氧化脂质与过氧化氢酶比值则明显降低，过氧化脂质含量和过氧化脂质与过氧化氢酶比值在肝、肾组织中无变化，表明六味地黄汤能明显清除心肌中自由基，抑制心肌中脂质过氧化，且此作用并不是通过提高过氧化氢酶活性来达到．     

衰老标记蛋白30对过氧化氢所致人皮肤成纤维细胞衰老表型的影响

目的观察高表达的衰老标记蛋白30(SMP30)对过氧化氢(H_2O_2)所致的正常人皮肤成纤维细胞(NHSF)衰老表型的影响。方法实验分为转染H_2O_2处理组(NHSF+SMP30+H_2O_2组)、转空载体H_2O_2处理组(NHSF+空载体+H_2O_2组)和转空载体组(NHSF+空载体组)。NHSF细胞分别转染人SMP30 c DNA或空载体pc DNA3.1(分别命名为NHSF+SMP30、NHSF+空载体),然后150μmol·L-1H_2O_2处理2 h。应用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和蛋白印迹法分析SMP30的表达,显微镜观察细胞形态,并检测与衰老相关的β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)、细胞活性氧(ROS)及超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果人SMP30 c DNA明显上调了NHSF中SMP30的表达。NHSF+空载体+H_2O_2组SMP30 mRNA和蛋白表达水平明显低于NHSF+空载体组(P<0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组SMP30 mRNA和蛋白表达水平高于NHSF+空载体+H_2O_2组(P<0.05)。NHSF+空载体+H_2O_2组较NHSF+空载体组SA-β-gal染色率明显增高(P<0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组较NHSF+空载体+H_2O_2组SA-β-gal染色率明显下降(P<0.05)。NHSF+空载体+H_2O_2组较NHSF+空载体组ROS活性明显增高(P<0.05),而SOD水平明显降低(P<0.05);NHSF+SMP30+H_2O_2组较NHSF+空载体+H_2O_2组ROS活性明显下降,而SOD水平明显上升(P<0.05)。结论高表达的SMP30能够抑制细胞SA-β-gal和ROS的表达,同时上调SOD的活性。     

从非洲药用植物Thonningia sanguinea中分得新的抗氧化剂thonningianin A和B

在加纳蛇菰科植物T.sanguinea Vahl用于预防支气管哮喘。该植物提取物对DPPH显示自由基清除活性,且能抑制H_2O_2诱导的肝微粒体中的脂质过氧化,抑制     

SOX6基因对H_2O_2诱导的星形胶质细胞损伤的机制

目的探讨干扰SOX6基因表达对H_2O_2诱导的星形胶质细胞(AS)凋亡、线粒体膜电位及PI3K/AKT信号通路影响。方法从乳大鼠大脑皮质分离培养AS细胞,将细胞分为阴性对照组(NC组):AS转染无干扰作用的siRNA; H_2O_2组:20μmol/L的H_2O_2处理AS细胞24 h; H_2O_2+NC组:无干扰作用的siRNA转染AS细胞24h后,20μmol/L的H_2O_2处理细胞24 h; H_2O_2+si-SOX6组:SOX6特异性siRNA转染AS细胞24 h后,20μmol/L的H_2O_2处理细胞24 h。通过LDH试剂盒、流式细胞术及JC-1探针分别检测细胞毒性、凋亡率及线粒体膜电位;Western blotting检测SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9、Bcl-2、Bax和p-AKT蛋白表达。结果 H_2O_2可明显上调AS细胞SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9和Bax表达,下调Bcl-2和p-AKT表达,提高细胞毒性,诱导细胞凋亡,而干扰SOX6基因表达可明显减弱H_2O_2对细胞SOX6、Cyt.C、caspase3、caspase9、Bcl-2、Bax和p-AKT表达及细胞毒性和凋亡影响。结论干扰SOX6基因表达可通过抗凋亡途径保护H_2O_2诱导的AS损伤,此保护作用与线粒体通路及PI3K/AKT信号通化激活有关。     

静脉注射过氧化氢对小鼠红细胞膜的损伤

小鼠静脉注射H_2O_2后,其血浆LPO和Pl—Hb的含量均较对照组为高,且Pl—Hb和LPO呈明显正相关;全血谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化氢酶的活性与对照组比较均无明显差异。结果提示静脉注射H_2O_2的量超过了小鼠红细胞的抗氧化保护能力;H_2O_2对小鼠红细胞膜脂质的过氧化损伤明显,使红细胞膜结构和功能破坏,导致溶血。     

锌、汞对大鼠肝微粒体、线粒体脂质过氧化作用的影响

脂质过氧化物(LPO)是自由基引发不饱和脂肪酸的过氧化链式反应产物,微粒体及线粒体的膜磷脂中含有大量不饱和脂肪酸,易受脂质过氧化作用的损伤。本文从亚细胞水平探讨给锌、汞后大鼠肝微粒体、线粒体LPO含量的变化。1 材料和方法1.1 动物:体重 250～300g Wistar雄性大鼠20只,随机分为4组:对照组(皮下注射0.9％氯化钠溶液1ml/d×5);锌组(皮下注射醋酸锌0.75mmol/kg·d×5);汞组(皮下     

Ⅰ射线及烧伤复合伤对鼠肝LPO作用和相关酶活性的影响

本文观察了γ射线及烧伤复合伤后1 d～10d内大鼠肝线粒体MDA含量、细胞色素氧化酶、NADH-细胞色素C还原酶、CAT和SOD活力的动态变化,以反映肝线粒体内氧自由基、MDA产生和抗氧化机制的变化。结果表明线粒体MDA含量在烧伤、γ射线损伤和放烧复合伤后第2天、6天明显升高,其中烧伤组第10天有第3次高峰出现。细胞色素氧化酶和NADH-细胞色素C还原酶活力在3种损伤后有明显上升,而CAT和SOD活力在3种损伤后有明显下降。γ射线、烧伤及复合伤造成线粒体内产生O·_2~-和H_2O_2的酶活力增加,同时伴有清除O·_2~-和H_2O_2的CAT和SOD酶活力下降,这是造成线粒体膜脂质过氧化作用加速的原因之一。     

毒黄素致小鼠组织脂质过氧化作用

用椰毒假单胞菌产生的毒黄素注入小鼠腹腔引起急性中毒,约2h动物处于濒死状态。取脏器和血液以丙二醛法测定其脂质过氧化作用。显示肾和脑组织呈明显的脂质过氧化,而心脏、肺和血液未看到此种作用。考虑到毒黄素是作为还原性辅酶Ⅰ或FMNH_2与氧之间的电子传递体而产生H_2O_2的,因而推测产生H_2O_2的部位在线粒体和细胞浆,使线粒体受到损伤并影响糖酵解。