4—1BB配体在肿瘤细胞株上的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系

目的检测4-1BBL在肿瘤细胞株上的表达及其功能。方法半定量RT—PCR检测几种肿瘤细胞株内4-1BBL mRNA表达；流式细胞术检测肿瘤细胞表面4-1BBL蛋白的表达；MTT法检测4-1BBLmAb对肿瘤细胞增殖的影响。结果4—1BBL在Raji和THP-1细胞株表面表达率分别为26．8％和15．3％，而在T1301和Jurkat细胞株中，4-1BBLmRNA水平虽有一定表达，但蛋白水平却几乎不表达；4-1BBLmAb可以促进肿瘤细胞的增殖。结论4-1BBL在不同肿瘤细胞株上的表达有差异；4-1BBL在肿瘤细胞的增殖和长期存活中发挥重要作用。     

乳腺癌组织肿瘤细胞和间质免疫细胞程序性死亡配体-1表达与临床病理特征的关系

目的 观察不同分子分型乳腺癌组织肿瘤细胞、间质免疫细胞程序性死亡配体-1(programmed death ligand-1, PD-L1)表达变化,探讨其与乳腺癌临床病理特征的关系。方法 行手术治疗乳腺癌患者370例,其中Luminal A型26例为Luminal A型组,Luminal B型246例为Luminal B型组,人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2, HER-2)过表达型52例为HER-2过表达型组,三阴性46例为三阴性组。取手术切除癌组织,采用免疫组织化学Envision两步法检测肿瘤细胞、间质免疫细胞PD-L1阳性表达率。比较不同分子分型乳腺癌患者以及不同年龄、临床分期、阳性淋巴结数等乳腺癌患者癌组织肿瘤细胞、间质免疫细胞PD-L1阳性表达率。结果 (1)乳腺癌组织间质免疫细胞PD-L1阳性表达率在Luminal B型组、HER-2过表达型组、三阴性组(39.8%、73.1%、65.2%)均高于肿瘤细胞(15.4%、11.5%、17.4%)(P<0.05),在Luminal A型组与肿瘤细胞比...     

人4-1BB转基因细胞的构建及其对SHI-1细胞的促增殖作用

4 1BB(CD1 37)又名淋巴细胞激活诱导受体 ,4 1BB及其配体 4 1BBL分别属TNFR RNF家族分子 ,是近年颇受重视的一对新型共刺激分子。它们不仅在特异性免疫应答中起着重要的调节作用 ,而且以其独特的信号传导方式产生效应[1 ] 。我们进行了人 4 1BBcDNA的克隆和 4 1BB转基因细胞的构建 ,发现 4 1BB转基因细胞能促进急性单核细胞白血病细胞系 (SHI 1)的增殖。材料和方法1　质粒　pEGZ Term、PHIT6 0、pHIT4 5 6由德国Seffling教授赠送。小鼠成纤维母细胞 (L92 9)细胞株购自美国ATCC库 ,SHI 1细胞为我室建株 ,无支原体污…     

HIF-1α的表达与肿瘤细胞增殖凋亡的关系

肿瘤是一类以细胞生长和增殖失控为主要特征的疾病,细胞在增殖、分化和凋亡方面的异常都参与了肿瘤的发生和发展,高增殖导致肿瘤快速恶性生长,而凋亡则抑制肿瘤的生长和恶性化,两者是一个相互平衡的过程。增殖和凋亡比例的失衡会导致肿瘤细胞净值的不断增加导致肿瘤不断生长并发生转移。     

程序性死亡配体-1在肺腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的 分析比较程序性死亡配体-1(PD-L1)在肺腺癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法 回顾性分析2019年1月至2021年4月常州市第一人民医院手术切除后病理确诊的肺腺癌患者99例,使用免疫组织化学染色方法检测肺癌组织中PD-L1的表达水平,分析肺癌组织中PD-L1表达与肺腺癌临床病理特征的关系。结果 99例肺腺癌患者中PD-L1低表达79例(79.8%)、高表达20例(20.2%)。肿瘤组织低分化患者中PD-L1高表达率(35.7%,15/42)显著高于中、高分化患者(8.8%,5/57);有淋巴结转移患者PD-L1高表达率(34.6%,9/26)显著高于无淋巴结转移患者(15.1%,11/73)(均P<0.05)。不同PD-L1表达水平患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 PD-L1高表达与肺腺癌患者肿瘤低分化程度和淋巴结转移具有相关性,可能参与肿瘤的发生发展,有助于评估病情严重程度和预后预测。     

程序性死亡配体-1表达与微卫星不稳定性胃癌患者预后的关系

目的 观察微卫星不稳定性(microsatellite instability, MSI)胃癌患者癌组织程序性死亡配体-1(programmed death-ligand 1, PD-L1)表达变化,探讨其与MSI胃癌患者临床病理特征及预后的关系。方法 108例胃癌患者均行胃癌根治术,采用免疫组织化学法检测胃癌组织PD-L1阳性表达及错配修复蛋白表达情况,根据错配修复蛋白表达情况分为MSI组28例和非MSI组80例,比较2组患者胃癌组织PD-L1阳性表达率及不同临床病理特征的MSI胃癌患者癌组织PD-L1阳性表达率。随访3年,采用Kaplan-Manier生存曲线分析PD-L1阳性与阴性表达的MSI胃癌患者术后3年总生存率;绘制ROC曲线,评估癌组织PD-L1表达预测MSI胃癌患者术后3年预后不良的效能。结果 108例胃癌患者癌组织PD-L1阳性表达率为43.52%;MSI胃癌患者28例,发生率为25.93%。MSI组PD-L1阳性表达率(60.71%)高于非MSI组(37.50%)(χ²=4.547,P=0.033);临床分期Ⅲ～Ⅳ期(81.25%)、有淋巴结转...     

Kindlin与肿瘤细胞增殖关系的研究进展

Kindlin是一族新发现的黏着斑蛋白。目前,已在哺乳动物中发现该蛋白家族有3个成员,包括Kindlin-1、Kindlin-2和Kindlin-3[1]。不同的Kindlin家族成员在进化上具有高度的同源性和保守性,参与了多种重要的细胞生理过程,如细胞迁移、增殖和分化的调控。Kindlin家族成员的异常与多种肿瘤的发生、发展及遗传性疾病密切相关。研究Kindlin对     

早期胃癌肿瘤浸润深度与癌组织PD-L1、Arg-1表达的关系

目的 探讨早期胃癌肿瘤浸润深度与癌组织程序性死亡配体-1(PD-L1)、精氨酸酶-1(Arg-1)表达的关系。方法 回顾性选取2020年1月至2022年1月在琼海市人民医院治疗的早期胃癌患者110例,采用免疫组织化学染色法检测胃癌组织和癌旁组织的PD-L1、Arg-1表达,内镜检查早期胃癌浸润深度情况,分析早期胃癌浸润深度的影响因素。结果 早期胃癌组织PD-L1和Arg-1阳性表达率分别为58.18%和76.36%,均明显高于癌旁组织(22.73%、30.91%),差异均有统计学意义(P<0.05)。合并溃疡、病变边缘有隆起、PD-L1阳性表达、Arg-1阳性表达组织黏膜下层深浸润比例分别为54.35%、51.16%、43.75%和39.29%,明显高于未合并溃疡、病变边缘无隆起、PD-L1阴性表达、Arg-1阴性表达组织(15.63%、19.40%、15.22%和7.69%),差异均有统计学意义(P<0.05)。肿瘤大小>1 cm、未分化型组织PD-L1阳性表达率分别为73.33%和97.67%,Arg-1阳性表达率分别为95.56%和93.02%,明显高于肿瘤大小...     

增殖诱导配体及其受体在肿瘤组织中的表达与意义

目的分析增殖诱导配体(APRIL)及其受体在不同肿瘤组织及肿瘤发展不同阶段的表达水平,探讨其与肿瘤发生的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(RFQ-PCR)检测了临床上常见肿瘤组织中APRIL及其受体mRNA的准确含量,并以靶基因和内参mRNA含量的比值作为评价靶基因表达水平的指标。结果肿瘤组织中APRIL表达水平显著高于交界组织(P<0.05)和正常组织(P<0.05);B细胞成熟抗原(BCMA)和穿膜蛋白活化物(TACI)表达水平在大多数肿瘤组织中与正常组织差异无统计学意义(P>0.05);APRIL在肠上皮化生、异型增生和胃癌组织中表达水平显著高于正常黏膜(P<0.05),APRIL在胃癌组织中表达水平显著高于肠上皮化生和异型增生(P<0.05),而其受体BCMA和TACI在各组胃黏膜病变之间表达水平无统计学意义(P>0.05)。结论成功建立RFQ-PCR检测APRIL及其受体mRNA含量的方法,具有较好的检测灵敏度和重复性;APRIL在肿瘤发生、发展过程中可能起了重要作用;除了BCMA和TACI外,肿瘤细胞可能还存在APRIL未知受体;APRIL在某些类型肿瘤有可能主要是通过受体BCMA而不是TACI发挥作用。     

4-1BBL在人高转移性肺癌细胞株95D的表达及其生物学作用

目的 探讨共刺激分子4-1BBL在人高转移性肺癌细胞株95D细胞的表达并在体外分析4-1BBL逆向信号对95D细胞的功能影响.方法 采用免疫荧光和流式细胞术及RT-PCR检测4-1BBL分子在95D细胞中的表达,进而在体外采用可溶性4-1BB-Ig融合蛋白激发4-1BBL逆向信号,分析95D表达膜型负性免疫调节分子CD95L、PD-LI和B7-H3的变化.结果 95D细胞表达4-1BBL,4-1BB激发的逆向信号可上调95D细胞表达膜型CD95L、PD-LI和B7-H3.结论 体外研究结果提示共刺激分子4-1BBL表达于肿瘤细胞,4-1BBL逆向信号可能通过上调表达肿瘤细胞表而的负性免疫分子,参与肿瘤细胞的免疫逃逸机制.     

乳腺导管上皮病变中细胞增殖和凋亡作用及其与ER、PR、C-erbB-2表达关系的研究

目的 :探讨乳腺导管上皮病变中细胞增殖和凋亡作用及其与ER、PR、C -erbB - 2表达关系的临床病理意义。方法 :采用免疫组织化学Envision二步法和TUNEL法检测正常乳腺导管上皮 2 0例 ,增生性乳腺导管上皮 4 6例 ,导管原位癌 12例和 6 0例乳腺浸润性导管癌增殖指数 (ProliferativeIndex ,PI)和凋亡指数 (ApoptoticIn dex ,AI)以及ER、PR、C -erbB - 2表达 ,分析乳腺导管上皮病变中细胞增殖指数和凋亡指数及其与ER、PR、C-erbB - 2表达率的关系。结果 :正常乳腺导管上皮、增生性导管上皮、导管原位癌、浸润性导管癌及其随病理组织学分级愈高 ,细胞增殖指数 (PI)和C -erbB - 2阳性表达指数 (CI)逐渐增加 ,细胞凋亡 (AI)逐渐减少 ,且正常乳腺导管上皮与乳腺导管原位癌 (重度非典型增生 )细胞增殖指数 (PI)、细胞凋亡 (AI)、C -erbB - 2阳性表达 (CI)及ER、PR表达 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。乳腺导管上皮病变细胞增殖与ER、C -erbB - 2表达呈正相关 (r=0 5 4 ,r=0 79,P <0 0 5 ) ;乳腺导管上皮病变细胞凋亡与ER、C -erbB - 2表达呈负相关 (r =-0 6 2 ,r=- 0 73,P <0 0 5 )。结论 :细胞增殖和凋亡、ER、PR及C -erbB - 2在乳腺导管上皮病变发生发展和预后判断过程中可能起重要作用 ,且它们皆可能作为乳     

Elevated soluble 4-1BB is associated with serum markers of hepatitis B virus in patients with chronic hepatitis B

BACKGROUNDPrevious studies have suggested that the costimulatory molecule 4-1BB plays pivotal roles in regulating immunity during chronic viral infection. However, up to now, there are few studies about 4-1BB in chronic hepatitis B (CHB).AIMTo clarify this issue, we report our comprehensive study results on the expression levels of 4-1BB in patients with CHB.METHODSFrom September 2018 to June 2019, a total of 64 patients with CHB were recruited from the Department of Hepatology, The First Hospital of Jilin University. Peripheral blood samples were collected from 52 treatment-naïve and 12 entecavir-treated patients with CHB as well as 37 healthy donors (including 24 healthy adults and 13 healthy children). The levels of soluble 4-1BB (s4-1BB) in plasma were measured by ELISA. 4-1BB mRNA expression in peripheral blood mononuclear cells was detected by real-time quantitative PCR.RESULTSThe s4-1BB levels in the plasma of patients with CHB were significantly higher than those in healthy adults (94.390 ± 7.393 ng/mL vs 8.875 ± 0.914 ng/mL, P < 0.001). In addition, the s4-1BB level in plasma was significantly increased in patients with a higher viral load and a disease flare up. However, there were no significant differences between treatment-naïve and entecavir-treated patients. Interestingly, among treatment-naïve patients with CHB, the levels of s4-1BB in plasma had a significant positive correlation with hepatitis B surface antigen, hepatitis B virus DNA, hepatitis B e antigen, and triglyceride levels (r = 0.748, P < 0.001; r = 0.406, P = 0.004; r = 0.356, P = 0.019 and r = -0.469, P = 0.007, respectively). The 4-1BB mRNA expression was higher in the peripheral blood mononuclear cells of patients with CHB than in the peripheral blood mononuclear cells of healthy adults, but the difference was not statistically significant.CONCLUSIONThese results suggest that the levels of s4-1BB may be associated with pathogenesis of hepatitis B virus and therefore may be a promising biomarker for disease progression.     

抑制SDF-1活性对人急性髓性白血病HL-60细胞系增殖的影响

本研究通过观察抑制SDF-1活性对HL-60细胞增殖活性的影响，探讨趋化因子SDF-1在维持HL-60细胞生存能力中的作用。培养骨髓基质细胞，并与HL-60细胞共培养，采用SDF-1受体CXCR4单克隆抗体阻断SDF-1生物活性后，用MTT法检测HL-60细胞活力、用流式细胞术观察HL-60细胞增殖周期变化、检测细胞膜表面CXCR4表达，同时检测CXCR4单克隆抗体应用前后HL-60细胞内钙离子浓度变化。结果显示，抗CXCR4单克隆抗体可下调HL-60细胞膜表面CXCR4的表达，同时处于G0／G1期的细胞增多，处于S期的细胞减少，而白血病细胞存活率下调，细胞内钙离子浓度降低。结论：抑制SDF-1活性可在一定程度上抑制白血病细胞的增殖。     

DLL4/Notch1配体过表达抑制K562细胞生长机制研究

本研究旨在探讨Notch1信号通路的配体delta-like ligand4（DLL4）基因过表达对K562细胞增殖的影响及其可能的作用机制.采用脂质体介导将含配体DLL4基因的质粒pBudCE4.1-DLL4转染K562细胞,通过RT-PCR和Western blot检测转染48 h后DLL4基因的mRNA及蛋白表达,同样检测转染后Notch1受体胞内区（NICD）、下游靶基因Hesl的mRNA及蛋白表达;通过Western blot检测与Notch信号通路相关的细胞转录因子YY1、原癌基因C-MYC及抑癌基因Rb蛋白的表达水平;用CCK-8法检测转染后细胞的增殖情况;用流式细胞术检测转染质粒48 h后各组细胞的凋亡情况.结果表明,DLL4基因转染后的K562细胞中DLL4、NICD及下游靶基因Hesl的mRNA及蛋白表达量比对照组明显增多（P＜0.05）,说明DLL4的过表达激活了Notch1信号通路;Western blot方法检测显示,DLL4的转染增加了细胞转录因子YY1、原癌基因C-MYC及抑癌基因Rb蛋白的表达,从而抑制了K562细胞的生长,诱导细胞周期停滞于G1期及细胞凋亡的增加.结论：外源性DLL4基因过表达可有效活化K562细胞内Notch1信号通路,可能通过YY1、C-MYC及Rb等Notch信号通路相关基因的高表达诱导K562细胞的生长减慢及细胞凋亡.     

核糖核苷酸还原酶小亚基M2在多发性骨髓瘤患者中的表达及抑制肿瘤细胞增殖的相关机制

目的:探讨核糖核苷酸还原酶小亚基M2(ribonucleotide reductase M2,RRM2)在多发性骨髓瘤细胞中的表达及抑制肿瘤细胞增殖的相关机制。方法:选取2016年7月至2018年9月在本院初诊的多发性骨髓瘤患者36例为MM组,选取同期纯缺铁性贫血的患者16例作为对照组。应用RT-qPCR、Western blot检测所收集病例中骨髓单个核细胞内RRM2的表达。用siRNAs转染多发性骨髓瘤细胞株RPMI8226建立RRM2表达缺失的细胞模型,并用CCK8检测细胞的增殖,流式细胞术分析敲低RRM2表达对细胞周期的影响,并应用Western blot分析周期相关调控蛋白的变化。结果:RT-qPCR及Western blot结果显示,多发性骨髓瘤患者样品中的RRM2相对表达水平比对照组明显升高(P<0.05)。进一步分析证明,多发性骨髓瘤患者单个核细胞中RRM2的表达量与临床肿瘤分期、骨质破坏及髓外浸润等关系密切(P<0.05)。在多发性骨髓瘤细胞株内,利用siRNA干扰下调RPMI8226细胞内RRM2蛋白表达,可以明显抑制RPMI8226细胞的增殖能力;流式细胞术检测细胞周期的结果发现,RRM2干扰组细胞周期阻滞于S期(P<0.05);进一步的研究证明,RRM2干扰可以影响细胞周期调控相关蛋白的表达。结论:RRM2在多发性骨髓瘤单个核细胞内呈高表达,且与患者肿瘤恶性程度密切相关。干扰细胞内RRM2表达可通过阻滞细胞周期抑制细胞增殖。RRM2可能成为评估多发性骨髓瘤进展的新指标及药物开发的新靶点。     

2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞系增殖与凋亡的影响

为了探讨2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞系增殖及凋亡的影响,并观察其与地塞米松、反应停、三氧化二砷、唑仑膦酸钠等药物联合时的协同作用,采用台盼蓝染色法检测细胞活力,应用BrdU掺入法检测浆细胞标记指数(PCLI),DNA片段原位末端标记(TUNEL法)检测凋亡细胞.药物协同作用判断标准按金氏公式计算Q值.结果表明,7株骨髓瘤细胞系NCI-H929、HS-sultan、KM3、SK0-007、CZ-1、U266、LP-1经1、4、8、12、16 μmol/L 2-甲氧基雌二醇分别作用12、24、36和48小时后细胞活力明显受抑制,呈现时间剂量依赖性,经统计学分析,差异显著(P＜0.05).各细胞系对2-甲氧基雌二醇敏感性不同,其IC50介于(20.8±0.27)μmol/L与(34.1±0.57)μmol/L之间.1、4、8、12、16 μmol/L 2-甲氧基雌二醇分别作用12、24、36和48小时可诱导骨髓瘤细胞系凋亡,凋亡率介于9%-33%之间,呈现时间和剂量依赖性,经统计学分析,差异显著(P＜0.05).经12 μmol/L 2-甲氧基雌二醇作用24小时后浆细胞标记指数(PCLI)由作用前平均(30.14±4.28)%下降到作用后的(14.71±6.27)%,差异显著(P＜0.05).2-甲氧基雌二醇与药物联合作用后计算Q值介于1.13-1.43之间,具有协同作用.结论2-甲氧基雌二醇可抑制骨髓瘤细胞生长,并可诱导骨髓瘤细胞凋亡,与地塞米松、反应停、三氧化二砷、唑仑膦酸钠联合使用具有协同作用.     

肝细胞核因子1B体外抑制前列腺癌细胞的增殖和迁移

目的:探讨肝细胞核因子1B(HNF1B)在前列腺癌中表达及其对肿瘤细胞生长和迁移的影响。方法:免疫组化检测HNF1B基因在患者前列腺癌组织中的表达;Western印迹法检测前列腺癌细胞系中HNF1B的表达水平。在DU-145细胞中过表达HNF1B,利用MTS检测HNF1B表达改变对细胞增殖的影响;克隆形成实验检测克隆情况;Transwell实验检测迁移情况。结果:前列腺癌组织中HNF1B蛋白表达低于癌旁组织(P0.000 1),高转移、激素治疗抵抗的前列腺癌细胞HNF1B表达低于低转移前列腺癌细胞(P0.05)。过表达HNF1B可抑制前列腺癌细胞增殖、迁移和克隆形成(P0.05或P0.01)。结论:HNF1B是前列腺癌抑癌基因,体外可通过抑制前列腺癌的增殖、迁移和生长发挥抑癌作用。