微小RNA-222-3p在儿童肺炎中的表达及其对LPS诱导的肺成纤维细胞凋亡和炎症因子表达的影响北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-222-3p(miR-222-3p)在肺炎患儿血清中的表达水平,以及对脂多糖(LPS)诱导的肺成纤维细胞中凋亡和炎症因子水平的影响。方法选取87例儿童血清样本(50例肺炎患儿为肺炎组,37例健康儿童为健康对照组)作为实验标本,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测血清中miR-222-3p表达水平。将人胚肺成纤维细胞WI-38细胞株分为4组:对照组(无任何处理)、模型组(5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h)、转染组-1(转染inhibitor NC后,5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h后,)、转染组-1(转染miR-222-3p inhibitor后用5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h)。用ELISA试剂盒检测各组WI-38细胞培养上清液白介素-1β(IL^(-1)β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;用流式细胞术比较各组细胞的凋亡率。结果健康对照组与肺炎组血清中miR-222-3p的相对表达分别为1.10±0.36,1.51±0.52;对照组、模型组、转染组-1、和转染组-2细胞上清IL^(-1)β的水平为(10.08±1.33),(317.85±37.67),(304.87±37.07),(152.12±24.38)pg·m L^(-1);IL-6的水平为(19.78±2.17),(423.75±54.16),(429.05±48.03),(208.18±34.85)pg·m L^(-1);TNF-α的含量为(17.54±3.85),(602.13±42.13)(606.44±53.32),(349.30±25.73)pg·m L^(-1);凋亡率分别为(4.73±0.64)%,(9.75±1.27)%,(10.68±1.87)%,(7.18±0.79)%;模型组与对照组比较,转染组-1与对照组比较,转染组-2与转染组-1比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-222-3p在肺炎患儿血清中高表达,敲低miR-222-3p可降低LPS诱导的WI-38炎症因子水平,并抑制细胞凋亡。     

MiR-26a-5p对人主动脉内皮细胞增殖和凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-26a-5p(miR-26a-5p)在氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)中的表达和作用。方法将HAECs随机分为对照组(正常培养);模型组(用50μg·mL^(-1)ox-LDL处理24 h);转染组-1(转染mimic NC后用50μg·mL^(-1)ox-LDL处理24 h);转染组-2(转染miR-26a-5p mimic后用50μg·mL^(-1)ox-LDL处理24 h)。以实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测miR-26a-5p的表达水平;以噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力;以流式细胞术检测HAECs的凋亡情况。结果对照组、模型组、转染组-1、转染组-2细胞中miR-26a-5p的相对表达量分别为1.03±0.14,0.56±0.03,0.51±0.07,2.31±0.17;24 h的细胞增殖率分别为(47.71±4.35)%,(31.64±2.83)%,(30.23±1.47)%,(41.62±2.85)%;凋亡率分别为(8.24±0.59)%,(14.56±1.63)%,(15.48±1.24)%,(8.54±0.68)%。模型组与对照组比较,转染组-2与转染组-1比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-26a-5p在ox-LDL诱导的HAECs中低表达,上调miR-26a-5p可以促进HAECs增殖并抑制细胞凋亡。     

miR-590-5p对PDGF诱导气道平滑肌细胞增殖和迁移的作用和机制北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-590-5p(miR-590-5p)在人血小板来源生长因子(PDGF)诱导的气道平滑肌细胞(ASMCs)中的作用以及潜在机制。方法ASMCs随机分为对照组(不做处理),模型组(用40 ng·m L-1PDGF刺激24h),和实验组(转染miR-590-5p模拟物后用40 ng·m L-1PDGF刺激24 h)。以细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测ASMCs的增殖;细胞划痕愈合实验检测ASMCs的迁移;以蛋白印迹法检测各组ASMCs中酪氨酸激酶2(JAK2)的表达水平。结果对照组、模型组、实验组细胞增殖率分别为(57.28±4.39)%,(84.38±3.45)%,(60.86±4.40)%;细胞迁移率分别为(19.27±2.49)%,(38.16±5.32)%,(24.68±3.04)%;JAK2的相对表达分别为0.69±0.08,2.19±0.13,1.26±0.11。模型组与对照组比较,实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-590-5p在PDGF诱导的ASMCs表达下调,miR-590-5p通过靶向JAK2抑制PDGF诱导的ASMCs的增殖和迁移。     

丁苯酞对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞损伤的保护作用北大核心CSCD

目的探究丁苯酞对缺氧缺糖/复氧复糖PC12细胞损伤的保护作用和机制。方法将PC12细胞随机分为对照组(常规培养)、模型组[缺氧缺糖/复氧复糖(OGD/R)]和实验组(10μmol·L^(-1)丁苯酞)。然后,将NC inhibitor和miR-146b-5p inhibitor分别转染至实验组细胞中,分别命名为转染组-1和转染组-2。用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-β)含量;试剂盒检测活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;用蛋白免疫印迹法检测肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)蛋白表达。结果对照组、模型组和实验组的TNF-α含量分别为(53.31±4.71),(115.10±10.33)和(82.13±4.83)pg·m L^(-1);IL^(-1)β含量分别为(62.17±4.88)(97.33±7.96)和(74.42±5.33)pg·m L^(-1);ROS活性分别为(21.12±2.11),(47.62±2.98)和(32.01±3.15)U·m L^(-1);SOD活性分别为(60.42±3.33),(44.78±2.69)和(68.01±5.12)U·m L^(-1);TRAF6蛋白相对表达量分别为1.03±0.11,2.92±0.32和1.93±0.20。上述指标,模型组与对照组相比,实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。转染组-1和转染组-2中TRAF6相对表达量分别为1.01±0.10和3.12±0.29,两组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。结论丁苯酞通过miR-146b-5p/TRAF6轴抑制炎症反应和氧化应激反应减轻缺氧缺糖/复氧复糖诱导的PC12细胞损伤。     

白芨多糖对胃溃疡大鼠的干预作用及其机制研究

目的研究白芨多糖对胃溃疡(GU)模型大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及病灶组织的核因子-κB(NF-κB)p65基因及其蛋白表达影响。方法用乙酸直接烧灼法复制GU大鼠模型。按随机数字表法将大鼠分为6组:正常组、模型组,阳性对照组(0.3 g·kg^-1·d^-1雷尼替丁灌胃)和大、中、小3个剂量实验组(50.0,25.0,12.5 mg·kg^-1·d^-1白芨多糖灌胃),每组10只;正常组和模型组大鼠给予蒸馏水灌胃,各组均1次/天,连续15 d。用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量,以实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测组织中NF-κB基因和蛋白表达情况。结果正常组、模型组、阳性对照组和大、中、小3个剂量实验组的血清TNF-α含量分别为(571.13±11.85),(759.25±21.11),(636.63±3.70),(611.75±12.46),(741.63±11.99)和(756.88±8.34)pg·mL^-1;这6组的IL-1β的含量分别为(400.50±30.39),(532.13±11.76),(458.88±9.48),(422.00±21.50),(508.63±15.68)和(523.38±10.18)pg·mL^-1;这6组的IL-6的含量分别为(295.63±11.15),(429.00±11.56),(340.63±9.68),(317.88±10.80),(377.50±14.15)和(417.75±9.36)pg·mL^-1;这6组的NF-κB p65基因表达量(2-ΔΔCt值)分别为1.00±0.00,1.37±0.02,1.29±0.02,1.23±0.03,1.33±0.02和1.35±0.03;这6组的NF-κB p65蛋白表达量(灰度值)分别为0.60±0.11,1.24±0.36,0.79±0.14,0.63±0.09,0.87±0.15和1.16±0.25。上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),大、中2个剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论白芨多糖可通过抑制促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6异常分泌,并下调NF-κB p65基因及其蛋白表达,从而发挥保护胃黏膜的作用。     

微小RNA-137对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响北大核心CSCD

目的探究微小RNA-137(miR-137)通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响。方法取人肾小管上皮细胞HK-2,将其随机分为对照组和模型组。对照组细胞常规培养,模型组细胞缺氧4 h、复氧2 h以构建H/R模型。将HK-2细胞转染miR-137模拟物或阴性对照寡核苷酸,随后构建H/R损伤模型,分别命名为miR-137 mi组和miR-NC组。用原位末端标记(TUNEL)法检测各组细胞的凋亡率;用丙二醛(MDA)检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测定试剂盒及超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测各组细胞MDA、GSH-PX和SOD的含量;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;用蛋白质印迹(Western blot)法检测磷酸化PI3K(p-PI3K)蛋白及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白的表达水平。结果对照组、模型组、miR-NC组和miR-137 mi组的细胞凋亡率分别为(5.06±0.10)%,(13.74±1.39)%,(11.75±1.20)%和(8.32±0.76)%;MDA的含量分别为(38.37±2.33),(45.38±3.02),(45.95±3.27),(33.49±1.78)nmol·mg^(-1);GSH-PX的含量分别为(573.17±5.15),(204.46±2.77),(205.39±1.72),(415.80±4.48)U·mg^(-1);SOD的活性分别为(11.42±1.84),(4.92±0.20),(5.01±0.34),(7.93±0.57)U·mg^(-1);MCP-1的含量分别为(1.57±0.13),(4.78±0.38),(4.30±0.14),(2.95±0.62)ng·mL^(-1);ICAM-1的含量分别为(0.18±0.05),(0.56±0.09),(0.53±0.04),(0.25±0.09)ng·mL^(-1);IL-1β的含量分别为(23.62±2.85),(43.83±1.70),(44.07±2.33),(31.86±1.67)pg·mL^(-1),以上指标,对照组和模型组相比,miR-NC组和miR-137 mi组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-137可减少人肾小管上皮细胞H/R损伤模型细胞凋亡、降低氧化应激以及炎症反应,其作用机制与PI3K/AKT信号通路有关。     

藤黄酸上调miR-497-5p影响子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学行为北大核心CSCD

目的研究藤黄酸对子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学行为的影响和机制。方法子宫内膜癌Ishikawa细胞分成4组:对照组、实验组(用0.8μg·mL^(-1)藤黄酸处理)、Anti-miR-NC组(转染inhibitor control,0.8μg·mL^(-1)藤黄酸处理)、Anti-miR-497-5p组(转染miR-497-5p inhibitor,0.8μg·mL^(-1)藤黄酸处理)。用qRT-PCR方法检测miR-497-5p表达,用MTT法检测细胞增殖,用流式细胞术检测凋亡率,Transwell小室检测迁移能力,用蛋白印迹法(Western blot)检测剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3、上皮性钙黏附素、神经性钙黏附素、基质金属蛋白酶-9蛋白表达。结果对照组、实验组、Anti-miR-NC组、Anti-miR-497-5p组子宫内膜癌Ishikawa细胞中miR-497-5p表达量分别为1.00±0.10,1.98±0.17,1.96±0.19和0.99±0.12;上述4组的细胞增殖率分别为(100.00±11.70)%,(55.10±8.10)%,(56.20±7.15)%和(87.51±7.64)%;上述4组的细胞凋亡率分别为(4.66±0.88)%,(12.45±1.85)%,(13.05±1.56)%和(8.72±1.10)%;上述4组的迁移细胞数目分别为215.36±18.42,103.69±9.15,108.42±11.50和164.79±13.57。上述指标,实验组与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);Anti-miR-497-5p组与Anti-miR-NC组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论藤黄酸通过上调miR-497-5p影响子宫内膜癌Ishikawa细胞生物学行为。     

钩藤碱固体脂质纳米粒抑制哮喘模型小鼠气道平滑肌细胞增殖的作用机制

目的 研究钩藤碱固体脂质纳米粒（Rhy-SLN）抑制哮喘模型小鼠气道平滑肌细胞（ASMCs）增殖的作用机制。方法 采用卵清蛋白+氢氧化铝过敏法制备哮喘模型小鼠，然后原代分离培养ASMCs并进行形态观察和鉴定[当ASMCs内α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）呈红色，结蛋白（Desmin）呈绿色，表明ASMCs培养成功]；将细胞分为空白组（正常小鼠ASMCs）、模型组（哮喘模型小鼠ASMCs）、Rhy-SLN组（哮喘模型小鼠ASMCs）、细胞因子信号转导抑制蛋白1(SOCS1)过表达组（转染SOCS1过表达载体的哮喘模型小鼠ASMCs）、SOCS1-RNAi组（转染SOCS1-RNAi载体的哮喘模型小鼠ASMCs）、SB203580组[p38丝裂原激活的蛋白激酶（p38 MAPK）抑制剂，哮喘模型小鼠ASMCs]。各组加入相应含药（均为10μmol/L）或不含药培养基培养24 h。采用MTT法检测ASMCs增殖，采用Western blot法检测ASMCs中α-SMA、白细胞介素1β(IL-1β)、SOCS1、p38 MAPK、磷酸化p38 MAPK(p-p38MAPK)蛋白表达水平。结果 ...     

miR-149-3p调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎性反应的影响

目的 探讨miR-149-3p通过调控JNK/p38 MAPK信号通路对髓核细胞凋亡、自噬和炎症反应的影响。方法 体外分离大鼠髓核细胞,用IL-1β浓度为10 ng/ml建立模型组,细胞分为Con组(空白对照)、IL-1β组(IL-1β处理)、IL-1β+miR-NC组(IL-1β处理,转染miR-NC)、IL-1β+miR-149-3p组(IL-1β处理,转染miR-149-3p)、IL-1β+miR-149-3p+Anisomycin组(IL-1β和通路激活剂Anisomycin处理,转染miR-149-3p)。采用qRT-PCR检测miR-149-3p相对表达水平;MTT、流式细胞术实验检测细胞增殖和凋亡;Western blot检测Bax、Bcl-2、Beclin 1、LC3II/LC3I、JNK/p38 MAPK信号通路相关蛋白表达;ELISA检测TNF-α、IL-6、IL-8表达水平。结果 IL-1β组内miR-149-3p相对表达量、细胞活性、Bcl-2蛋白表达明显低于Con组,凋亡率、Bax、Beclin 1、LC3II/LC3I蛋白表达、TNF-α、IL-6、IL-8...     

红芪多糖对糖尿病周围神经病变ob/ob小鼠丝裂原活化蛋白激酶信号通路的影响北大核心CSCD

目的观察红芪多糖(HPS)对糖尿病周围神经病变(ob/ob)小鼠坐骨神经中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路的影响。方法将50只ob/ob小鼠按体重随机分为模型组、低、中、高剂量实验组和对照组,每组10只;另取10只C57BL/6小鼠为正常组。正常组和模型组均给予5 mL·kg^(-1)·d^(-1)蒸馏水;对照组按30 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量给予0.04 mg·mL^(-1)α-硫辛酸;低、中、高剂量实验组分别按50,100和200 mg·kg^(-1)·d^(-1)的剂量给予20 mg·mL^(-1)HPS。6组小鼠每天灌胃给药1次,连续给药8周。用Power Lab生理检测仪检测小鼠的运动神经传导速度(MNCV),用蛋白质印迹法测定坐骨神经组织中磷酸化p38 MAPK(p-p38MAPK)和白细胞介素-6(IL-6)蛋白的表达水平。结果治疗8周后,低、高剂量实验组和对照组、模型组、正常组的MNCV分别为(40.35±2.12),(43.74±3.21),(42.70±3.36),(40.29±1.79)和(46.95±2.36)m·s^(-1),p-p38MAPK/p38MAPK蛋白相对表达量分别为1.03±0.02,0.77±0.05,0.86±0.06,1.20±0.03和0.63±0.04,IL-6蛋白相对表达量分别为0.77±0.03,0.67±0.01,0.72±0.01,0.87±0.02和0.56±0.03。模型组的上述指标与正常组和高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论HPS可通过下调p-p38MAPK/p38MAPK及IL-6的表达,从而改善对糖尿病周围神经病变的炎症反应。     

长链非编码RNA FOXD3-AS1对黑色素瘤细胞增殖与侵袭的影响北大核心CSCD

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)FOXD3-AS1靶向miR-128-3p/PDK1对黑色素瘤细胞增殖和侵袭的调控作用。方法转染组-1,转染组-2,转染组-3分别转染pcDNA-FOXD3-AS1、pcDNA-FOXD3-AS1与miR-128-3p mimics的阴性对照(mimic NC)、pcDNA-FOXD3-AS1与miR-128-3p mimics,以未进行转染的细胞作为对照组。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测黑色素瘤细胞和正常人表皮黑色素细胞FOXD3-AS1和miR-128-3p的表达差异;用双荧光素酶报告基因实验验证FOXD3-AS1与miR-128-3p的相互作用;用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测细胞的增殖能力;用Transwell小室法检测细胞的侵袭;用蛋白质印迹法检测3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1(PDK1)蛋白的表达水平。结果对照组、转染组-1,转染组-2,转染组-3细胞24 h的增殖率分别为(100.00±0.00)%,(168.03±15.71)%,(163.58±6.24)%,(124.62±8.93)%;侵袭的细胞数分别为(21.33±2.08),(38.33±4.89),(40.00±2.65),(25.33±2.52)个;PDK1的表达水平分别为0.36±0.02,1.19±0.08,1.24±0.11,0.48±0.03。转染组-1与对照组比较,转染组-3与转染组-2比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论FOXD3-AS1通过靶向miR-128-3p/PDK1轴,促进黑色素瘤细胞的增殖与侵袭。     

红藻氨酸对小胶质细胞凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究红藻氨酸(KA)对BV2小胶质细胞的增殖和凋亡的影响及机制。方法用KA诱导的BV2小胶质细胞模型。将BV2细胞分为对照组和KA组。对照组用正常的培养基培养,KA组用含600μmol·L^(-1)KA的培养基培养。以酶联免疫吸附试验检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL^(-1)β)和IL-6水平,以蛋白质印迹法检测半胱天冬酶3(Caspase-3)、Caspase-9和p53表达水平,以钙成像实验测定细胞内Ca^(2+)浓度。结果KA组的24 h TNF-α、IL-1β、IL-6的含量分别为(130.60±9.22)、(9.83±1.10)和(73.79±11.26)pg·mL^(-1)。对照组和KA组小胶质细胞中Caspase-3蛋白相对表达水平分别为1.00±0.06和1.22±0.09,Caspase-9蛋白相对表达水平分别为1.00±0.14和1.44±0.12,p53蛋白相对表达水平分别为1.00±0.14和1.34±0.13,Ca^(2+)水平分别为1.18±0.29和5.26±0.47。KA组的上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论KA可以激活小胶质细胞促进其释放炎症因子,高浓度KA可促进BV2小胶质细胞的凋亡,其机制可能与细胞内钙离子升高有关。     

三七皂苷(血塞通)对脂多糖诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用北大核心CSCD

目的研究血塞通对脂多糖(LPS)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法将H9c2细胞分为对照组、模型组和低、高剂量实验组。对照组细胞正常培养不做任何处理;模型组用10μg·mL^(-1)LPS处理12 h;低、高剂量实验组分别用0.20,0.40 mg·mL^(-1)血塞通预处理细胞12 h,再用10μg·mL^(-1)LPS处理12 h。以细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞存活率;以流式细胞术测定细胞凋亡水平;以荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)水平;以酶联免疫吸附法检测细胞炎症因子水平;以蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞凋亡核因子抑制蛋白(IκBα)、磷酸化p65(p-p65)、p65蛋白表达水平。结果对照组、模型组和低、高剂量实验组的细胞存活率分别为(100.00±2.15)%,(33.93±5.17)%,(47.02±6.41)%和(52.49±7.17)%,凋亡率分别为(2.76±0.40)%,(74.40±6.54)%,(54.22±6.74)%和(47.39±6.55)%;模型组与对照组和低、高剂量实验组比较,高、低剂量实验组组间,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、模型组和低、高剂量实验组的细胞炎性因子NF-кB分别为(0.72±0.07),(1.27±0.15),(1.05±0.12),(0.88±0.09)μmol·L-1,IL-6分别为(0.17±0.03),(0.38±0.05),(0.29±0.05),(0.24±0.04)μmol·L-1,与模型组比较,低、高剂量实验组NF-кB和IL-6水平显著降低(P<0.05)。经过血塞通处理后,ROS浓度降低。蛋白质印迹表明,LPS刺激显著抑制了IκBα表达,上调p-p65表达水平,而血塞通可以显著上调被LPS刺激细胞的IκBα表达,降低p-p65的表达水平(均P<0.05)。结论血塞通能够阻止由LPS引起的心肌细胞炎症反应的发生,降低心肌细胞损伤。     

银杏内酯B对MPP+诱导的帕金森病SH-SY5Y细胞模型中α-synuclein表达的影响北大核心CSCD

目的探讨银杏内酯B(ginkgolide B,GB)对1-甲基-4苯基-吡啶离子(N-methyl-4-phenylpyridiniumiodide,MPP^(+))诱导的帕金森病(Parkinson’s disease,PD)SH-SY5Y细胞模型的α-突触核蛋白(α-synuclein,α-syn)表达的影响和潜在的机制。方法将SH-SY5Y细胞分为溶媒(DMSO)对照组、MPP^(+)组(1.0 mmol·L^(-1)MPP^(+)孵育48 h)、MPP^(+)+GB组(用50μmol·L^(-1)的GB处理1 h后,再用1.0 mmol·L^(-1)MPP^(+)孵育48 h)、第1转染组(转染miR阴性对照物)、第2转染组(转染miR-207模拟物)、第3转染组(转染miR-207抑制剂)、MPP^(+)+GB+第2转染组(细胞转染miR-207模拟物后,用50μmol·L^(-1)的GB处理1 h,再用1.0 mmol·L^(-1)MPP^(+)孵育48 h)、MPP^(+)+GB+第3转染组(细胞转染miR-207抑制剂后,用50μmol·L^(-1)的GB处理1 h,再用1.0 mmol·L^(-1)MPP^(+)孵育48 h)、第4转染组(先转染miR-207模拟物,再转染p CMV6-XL5)和第5转染组(先转染miR-207模拟物,再转染p CMV6-XL5-LAMP2A)。结果与MPP^(+)组(3.51±0.23)比较,MPP^(+)+GB组miR-207的相对表达量(2.07±0.26)的差异有统计学意义(P<0.05)。第1转染组、第2转染组和第3转染组α-syn基因相对表达量分别为1.03±0.09,1.56±0.13,0.78±0.09;α-syn蛋白相对表达量分别为1.02±0.08,1.81±0.20,0.53±0.23;与第1转染组比较,第2转染组和第3转染组α-syn表达的差异均有统计学意义(均P<0.05)。第2转染组和第5转染组α-syn基因相对表达量分别1.03±0.12,0.71±0.10;α-syn蛋白相对表达量分别为1.09±0.07,0.22±0.11;与第2转染组比较,第5转染组α-syn表达的差异均有统计学意义(均P<0.05)。MPP^(+)+GB组、MPP^(+)+GB+第2转染组和MPP^(+)+GB+第3转染组α-syn基因相对表达量分别为1.02±0.09,1.62±0.15,0.71±0.12;α-syn蛋白相对表达量分别为1.02±0.10,2.01±0.35,0.63±0.14;与MPP^(+)+GB组比较,MPP^(+)+GB+第2转染组和MPP^(+)+GB+第3转染组α-syn表达的差异均有统计学意义(均P<0.05)。LAMP2A是miR-207的靶基因。结论在MPP^(+)诱导的PD SH-SY5Y细胞模型中,GB能通过介导miR-207/LAMP2A信号轴来降低α-syn的表达。     

黄芩苷对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究黄芩苷对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡中的作用及其机制。方法将乳腺癌MCF-7细胞分为4组:空白组不给予任何处置;对照组给予200μmol·L^(-1)黄芩苷处理24 h;第1转染组和第2转染组分别转染inhibitor control和微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)inhibitor,并添加200μmol·L^(-1)黄芩苷处理24 h。用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-30a-5p的水平;用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖;用Transwell小室法检测细胞的侵袭;用流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果空白组、对照组、第1转染组、第2转染组细胞miR-30a-5p水平分别为0.98±0.05,2.51±0.37,2.32±0.28,1.27±0.18;增殖抑制率分别为(3.46±0.79)%,(31.65±2.38)%,(34.82±3.14)%,(12.53±1.62)%;侵袭的细胞数目分别为(53.67±3.12),(23.14±2.02),(25.67±1.87),(41.15±3.73)个;凋亡率分别为(6.72±0.48)%,(13.79±1.63)%,(12.65±0.78)%,(8.36±0.52)%。对照组与空白组比较,第2转染组与第1转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芩苷通过上调乳腺癌细胞中miR-30a-5p的表达,抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。     

microRNA-129-5p对脂多糖致小鼠肺上皮细胞损伤的影响北大核心CSCD

目的研究microRNA-129-5p(miR-129-5p)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肺上皮细胞凋亡和自噬的影响。方法取小鼠肺上皮细胞MLE-12,分别转染miR-129-5p模拟物(设为miR-129-5p mi组)和阴性对照寡核苷酸(设为miR-NC组),随后用500 ng·mL^(-1)LPS处理MLE-12细胞。用细胞计数法-8(CCK-8)检测各组细胞的增殖能力;用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;用蛋白质印迹(Western blot)法检测各组细胞中自噬相关蛋白P62和Bec-lin-1的表达水平。结果miR-NC组和miR-129-5p mi组细胞在24 h的细胞存活率分别为(52.73±1.41)%,(68.70±3.55)%,在48 h的细胞存活率分别为(48.75±7.22)%,(69.24±3.05)%,在72 h的细胞存活率分别为(48.22±4.28)%,(65.61±2.53)%;细胞凋亡率分别为(28.46±2.51)%,(17.24±2.06)%;P62蛋白的表达水平分别为1.01±0.03和1.54±0.07,Beclin-1蛋白的表达水平分别为0.98±0.09和0.52±0.05,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论过表达miR-129-5p可显著促进LPS诱导小鼠肺上皮细胞MLE-12增殖,并抑制细胞凋亡和自噬,从而改善LPS诱导的急性肺损伤。     

京尼平对糖尿病肾病小鼠肾脏的保护作用

目的 探讨京尼平对糖尿病肾病(DN)小鼠肾脏的保护作用.方法 昆明种小鼠30只,随机分为正常对照组、聚乙二醇组和京尼平组,每组10只.后两组使用链脲佐菌素腹腔注射制作小鼠DN模型.京尼平组每天给予溶解于聚乙二醇的京尼平50 mg·kg-1灌胃.聚乙二醇组只给予聚乙二醇灌胃.检测小鼠血糖、体质量、肾超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA),通过酶联免疫吸附(ELISA)检测小鼠尿清蛋白、肾肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及血清肌酐、白细胞介素-6(IL-6)的含量.采用Western blot检测小鼠肾脏核因子-κB(NF-κB) p65、诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和caspase-3的表达.结果 正常对照组、聚乙二醇组和京尼平组24 h尿清蛋白分别为(11.40±0.98),(120.30±9.57),(56.20±4.07) mg;血清肌酐分别为(54.3±9.7),(130.6±21.3),(87.3±10.1) μmol·L-1;肾脏SOD活性分别为(2 430±1 010),(2 260±370),(3 060±400)U·L-1;肾TNF-α分别为(683.50±54.88),(961.40±39.52),(531.70±15.84) pg·mg-1;血清IL-6分别为(74.40±16.70),(686.60±12.38),(196.30±62.50) pg·mg-1.免疫印迹显示京尼平组NF-κB p65、iNOS和caspase-3的表达均降低(P＜0.01).结论 京尼平对DN小鼠肾脏具有保护作用,机制可能与其抗氧化和抗炎症作用有关.     

长链非编码RNA SNHG17通过微小RNA-375促进气道平滑肌细胞增殖和迁移

目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)小核仁RNA宿主基因17(SNHG17)在气道平滑肌细胞(ASMCs)中的表达及其作用。方法 腹腔注射卵清蛋白抗原悬浮液构建幼龄Wistar大鼠的支气管哮喘模型。将大鼠随机分为对照组(腹腔注射生理盐水)和模型组(腹腔注射10%的卵清蛋白抗原悬浮液),随后将空白质粒(pc-NC组)、SNHG17过表达质粒(pc-SNHG17组)分别转染至模型组ASMCs中。用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)法检测ASMCs中SNHG17和miR-375表达水平,以EdU法检测ASMCs增殖能力,以划痕实验检测ASMCs迁移能力。结果 对照组和模型组中SNHG17的表达水平分别为1.00±0.10和1.81±0.11。对照组、模型组、pc-NC组和pc-SNHG17组中miR-375的表达水平分别为1.01±0.08,0.72±0.05,0.79±0.05和0.53±0.06;细胞增殖率分别为(26.11±2.51)%,(33.01±2.91)%,(34.44±3.07)%和(43.92±2.97)%;细胞迁移率分别为(10.05±1.00)%,(...     

miR-146b-5p对脑缺血再灌注损伤细胞的影响北大核心CSCD

目的研究miR-146b-5p在脑缺血再灌注损伤(CIRI)中的作用和调控机制。方法建立神经元细胞PC12的糖-氧剥夺/再氧合(OGD/R)体外模型,并将细胞随机分为NC mimic组和miR-146b-5p mimic组。以细胞计数法检测细胞存活率;以酶联免疫吸附(ELISA)法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-β(IL-β)含量;以试剂盒法检测活性氧(ROS)和超氧化物歧化酶(SOD)含量;以双荧光素酶报告实验验证miR-146b-5p和硫氧还蛋白互作蛋白(TXNIP)的结合关系;以蛋白质印迹法检测TXNIP蛋白表达。结果72 h时,NC mimic组和miR-146b-5p mimic组细胞存活率分别为(61.32±8.11)%和(81.45±9.34)%,TNF-α含量分别为(125.17±11.03)和(81.14±9.83)pg·m L^(-1),IL^(-1)β含量分别为(98.33±8.17)和(63.22±7.91)pg·m L^(-1),ROS含量分别为(45.67±3.98)和(35.20±3.01)U·m L^(-1),SOD含量分别为(30.11±2.99)和(51.08±6.75)U·m L^(-1),差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在脑缺血再灌注损伤中,miR-146b-5p靶向TXNIP促进细胞存活,抑制炎症反应和氧化应激改善脑缺血再灌注损伤。     

盐酸氨溴索对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺纤维化的影响

目的研究盐酸氨溴索对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺纤维化的影响及作用机制。方法将60只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(n=20)、模型组(n=20)及实验组(n=20)。模型组及实验组大鼠均用气管滴注3 mg·kg^-1脂多糖(LPS)100μL,构建ARDS大鼠模型。造模成功后,实验组大鼠腹腔注射盐酸氨溴索注射液40.0 mg·kg^-1·d^-1,对照组与模型组则注射等量生理盐水,连续干预21 d。用酶联免疫吸附法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平及羟脯氨酸(HYP)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物(GSH-Px)含量,用蛋白质印迹法检测大鼠肺组织中核因子-κB(NF-κB)P65蛋白表达水平。结果对照组、模型组及实验组大鼠肺组织炎性因子TNF-α分别为(10.87±1.22),(36.93±3.14),(17.86±2.38)pg·g^-1,IL-6分别为(14.73±1.56),(37.12±4.61),(20.96±2.03)pg·g^-1,HYP分别为(319.55±46.37),(743.22±91.31),(415.38±57.88)μg·g^-1;MDA分别为(12.78±1.96),(33.45±5.16),(18.02±3.34)μmol·g^-1;SOD分别为(69.76±10.32),(28.63±2.89),(56.12±5.33)kU·g^-1,GSH-Px分别为(46.23±4.81),(15.04±2.39),(37.73±3.68)kU·g^-1,大鼠肺组织中NF-κB P65蛋白相对表达量分别为0.09±0.04,0.81±0.15,0.34±0.11。模型组和实验组与对照组比,以上各指标差异均有统计学意义(均P<0.05);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论盐酸氨溴索可降低炎症因子水平、减少氧自由基生成,抑制肺组织NF-κB P65蛋白表达,进而减轻ARDS大鼠肺损伤及肺纤维化。