miR-125b-5p对过氧化氢诱导的视网膜神经节细胞损伤的影响及其机制研究

目的研究miR-125b-5p对H₂O₂诱导的小鼠视网膜神经节细胞(RGCs)损伤的影响及潜在的机制。方法将RGC-5分为12组:对照组(细胞未处理组)、H₂O₂组(200μmol·L^-1H₂O₂处理12 h建立氧化损伤模型)、miRNC组、miR-125-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-125-5p组、H₂O₂+miR-NC组、H₂O₂+miR-125b-5p组、H₂O₂+si-NC组、H₂O₂+si-LCN2组、H₂O₂+miR-125b-5p+pcD NA组和H₂O₂+miR-125b-5p+pcD NA-LCN2组。H₂O     

miR-542-3p调控Rho基因对脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的探讨microRNA-542-3p (miR-542-3p)靶向调控Rho基因对小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)的保护作用。方法将小鼠随机分为正常组、假手术组和模型组,构建CIRI模型(MCAO)。用TUNEL染色检测3组小鼠海马组织中海马神经元的凋亡情况,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western Blot)分别检测各组小鼠海马组织的miR-542-3p和Rho的mRNA和蛋白表达水平;分离提取3组小鼠海马神经元体外传代培养,选择第三代细胞分为:正常组、空白组、阴性对照组、miR-542-3p mimic组、miR-542-3p inhibitor组、siRNA-Rho组和miR-542-3p inhibitor+siRNA-Rho组,双荧光素酶报告基因实验验证miR-542-3p和Rho的靶向关系,用qRT-PCR和Western Blot法分别检测各组细胞中miR-542-3p、Rho的mRNA和蛋白表达水平,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测各组细胞转染后的增殖能力变化情况,流式细胞术检测各组细胞转染后的凋亡情况。结果与正常组相比,模...     

miR-211-5p在局灶性脑缺血再灌注损伤大鼠模型中表达分析

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注(MCAO/R)损伤模型大鼠脑组织miR-211-5p表达情况。方法 取SPF级成年大鼠40只,分为假手术组(Sham组)、MCAO/R+溶剂组(Vehicle组)、MCAO/R+miR-211-5p组(Mimic组)、MCAO/R+anti-miR-211-5p组(Antagomir组),每组10只。评价各组大鼠神经功能缺损评分,检测各组大鼠脑梗死体积及miR-211-5p、脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达水平。结果 Vehicle组存活率低于Sham组,Longa评分升高,miR-211-5p处理后存活率升高,Longa评分降低(P<0.05)。Mimic组脑梗死体积百分比较Vehicle组降低,Antagomir组脑梗死体积百分比高于Mimic组(P<0.05)。与Sham组和Vehicle组比较,Mimic组miR-211-5p表达量升高,Antagomir组表达量降低,Antagomir组miR-211-5p表达量低于Mimic组(P<0.05)。Mimic组BDNF表达量显著高于其他3组,Antagomir组BDNF表...     

七氟烷预处理和miR-29b-3p对大鼠脊髓缺血/再灌注损伤的影响

目的探讨七氟烷预处理和miR-29b-3p对大鼠脊髓缺血/再灌注损伤(spinal cord ischemia/reperfusion injury,SCIRI)的影响及相关机制。方法通过夹闭主动脉弓14 min建立大鼠SCIRI模型。缺血/再灌注(IR)前将大鼠暴露于2.4%(1 Mac)七氟烷中1 h,建立七氟烷预处理模型。通过鞘内注射mimic质粒过表达miR-29b-3p。采用Tarlov评分、伊文思蓝(EB)、HE、TUNEL染色评估脊髓损伤;Real-time qPCR检测miR-29b-3p和BMF mRNA表达;Western blot测定凋亡相关蛋白BCL-2蛋白修饰因子(BMF)、Bax、和cleaved caspase-3表达。结果与假手术组相比,IR组Tarlov评分降低,血脊髓屏障(BSCB)通透性增加,健存运动神经元减少,凋亡细胞增多,miR-29b-3p表达减少,BMF、Bax、和cleaved caspase-3表达增加(P<0.05)。和IR组相比,七氟烷预处理或过表达miR-29b-3p时,IR大鼠的Tarlov评分升高,BSCB通透性降低,健...     

冰片对脑缺血再灌注损伤模型大鼠炎症反应和血脑屏障通透性的影响北大核心CSCD

目的研究冰片对大鼠脑缺血再灌注损伤后超氧化物歧化酶(SOD)活性、炎症反应和血脑屏障通透性的作用及其机制。方法按照体重将大鼠随机分成3组,每组10只:假手术组、模型组和实验组。造模前,实验组给予10%冰片(0.5 g·kg^(-1))和石蜡油2 m L灌胃,1次/天;假手术组和模型组给予相同体积0.9%Na Cl,连续7 d。用颈总动脉夹闭法制备脑缺血-再灌注损伤模型。缺血0.5 h后再灌注24 h后,用黄嘌呤氧化酶法与分光光度法分别检测缺血脑组织SOD活性和髓过氧化物酶(MPO)活性和伊文思蓝(EB)含量;用酶联免疫吸附实验测定脑组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果脑缺血-再灌注24h后,假手术组、模型组和实验组得大鼠脑组织SOD活性分别是(332.76±3.30),263.17±1.47),(286.01±2.34)U·mg-1;这3组的大鼠脑组织MPO活性分别是(0.17±0.02),(0.96±0.15),(0.68±0.11)U·g-1,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。假手术组、模型组和实验组的大鼠脑组织TNF-α含量分别是(0.36±0.05),(0.87±0.02),(0.69±0.24)U·g-1,模型组与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.01);实验组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论冰片对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的脑组织具有神经保护作用。     

三七总皂甙对大鼠脑缺血再灌注损伤后p53蛋白表达的影响

目的 观察三七总皂甙对大鼠脑缺血再灌注损伤后p53蛋白表达的影响,探索三七总皂甙神经保护作用的分子机制.方法 采用SD大鼠局灶性脑缺血再灌注模型(transientmiddle cerebral arteryocclusion,MCAO),将大鼠随机分组,各组按实验设计给药造模,分时点对各组动物造模后神经功能缺陷进行评分,应用免疫组织化学法研究缺血再灌注损伤脑组织凋亡相关蛋白p53白表达情况.结果 PNS处理各组缺血再灌注后神经功能缺陷评分和脑组织p53蛋白表达均明显少于缺血再灌注组(P＜0.05).结论 三七总皂甙能减轻脑组织的缺血再灌注损伤,改善神经功能缺失.其作用机制可能与其抑制脑组织p53蛋白表达有关.     

下调人类白细胞抗原复合体18靶向微小RNA-146b-5p对胶质瘤SHG44细胞迁移和侵袭的影响

目的 研究下调长链非编码RNA(lncRNA)人类白细胞抗原复合体18(HCG18)靶向微小RNA-146b-5p(miR-146b-5p)对胶质瘤SHG44细胞迁移和侵袭的影响.方法 以实时定量-PCR法检测胶质瘤SHG44、CHG-5和BT325细胞与正常胶质HEB细胞中HCG18基因表达,用SHG44细胞做后续实...     

樟柳碱对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

研究樟柳碱对大鼠急性脑缺血及再灌注损伤的影响。电灼闭塞锥动脉并夹闭颈动脉，使大鼠前脑缺血３０ｍｉｎ，放开双侧颈总动脉重灌６０ｍｉｎ，并在重灌４０ｍｉｎ时ｉｖ２％伊文思蓝０．２ｍＬ。分别用原子吸收分光光度法，分光光度法测定前钙含量和伊文思蓝含量。     

阿司匹林对大鼠脑缺血再灌注损伤细胞凋亡的影响

目的　观察阿司匹林对大鼠脑缺血 再灌损伤时的抗凋亡作用。方法　线栓法制作局部脑缺血 2h、再灌 2 4h模型 ,观察阿司匹林 6mg·kg-1和 6 0mg·kg-1对正常神经元密度、凋亡细胞数目及bcl 2和bax基因蛋白的影响。TUNEL法检测细胞凋亡 ,免疫组化法检测bcl 2和bax基因蛋白。相邻组织切片HE染色 ,计数正常神经元密度。结果　两个剂量阿司匹林均明显抑制再灌引起的正常神经元的丢失和凋亡细胞数目 ,提高bcl 2 /bax。 6mg·kg-1组主要提高bcl 2的表达 ;6 0mg·kg-1组除提高bcl 2表达外 ,对bax表达的抑制更明显。两个剂量对bcl 2和bax的影响均有组间差异 ,但对bcl 2 /bax的影响却无组间差异。结论　阿司匹林可明显减轻脑缺血 再灌引起的脑损伤 ,有明显的抗凋亡作用 ,其机制可能与提高bcl 2 /bax有关。     

5-脂氧酶在脑缺血再灌注损伤中的机制探讨

炎症反应在脑缺血再灌注损伤中发挥着重要的作用。5-脂氧酶(5-lipoxygenase,5-LOX)是炎症反应中的关键酶,通过多条途径来介导脑缺血再灌注损伤,因此,脑缺血再灌注损伤与5-LOX密切相关。5-LOX可能通过白三烯、N-甲基-D-天冬氨酸、基质金属蛋白酶-9、氧自由基损伤、核转录因子NF-κB等多条途经损伤脑组织。因此,5-LOX通路有望成为脑缺血再灌注损伤保护的靶点,将可能为缺血性脑血管病提供新的治疗对策。     

微小RNA-199a-5p调控Klotho表达对体外脑缺血再灌注大鼠氧-葡萄糖剥夺/再灌注诱导的肾上腺嗜铬瘤细胞损伤的保护作用

目的 探究抑制微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)表达对体外脑缺血再灌注(I/R)损伤大鼠模型氧-葡萄糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的肾上腺嗜铬瘤细胞(PC12)损伤的保护作用,并进一步探讨Klotho在该过程中的作用。方法 将PC12细胞分为Control组、OGD/R组、miR-NC inhibitor组、miR-199a-5p inhibitor组、miR-199a-5p inhibitor+shRNA-pLKO.1组和miR-199a-5p inhibitor+shRNA-Klotho组。RT-qPCR或蛋白质印迹法(Western blotting)确定各组PC12细胞转染效率;胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)和流式细胞术确定各组PC12细胞活力和凋亡率;试剂盒测量各组PC12细胞中活性氧(ROS)释放量、丙二醛(MDA)含量以及超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组PC12细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和白细胞...     

穿心莲内酯对大鼠脑缺血 再灌注损伤的影响

目的：观察穿心莲内酯(AP)对大鼠脑缺血 再灌注损伤的影响。方法：32只大鼠随机平分为AP高剂量组(2.50 mg·kg 1×2)、AP低剂量组(1.25 mg·kg 1×2)、模型组和对照组。结扎大鼠双侧颈总动脉，30 min后松开，再灌注60 min，复制脑缺血 再灌注损伤模型。AP高、低剂量组及模型组大鼠于颈总动脉结扎前10 min和剪断结扎线前(再灌注前)分别经颈静脉注入高、低剂量AP和等容积0.9%氯化钠注射液，再灌注维持60 min，对照组基本与模型组处理相同，但不结扎双侧颈总动脉。处死大鼠，测定再灌注后海马组织中过氧化物歧化酶(SOD)、Na＋ K＋ ATP酶、Ca2＋ ATP酶、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果：穿心莲内酯能明显提高脑缺血 再灌注后海马结构中SOD、GSH Px、Ca2＋ ATP酶、Na＋ K＋ ATP酶活性及降低脂质过氧化产物MAD含量。结论：穿心莲内酯对脑缺血 再灌注损伤的海马结构具有保护作用。     

羟乙葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤细胞凋亡及p53表达的影响

目的观察异黄酮类羟乙葛根素在大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时的抗凋亡作用。方法利用大鼠大脑中动脉栓线阻断法制备局灶性脑缺血再灌注损伤模型 ,利用病理学检查、免疫组织化学方法观察羟乙葛根素对缺血再灌注大鼠的脑组织细胞凋亡及p5 3表达的影响。结果羟乙葛根素能改善局灶性脑缺血再灌注损伤的病理学改变 ,减轻细胞凋亡的程度 ,抑制p5 3的表达。结论羟乙葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有保护作用 ,其作用机制可能与羟乙葛根素抗细胞凋亡 ,抑制p5 3表达有关。     

miR-1224-5p靶向调控HMOX1基因对心肌细胞缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨微小RNA-1224-5p(miR-1224-5p)靶向调控血红素加氧酶1(HMOX1)基因对大鼠心肌细胞H9C2缺血再灌注(I/R)损伤的影响.方法 体外培养大鼠心肌细胞H9C2,模拟心肌I/R损伤.按照处理方法将大鼠心肌H9C2细胞分为对照组(Control组)、I/R组、I/R+anti-miR-con...     

紫杉醇对脑缺血-再灌注诱导海马神经元损伤的保护作用

目的研究紫杉醇对脑缺血-再灌注(I-R)后海马神经元损伤的保护作用及分子机制。方法 SD大鼠随机分为假手术对照组(A组)、I-R对照组(B组)、1%DMSO溶剂处理组(C组)、紫杉醇8μg/kg组(D组,缺血前30min脑室注射),每组各10只。采用大鼠四动脉结扎全脑缺血模型,应用免疫印迹法检测紫杉醇对B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)表达的影响。结果与A组相比,B、C组Bcl-2及Caspase-3磷酸化表达增加(P<0.05),而D组Bcl-2及Caspase-3磷酸化表达较B组明显减少(P<0.05)。结论紫杉醇可能对脑I-R诱导海马神经元的损伤有保护作用;这种保护作用可能与Bcl-2、Caspase-3蛋白活性密切相关。     

重组人谷氧还蛋白1对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用

目的探讨重组人谷氧还蛋白1(rhGrx1)对小鼠局灶性脑缺血/再灌注损伤的保护作用及机制。方法线栓法制备小鼠脑缺血/再灌注模型,病理形态学方法证实模型建立成功。小鼠尾静脉注射rhGrx1(5mg·kg-1和10mg·kg-1)后,观察脑组织中乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)及蛋白质羰基含量的变化,Western blot检测小鼠脑组织中p38MAPK表达水平的变化。结果HE染色证实模型建立成功且提示rhGrx1可改善缺血/再灌注损伤所致的小鼠脑组织病理形态学变化;rhGrx1能增加小鼠脑组织LDH、SOD活性、降低蛋白质羰基的含量。与假手术组小鼠相比,缺血和再灌注时脑组织p38MAPK蛋白表达量明显增加,注射rhGrx1后p38MAPK蛋白表达被抑制。结论rh-Grx1对局灶性脑缺血/再灌注损伤小鼠有一定保护作用,其机制可能与抑制p38MAPK蛋白表达相关。     

阿司匹林调节miR-340-5p/HMGB1/TLR4通路对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响

目的 探讨阿司匹林（Asp）通过调节微RNA-340-5p(miR-340-5p)/高迁移率族蛋白1(HMGB1)/Toll样受体4(TLR4)通路对大鼠心肌缺血/再灌注（I/R）损伤的影响。方法 将雄性SD大鼠分为假手术（Sham）组（开胸不结扎）、I/R组（构建I/R损伤模型）、Asp预处理（I/R+Asp）组（Asp预处理7 d+造模）、I/R+Asp+in-miR-340-5p组[Asp预处理7 d+提前转染miR-340-5p抑制物+造模]和I/R+Asp+HMGB1组（Asp预处理7 d+提前转染过表达HMGB1+造模）,每组20只。检测各组大鼠心肌损伤指标（乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶MB、心肌肌钙蛋白Ⅰ）、炎症和氧化应激指标（髓过氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、丙二醛）水平,观察其心肌组织病理改变,检测其心肌梗死面积、细胞凋亡情况以及心肌组织中miR-540-5p和HMGB1、TLR4蛋白的表达情况;以大鼠心肌细胞H9C2为对象,考察miR-340-5p与HMGB1的靶向关系。结果 Asp预处理可显著抑制I/R损伤模型大鼠血清心肌损伤指标水平的升高,可减轻炎...     

芍药醇调控miR-122-5p/GSTM1分子轴对缺血再灌注心肌细胞存活的影响

摘要：目的:探讨芍药醇对缺血再灌注心肌细胞存活的影响,并探讨其机制是否与调控miR-122-5p/谷胱甘肽转移酶M1（GSTM1）分子轴有关。方法:将H9C2细胞分为正常对照（NC）组、缺血/再灌注（I/R）组、I/R+低-中-高芍药醇组、I/R+anti-miRcon组、I/R+anti-miR-122-5p组、I/R+芍药醇+miR-con组、I/R+芍药醇+miR-122-5p组、I/R+芍药醇+miR-122-5p+pc DNA-con组、I/R+芍药醇+miR-122-5p+pc DNA-GSTM1组,采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞活力;实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和蛋白质印记（Western blot）检测miR-122-5p、GSTM1表达;双荧光素酶报告基因实验和Western blot确定miR-122-5p对GSTM1的靶向作用。结果:I/R处理后,H9C2细胞存活率、GSTM1表达降低,miR-122-5p表达升高（P<0.05）。芍药醇干预后,H9C2细胞存活率、GSTM1表达升高,miR-122-5p表达降低（P<0.05）。抑制miR-122-5p表达后H9C2细胞存活率升高,从而减轻I/R对H9C2细胞的抑制作用（P<0.05）。过表达miR-122-5p可逆转芍药醇对I/R处理下H9C2细胞存活的保护作用（P<0.05）。过表达GSTM1可逆转miR-122-5p对芍药醇干预的I/R处理下H9C2细胞存活的影响（P<0.05）。结论:GSTM1是miR-122-5p的靶基因,miR-122-5p对GSTM1具有负性调控作用。芍药醇可提高I/R条件下心肌细胞存活率,其机制与下调miR-122-5p/GSTM1分子轴有关。     

隐丹参酮对脑缺血再灌注损伤神经元细胞凋亡的作用

目的 探讨隐丹参酮(CTs)抑制c-Jun氨基末端激酶/p38丝裂原活化蛋白激酶(JNK/p38 MAPK)信号通路对脑缺血再灌注损伤(CIRI)神经元细胞凋亡的作用.方法 将30只SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组,每组10只,模型组和实验组参照改良Longa法制备CIRI模型.造模成功后,实验组腹腔注射CTs...     

葡萄籽原花青素对小鼠深低温脑缺血-再灌注损伤的影响

目的探讨葡萄籽原花青素(GSPE)对小鼠脑缺血-再灌注(I-R)损伤的保护作用。方法 60只C57/BL6小鼠随机均分为GSPE(A)组、模型(B)组和假手术(C)组,建立深低温I-R模型,再灌注24 h后处死小鼠取脑,RT-PCR技术检测小鼠脑组织半胱天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3mRNA,TUNEL法检测小鼠大脑皮层细胞凋亡。结果与C组比较,A组和B组Caspase-3 mRNA表达和细胞凋亡明显增加(P<0.05);而A组各观察指标低于B组(P<0.05)。结论 GSPE对深低温I-R损伤鼠脑有保护作用。