乳腺癌细胞PCDH10基因启动子甲基化与信使RNA表达相关性研究

目的 探讨原钙黏蛋白10(PCDH10)在人乳腺癌细胞中的信使RNA(mRNA)表达和甲基化状态及其相互关系.方法 从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中,收集乳腺癌患者的正常乳腺组织和癌组织PCDH10的mRNA和甲基化数据,用UALCAN在线工具进行分析.亚硫酸盐测序法(BSP)检测乳腺癌细胞中PCDH10基因启动子...     

中国散发性乳腺癌中ERα表达与ERα基因启动子甲基化相关性研究

目的探讨中国散发性乳腺癌中ERα蛋白表达和ERα基因启动子甲基化的相关性。方法通过甲基化特异性PCR法检测138例乳腺癌肿瘤组织中ERα基因启动子区四个CpG岛密集区域甲基化情况,免疫组织化学方法检测ERα,PgR蛋白表达。结果138例肿瘤组织中有83例发生ERα基因启动子甲基化(60.1%),69例ERα阴性标本有57例发生甲基化(82.6%)。ERα蛋白失表达与ERα基因启动子甲基化具有相关性。此外,ERα基因启动子甲基化与PgR蛋白低表达相关。(76%vs24.1%;P<0.00001)。结论中国散发性乳腺癌普遍存在ERα基因启动子甲基化,ERα基因启动子甲基化与ERα、PgR蛋白低表达相关,ERα基因的表遗传学改变在中国散发性乳腺癌发生发展中具有重要作用。     

散发性乳腺癌组织BRCA1基因启动子甲基化与蛋白表达的相关性

目的：探讨BRCA1基因启动子甲基化对BRCA1蛋白表达的影响,与散发性乳腺癌发病之间的关系。方法：采用甲基化特异性PCR（MS-PCR）检测51例散发的乳腺浸润性导管癌和10例乳腺良性组织的BRCA1基因启动子甲基化状态,免疫组织化学SP法检测相应组织的石蜡标本BRCA1蛋白表达水平。结果：10例乳腺良性组织中均未检测到BRCA1启动子的异常甲基化,结合免疫组织化学检测,BRCA1蛋白均在细胞核阳性表达,其中70％为强阳性表达;在51例散发性乳腺浸润性导管癌组织中检测到7例BRCA1启动子发生异常甲基化,甲基化比例为13．73％（7／51）;其余44例（44／51,86．27％）未检测到BRCA1启动子甲基化。     

ERα／β蛋白表达与基因启动子甲基化在中国女性散发性乳腺癌中的相关性研究

目的：探讨雌激素受体α（Estrogen Receptorα,ERα）、雌激素受体β（EstrogenReceptorβ,ERβ）基因启动子区甲基化与ERα、ERβ蛋白失表达关系。方法：甲基化特异性PCR（Methylation specific PCR,MSP）法检测138例散发性乳腺癌和14例乳腺纤维腺瘤组织中ERα基因启动子区四个CpG岛密集区域甲基化及ERβ启动子区甲基化状态,免疫组织化学方法检测ERα、ERβ蛋白的表达。结果：纤维腺瘤组织中,ERα、ERβ甲基化发生率分别为28．6％（3／14）、14．3％（2／14）：乳腺癌组织ERα、ERβ总甲基化发生率分别为60．1％（83／138）、53．6％（74／138）,ERQ启动子区ER1、ER2、ER3、ER4四个检测区域的甲基化发生率分别为34．896、35．5％、39．1％、36．996,ER1 ER4各检测区域间甲基化率未见显著性差别;乳腺癌组织ERα、ERβ甲基化发生率均显著高于纤维腺瘤组织（60．1％vs．28.6％,）（2=5．117,P=0．023;53．6％vs．14．3％,X2=11．418,P=-0．004）;分析乳腺癌中ERQ基因启动子甲基化与ERa表达相关性发现ERα阳性的乳腺癌组织中ERα基因启动子甲基化发生率为37．7％（26／69）,而在ERα阴性组织总甲基化发生率82．6％（57／69）。进一步针对四个CpG岛密集区域异常甲基化检测发生率,发现在职α阳性的乳腺癌组织中职α基因启动子甲基化发生率分别为14．5％、18．896、7．296、17．4％,在ERα阴性的乳腺癌组织中ERα基因启动子甲基化发生率明显升高,分别为55．1％、52．2％、58％、56．5％,以ERα表达水平与甲基化检出率做Spearman相关性分析,二者呈显著负相关（r=-0．469,P〈0．0001）;分析乳腺癌中ERβ基因启动子甲基化与ERβ蛋白表达的相关性发现ERβ阳性的乳腺癌组织中ERβ基因启动子甲基化发生率为35．4％（29／82）,而在ERβ阴性组织总甲基化发生率80．4％（45／56）。以ERβ表达水平与甲基化检出率做Spearman相关性分析,二者呈显著负相关（r=-0．743,P〈0．0001）。结论：中国女性散发性乳腺癌存在较高频率的ERα、ERβ基因启动子异常甲基化;乳腺癌组织中ERα、ERβ失表达与其基因启动子异常甲基化有关。     

E-钙黏蛋白基因启动子区甲基化与膀胱癌关联性的Meta分析

目的将既往有关E-钙黏蛋白(CDH1)基因启动子区甲基化与膀胱癌关系的研究进行Meta分析,评估CDH1基因启动子区甲基化与膀胱癌的具体关联。方法参照Cochrane协作网制定的检索策略在国内外相关数据库进行检索,筛选并纳入文献后,提取文献信息:第一作者、文献发表时间、国家、语种、研究设计、样本量、种族、病理亚型、甲基化检测方法、基因甲基化频率等。采用STATA12.0进行Meta分析,计算优势比(OR)及其95%可信区间(95%CI)。结果本Meta分析共计纳入10项病例对照研究,通过检测其中620例膀胱癌组织和341例正常或癌旁组织的CDH1基因甲基化频率,结果发现膀胱癌组织中的甲基化频率明显高于正常或癌旁组织(OR=3.09,95%CI:1.13~8.50,P=0.029);亚组分析结果显示,在亚洲人群中膀胱癌组织中的甲基化频率明显高于正常或癌旁组织(OR=3.85,95%CI:1.46~10.14,P=0.006),而在欧美人群中未发现此种差异(OR=2.22,95%CI:0.38~12.91,P=0.375);采用MSP方法检测时,膀胱癌组织与癌旁及正常组织间CDH1基因启动子区甲基化频率存在明显差异(P<0.001),采用Q-MSP方法检测时,两组CDH1基因启动子区甲基化频率无明显差异(P=0.818)。结论 CDH1基因启动子区甲基化可能参与了膀胱癌的发生和发展。     

DNA甲基化与乳腺癌发生的相关关系研究进展

<正>乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一,全世界每年约有120万妇女新发生乳腺癌。从20世纪70年代起,亚洲国家发病率逐年升高,我国每年因乳腺癌病死的妇女也大约有1.3万人,且发病率和发病年龄有提高和提前的趋势。数年来,研究者发现在乳腺癌的发生、发展过程中除致癌因素造成的基因突变、缺失、扩增外,尚存在DNA序列以外的调控     

BRCA1基因突变及启动子甲基化与乳腺癌

乳腺癌是女性最常见的癌症,乳腺癌易感基因1(BRCA1)是研究比较深入的乳腺癌的抑癌基因。BRCA1基因失活,将会促进乳腺癌的发生。目前的研究成果比较倾向于认为:BRCA1基因突变与遗传性乳腺癌关系比较密切,基因突变位点多种多样,不同种族间各异;而在散发性乳腺癌中,启动子甲基化是BRCA1基因失活的主要方式,并且与散发性乳腺癌的病理学、免疫学及临床特征等参数间存在相关性。     

DLC-1、PCDH10表达水平和NQO1基因多态性与吸烟诱导胃癌ESD术后复发的关系

目的 探讨DLC-1(deleted in liver cancer 1,DLC-1)、编码原钙黏蛋白10(protocadherin-10,PCDH10)表达水平和依赖还原型辅酶Ⅰ/Ⅱ:醌氧化还原酶NAD(P)H:quinone oxidoreductase l,NQO1)基因多态性与吸烟诱导胃癌行内镜黏膜下剥离术(...     

DNA甲基化抑制物对雌激素受体β在乳腺癌细胞中表达的影响及意义

目的:研究甲基化抑制物作用于乳腺癌细胞后对其ER-β表达的影响及意义。方法:抽取细胞总RNA,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测MCF-7与MDA-MB-231中ER-β的表达状况。在两种细胞中按作用浓度加入甲基化抑制药物5-AZA-CdR,反应一定时间后用RT-PCR的方法测定药物处理后ER-β的表达情况,分析影响及意义。结果:MCF-7的ER-β平均表达水平(0.54±0.44),药物处理后平均表达水平(0.76±0.53),较未经药物处理的细胞明显升高(P<0.05);MDA-MB-231是雌激素受体阴性的细胞株,不表达ER-β,药物处理后ER-β出现表达平均水平为(0.32±0.11),P<0.05。结论:DNA去甲基化可以诱导ER-β表达增强或再表达,对于提高乳腺癌的内分泌治疗疗效和指导新辅助化学治疗有重大意义。     

乳腺癌组织中C-erbB2基因启动子区CpG岛甲基化分析

目的了解乳腺癌组织中致癌基因C-erbB2启动子区CpG岛的甲基化状态。方法收集经病理确诊的39例乳腺癌患者甲醛固定的癌组织及相应的癌旁组织各39份;采用甲基化特异聚合酶链反应(MSP)检测C-erbB2基因启动子区CpG岛的甲基化状态。结果乳腺癌组织中C-erbB2基因启动子区CpG岛的甲基化率(51.3%)低于癌旁组织中存在的甲基化率(74.4%),二者之间差异有统计学意义(P<0.05)。结论所检测标本显示乳腺癌组织与癌旁组织间C-erbB2基因启动子区CpG岛甲基化率差异有统计学意义,提示C-erbB2的低甲基化可能是C-erbB2蛋白高表达和乳腺癌发生的原因之一。     

乳腺癌NOEY2基因启动子区甲基化的研究

目的检测NOEY2基因在乳腺癌发生不同阶段的甲基化状态及其在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的mRNA表达水平,探讨NOEY2基因启动子区异常甲基化与乳腺癌发生发展的关系。方法收集2010年1月—2012年1月手术切除乳腺的女性患者标本,其中IDC组46例,乳腺普通型导管增生(UDH)组30例,癌旁正常乳腺组织(NBT)组20例,乳腺原位导管癌(DCIS)组20例,乳腺非典型导管增生(ADH)组13例,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测NOEY2基因的甲基化率及水平,分析其与临床病理参数的关系;采用实时定量PCR检测30例IDC中NOEY2基因的mRNA相对表达量,分析NOEY2基因甲基化对其mRNA表达的影响。结果 IDC组的完全甲基化率高于NBT及UDH组(P<0.01);NOEY2基因完全甲基化与乳腺癌患者的临床分期、组织学分级有关(P<0.05),而与年龄、肿瘤大小、ER、PR、HER2无相关性(P>0.05);完全甲基化的IDC标本NOEY2 mRNA表达量低于部分甲基化的IDC标本(P<0.05);IDC中NOEY2基因的甲基化水平与NOEY2基因mRNA表达量呈负相关(r=-0.659,P<0.05)。结论 NOEY2基因启动子区异常高甲基化及其导致的mRNA表达下调在乳腺癌发生发展过程中起重要作用。     

乳腺癌 NOEY2基因启动子区甲基化的研究

目的：检测 NOEY2基因在乳腺癌发生不同阶段的甲基化状态及其在乳腺浸润性导管癌(IDC)中的mRNA 表达水平,探讨 NOEY2基因启动子区异常甲基化与乳腺癌发生发展的关系。方法收集2010年1月—2012年1月手术切除乳腺的女性患者标本,其中 IDC 组46例,乳腺普通型导管增生(UDH)组30例,癌旁正常乳腺组织(NBT)组20例,乳腺原位导管癌( DCIS) 组20例,乳腺非典型导管增生( ADH)组13例,采用甲基化特异性 PCR (MSP)检测 NOEY2基因的甲基化率及水平,分析其与临床病理参数的关系;采用实时定量 PCR 检测30例 IDC 中NOEY2基因的 mRNA 相对表达量,分析 NOEY2基因甲基化对其 mRNA 表达的影响。结果 IDC 组的完全甲基化率高于 NBT 及 UDH 组(P <0．01);NOEY2基因完全甲基化与乳腺癌患者的临床分期、组织学分级有关(P <0．05),而与年龄、肿瘤大小、ER、PR、HER2无相关性(P >0．05);完全甲基化的 IDC 标本 NOEY2 mRNA 表达量低于部分甲基化的IDC 标本(P <0．05);IDC 中 NOEY2基因的甲基化水平与 NOEY2基因 mRNA 表达量呈负相关( r =-0.659,P <0．05)。结论 NOEY2基因启动子区异常高甲基化及其导致的 mRNA 表达下调在乳腺癌发生发展过程中起重要作用。     

雌激素通过调节三叶因子3基因启动子甲基化水平促进甲状腺癌细胞增殖的研究北大核心CSCD

目的 探讨17β-雌二醇对甲状腺癌细胞增殖的影响,及其与三叶因子3(TFF3)基因启动子甲基化水平的关系。方法 将甲状腺癌TPC-1、BCPAP、FTC-133细胞分为4组:空白组(未加任何处理)、对照组(含浓度<0.05%二甲基亚砜的培养基)和低、高剂量实验组(1和100 nmol·L^(-1) 17β-雌二醇)。用甲基化特异性聚合酶链反应分析17β-雌二醇处理前后3株细胞TFF3基因启动子区甲基化水平,用生长曲线检测17β-雌二醇对3株细胞增殖的影响。结果 TFF3基因启动子甲基化水平随17β-雌二醇浓度的升高而降低。在TPC-1细胞中,低、高剂量实验组的TFF3基因启动子区甲基化百分比分别从空白组和对照组的(53.34±0.62)%,(54.62±3.11)%降至(37.12±1.19)%和(27.84±0.73)%,BCPAP细胞的TFF3基因启动子区甲基化百分比从空白组和对照组的(56.04±0.93)%,(58.08±0.89)%降至(50.33±0.55)%和(26.36±0.74)%,FTC-133细胞的TFF3基因启动子区甲基化百分从空白组和对照组的(73.28±0.36)%,(71.64±0.54)%降至(61.33±0.56)%和(51.28±0.62)%。在3种细胞中,低、高剂量实验组的上述指标与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。生长曲线结果显示,17β-雌二醇能促进甲状腺癌细胞增殖。对照组在第5天时TPC-1,BCPAP和FTC-133细胞的汇合度分别为(50.04±2.83)%,(30.02±4.97)%和(25.09±2.94)%,高剂量实验组在第5天时TPC-1,BCPAP和FTC-133细胞的汇合度分别上升到(100.00±2.16)%,(90.08±3.56)%和(40.03±2.93)%,高剂量实验组的上述指标与对照组相比,差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论 17β-雌二醇能通过降低TFF3基因启动子区CPG位点的DNA甲基化水平,促进癌细胞增殖。     

乳腺癌p16基因甲基化和蛋白表达的检测及其临床意义

目的:探讨p16基因在乳腺癌中甲基化状态、表达情况及其与临床的关系.方法:应用甲基化特异性的聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测48例乳腺癌中p16基因甲基化状态,应用免疫组化检测p16基因的蛋白表达情况.结果:p16基因在乳腺癌中甲基化率为27.1%(13/48),有淋巴结及远处转移的甲基化率(52.6%,10/19)高于无转移的甲基化率(10.3%,3/29)(P＜0.05);13例甲基化病例中P16蛋白失表达率(76.9%,10/13)高于非甲基化病例(8.6%,3/35)(P＜0.05).结论:p16基因高甲基化是乳腺癌中常见的分子生物学改变之一,p16基因高甲基化和乳腺癌浸润及转移有相关性;P16蛋白表达和其高甲基化呈负相关,甲基化是p16抑癌基因失活的主要方式之一.     

乳腺癌p16基因甲基化和蛋白表达的检测及其临床意义

目的:探讨p16基因在乳腺癌中甲基化状态、表达情况及其与临床的关系.方法:应用甲基化特异性的聚合酶链反应(methylation specific PCR,MSP)检测48例乳腺癌中p16基因甲基化状态,应用免疫组化检测p16基因的蛋白表达情况.结果:p16基因在乳腺癌中甲基化率为27.1%(13/48),有淋巴结及远处转移的甲基化率(52.6%,10/19)高于无转移的甲基化率(10.3%,3/29)(P＜0.05);13例甲基化病例中P16蛋白失表达率(76.9%,10/13)高于非甲基化病例(8.6%,3/35)(P＜0.05).结论:p16基因高甲基化是乳腺癌中常见的分子生物学改变之一,p16基因高甲基化和乳腺癌浸润及转移有相关性;P16蛋白表达和其高甲基化呈负相关,甲基化是p16抑癌基因失活的主要方式之一.     

Ki67在乳腺癌组织中表达与临床特征的相关性北大核心CSCD

目的观察Ki67在乳腺癌组织中表达与临床特征的相关性。方法选取2012年1月至2016年6月在我院就诊的432例乳腺癌患者为试验组,55例乳腺良性肿瘤患者为对照组。对病变组织进行Ki67免疫组化分析,并调查患者病例资料,对影响因素与相关性进行分析。结果对照组Ki67阳性表达率为9.1%,试验组为50.9%,差异有统计学意义(P<0.05)。Ki67在乳腺癌组织中的阳性表达率与乳腺癌的病理分期、分化程度、淋巴结转移明显相关(P<0.05)。多因素非条件Logistic回归分析显示,乳腺癌组织的病理分期、分化程度、淋巴结转移均为影响Ki67阳性表达的独立危险因素(P<0.05)。结论 Ki67在乳腺癌组织中呈现高表达状况,与组织的病理分期、分化程度、淋巴结转移明显相关,可作为判断乳腺癌患者病情的重要指标。     

Syk基因启动子甲基化与肝癌术后复发转移相关性研究

目的探讨Syk基因启动子甲基化与肝癌术后复发转移的关系。方法采用甲基化特异性PCR方法检测Syk基因启动子甲基化情况,结合随访结果,探讨Syk基因启动子甲基化和肝癌术后复发转移的关系。结果在21例癌组织检测到Syk基因启动子甲基化的肝癌患者中,有15例术后发生癌复发转移,发生率为71.4%;在56例癌组织未检测到Syk基因启动子甲基化的肝癌患者中,只有21例术后发生癌复发转移,发生率为37.5%。癌组织检测到Syk基因启动子甲基化的肝癌患者术后复发转移发生率显著增高(P<0.05)。结论Syk基因启动子甲基化与肝癌术后复发转移密切相关。     

非小细胞肺癌中E-cadherin基因甲基化及蛋白表达的研究

目的 本实验通过探讨非小细胞肺癌癌组织与相应癌旁组织中E-cadherin(E-cad)基因异常甲基化改变及其蛋白表达的特点,以及其与肺癌发生发展的关系,从而为今后肺癌的诊断,治疗及预后提供新思路.方法 应用DNA提取、甲基化特异PCR、蛋白电泳及免疫组化技术对肺癌组织与相应癌旁组织进行相关研究.结果 50例癌组织的E-cadherin蛋白表达阳性率为32％(16/50),相应的癌旁组织阳性率表达为84％(42/50);癌组织中E-cadherin蛋白表达显著低于相应癌旁组织蛋白表达(P＜0.001);同时50例癌组织及其对应癌旁组织的甲基化阳性率分别为74％(37/50)、40％(20/50),癌组织的E-cadherin甲基化阳性率高于相应的癌旁组织(P＜0.001).结论 非小细胞肺癌组织中E-cadhenn蛋白呈低表达,癌组织的E-cadherin基因启动子存在异常甲基化,E-cadherin基因启动子的异常甲基化可能与E-cadherin蛋白表达下调具有相关性,可作为肿瘤恶性程度的良好指标.     

多发性骨髓瘤患者DAPK的表达及启动子区甲基化状态的研究

目的研究多发性骨髓瘤(MM)患者抑癌基因DAPK的表达及其启动子区甲基化状态,探讨其在MM发生发展中的作用。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)技术及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)研究MM患者骨髓单个核细胞DAPK基因启动子甲基化发生率及其mRNA的表达水平。结果 MM患者DAPK基因启动子甲基化阳性率为18.52%,对照组中DAPK基因启动子区甲基化阳性率为0;MM组与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。MM组和对照组DAPK mRNA表达情况,差异无统计学意义(P>0.05);MM患者中甲基化组低于非甲基化组;甲基化组、非甲基化组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.0167);MM患者的初治组低于复发组,初治组、复发组与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.0167)。结论 DAPK基因启动子区甲基化可能是其mRNA表达的机制之一,并在MM的发病中具有一定的作用。