沙利度胺对胶质瘤U251细胞增殖及血管内皮生长因子表达的影响北大核心CSCD

目的探究不同浓度沙利度胺对人胶质瘤U251细胞增殖和血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法用0,10,50,100,200μmol·L^(-1)沙利度胺分别处理人胶质瘤U251细胞,用噻唑蓝(MTT)法分检测24、48和72 h的细胞活力,用流式细胞术各组细胞凋亡情况,用蛋白质印迹(Western blot)法检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白表达的影响,用酶联免疫吸附(ELISA)法测定细胞培养上清液中VEGF水平。结果0,10,50,100,200μmol·L^(-1)沙利度胺组细胞凋亡率分别为(3.21±0.82)%,(28.21±4.23)%,(37.17±2.39)%,(68.12±3.28)%,(79.29±3.26)%,Bcl-2的表达分别为1.42±0.11,1.17±0.12,0.95±0.06,0.68±0.07,0.24±0.06,差异均有统计学意义(均P<0.05);干预72 h,0,10,50,100,200μmol·L^(-1)沙利度胺组细胞活性分别为0.89±0.15,0.56±0.08,0.43±0.26,0.22±0.19,0.14±0.12,VEGF水平分别为(395.63±9.47),(161.12±6.47),(112.52±6.16),(98.81±9.92),(79.92±3.48)pg·mL^(-1),差异均有统计学意义(均P<0.05),且具有剂量依赖性。结论沙利度胺对胶质瘤U251细胞具有显著的抑制作用,可以显著诱导细胞凋亡并抑制VEGF的表达。     

微小RNA-137对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响北大核心CSCD

目的探究微小RNA-137(miR-137)通过磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信号通路对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的影响。方法取人肾小管上皮细胞HK-2,将其随机分为对照组和模型组。对照组细胞常规培养,模型组细胞缺氧4 h、复氧2 h以构建H/R模型。将HK-2细胞转染miR-137模拟物或阴性对照寡核苷酸,随后构建H/R损伤模型,分别命名为miR-137 mi组和miR-NC组。用原位末端标记(TUNEL)法检测各组细胞的凋亡率;用丙二醛(MDA)检测试剂盒、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)测定试剂盒及超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测各组细胞MDA、GSH-PX和SOD的含量;用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组细胞单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量;用蛋白质印迹(Western blot)法检测磷酸化PI3K(p-PI3K)蛋白及磷酸化AKT(p-AKT)蛋白的表达水平。结果对照组、模型组、miR-NC组和miR-137 mi组的细胞凋亡率分别为(5.06±0.10)%,(13.74±1.39)%,(11.75±1.20)%和(8.32±0.76)%;MDA的含量分别为(38.37±2.33),(45.38±3.02),(45.95±3.27),(33.49±1.78)nmol·mg^(-1);GSH-PX的含量分别为(573.17±5.15),(204.46±2.77),(205.39±1.72),(415.80±4.48)U·mg^(-1);SOD的活性分别为(11.42±1.84),(4.92±0.20),(5.01±0.34),(7.93±0.57)U·mg^(-1);MCP-1的含量分别为(1.57±0.13),(4.78±0.38),(4.30±0.14),(2.95±0.62)ng·mL^(-1);ICAM-1的含量分别为(0.18±0.05),(0.56±0.09),(0.53±0.04),(0.25±0.09)ng·mL^(-1);IL-1β的含量分别为(23.62±2.85),(43.83±1.70),(44.07±2.33),(31.86±1.67)pg·mL^(-1),以上指标,对照组和模型组相比,miR-NC组和miR-137 mi组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-137可减少人肾小管上皮细胞H/R损伤模型细胞凋亡、降低氧化应激以及炎症反应,其作用机制与PI3K/AKT信号通路有关。     

葛根素通过抗氧化应激对亚慢性乙醇脑损伤大鼠的神经保护作用北大核心CSCD

目的研究葛根素对亚慢性乙醇脑损伤大鼠的神经保护作用及其抗氧化应激作用机制。方法按照体重将大鼠分为5组:正常组、模型组和低、中、高3个剂量实验组。通过连续大量灌胃给予乙醇4 d建立亚慢性脑损伤大鼠模型。从灌胃给予乙醇第1天起,正常组与模型组大鼠腹腔注射0.9%Na Cl 5.0mL·kg^(-1)·d^(-1);低、中、高3个剂量实验组腹腔注射葛根素50,100,150mg·kg^(-1)·d^(-1),连续7 d。以血液乙醇浓度检测试剂盒检测大鼠血液乙醇浓度,Y迷宫检测大鼠空间学习记忆能力,FJB染色评价大鼠前额叶皮层神经元数量,试剂盒法检测各组大鼠前额叶皮层内超氧化物岐化酶(SOD)和丙二醛(MDA)水平。结果大量灌胃给予乙醇1~4 d,大鼠血液乙醇浓度显著增加并持续高于人类的醉酒状态(>320 mg·d L^(-1))。给药后,正常组、模型组与低、中、高3个剂量实验组大鼠自发反应交替率分别为(76.18±5.70)%,(38.61±5.70)%,(45.70±4.39)%,(74.46±2.77)%和(75.62±6.89)%;这5组的SOD活性分别为(15.18±1.81),(7.88±0.97),(9.20±0.88),(14.53±0.89)和(14.36±0.70)U·mg^(-1);这5组的MDA活性分别为(1.04±0.04),(1.31±0.06),(1.24±0.03),(1.10±0.07)和(1.08±0.09)μmol·mg^(-1)。模型组的上述指标与正常组比较,差异均有统计学意义(P<0.01);中、高2个剂量实验组的上述指标与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论葛根素可通过增加SOD活性、减少MDA水平,发挥对抗亚慢性乙醇脑损伤的神经保护作用。     

Apelin-13对高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的保护作用北大核心CSCD

目的探讨Apelin-13对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的保护机制是否与沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)相关。方法实验分组分为4部分。实验Ⅰ,将HUVECs分为6组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、各实验组(分别用1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。实验Ⅱ,将HUVECs分为4组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1)糖)、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、对照组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)糖)。实验Ⅲ,将HUVECs分为2组,分别为空载质粒组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)和APJ低表达组(1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)。以上3个实验均用Western blot法检测高糖环境下SIRT1蛋白的表达水平。实验Ⅳ,将HUVECs分为5组,分别为空白组(5.5 mmol·L^(-1))、模型组(33 mmol·L^(-1)高糖)、实验组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖)、抑制剂组(33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)、干预组(用1×10^(-8)mol·L^(-1)Apelin预处理+33 mmol·L^(-1)高糖+1×10^(-5)mol·L^(-1)EX527)。用流式细胞术检测HUVECs的凋亡率。结果实验Ⅰ,空白组、模型组和1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7)和1×10^(-6)mol·L^(-1)Apelin实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.51±0.06,0.30±0.05,1.02±0.07,1.12±0.10,1.14±0.10和1.05±0.10,模型组的SIRT1蛋白相对表达量与4个实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅱ,空白组、模型组、对照组和实验组的SIRT1蛋白相对表达量分别为0.82±0.09,0.59±0.05,0.77±0.05和0.72±0.06;模型组的SIRT1蛋白相对表达量与实验组和空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验Ⅲ,空载质粒组和APJ低表达组的SIRT1蛋白表达水平分别为0.94±0.13和0.71±0.17,差异有统计学意义(P<0.05)。实验Ⅳ,空白组、模型组、实验组、抑制剂组和干预组的细胞凋亡率分别为(13.60±0.92)%,(24.63±1.25)%,(12.73±1.00)%,(25.68±1.42)%和(10.25±2.30)%。模型组的细胞凋亡率与空白组和实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);抑制剂组的细胞凋亡率与干预组相比,差异有统计学意义(P<0.05);干预组的细胞凋亡率与实验组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论Apelin-13减轻高糖诱导的脐静脉内皮细胞凋亡的机制与SIRT1信号通路无关。     

大黄素对重症胰腺炎肾损伤模型大鼠血清缺氧诱导因子-1α及糖原合酶激酶-3β水平的影响北大核心CSCD

目的研究大黄素对重症胰腺炎肾损伤大鼠血清缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)和糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)水平影响。方法将60只大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、对照组和实验组,每组12只。模型组和试验组注入牛磺胆酸钠0.1 mL/100 g建立重症胰腺炎肾损伤大鼠模型;假手术组和对照组打开腹腔后仅轻轻翻动十二指肠以及胰腺;空白组大鼠未作任何处理。空白组、假手术组、模型组均予以腹腔注射5μL·g-10.9%Na Cl q6 h;对照组和实验组均按25μg·g-1剂量予以腹腔注射5 g·L^(-1)大黄素q6 h。术后3,6,12h,比较各组大鼠的血清肌酸酐(SCr)、尿素氮(BUN)、HIF-1α和GSK-3β水平。结果空白组、假手术组、对照组和实验组的胰腺组织病理学评分分别为(1.30±0.14),(1.39±0.14),(1.40±0.15)和(2.73±0.30)分,与模型组的胰腺组织病理学评分(9.84±1.05)分相比,差异均有统计学意义(均P<0.05),且实验组的胰腺组织病理学评分与空白组、假手术组、对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后3 h,空白组、假手术组、对照组、模型组和实验组的SCr分别为(60.46±6.78),(61.52±6.78),(60.38±6.74),(120.57±13.43)和(95.35±9.85)μmol·L^(-1),BUN分别为(7.47±0.79),(8.02±0.92),(7.93±0.83),(12.49±1.53)和(8.56±0.89)mmol·L^(-1),HIF-1α分别为(225.46±23.57),(210.57±23.58),(229.67±6.74),(160.46±17.47)和(144.57±14.85)μg·L^(-1),GSK-3β分别为(6.59±0.69),(6.57±0.69),(6.74±0.68),(19.95±2.13)和(10.56±1.39)μg·L^(-1)。术后6 h,空白组、假手术组、对照组、模型组和实验组的SCr分别为(60.57±6.79),(60.55±6.76),(59.50±6.76),(143.57±15.47)和(110.57±12.55)μmol·L^(-1),BUN分别为(7.65±0.84),(8.11±0.93),(8.29±0.92),(15.46±1.64)和(12.35±1.37)mmol·L^(-1),HIF-1α分别为(226.46±24.04),(222.46±23.57),(230.57±24.05),(155.36±15.74)和(127.57±12.84)μg·L^(-1),GSK-3β分别为(6.25±0.67),(6.71±0.69),(6.82±0.71),(25.34±2.64)和(11.56±1.27)μg·L^(-1)。术后12 h,空白组、假手术组、对照组、模型组和实验组的SCr分别为(60.61±6.79),(61.68±6.79),(61.54±6.78),(166.45±17.05)和(131.45±13.46)μmol·L^(-1),BUN分别为(8.03±0.85),(7.98±0.82),(8.79±0.93),(18.66±19.46)和(15.35±1.63)mmol·L^(-1),HIF-1α分别为(219.57±23.63),(226.35±24.04),(220.25±24.04),(148.46±18.94)和(117.46±12.04)μg·L^(-1),GSK-3β分别为(6.77±0.69),(6.70±0.70),(6.86±0.70),(35.02±3.76)和(20.35±2.13)μg·L^(-1)。空白组、假手术组、对照组术后3,6,12 h的SCr、BUN、HIF-1α、GSK-3β与模型组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05),且实验组与模型组术后3,6,12 h的SCr、BUN、HIF-1α、GSK-3β比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论大黄素可能通过上调血清HIF-1α和GSK-3β水平,提高肾细胞耐缺氧的能力,从而发挥对重症急性胰腺炎肾损伤的保护作用。     

白芍多糖对小鼠急性肝损伤的保护与机制研究北大核心CSCD

目的 研究白芍多糖对小鼠急性肝损伤的保护作用。方法 将小鼠随机分5组,低、高剂量实验组(283.5,1 134 mg·kg^(-1)·d^(-1)白芍多糖溶液),阳性对照组(2 mg·kg^(-1)·d^(-1)联苯双酯),空白组和模型组(等量蒸馏水)。灌胃7 d后,除空白组外,其余各组均腹腔注射10 mg·kg^(-1)四氯化碳(CCl_(4))溶液,诱导急性肝损伤。试剂盒法检测血清谷草转氨酶(GOT)和谷丙转氨酶(GPT)含量;Lowry法测量肝组织氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)含量;酶联免疫吸附试验法测定抗炎因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6);蛋白质印迹法检测肝组织Toll样受体4(TLR4)、NF-κBp65、髓样分化蛋白88(MyD88)和p-NF-κBp65蛋白的表达;苏木精-伊红(HE)染色法观察小鼠肝组织病理变化。结果 空白组、模型组、阳性对照组、低剂量实验组、高剂量实验组血清GPT含量分别为(46.89±5.10),(194.07±21.46),(113.69±10.88),(144.51±21.36)和(126.96±7.85)U·L^(-1);GOT含量分别为(75.75±14.42),(231.63±24.30),(143.09±16.76),(187.04±18.82)和(163.89±17.96)U·L^(-1);各组肝组织匀浆SOD含量分别为(33.88±5.35),(15.15±4.20),(26.71±3.68),(20.03±1.92)和(23.10±3.35)U·mg^(-1);各组肝组织匀浆GSH含量分别为(12.72±2.09),(2.78±0.46),(8.68±2.15),(6.59±2.49)和(8.16±2.27)μmol·mg^(-1);各组肝组织匀浆MDA含量分别为(5.98±1.00),(14.56±2.57),(8.60±1.24),(11.36±1.07)和(9.04±1.75)nmol·mg^(-1)。与模型组比较,阳性对照组、低剂量实验组、高剂量实验组血清的GOT、GPT活性明显降低,肝组织SOD、GSH明显升高,MDA明显降低,肝组织坏死程度明显改善。结论 白芍多糖通过调控TLR4/MyD88/NF-κB通路,对CCl_(4)所诱导的小鼠肝损伤具有保护作用。     

防己诺林碱对宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制研究北大核心CSCD

目的探索防己诺林碱(FAN)对宫颈癌He La细胞的作用及分子机制。方法人宫颈癌He La细胞随机分为空白组(0μmol·L^(-1)FAN)和低、高剂量实验组(7.5,15μmol·L^(-1)FAN)。通过CCK-8法、细胞划痕和Transwell检测FAN对宫颈癌He La细胞增殖、迁移和侵袭的影响,采用流式细胞术检测FAN对细胞周期和凋亡的作用。用Western Blot法检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1),P27,P53,B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl2),细胞外调节蛋白激酶(ERK)和磷酸化细胞外调节蛋白激酶(p-ERK)的表达。结果FAN对宫颈癌He La细胞有明显抑制作用,呈现浓度和时间依赖关系(P<0.05)。给药48 h后,空白组、低、高剂量实验组划痕愈合率分别为(48.10±5.19)%,(22.68±3.36)%,(12.31±2.79)%;侵袭细胞数量分别为(248.60±33.34),(186.60±24.58),(53.00±13.04)个。给药24 h后,空白组、低、高剂量实验组G0/G1期细胞比例分别为(68.67±2.32)%,(77.43±3.51)%,(85.90±1.31)%;细胞凋亡率分别为(4.07±0.40)%,(5.48±1.36)%,(10.25±1.88)%;Cyclin D1蛋白相对表达量分别为0.75±0.07,0.45±0.07,0.20±0.03;P27蛋白相对表达量分别为0.01±0.00,0.17±0.02,0.55±0.04;P53蛋白相对表达量分别为0.08±0.01,0.12±0.03,0.34±0.08;Bcl-2蛋白相对表达量分别为0.40±0.03,0.17±0.02,0.06±0.01;p-ERK蛋白相对表达量分别为0.61±0.03,0.34±0.03,0.15±0.04;低、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论FAN能抑制宫颈癌He La细胞的增殖、迁移及侵袭能力,同时阻滞细胞周期并促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制ERK信号通路有关。     

三七皂苷(血塞通)对脂多糖诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用北大核心CSCD

目的研究血塞通对脂多糖(LPS)诱导的H9c2心肌细胞损伤的保护作用及机制。方法将H9c2细胞分为对照组、模型组和低、高剂量实验组。对照组细胞正常培养不做任何处理;模型组用10μg·mL^(-1)LPS处理12 h;低、高剂量实验组分别用0.20,0.40 mg·mL^(-1)血塞通预处理细胞12 h,再用10μg·mL^(-1)LPS处理12 h。以细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组细胞存活率;以流式细胞术测定细胞凋亡水平;以荧光探针DCFH-DA检测活性氧(ROS)水平;以酶联免疫吸附法检测细胞炎症因子水平;以蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞凋亡核因子抑制蛋白(IκBα)、磷酸化p65(p-p65)、p65蛋白表达水平。结果对照组、模型组和低、高剂量实验组的细胞存活率分别为(100.00±2.15)%,(33.93±5.17)%,(47.02±6.41)%和(52.49±7.17)%,凋亡率分别为(2.76±0.40)%,(74.40±6.54)%,(54.22±6.74)%和(47.39±6.55)%;模型组与对照组和低、高剂量实验组比较,高、低剂量实验组组间,差异均有统计学意义(均P<0.05)。对照组、模型组和低、高剂量实验组的细胞炎性因子NF-кB分别为(0.72±0.07),(1.27±0.15),(1.05±0.12),(0.88±0.09)μmol·L-1,IL-6分别为(0.17±0.03),(0.38±0.05),(0.29±0.05),(0.24±0.04)μmol·L-1,与模型组比较,低、高剂量实验组NF-кB和IL-6水平显著降低(P<0.05)。经过血塞通处理后,ROS浓度降低。蛋白质印迹表明,LPS刺激显著抑制了IκBα表达,上调p-p65表达水平,而血塞通可以显著上调被LPS刺激细胞的IκBα表达,降低p-p65的表达水平(均P<0.05)。结论血塞通能够阻止由LPS引起的心肌细胞炎症反应的发生,降低心肌细胞损伤。     

黄芩苷对乳腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究黄芩苷对乳腺癌MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡中的作用及其机制。方法将乳腺癌MCF-7细胞分为4组:空白组不给予任何处置;对照组给予200μmol·L^(-1)黄芩苷处理24 h;第1转染组和第2转染组分别转染inhibitor control和微小RNA-30a-5p(miR-30a-5p)inhibitor,并添加200μmol·L^(-1)黄芩苷处理24 h。用实时定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-30a-5p的水平;用噻唑蓝(MTT)法检测细胞的增殖;用Transwell小室法检测细胞的侵袭;用流式细胞术检测细胞的凋亡率。结果空白组、对照组、第1转染组、第2转染组细胞miR-30a-5p水平分别为0.98±0.05,2.51±0.37,2.32±0.28,1.27±0.18;增殖抑制率分别为(3.46±0.79)%,(31.65±2.38)%,(34.82±3.14)%,(12.53±1.62)%;侵袭的细胞数目分别为(53.67±3.12),(23.14±2.02),(25.67±1.87),(41.15±3.73)个;凋亡率分别为(6.72±0.48)%,(13.79±1.63)%,(12.65±0.78)%,(8.36±0.52)%。对照组与空白组比较,第2转染组与第1转染组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论黄芩苷通过上调乳腺癌细胞中miR-30a-5p的表达,抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,诱导细胞凋亡。     

硼替佐米联合5-杂氮胞苷抑制JAK/STAT信号通路对T细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响北大核心CSCD

目的研究硼替佐米联合5-杂氮胞苷对T细胞淋巴瘤细胞增殖、凋亡及机制。方法对照组Jurkat细胞以3μmol·L^(-1)5-杂氮胞苷处理,低、中、高剂量实验组以10,30,50 nmol·L-1的硼替佐米+3μmol·L^(-1)5-杂氮胞苷处理,空白组加等量生理盐水。用噻唑蓝(MTT)法及流式细胞术检测细胞增殖、凋亡,用蛋白免疫印迹法检测细胞JAK/STAT信号通路蛋白表达。结果干预72h后,对照组和低、中、高剂量实验组细胞增殖抑制率分别为(39.05±2.63)%,(31.26±2.43)%,(60.12±3.05)%,(72.16±3.64)%。干预24,48,72 h后,中、高剂量实验组细胞增殖抑制率均高于对照组,且随硼替佐米浓度增大及作用时间延长逐渐升高(P<0.05)。干预48 h后,对照组和低、中、高剂量实验组细胞凋亡率均显著高于空白组。对照组和低、中、高剂量实验组细胞增殖指数低于空白组,凋亡率高于空白组(均P<0.05);且实验组增殖指数均低于对照组,细胞凋亡率均高于对照组(均P<0.05)。空白组、对照组和低、中、高剂量实验组Janus激酶1(JAK1)蛋白相对表达量为2.68±0.22,2.15±0.31,1.82±0.25,1.53±0.15,0.89±0.14,TYK2蛋白相对表达量为3.84±0.56,2.25±0.46,2.37±0.39,2.26±0.33,1.28±0.26;对照组和低、中、高剂量实验组Janus激酶1(JAK1)、TYK2蛋白相对表达量均低于空白组(均P<0.05),低、中、高剂量实验组JAK1蛋白及高剂量实验组TYK2蛋白相对表达量低于对照组(均P<0.05)。结论硼替佐米可协同增强5-杂氮胞苷抑制T细胞淋巴瘤细胞的增殖,并促其凋亡,其作用机制与显著抑制JAK/STAT信号通路中蛋白表达有关。     

壁虎活性组分对HepG2细胞增殖及活性氧的影响北大核心CSCD

目的该研究旨在探讨壁虎活性组分(GACs)对人肝癌HepG2细胞内活性氧水平,钙离子水平及线粒体膜电位水平的影响。方法实验分为对照组(不加药)和低、中、高3个浓度实验组(GACs,0.1,0.2,0.3 mg·m L^(-1))。GACs作用于HepG2细胞24 h后,用噻唑蓝比色法(MTT法)检测GACs对HepG2细胞增殖能力的影响,用流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平、钙离子水平及线粒体膜电位(MMP)水平。结果 GACs可抑制HepG2细胞的增殖,并具有质量浓度依赖性,作用24 h后其IC_(50)值为0.21 mg·m L^(-1)。对照组、低、中、高剂量组细胞增殖抑制率分别为(0.07±0.01)%,(0.17±0.03)%,(0.49±0.12)%和(0.67±0.18)%;ROS含量分别为(16.61±1.12),(85.81±2.56),(268.91±2.34),(1741.5±5.64);钙离子水平分别为(9.67±0.98),(12.30±1.07),(94.80±2.75),(910.99±5.31);MMP分别为(27.02±1.8)×10^(-2),(23.78±1.2)×10^(-2),(18.27±1.5)×10^(-2),(16.49±2.1)×10^(-2),低、中、高剂量组各指标分别与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论 GACs能抑制HepG2细胞增殖,可能通过引起HepG2细胞内ROS含量升高、钙离子水平升高、MMP降低,扰乱线粒体的正常功能,最终导致HepG2细胞的凋亡。     

单酰基甘油脂肪酶抑制药通过磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶信号通路对胃癌细胞生物学活性的影响北大核心CSCD

目的 探究单酰基甘油脂肪酶(MAGL)抑制药对胃癌细胞侵袭、迁移及磷脂酰肌醇3激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶(PI3K/AKT)信号通路的影响。方法 体外培养人胃癌细胞系MKN-45,分为空白组和低、中、高剂量实验组。空白组给予正常DMEM培养基培养,不作任何处理;低、中、高剂量实验组分别用含1,10和20μmol·L^(-1) MAGL抑制药的DMEM培养基进行培养。用噻唑蓝法、划痕实验、Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移、侵袭能力,用蛋白质印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白的表达情况。结果 中、高剂量实验组和空白组的细胞抑制率分别为(9.12±0.48)%,(23.78±0.65)%和0.00%,侵袭细胞数分别为(221.64±28.66),(118.58±18.75)和(308.21±36.36)个,划痕愈合率分别为(18.36±2.88)%,(11.03±1.72)%和(27.05±4.10)%,PI3K蛋白相对表达水平分别为0.64±0.05,0.48±0.07和1.18±0.08,p-AKT蛋白相对表达水平分别为0.74±0.06,0.45±0.09和0.97±0.07。中、高剂量实验组的上述指标与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 MAGL抑制药可能通过调控PI3K/AKT信号通路,抑制胃癌MKN-45细胞增殖、侵袭及转移。     

鸦胆子苦醇联合长波紫外线辐射对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的影响研究北大核心CSCD

目的观察鸦胆子苦醇联合长波紫外线(UVA)辐射对人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡的影响及机制。方法人恶性黑色素瘤A375细胞分为空白组、对照组和实验组。空白组细胞不做任何处理,对照组用75 k J·m^(-2)长波紫外线处理,实验组在75 k J·m^(-2)长波紫外线处理2 h后分别加入10,20,50,100,200nmol·L^(-1)的鸦胆子苦醇。检测各组细胞活性、细胞周期及凋亡率,检测人转录因子NF-E2相关因子2(Nrf2)通路及线粒体凋亡途径相关蛋白表达情况。结果对照组和实验组细胞活性均显著低于空白组,50,100,200 nmol·L^(-1)实验组细胞活性均显著低于对照组,且随鸦胆子苦醇作用浓度增大而逐渐降低(P<0.05或P<0.01)。对照组和10,20,50,100,200 nmol·L^(-1)实验组细胞凋亡率分别为(3.21±0.24)%,(3.45±0.26)%,(5.86±0.42)%,(12.62±1.12)%,(13.02±2.24)%,(16.15±2.78)%,均显著高于空白组的(0.89±0.12)%,20,50,100,200 nmol·L^(-1)实验组细胞凋亡率均明显高于对照组(均P<0.01)。对照组和实验组与空白组比较,人恶性黑色素瘤A375细胞G0/G1期细胞比例逐渐升高,G2/M和S期细胞比例逐渐降低(P<0.05或P<0.01)。空白组、对照组和50 nmol·L^(-1)实验组Nrf2蛋白相对表达量分别为1.69±0.23,1.23±0.24,1.03±0.15,谷胱甘肽S转移酶P1(GSTP1)蛋白相对表达量分别为2.43±0.16,2.89±0.18,2.78±0.21,B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)蛋白相对表达量分别为0.59±0.14,1.05±0.21,1.59±0.24,胱天蛋白酶-3(caspase-3)蛋白相对表达量分别为2.63±0.15,2.71±0.26,2.63±0.28。与空白组比较,对照组和实验组人恶性黑色素瘤A375细胞Nrf2蛋白表达相对量降低,Bax和GSTP1蛋白表达相对量升高,caspase-3无明显变化。结论鸦胆子苦醇联合UVA辐射可抑制人恶性黑色素瘤A375细胞增殖,且存在一定的量效关系,与抑制Nrf2信号通路及激活线粒体凋亡途径相关蛋白,加速细胞凋亡有关。     

银杏酸对大鼠肝毒性的影响研究北大核心CSCD

目的研究银杏酸(17∶1)致肝损伤的机制,为合理安全应用银杏酸提供依据。方法 SD大鼠随机分为空白组、对照组和低、中、高剂量实验组。低、中、高剂量实验组给予20,50,100 mg·kg^(-1)银杏酸,灌胃,空白组和对照组给予等量的生理盐水。连续给药14 d,对照组末次灌胃结束后腹腔注射40%CCl_4橄榄油建立急性肝损伤模型。取肝组织,苏木素-伊红(HE)染色后,在光学显微镜下进行病理检查,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法检测肝组织细胞凋亡情况,按照试剂盒方法测定肝组织匀浆液中谷胱甘肽(GSH)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量。结果病理学显示,低、中、高剂量实验组出现不同程度的肝损伤,以高剂量实验组最严重。与空白组相比,大鼠肝组织SOD和GSH含量降低明显降低(P<0.01)。低、中、高剂量实验组MDA水平分别为(5.99±0.80),(10.47±0.86)和(19.13±1.69)nmol·mg^(-1)·prot^(-1),与空白组的(3.43±0.37)nmol·mg^(-1)·prot^(-1)相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。TUNEL法显示,低、中、高剂量实验组的细胞凋亡率分别为(26.64±4.03)%,(39.38±3.72)%和(57.87±4.64)%,与空白组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论银杏酸(17∶1)具有明显的肝毒性,其损伤途径与引起机体氧化应激后诱导脂质过氧化有关。     

阿帕替尼上调miR-324-5p表达抑制结肠癌细胞的研究

目的 探讨阿帕替尼对结肠癌细胞生物学行为的影响和机制。方法 将结肠癌细胞HCT116分为对照(NC)组,低、中、高剂量组(0.5,1.0和2.0μmol·L^-1阿帕替尼),转染1组(2.0μmol·L^-1阿帕替尼+anti-miR-NC),转染2组(2.0μmol·L^-1阿帕替尼+anti-miR-324-5p)。细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖率;Transwell法检测细胞迁移和侵袭;荧光定量聚合酶链反应法检测miR-324-5p表达。结果 NC组,低、中、高剂量组、转染1组、转染2组HCT116细胞增殖率分别为(100.00±2.79)%,(94.29±1.74)%,(76.48±1.65)%,(51.48±1.75)%,(51.58±0.88)%和(93.64±3.90)%;迁移细胞数分别为(206.27±9.30),(163.23±3.84),(133.83±4.26),(104.32±5.72),(107.93±3.14)和(194.51±3.96)个;侵袭细胞数分别为(153.47±4.37),(121.4...     

水飞蓟宾对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞损伤的影响

目的 探讨水飞蓟宾对白细胞介素-1β(IL-1β)诱导的软骨细胞损伤的影响及其机制。方法 将体外培养的软骨细胞分为对照组、诱导组(以10 ng·mL^-1 IL-1β诱导处理)和低、中、高剂量实验组(在10 ng·mL^-1IL-1β诱导基础上分别以40,80,160μmol·L^-1水飞蓟宾处理)。用流式细胞术检测细胞凋亡率,用酶联免疫吸附(ELISA)法检测基质金属蛋白酶-13(MMP-13)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)水平,用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞中微管相关蛋白1(Beclin-1)、无翅型小鼠乳房肿瘤病毒整合位点1(Wnt1)和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平。结果 对照组、诱导组、低剂量实验组、中剂量实验组和高剂量实验组细胞凋亡率分别为(3.24±0.60)%,(31.18±2.51)%,(28.04±2.10)%,(22.03±1.79)%和(17.48±0.69)%;MMP-13水平分别为(21.18±3.09),(84.05±5.12),(75...     

番茄碱通过AMPK/COX-2通路调控食管癌细胞凋亡的机制研究北大核心CSCD

目的探究番茄碱通过单磷酸腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/环氧合酶-2(COX-2)通路抑制食管癌凋亡的机制研究。方法将人食管癌EC9706细胞随机分为对照组、低剂量实验组、中剂量实验组、高剂量实验组、高剂量+抑制药组;对照组细胞不做处理,低、中、高剂量实验组细胞分别给予1.0、2.0和4.0μmol·L^(-1)的番茄碱处理细胞48 h,高剂量+抑制药组使用4.0μmol·L^(-1)番茄碱和10μmol·L^(-1)AMPK抑制药Dorsomorphin共同处理细胞48 h。用细胞计数试剂盒8(CCK8)法检测细胞存活率;用流式细胞术和TUNEL法检测细胞凋亡情况;用蛋白质印迹(Western blot)法检测细胞相关蛋白表达情况。结果对照组,低、中、高剂量实验组及高剂量+抑制药组细胞TUNEL阳性细胞率分别为(3.73±0.60)%、(12.48±1.05)%、(17.03±1.29)%、(33.04±2.25)%和(13.99±1.12)%,Ki67蛋白表达水平分别为0.98±0.09、0.79±0.07、0.59±0.09、0.33±0.03和0.71±0.07,胱天蛋白酶(Cl-caspase-3)蛋白表达水平分别为0.30±0.04、0.59±0.05、0.75±0.07、1.00±0.06和0.54±0.05,p-AMPK蛋白表达水平分别为0.28±0.05、0.56±0.06、0.73±0.04、1.09±0.10和0.69±0.04;COX-2蛋白表达水平分别为1.13±0.08、0.74±0.07、0.57±0.07、0.39±0.04和0.72±0.07。低、中、高剂量实验组上述指标与对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05);高剂量+抑制药组上述指标与高剂量实验组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论番茄碱可通过激活AMPK/COX-2信号通路抑制食管癌细胞增殖、诱导凋亡。     

双歧杆菌三联活菌胶囊治疗乙型病毒性肝炎肝硬化的临床研究北大核心CSCD

目的观察双歧杆菌三联活菌胶囊治疗乙型病毒性肝炎(乙肝)肝硬化的临床疗效及安全性。方法将366例乙肝肝硬化患者随机分为对照组183例和试验组183例。对照组给予异甘草酸镁注射液和还原型谷胱甘肽等常规治疗;试验组在对照组的基础上,给予双歧杆菌三联活菌胶囊每次400 mg,每天3次,口服。2组患者均治疗4周。比较2组患者的血清指标、肠道菌群情况及药物不良反应发生情况。结果治疗后7 d,试验组双歧杆菌属和乳酸杆菌属分别为(26.06±3.55)%,(22.27±2.97)%,治疗后28 d,试验组乳酸杆菌属和乳酸杆菌属分别为(27.67±3.33)%,(23.94±3.47)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。治疗后28 d,试验组和对照组的二胺氧化酶分别为(19.37±3.55),(22.64±2.97)U·mL^(-1);血浆中内毒素(ET)含量分别为(0.11±0.03),(0.25±0.08)Eu·mL^(-1),白细胞介素-6(IL-6)含量分别为(2.09±0.45),(2.59±0.61)ng·L^(-1);肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量分别为(157.27±40.30),(186.27±40.96)ng·L^(-1),差异均有统计学意义(均P<0.05)。2组患者治疗期间均未发生药物不良反应。结论双歧杆菌三联活菌胶囊治疗乙肝肝硬化的临床疗效较好,其可显著改善患者的肠道菌群情况,降低体内炎症因子水平,且安全性较高。     

微小RNA-222-3p在儿童肺炎中的表达及其对LPS诱导的肺成纤维细胞凋亡和炎症因子表达的影响北大核心CSCD

目的探讨微小RNA-222-3p(miR-222-3p)在肺炎患儿血清中的表达水平,以及对脂多糖(LPS)诱导的肺成纤维细胞中凋亡和炎症因子水平的影响。方法选取87例儿童血清样本(50例肺炎患儿为肺炎组,37例健康儿童为健康对照组)作为实验标本,用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测血清中miR-222-3p表达水平。将人胚肺成纤维细胞WI-38细胞株分为4组:对照组(无任何处理)、模型组(5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h)、转染组-1(转染inhibitor NC后,5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h后,)、转染组-1(转染miR-222-3p inhibitor后用5μg·m L^(-1)LPS诱导12 h)。用ELISA试剂盒检测各组WI-38细胞培养上清液白介素-1β(IL^(-1)β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平;用流式细胞术比较各组细胞的凋亡率。结果健康对照组与肺炎组血清中miR-222-3p的相对表达分别为1.10±0.36,1.51±0.52;对照组、模型组、转染组-1、和转染组-2细胞上清IL^(-1)β的水平为(10.08±1.33),(317.85±37.67),(304.87±37.07),(152.12±24.38)pg·m L^(-1);IL-6的水平为(19.78±2.17),(423.75±54.16),(429.05±48.03),(208.18±34.85)pg·m L^(-1);TNF-α的含量为(17.54±3.85),(602.13±42.13)(606.44±53.32),(349.30±25.73)pg·m L^(-1);凋亡率分别为(4.73±0.64)%,(9.75±1.27)%,(10.68±1.87)%,(7.18±0.79)%;模型组与对照组比较,转染组-1与对照组比较,转染组-2与转染组-1比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论miR-222-3p在肺炎患儿血清中高表达,敲低miR-222-3p可降低LPS诱导的WI-38炎症因子水平,并抑制细胞凋亡。     

JQ-1联合小豆蔻明对乳腺癌细胞MCF-7增殖和凋亡的影响北大核心CSCD

目的探讨JQ-1与小豆蔻明(CAR)联用对乳腺癌细胞MCF-7增殖和细胞凋亡的影响。方法将MCF-7细胞实验分为空白组(不给药)、对照组(10.00μmol·L^(-1)CAR)、实验组(25.00μmol·L^(-1)JQ-1)及联合组(10.00μmol·L^(-1)CAR+25.00μmol·L^(-1)JQ-1)。4组细胞均培养48 h。用CCK-8法检测细胞的增殖能力,用Annexin-V FITC/PI双染法检测细胞的凋亡情况,用蛋白质印迹法检测磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)和活化后胱天蛋白酶7(Cleaved Caspase7)的表达水平。结果联合组、实验组、对照组和空白组的增殖率分别为(47.79±11.27)%、(66.75±26.56)%、(74.57±13.59)%和(100.00±0)%,细胞晚期凋亡率分别为(24.17±1.27)%、(7.07±0.80)%、(14.70±3.12)%和(4.98±2.98)%,p-PI3K蛋白相对表达水平分别为0.87±0.02、1.11±0.06、1.09±0.03和1.00±0.00,p-AKT蛋白相对表达水平分别为0.31±0.05、0.96±0.06、0.96±0.16和1.00±0.00,Cleaved Caspase7蛋白相对表达水平分别为2.70±0.04、1.51±0.03、1.28±0.01和1.00±0.00。联合组的上述指标与空白组、对照组、实验组比较,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论JQ-1与CAR联用对乳腺癌细胞MCF-7具有增强抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用,其作用机制可能与调控PI3K/AKT通路相关。