布地奈德对哮喘大鼠IKK/NF-κB信号通道影响的实验研究

目的:观察布地奈德混悬液(Bud,商品名:普米克令舒)对哮喘大鼠肺组织IκB激酶(IKKβ)mRNA表达及核转录因子(NF-κB)活化的影响.方法:复制哮喘大鼠模型,分为正常组、哮喘组和布地奈德混悬液雾化组,用原位杂交法检测肺组织IKKβ mRNA表达,免疫组化检测肺组织NF-κBp65蛋白活性,双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)检测血清及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-5 的浓度.结果:哮喘组肺组织IKKβ mRNA(0.203±0.038)及NF-κBp65(0.256±0.063)表达量均显著高于正常组(分别为 0.015±0.006,0.034±0.008,P＜0.01).布地奈德混悬液雾化组肺组织IKKβ mRNA (0.101±0.010)和NF-κBp65(0.062±0.014)表达均显著低于哮喘组(P均<0.01).结论:哮喘组肺组织IKKβ mRNA、NF-κBp65表达显著增强,Bud雾化吸入能有效抑制哮喘大鼠肺组织IKKβ mRNA的表达及NF-κBp65的活性,证明Bud能有效抑制IKK/NF-κB信号通道的活性.     

阿魏酸钠对哮喘大鼠肺组织核因子-κB、抑制蛋白α和ICAM-1表达的影响

目的观察哮喘大鼠气道炎症、气道反应性及肺组织中核因子-κB(NF-κB)、抑制蛋白α(IκBα)和细胞间黏附分子1(ICAM-1)的表达,探讨用阿魏酸钠干预后对其的影响及作用机制。方法18只健康雄性SPF级Wistar大鼠随机分为哮喘组(A组),阿魏酸钠干预组(Fe组)和正常对照组(C组),每组6只。A组和Fe组用卵清蛋白(OVA)致敏激发复制哮喘模型,Fe组每次激发前用阿魏酸钠干预,C组用生理盐水作为对照。测定哮喘大鼠的气道高反应性及支气管肺泡灌洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞数量,免疫组化方法观察NF-κB、IκBα和ICAM-1在哮喘大鼠肺组织的表达。结果阿魏酸钠能降低哮喘大鼠的气道高反应,减少气道嗜酸性粒细胞的募集。A组支气管肺组织NF-κB[(38.03±2.89)%]和ICAM-1[(14.59±0.56)%]的蛋白表达显著高于对照C组[分别为(5.26±0.41)%,(1.89±0.26)%],IκBα蛋白的表达[(1.58±0.34)%]低于C组[(15.49±1.32)%],有统计学差异(P<0.01)。Fe组NF-κB[(18.65±2.25)%]和ICAM-1[(6.75±0.61)%]的蛋白表达与A组相比显著降低(P<0.01),IκBα[(5.58±0.27)%]则增高(P<0.01)。哮喘大鼠肺组织NF-κB与ICAM-1蛋白表达呈正相关(r=0.878,P=0.022),与IκBα呈负相关(r=-0.824,P=0.044)。结论阿魏酸钠能够抑制哮喘大鼠肺组织IκBα的降解和NF-κB的激活,进而抑制ICAM-1的表达,最终抑制气道炎症和气道高反应性。     

吸入布地奈德对哮喘大鼠肺组织嗜酸粒细胞趋化因子及受体表达水平的影响

目的观察吸入布地奈德对哮喘大鼠肺组织嗜酸粒细胞趋化因子及受体表达水平的影响。方法将30只Wistar大鼠随机分组(n=10):模型组(A组)采用OVA致敏与激发;空白对照组(C组),以生理盐水代替OVA;布地奈德组(B组),第6次诱发哮喘结束后30 min采用BUD混悬液雾化吸入2周。模型组和空白对照组以等量生理盐水代替。肺组织嗜酸性粒细胞(EOS)计数,测定肺组织Eotaxin蛋白、CCR3蛋白表达水平。结果布地奈德组大鼠肺组织EOS计数明显低于模型组[(8.87±3.21)vs(11.53±4.50),P0.05]。哮喘大鼠肺组织中有大量的Eotaxin蛋白、CCR3蛋白表达,布地奈德组大鼠肺组织Eotaxin蛋白、CCR3蛋白表达明显减少。空白对照组在上述部位仅少量表达或不表达。结论 Eotaxin及其受体CCR3参与哮喘的发病机制,布地奈德雾化吸入治疗哮喘与其抑制Eotaxin及其受体CCR3表达有关。     

尼可地尔对哮喘气道重塑大鼠肺组织Toll样受体4以及核因子-κB p65表达的影响

目的观察尼可地尔对哮喘气道重塑大鼠肺组织中Toll样受体4(TLR-4)及核因子(NF)-κBp65的作用以及对Bax/Bcl-2的调节情况。方法 32只清洁级SD雄性大鼠,随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组和尼可地尔组。采用5点注射和雾化吸入鸡卵清蛋白+氢氧化铝的方法复制大鼠哮喘模型,地塞米松组予地塞米松0.5 mg.kg-1.d-1雾化吸入,尼可地尔组予尼可地尔3 mg.kg-1.d-1雾化吸入,正常组与哮喘组雾化吸入生理盐水,共4 wk。观察大鼠肺组织病理学改变,NF-κB p65、Bax、Bcl-2的含量,以及TLR-4 mRNA的表达。结果与哮喘组相比,尼可地尔组大鼠的肺部组织炎症细胞浸润较少,肺泡的组织结构较为完整。哮喘组大鼠肺组织NF-κB p65、Bcl-2、TLR-4 mRNA表达高于正常组,Bax表达量较正常组低,差异均有显著意义(P<0.05)。尼可地尔组和地塞米松组大鼠NF-κB p65、Bcl-2、TLR-4mRNA表达低于哮喘组,Bax表达量较哮喘组高,均有显著差异(P<0.05)。结论尼可地尔能逆转哮喘大鼠肺组织病理变化,降低TLR-4介导的NF-κB p65表达,改善Bax/Bcl-2表达失调为其可能机制。     

芝麻素抗哮喘炎症作用研究

目的观察芝麻素抗哮喘作用,并探讨其可能的作用机制。方法 40只♂清洁级BALB/c小鼠,随机分为正常组、哮喘组、芝麻素低剂量组、芝麻素高剂量组和地塞米松组。体外卵清蛋白(OVA)诱导建立哮喘模型,ELISA和Western blot方法检测芝麻素对支气管炎肺泡灌洗液(BALF)和肺组织白细胞介素-4、5、13(IL-4、5、13)、干扰素-γ(IFN-γ)表达的影响。HE染色观察肺部炎症变化,Western blot方法检测IκBα磷酸化和NF-κB活化。结果哮喘组与正常组相比,炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平增高,而IFN-γ的表达明显降低(P<0.05),IκBα磷酸化和NF-κB核转位明显增加(P<0.05);芝麻素高剂量组明显降低炎症细胞计数、IL-4、IL-5、IL-13水平,提高IFN-γ的表达(P<0.05),同时抑制IκBα磷酸化和NF-κB核转位(P<0.05)。结论芝麻素通过抑制NF-κB激活,减轻哮喘炎症反应。     

1,25-二羟维生素D_3对哮喘气道重塑小鼠模型NF-κB信号通路的调控研究

目的探讨1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2D3]对慢性支气管哮喘(简称哮喘)小鼠气道重塑的干预作用及可能作用机制。方法 BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组及VitD组。以卵白蛋白(OVA)致敏、反复激发9周(共31次)建立慢性哮喘气道重塑模型。VitD组在每次OVA激发前1 h予以腹腔注射100 ng 1,25-(OH)2D3。对照组用等量生理盐水代替OVA进行致敏和激发。末次激发后24 h处死小鼠。肺组织分别行HE染色和Masson染色,观察各组气道结构及上皮下纤维化,并用计算机图像分析系统评价各组气道重塑;蛋白免疫印记法检测肺组织核转录因子-κB(NF-κB)p65的核移位及IκBα、p-IκBα蛋白的表达水平;实时荧光定量(Real-time)PCR检测肺组织中IκBαmRNA表达水平。结果 (1)哮喘组出现炎性细胞浸润增多、上皮下纤维化及平滑肌细胞层增厚等气道重塑的结构改变,而1,25-(OH)2D3的干预可有效减轻上述病理改变;(2)1,25-(OH)2D3明显抑制哮喘肺组织中NF-κB p65的核移位;(3)1,25-(OH)2D3能通过上调IκBα的mRNA表达并抑制其磷酸化来上调哮喘肺组织中IκBα的蛋白表达。结论 1,25-(OH)2D3可通过负性调控NF-κB信号通路来拮抗哮喘气道重塑。     

白芨多糖对胃溃疡大鼠的干预作用及其机制研究

目的研究白芨多糖对胃溃疡(GU)模型大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)及病灶组织的核因子-κB(NF-κB)p65基因及其蛋白表达影响。方法用乙酸直接烧灼法复制GU大鼠模型。按随机数字表法将大鼠分为6组:正常组、模型组,阳性对照组(0.3 g·kg^-1·d^-1雷尼替丁灌胃)和大、中、小3个剂量实验组(50.0,25.0,12.5 mg·kg^-1·d^-1白芨多糖灌胃),每组10只;正常组和模型组大鼠给予蒸馏水灌胃,各组均1次/天,连续15 d。用酶联免疫吸附法检测大鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-6含量,以实时荧光定量PCR法和蛋白免疫印迹法检测组织中NF-κB基因和蛋白表达情况。结果正常组、模型组、阳性对照组和大、中、小3个剂量实验组的血清TNF-α含量分别为(571.13±11.85),(759.25±21.11),(636.63±3.70),(611.75±12.46),(741.63±11.99)和(756.88±8.34)pg·mL^-1;这6组的IL-1β的含量分别为(400.50±30.39),(532.13±11.76),(458.88±9.48),(422.00±21.50),(508.63±15.68)和(523.38±10.18)pg·mL^-1;这6组的IL-6的含量分别为(295.63±11.15),(429.00±11.56),(340.63±9.68),(317.88±10.80),(377.50±14.15)和(417.75±9.36)pg·mL^-1;这6组的NF-κB p65基因表达量(2-ΔΔCt值)分别为1.00±0.00,1.37±0.02,1.29±0.02,1.23±0.03,1.33±0.02和1.35±0.03;这6组的NF-κB p65蛋白表达量(灰度值)分别为0.60±0.11,1.24±0.36,0.79±0.14,0.63±0.09,0.87±0.15和1.16±0.25。上述指标:模型组与正常组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),大、中2个剂量实验组与模型组比较,差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。结论白芨多糖可通过抑制促炎因子TNF-α、IL-1β和IL-6异常分泌,并下调NF-κB p65基因及其蛋白表达,从而发挥保护胃黏膜的作用。     

已酮可可碱对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用

目的 研究已酮可可碱(PTX)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肺损伤的保护作用.方法 健康成年雄性SD大鼠72只,随机分为对照(C)组、实验(E)组和干预(P)组.E组和P组用5%牛磺胆酸钠逆行胰胆管注射制备SAP模型.然后,P组立即腹腔注射PTX.于制模后2、6和12 h观察胰腺和肺组织的病理学改变;ELISA法测定血清中性粒细胞趋化因子(CINC)和白细胞介素6(IL-6)水平变化;Western blot法检测肺组织核因子抑制蛋白(IκBα)的表达量.结果 E组血清CINC、IL-6水平及肺组织IκBα蛋白的表达均显著高于同时段C组(P<0.05);与E组比较,P组血清CINC、IL-6水平和肺组织IκBα蛋白表达量均明显降低(P<0.05),胰腺和肺组织病理改变减轻.结论 SAP肺损伤时,肺组织IκBα明显升高,核因子κB(NF-κB)活化,从而启动CINC、IL-6等过量表达.PTX可以抑制NF-κB/IκB信号通路的激活,对SAP肺损伤具有保护作用.     

鼠曲草提取物对COPD模型大鼠气道炎症的抑制作用及对NF-κB通路的影响

目的:研究鼠曲草提取物对慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)模型大鼠气道炎症的影响及作用机制。方法:大鼠随机分为正常组,模型组,鼠曲草提取物低、中、高剂量组(0.75,1.5,3g·kg^-1)和地塞米松组(阳性对照药,27mg·kg^-1),每组9只。除正常组外,其余各组大鼠采用香烟烟熏联合气管内滴注脂多糖建立COPD大鼠模型。造模15d后,各给药组大鼠灌胃相应药物,正常组和模型组大鼠灌胃等体积0.9%氯化钠溶液,每日1次,连续14d。末次给药后,检测各组大鼠肺功能;HE染色观察肺组织病理学变化;酶联免疫法检测肺泡灌洗液、血清中IL-6、IL-8、IL-17、IL-1β、TNF-α、TGF-β含量;RT-PCR法检测右肺组织中NF-κB mRNA的相对表达量;Western blot法检测右肺组织中NF-κB、IKKβ、IκBα及其p-IκBα蛋白的相对表达量。结果:不同剂量的鼠曲草提取物干预后,均可显著提高大鼠肺功能参数FEV0.3、FVC、FEV0.3/FVC,明显降低肺泡灌洗液中IL-8、IL-17、TNF-α及血清中IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、TNF-α、TGF-β含量,改善大鼠肺组织病理变化,同时显著降低p-IκB、IKK蛋白及NF-κB mRNA和蛋白相对表达量。结论:鼠曲草能够改善COPD模型大鼠的肺功能,减轻肺组织病理损伤,抑制炎症反应,其作用可能与抑制NF-κB信号通路有关。     

桂枝、荆芥挥发油对大鼠急性肺损伤模型核因子κB信号通路影响的比较

目的探讨桂枝、荆芥挥发油对核因子κB/IκB信号通路的影响。方法用大肠肝菌内毒素(LPS)制作大鼠急性肺损伤模型,通过桂枝挥发油和荆芥挥发油治疗后,采用ELISA法检测肺组织细胞中核蛋白NF-κB P65的含量和肺组织溶浆中磷酸化IκB-α、TNF-α和IL-1β的含量。结果正常大鼠肺组织中,NF-κB P65、磷酸化IκB-α、TNF-α和IL-1β有微量表达,LPS经尾静脉注射6 h后,各指标表达均显著增高,与空白对照组比较有显著差异(P<0.01),桂枝、荆芥挥发油组NF-κB P65、磷酸化IκB-α、TNF-α和IL-1β的含量均较模型组显著降低(P<0.01)。结论桂枝、荆芥挥发油对急性肺损伤时高度活化的核因子κB/IκB信号通路有显著的抑制或拮抗作用,提示核因子κB/IκB信号通路可能是桂枝、荆芥挥发油抗炎作用的主要机制之一。     

罗格列酮对糖尿病大鼠大血管中磷酸化IKK和IκBα表达的影响

目的探讨罗格列酮对糖尿病大鼠大血管组织中磷酸化核因子-κB(NF-κB)抑制蛋白激酶(IKK)及其下游作用物NF-κB抑制蛋白(IκBα)表达的影响。方法将48只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(A)、糖尿病组(B)和罗格列酮治疗组(C),C组给予5mg·kg-1·d-1罗格列酮生理盐水混悬液灌胃,A组和B组给予等体积生理盐水灌胃,用免疫组织化学检测8周和12周后颈动脉中磷酸化IKK和磷酸化IκBα表达的改变,光镜、电镜观察各组颈动脉形态的改变。使用图像分析系统分析颈动脉内中膜厚度(IMT),分离血清测血糖、血脂以及C肽。结果与正常对照组相比,糖尿病组及罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达增加,IMT增加(P<0.05);而罗格列酮治疗组IKK及IκBα表达低于糖尿病组,IMT下降(P<0.05)。结论罗格列酮可通过抑制IKK活化,进而抑制IκBα降解,降低NF-κB活化水平,从而减轻大血管病变。     

阻断NF-κB/IκB信号通路对HIBD大鼠脑内炎症因子的影响

目的:建立大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,将IκB通过腺病毒载体导入体内,探讨其对HIBD大鼠脑内NF-κB活性和TNF-α、IL-1表达的影响。方法:40只大鼠随机分为5组:I组(正常对照组),II组(HIBD损伤1d组),III组(HIBD损伤7d组),IV组(IκB干预1d组),V组(IκB干预7d组)。Western-blot检测脑细胞NF-κB的表达,了解NF-κB的活性,放免法检测TNF-α、IL-1的表达。结果:经中心静脉途径导入腺病毒转载的IκB基因,可降低HIBD大鼠脑内NF-κB活性,IκB干预1d组和7d组与HIBD损伤1d组和HIBD损伤7d组比较,NF-κB活性明显减少(P<0.05);降低脑内TNF-α、IL-1含量,IκB干预1d组和7d组与HIBD损伤1d组和7d组比较,TNF-α、IL-1含量明显减少(P<0.05)。结论:通过中心静脉途径注入腺病毒转载的IκB基因,直接增加脑内IκB的表达,阻断炎症因子TNF-α的合成,机制可能与其抑制了NF-κB的活性有关。     

壁虎粉对哮喘豚鼠模型干预作用及动物护理研究

目的 探讨中药壁虎粉对支气管哮喘动豚鼠物模型的肿瘤坏死因子(TNF-α)、白三烯B4(LTB4 )、核转录因子κ B(NF-κ B)mRNA水平的影响以及加强动物护理的重要性.方法 120只250～300 g健康雄性豚鼠120只,随机分为正常对照组30只、哮喘对照组31只、壁虎粉酶解液(高、低浓度)干预组30只和氨茶碱十预组29只.其中过程加强豚鼠哮喘模型喂养、灌药以及处死解剖等的动物护理.对造模豚鼠腹腔内均以1.5 ml/只的剂量卵蛋白抗原液致敏,一周后再次腹腔注射致敏.在第2次致敏后8天开始,壁虎粉干预组和氨茶碱干预组分别用壁虎粉酶解液和氨茶碱灌胃,哮喘对照组灌服生理盐水,1 h后用2％卵蛋白雾化吸入激发哮喘对照组、壁虎粉和氨茶碱干预组30分钟.正常对照组则雾化吸人生理盐水3分钟.各组动物隔日雾化吸入共20天.最后一次激发24 h后处死实验豚鼠,解剖取得肺组织以甲醛固定、保存并对各样本中相关TNF-α、LTB4、NF-κ B等mRNA水平RT-PCR检测.结果 哮喘对照组与正常对照组比较,TNF-α、LTB4、NF-κ B的mRNA水平均高于正常对照组(P＜0.01),表明哮喘造模成功且TNF-α、LTB4、NF-κB的mRNA表达与哮喘发病相关；经过壁虎粉酶解液干预或氨茶碱干预TNF-α、LTB4.、NF-κ B的mRNA水平明显降低(P＜0.01)；氨茶碱干预组TNF-α、LTB4、NF-κB的mRNA水平比壁虎粉酶解液干预组低,但差异无显著性(P＞0.05).结论 中药壁虎粉具有明显抑制TNF-o mRNA、NF-κ B和LTB4mRNA基因表达,有效阻断哮喘诱发途径信号传导通路的作用；实验过程中加强实验豚鼠动物模型的护理是保证实验结果的准确、可靠和可重复性的必要条件.     

NF-κB、IκB在阿霉素肾病大鼠中的表达及大黄蛰虫丸的干预作用

目的:探讨NF-κB、IκB在阿霉素肾病大鼠中的表达及大黄蛰虫丸的干预作用。方法:SD大鼠一次性尾静脉注射阿霉素5 mg/kg,随机分为模型组(n=30)和大黄蛰虫丸组(n=15),另以8只正常大鼠作为对照组(正常组),进行对比观察。于实验第7天、14天,各处死4只模型组大鼠,留取肾脏标本待测。实验第28天,大鼠全部处死,观察大鼠超微结构的改变,应用免疫荧光方法及免疫组织化学方法定位及定量分析检测NF-κB、IκB-α的表达变化。结果:与正常对照组比较,模型组大鼠肾小球足细胞结构受到损害,足细胞足突融合,肾小球内NF-κB表达增加[(2.491±0.551)×106],IκB-α表达下调[(0.947±0.631)×106],大黄蛰虫丸可明显抑制阿霉素肾病大鼠肾小球内NF-κB的表达[(1.165±0.374)×106],减轻足细胞足突融合。结论:大黄蛰虫丸可能通过影响NF-κB、IκB的表达而对足细胞起保护作用。     

血红素氧合酶-1对哮喘小鼠模型IL-25和MUC5AC表达的影响

摘要：目的　探讨血红素氧合酶-1（HO-1）对哮喘小鼠气道炎症的调节作用及其机制。方法　将28只健康雌性Balb/c小鼠根据随机数字表法分为4组：对照组、哮喘组、血晶素组、福多司坦组,每组7只。哮喘组、血晶素组和福多司坦组小鼠于第1天和第14天腹腔注射20 μg卵清蛋白（OVA）+500 μg Al（OH）3+0.2 mL PBS致敏,于第25~28天每天雾化吸入1次OVA激发气道高反应制备小鼠哮喘模型,对照组以等量生理盐水替代,血晶素组致敏前1、2 d,致敏后12、13、23、24、27 d腹腔注射血晶素75 μmol/kg,福多司坦组分别于致敏前25、26、27 d灌胃给药福多司坦（200 mg/kg）,末次激发后24 h内处死小鼠并收集血液、肺组织。HE染色观察肺组织形态学改变,免疫组化检测肺组织黏蛋白5AC（MUC5AC）的表达,酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测肺组织中MUC5AC和血清中白细胞介素（IL）-25的水平,并对MUC5AC和IL-25进行相关性分析。结果　哮喘组肺组织可见大量炎症细胞浸润、气管黏膜增厚、黏膜下水肿,血晶素组和福多司坦组可见少量炎症细胞浸润及渗出,病理改变较哮喘组轻。与对照组相比,哮喘组、血晶素组、福多司坦组MUC5AC和IL-25的表达水平明显升高（P＜0.05）;与哮喘组相比,血晶素组和福多司坦组MUC5AC和IL-25降低（P＜0.05）,且血晶素组较福多司坦组降低更明显（P＜0.05）。MUC5AC与IL-25的表达水平呈正相关（r=0.932,P＜0.01）。结论　HO-1可下调哮喘小鼠MUC5AC和IL-25的表达,减轻气道炎症和黏液高分泌。     

金水六君煎对哮喘小鼠肺水代谢及TNF-α/NF-κB信号通路的影响

目的 研究金水六君煎对哮喘小鼠肺水代谢及TNF-α/NF-κB信号通路的影响。方法 将小鼠适应性饲养1周后,按体质量随机取10只作为空白对照组,其余小鼠实验第1 天、第8 天及第15天腹腔注射与皮下注射卵蛋白致敏液致敏,第22 天随机分为模型对照组、阳性对照组及金水六君煎低、中、高剂量(4.1,8.2,16.4 g·kg^-1)组,隔日1次、连续2周吸入雾化激发液(1% 卵蛋白)复制哮喘小鼠模型,同时每天灌胃给予受试药,观测金水六君煎对哮喘小鼠行为学、肺湿干重比值、AQP1、AQP5、TNF-α、NF-κB及NF-κB mRNA表达的影响。结果 金水六君煎可减少哮喘发作动物数,缓解哮喘症状,降低肺指数及肺湿干重比值,提高肺组织AQP1、AQP5的表达水平,降低支气管肺泡灌洗液及肺组织TNF-α的含量,下调肺组织NF-κB及其基因表达水平(P<0.05或P<0.01)。结论 金水六君煎具有一定的平喘作用,抑制TNF-α/NF-κB信号通路、上调AQP1和AQP5而改善肺水代谢是其作用机制之一。     

红芪多糖对db/db小鼠糖尿病心肌病NF-κB/IKKβ信号通路的影响

目的 观察红芪多糖(HPS)对糖尿病心肌病(DCM)db/db小鼠心肌组织核转录因子-κB(NF-κB)/IκB激酶β(IKKβ)信号通路的影响。方法 将60只7周龄的雄性db/db小鼠随机分为模型组、对照组和低、中、高剂量实验组,每组12只;另取12只同周龄的db/m小鼠作为正常组。正常组和模型组均灌胃给予等剂量0.9%NaCl;低、中、高剂量实验组分别灌胃给予50、100、200 mg·kg^-1 HPS混悬液;对照组灌胃给予4 mg·kg^-1罗格列酮混悬液。6组大鼠每天给药1次,连续灌胃8周。用酶联免疫吸附试验法检测心肌组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)的含量,用实时荧光定量聚合酶链反应法检测心肌组织中NF-κB和IKKβ mRNA的表达水平,并分析NF-κB蛋白表达水平与TNF-α和IL-6含量的相关性。结果 正常组、模型组、对照组和高剂量实验组的小鼠心肌组织中IL-6含量分别为(1.24±0.54)、(7.72±0.24)、(2.90±0.50)和(2.78±0.56) ng·L^-1...     

异甘草酸镁对成纤维细胞NF-κB信号通路活性的影响

目的:研究异甘草酸镁(magnesium isoglycyrrhizinate,MgIG)对成纤维细胞核因子-kappa B(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路活性的影响。方法:实验分6组,为空白对照组、TNF-α模型组、地塞米松(dexamethasone,DEX)阳性对照组和0.1、1、10mg/ml的MgIG组。DEX组和MgIG组分别给予DEX(1μg/ml)和MgIG(0.1、1、10mg/ml)预处理4h后,除对照组外,其余5组加入TNF-α(20ng/ml)作用1.5h。提取细胞核蛋白,以免疫印迹法检测NF-κB p65蛋白质表达。提取总RNA,用实时PCR技术检测细胞内IκBαmRNA表达。成纤维细胞经DEX和MgIG预处理4h后加入TNF-α作用24h(浓度同上),用报告基因技术检测NF-κB基因表达。结果:成纤维细胞经TNF-α作用1.5h后,细胞核内NF-κB p65蛋白质表达量明显增加,IκBαmRNA表达上调;TNF-α作用24h后,NF-κB基因上调。DEX预处理4h,可以明显减少TNF-α引起的核内NF-κB p65蛋白质表达和细胞内IκBαmRNA表达,明显降低与TNF-α共作用24h后NF-κB基因表达。MgIG处理成纤维细胞4h后,能够明显降低TNF-α作用1.5h后核内NF-κB p65蛋白质表达量,但对IκBαmRNA表达水平无明显影响。1、10mg/ml的MgIG能够明显降低与TNF-α共作用24h后NF-κB基因表达水平。结论:MgIG的抗炎作用与抑制NF-κB p65转位入核和NF-κB基因表达,从而抑制NF-κB信号通路活性相关,但与DEX不同的是MgIG不能改变IκBαmRNA表达水平。     

壳寡糖预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤回肠NF-κB表达的影响

目的:研究壳寡糖预处理对大鼠肠缺血再灌注损伤(I/R)回肠核转录因子κB(NF-κB)表达的影响。方法:某院于2015年2月~2015年7月间将实验室饲养的40只健康雄性SD大鼠随机分为I/R组、壳寡糖预处理组两组,每组各20只。I/R组术前60min生理盐水灌胃,并通过手术建立肠I/R模型;壳寡糖预处理组在肠I/R模型建立前5d按1500mg/kg给予壳寡糖灌胃预处理,连续5d,并于建模前30min再灌胃1次,建立I/R模型。灌注处死大鼠后通过病理组织切片观察和免疫组化分析,观察两组肠黏膜损伤程度和NF-κB检测表达。结果:壳寡糖预处理肠黏膜损伤Chiu(2.64±0.11)分、NF-κB蛋白表达(0.17±0.01)、NF-κB mRNA(0.57±0.05)较I/R组(4.18±0.14)分、(0.23±0.03)、(0.70±0.05)均较低,相较差异显著(P0.05)。结论:壳寡糖能较好的抑制NF-κB表达,对减轻回肠缺血再灌注黏膜损伤效果显著。     

黄芪甲苷对慢性哮喘模型小鼠气道重塑的影响

目的观察黄芪甲苷对慢性哮喘小鼠模型气道重塑的影响。方法 48只BALB/c小鼠按随机原则分成正常对照组、哮喘组、黄芪甲苷组、布地奈德组,每组12只。卵蛋白致敏,气道激发8周。黄芪甲苷组和布地奈德组分别给予黄芪甲苷溶液(50 mg·kg-1)灌胃,布地奈德混悬液(8 ml)雾化,每日1次,共8周。末次激发24 h后,每组取6只小鼠评价呼气阻力,支气管肺泡灌洗液(BALF)观察炎症细胞计数,HE染色和Masson染色观察气道炎症和上皮下纤维化情况,ELISA检测BALF中血管内皮生长因子(VEGF)水平,免疫组织化学检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和VEGF蛋白表达。结果黄芪甲苷能够明显抑制慢性哮喘小鼠模型的气道炎症、气道高反应性和气道重塑。黄芪甲苷治疗后哮喘小鼠BALF中VEGF含量明显降低,哮喘小鼠肺组织高表达的α-SMA和VEGF蛋白水平也明显降低。结论黄芪甲苷能够抑制慢性哮喘小鼠模型的气道重塑,其机制可能通过抑制VEGF表达而实现。