巨噬细胞与结核分枝杆菌的免疫反应的研究进展

巨噬细胞是结核分枝杆菌在机体内的主要宿主细胞.细胞介导的免疫反应是机体抗结核分枝杆菌的主要免疫保护机制,巨噬细胞可通过吞噬、溶酶体融合,提呈结核分枝杆菌抗原,产生多种细胞因子、反应氧中间产物和反应氮中间产物,以及细胞凋亡等多种途径来杀灭结核分枝杆菌;同时,结核分枝杆菌也可采取各种方式来逃逸巨噬细胞的免疫作用.本文就巨噬细胞与结核分枝杆菌的免疫反应的研究进展作一综述.     

巨噬细胞与结核分枝杆菌的免疫反应的研究进展

巨噬细胞是结核分枝杆菌在机体内的主要宿主细胞.细胞介导的免疫反应是机体抗结核分枝杆菌的主要免疫保护机制,巨噬细胞可通过吞噬、溶酶体融合,提呈结核分枝杆菌抗原,产生多种细胞因子、反应氧中间产物和反应氮中间产物,以及细胞凋亡等多种途径来杀灭结核分枝杆菌;同时,结核分枝杆菌也可采取各种方式来逃逸巨噬细胞的免疫作用.本文就巨噬细胞与结核分枝杆菌的免疫反应的研究进展作一综述.     

巨噬细胞与结核分枝杆菌的免疫反应的研究进展

巨噬细胞是结核分枝杆菌在机体内的主要宿主细胞.细胞介导的免疫反应是机体抗结核分枝杆菌的主要免疫保护机制,巨噬细胞可通过吞噬、溶酶体融合,提呈结核分枝杆菌抗原,产生多种细胞因子、反应氧中间产物和反应氮中间产物,以及细胞凋亡等多种途径来杀灭结核分枝杆菌;同时,结核分枝杆菌也可采取各种方式来逃逸巨噬细胞的免疫作用.本文就巨噬细胞与结核分枝杆菌的免疫反应的研究进展作一综述.     

结核分枝杆菌感染致巨噬细胞脂代谢改变的研究进展

结核分枝杆菌引起的结核病是全球致死性传染病之一,结核感染期间结核分枝杆菌利用巨噬细胞脂质作为主要碳源。结核分枝杆菌与巨噬细胞间的相互作用、巨噬细胞内的免疫应答及脂质平衡密切相关。结核病患者肺内脂质含量明显增加,而外周血内胆固醇含量却明显降低。本文从巨噬细胞中结核分枝杆菌的能量代谢、结核分枝杆菌感染致肺部及血中巨噬细胞脂代谢改变等方面对结核分枝杆菌感染致巨噬细胞脂代谢改变的研究进展作一综述,以期发现结核病治疗的新靶点和新方法。     

结核分枝杆菌Hsp16.3与感染巨噬细胞凋亡的相关性研究

目的建立结核分枝杆菌感染RAW264.7株巨噬细胞模型,研究结核分枝杆菌Hsp16.3与感染巨噬细胞凋亡的相关性。方法分别用结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株和卡介苗菌株感染RAW264.7巨噬细胞株,于感染后1、3、6及12h,利用激光共聚焦显微镜鉴定卡介苗及结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株感染RAW264.7巨噬细胞模型;同时利用流式细胞技术于上述各时间点检测各组感染巨噬细胞的凋亡率,并分析其时相性变化;利用PCR技术扩增模型目的基因,利用Western blot检测上述各个时间点Hsp16.3蛋白表达水平的时相性变化。结果激光共聚焦显微镜下观察到RAW264.7巨噬细胞内有标记MTB16KD的绿色荧光,证实结核分枝杆菌感染巨噬细胞模型构建成功。巨噬细胞感染结核分枝杆菌后凋亡率升高,其中感染后1、3和12h凋亡率H37Rv感染组与BCG感染组比较差异有统计学意义(P<0.05);巨噬细胞感染结核分枝杆菌后的PCR产物大小为435bp;感染细胞Hsp16.3蛋白表达升高,其中感染后1h和3h升高更显著。结论结核分枝杆菌感染可导致巨噬细胞凋亡,感染巨噬细胞的凋亡率与菌株毒力强弱有关,弱毒力结核分枝杆菌感染的巨噬细胞早期凋亡更显著;结核分枝杆菌感染巨噬细胞的凋亡与结核分枝杆菌表达Hsp16.3水平高低有关,在感染早期强毒力结核分枝杆菌Hsp16.3表达水平较高。     

耐多药结核分枝杆菌异烟肼耐药相关基因katG突变分析

异烟肼(isoniazid, INH)是一种重要的抗结核药物,其在细菌体内被过氧化氢酶-过氧化物酶KatG氧化为乙酰异烟肼自由基和活性氧自由基等活性物质,进而攻击结核分枝杆菌多个靶位点来发挥杀菌作用。Zhang等通过Southern印迹杂交（Southern blot）发现结核分枝杆菌katG基因缺失和异烟肼耐药相关。研究表明,异烟肼耐药与许多基因相关,发生频率最高的为katG编码区和inhA启动子区的突变,katG315位突变最常见,有30%～94%的耐药株发生该突变,但国内对于该基因其他位点的突变研究较少。本研究通过对河南省耐多药(multidrug resistant,MDR)结核分枝杆菌katG编码区全长突变进行分析,进一步分析异烟肼的耐药机制。     

结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3功能及与结核病的关系研究进展

结核病依然是对人类健康具有极大威胁的传染性疾病之一,而结核分枝杆菌能在巨噬细胞内长期存活是其引起结核病的主要因素之一。近年研究发现,结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3是在结核分枝杆菌进入宿主巨噬细胞后大量表达的一个存在于膜上的主要抗原蛋白。由于结核分枝杆菌小分子热休克蛋白Hsp16.3在结核分枝杆菌潜伏于宿主巨噬细胞过程中扮演的重要角色,其已经越来越受到人们的关注。     

自噬在巨噬细胞抗结核感染中的作用及调控机制研究进展

结核分枝杆菌和宿主细胞的相互作用在很大程度上决定结核的结局,自噬是巨噬细胞清除结核分枝杆菌的策略之一;结核分枝杆菌也进化出了一套自噬逃逸机制,利于其在巨噬细胞内的生存。自噬通路调控是细胞自噬发挥其生物学功能的基础,影响结核分枝杆菌和巨噬细胞的作用结局,本文主要讲述结核分枝杆菌入侵机体后巨噬细胞相关自噬通路调控以及结核分枝杆菌自噬抑制机制,为寻找防止结核病的新靶点奠定基础。     

结核分枝杆菌感染对巨噬细胞内胆固醇代谢影响的机制的研究进展

正常情况下,胆固醇在巨噬细胞内的代谢过程主要包括胆固醇的摄取、酯化、水解以及外排,在机体严谨精细的调控下正常进行,维持巨噬细胞内脂质的动态平衡。胆固醇代谢稳态是维持细胞正常形态和功能的重要环节之一,如果过程中出现异常,发生代谢紊乱,就会破坏和改变细胞的结构。结核分枝杆菌感染宿主巨噬细胞之后,与宿主巨噬细胞的相互作用会影响着结核分枝杆菌的最终状态,其中胆固醇代谢在这一过程中发挥了重要作用。本文以胆固醇为线索,将结核分枝杆菌感染巨噬细胞后对胆固醇代谢影响的机制作一综述。     

结核分枝杆菌免疫逃避机制研究进展

结核病(Tuberculosis TB)主要由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)感染引起,结核分枝杆菌在机体中长期存在与其逃避机体免疫杀伤机制密切相关。已发现的结核分枝杆菌免疫逃避机制包括阻止巨噬细胞吞噬溶酶体的成熟及酸化,抑制氧化应激反应,抑制细胞凋亡及自噬等。结核分枝杆菌逃避宿主免疫杀伤的机制错综复杂,目前尚未完全明了,本文就结核分枝杆菌免疫逃避机制做一综述,为其深入研究提供参考。     

结核分枝杆菌Rv1773c促进细菌侵入巨噬细胞的研究

目的筛选出能促进分枝杆菌对巨噬细胞侵入的功能性结核基因并进行验证。方法将H37Rv RD10-16区的18个结核分枝杆菌(MTB)基因构建到pMV261载体上,然后将重组pMV261质粒电转至耻垢分枝杆菌M.smegmatis(Ms)中,并将各重组菌株命名为rMs::Rvs。运用菌落计数法筛选功能性基因;采用流式细胞术Flow cytometry(FCM),动物实验验证该基因的功能。结果菌落计数显示rMs::Rv1773c组菌落数最多,与对照组相比差异有统计学意义(P0.05);FCM验证Rv1773c促进Ms入侵巨噬细胞能力较强,rMs::Rv1773c组感染小鼠脾脏菌落数增多。结论筛选的RD14区功能性结核基因Rv1773c可能作为结核菌毒力因子,具备促进分枝杆菌入侵巨噬细胞的功能。     

流式细胞术检测不同毒力结核分枝杆菌感染巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化

目的利用流式细胞技术检测结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv株和卡介苗菌株(BCG)分别感染巨噬细胞的凋亡率及其时相性变化。方法分别用结核分枝杆菌H37Rv株和BCG菌株感染巨噬细胞RAW264.7细胞株,于感染后1、3、6及12h,用流式细胞技术检测各组感染巨噬细胞的凋亡率,并分析其时相性变化。结果结核分枝杆菌H37Rv株和BCG菌株感染均使巨噬细胞凋亡率升高,其中在感染后1h和12h凋亡率升高更显著,两组比较凋亡率差异有统计学意义(P<0.05)。结论结核分枝杆菌感染导致巨噬细胞凋亡,凋亡率与菌株毒力强弱相关,毒力弱的结核分枝杆菌感染早期巨噬细胞升高更显著。     

肺泡表面相关蛋白A、D与结核分枝杆菌感染相关性的研究进展

肺泡表面活性物质是由肺泡上皮细胞及支气管上皮细胞产生和分泌的,主要分为SP-A、SP-B、SP-C、SP-D等,在肺内免疫调节及炎症反应方面有重要作用,其中最主要的是SP-A和SP-D.肺结核是机体对结核分枝杆菌侵犯所产生的一种变态和免疫反应同时存在的状态,结核分枝杆菌在侵入肺泡之前首先要经呼吸道,被肺泡巨噬细胞吞噬,而肺泡表面活性物质在结核分枝杆菌与肺泡巨噬细胞之间起着重要中介体的作用.SP-A能够识别结核分枝杆菌细胞壁上的受体或者其他糖类分子,SP-D可以与结核分枝杆菌表面的脂质阿拉伯甘露聚糖结合,它们在介导结核分枝杆菌与肺泡巨噬细胞的黏附时受到一定因素的调节及限制,最终决定结核分枝杆菌与肺泡巨噬细胞之间黏附和吞噬的程度,从而决定结核分枝杆菌进入机体后增殖或被降解的结局.     

结核分枝杆菌与巨噬细胞的相互作用研究概述

结核分枝杆菌是一种胞内感染菌,巨噬细胞是其寄生场所。巨噬细胞是机体内抗菌免疫的主要效应细胞,通过直接杀伤和/或分泌多种细胞因子,对结核分枝杆菌具有抗原呈递、免疫杀伤等作用;结核分枝杆菌则可通过阻止吞噬体与溶酶体的融合逃避巨噬细胞的免疫监视和攻击。深入研究结核分枝杆菌对巨噬细胞免疫杀伤和免疫逃避机制,对研究宿主抗结核免疫机制以及设计新型结核病疫苗有深远意义。     

巨噬细胞在抗结核免疫中的作用及其研究进展

据估计世界上有1/3人口感染了结核分枝杆菌。在大多数情况下,结核分枝杆菌感染者是无症状和没有传染性的,即潜伏性结核感染。为何机体免疫反应可使绝大多数人免患活动性结核病,而又不能完全清除这种感染呢？研究表明,巨噬细胞在控制结核分枝杆菌感染中起着重要作用,而结核分枝杆菌本身也已产生了逃避巨噬细胞杀灭的机制。本文就以上方面的研究进展综述如下。     

巨噬细胞内表达的人颗粒溶素对胞内结核分枝杆菌的杀菌活性

目的 构建携带人颗粒溶素(GLS)的真核表达质粒并探讨其表达后对巨噬细胞RAW264.7内结核分枝杆菌的杀菌能力.方法利用套式PCR从同种异型抗原激活的人CTL中扩增出GLS基因,并克隆入pBudCE4.1载体,构建重组质粒.将其转染至感染结核分枝杆菌H37Rv的巨噬细胞株RAW264.7中,套式PCR、免疫荧光检测GLS表达;转染96 h后裂解细胞作抗酸染色及菌落计数,检测GLS细胞内直接杀菌活性.数据行t或t'检验.结果成功构建携带GLS的真核表达质粒pBudCE4.1/GLS;在转染的已感染H37Rv巨噬细胞株RAW264.7中,从转录和翻译水平都检测到目标基因GLS的表达产物;转染96 h,佛波酯+pBudCF4.1/GLS组、佛波酯+pBudCE4.1组与未激活初始巨噬细胞荷菌量分别为(1.44±1.25)、(3.16±0.20)和(3.59±0.21)个,两两比较,差异均有统计学意义(t=2.403,t=2.854,均P＜0.05).结论携带人GLS的真核表达质粒在巨噬细胞表达后具有明显的杀菌活性,为进一步作为结核基因治疗疫苗的应用提供了实验依据.     

巨噬细胞在抗结核免疫中的作用及其研究进展

据估计世界上有1／3人口感染了结核分枝杆菌。在大多数情况下，结核分枝杆菌感染者是无症状和没有传染性的，即潜伏性结核感染。为何机体免疫反应可使绝大多数人免患活动性结核病，而又不能完全清除这种感染呢?研究表明，巨噬细胞在控制结核分枝杆菌感染中起着重要作用，而结核分枝杆菌本身也已产生了逃避巨噬细胞杀灭的机制。本文就以上方面的研究进展综述如下。     

结核杆菌诱导人巨噬细胞肿瘤坏死因子受体相关信号传导元件的表达谱

目的 调查人巨噬细胞肿瘤坏死因子受体(TNFR)相关信号传导元件在结核分枝杆菌入侵前后的转录水平和变化幅度。方法 利用含有12800个基因和19200个基因全长序列或部分序列的基因芯片研究结核分枝杆菌无毒株和有毒株入侵导致的人巨噬细胞U937全基因组在转录水平的表达谱变化的基础上，然后，在：Northern验证的基础上，通过生物信息学分析TNFR相关信号传导元件的表达。结果 结核分枝杆菌无毒株入侵导致的人巨噬细胞U937中与TNFR有关的表达变化不如有毒株的明显，TNFR被抑制，与TNFR相关的下游基因的表达没有检测到。有毒株导致的变化比较明显，MAP激酶，NF-kappa B，caspase，p53途径等下游元件的表达分别提高2～3倍，内源TNF表达上升2～4倍，TNF的转换酶disintegrin金属蛋白酶表达上升2倍。结论 TNFR相关的信号传导途径元件参与了宿主对细菌的免疫反应，这些基因在转录水平被调控。结核分枝杆菌有毒株比无毒株激发的基因表达变化大。造成这种差异的原因有待进一步分析。     

代谢组学在结核分枝杆菌研究中的应用

肺结核是由结核分枝杆菌引起的一种传染病,全球约有1/3的人群感染过结核分枝杆菌,据WHO估算2010年全球约有850万至920万的新增病例,约120万至150万人死于结核病,其在传染病死亡中居第2位,仅次于获得性免疫缺陷病毒(HIV).近年来,随着耐药菌的增多及HIV感染人数的增加,增加了结核疫情控制的挑战.基因组学、转录组学、蛋白质组学等研究获得了大量的结核分枝杆菌特性相关数据,而由于基因的复杂性、转录后修饰、酶活性调节等问题,基因组学及蛋白质组学并不能完全描述结核分枝杆菌的生物学特征,许多已知基因或蛋白的功能并未完全确定.代谢组学作为作为组学的一种新的研究方法,能够全面鉴别和量化生物体在特定的时间或环境改变、基因突变或病理生理刺激引起的代谢产物的变化,准确描述已发生的代谢改变.进行结核分枝杆菌的代谢组学研究,结合已有的基因组学、蛋白质组学等信息形成整体观,将对对结核分枝杆菌产生更深入认识,从而为发现更好的诊断标志物、药物靶点及疫苗研发提供更多有用信息.     

巨噬细胞在抗结核感染中的作用

巨噬细胞在结核病发病过程及机体抗结核免疫过程中扮演重要的角色。巨噬细胞是机体天然免疫的重要组成细胞,同时又是一类主要的抗原提呈细胞。在天然免疫和获得性免疫中都起着关键的作用。结核病是由结核分枝杆菌引起的严重危害人类健康的主要传染病,结核分枝杆菌可以通过多种途径来干扰机体巨噬细胞的免疫应答。本篇综述的目的在于讨论宿主被结核分枝杆菌入侵后,巨噬细胞在各种抗结核感染的免疫应答中的作用机制。