养胃抗瘤冲剂及其拆方对人胃癌细胞系MGC-803及BGC-823侵袭重组基底膜的作用及作用途径

目的:观察人胃癌细胞系MGC-803,BGC-823对重组基底膜的侵袭作用,分析养胃抗瘤冲剂对其侵袭作用的影响及可能作用途径。方法:实验于2001-05/2001-10在中国中医研究院广安门医院肿瘤细胞生物学实验室完成。选取日本健康雌性大耳白兔21只,按随机数字表法分为7组,即养胃抗瘤冲剂组及拆方(益气方、活血方、解毒方、益气活血方、益气解毒方)组、空白血清组,制备含药血清。采用Transwell细胞培养小室建立人肿瘤细胞系体外侵袭模型,动态观察人胃癌细胞系MGC-803,BGC-823对重组基底膜的侵袭作用以及中药复方养胃抗瘤冲剂(由生黄芪、人参、白花蛇舌草、草河车、三七、苏木等组成,每克含生药3.22g,由中国中医研究院广安门医院制剂室提供)及拆方的含药血清、化疗药顺氯氨铂对胃癌细胞系侵袭作用的影响,侵袭抑制率(%)=(对照组侵袭细胞数-给药组侵袭细胞数)/对照组侵袭细胞数×100%,凡抑制率达30%以上,认为有抗侵袭作用。同时采用流式细胞仪通过单克隆抗体标记的方法检测侵袭转移相关黏附蛋白CD9,CD31,CD36,CD42a,CD44,CD49d,CD62p,CD41、凝血酶敏感蛋白及CD63的表达。结果:①各组人胃癌细胞系MGC-803,BGC-823对重组基底膜侵袭作用的抑制率比较:养胃抗瘤冲剂组、益气组、解毒组对人胃癌细胞MGC-803的抑制率均显著高于空白血清组(55.14%,32.43%,36.59%,0,P<0.05)。益气解毒、益气活血组作用优于单纯解毒、益气、活血组,但两组比较差异无显著性意义(44.86%,41.23%,P>0.05)。人胃癌细胞MGC-803与BGC-823比较,侵袭作用MGC-803强于BGC-823(空白血清组侵袭细胞数分别为60.75±4.57,56.35±3.25),养胃抗瘤冲剂及拆方对MGC-803的抑制作用强于BGC-823,但比较差异无显著性意义(P>0.05)。②各组人胃癌细胞系MGC-803,BGC-823侵袭转移相关黏附蛋白的表达水平比较:养胃抗瘤冲剂组肿瘤转移黏附蛋白CD63、凝血酶敏感蛋白的表达水平低于空白血清组(药物作用24h:3.30%,3.10%;24.97%,11.50%;48h:0.93%,3.56%;5.78%,10.41%),抑制肿瘤转移的黏附蛋白如CD9的表达水平高于空白血清组(药物作用24h:90.49%,86.23%;48h:94.81%,77.69%)。单纯的活血药在给药早期(24h)则可以促进CD63的表达(33.12%),随着给药时间的延长(48h)则降低CD9表达(30.22%);益气活血组则可纠正活血药的这种作用(24hCD63:3.55%;48hCD9:82.92%)。结论:人胃癌细胞系MGC-803,BGC-823对重组基底膜均具有侵袭作用,MGC-803的侵袭作用强于BGC-823。养胃抗瘤冲剂及拆方对MGC-803的抗侵袭作用优于BGC-823。养胃抗瘤冲剂抗人胃癌细胞侵袭作用的可能作用途径在于可降低部分促进肿瘤转移的黏附蛋白如CD63、凝血酶敏感蛋白的表达,对抑制肿瘤转移的黏附蛋白如CD9表达有促进作用。     

共轭亚油酸对胃癌MGC-803细胞增殖的影响

目的 研究共轭亚油酸（CLA）对体外培养人胃癌MGC-803细胞生长的影响。方法 采用体外培养人胃癌MGC-803细胞，用MTT比色、流式细胞光度术以及Cyclin D1蛋白表达检测的方法，观察不同浓度CLA（50．0、100．0、200．0μmol／L）对MGC-803细胞生长的影响。结果 MTT比色结果显示，不同浓度CLA可抑制人胃癌MGC-803细胞的增殖，72h的抑制率分别为48．61％、62．02％、66．33％，呈现剂量-效应关系（P〈0．05）。流式细胞仪检测表明，不同浓度CLA（50．0、100．0、200．0μmol／L）作用MGC-803细胞48h，C1期细胞从0μmol／L浓度组的32．2％分别上升到43．1％、59．7％、63．9％，出现G1期阻滞。免疫组织化学结果显示，Cyclin D1蛋白表达随着CLA浓度的增加呈现逐渐下降的趋势。结论 CLA对体外培养的人胃癌MGC-803细胞增殖有良好的抑制作用。     

白三烯受体拮抗剂对胃癌细胞VEGF表达影响的实验研究

目的观察白三烯受体拮抗剂对人胃癌BGC-823细胞血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法将白三烯受体拮抗剂孟鲁斯特及环氧化酶阻滞剂阿司匹林设置不同的作用浓度和作用时间与人胃癌BGC-823细胞共培养。采用MTT比色法检测胃癌细胞抑制率，ELISA方法检测胃癌细胞血管内皮细胞生长因子的表达。结果白三烯受体拮抗剂孟鲁斯特可明显抑制胃癌细胞BGC-823的生长，孟鲁斯特100、200μmol／L作用72h后人胃癌BGC-823细胞VEGF表达率与阴性对照组相比明显降低（P〈0．05），并且随着药物浓度的升高VEGF表达逐渐减弱。结论白三烯受体拮抗剂能够抑制胃癌BGC-823细胞的增殖，该作用可能与抑制肿瘤血管生成途径有关。     

胃癌中CD44v6和nm23基因蛋白的表达及其临床意义

目的：探讨CD44v6和nm23的表达与胃癌侵袭转移的关系，了解胃癌中CD44v6蛋白表达与nm23蛋白表达的相关性。方法：采用免疫组化S－P法检测CD44v6及nm23在胃癌中的表达情况。结果：CD44v6阳性表达率在进展期胃癌显著高于早期胃癌（P＜0．05），伴淋巴结转移组和肝转移组明显高于无转移组（P＜0．05），CD44v6表达与胃癌的侵袭转移倾向呈正相关（P＜0．05）;nm23阳性表达率在进展期胃癌明显低于早期胃癌（P＜0．05），伴淋巴结转移组和肝转移组显著低于无转移组，nm23蛋白表达与胃癌的侵袭转移倾向呈负相关（P＜0．05）。胃癌中CD44v6及nm23蛋白表达之间呈明显负相关关系（P＜0．01）。结论：胃癌组织中CD44v6和nm23蛋白的检测可用于胃癌转移的预测、恶性程度的评估和预后的判断。     

光动力疗法对人胃癌细胞MGC-803的杀伤性干预

目的：观察5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学疗法对人胃癌细胞MGC-803的干预作用，探讨光动力学疗法治疗胃癌的可能作用途径。方法：实验于2004-03／2004—12在全军神经医学研究所完成。试剂5-氨基乙酰丙酸购自美国Sigma公司；MGC-803人胃腺癌细胞株购于中山大学实验动物中心。①分别使用不同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MOC-803胃癌细胞，浓度分别为0．25，0．5，1．0，2．0，4．0mmol／L，给予相同剂量的激光辐照。②使用相同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞，给予不同剂量的激光辐照，能量分别为6．25，12．5，25．0，50．0，100J／cm^2。③使用不同浓度的5-氨基乙酰丙酸培养MGC-803胃癌细胞，浓度分别为0．25，0．5，1．0，2．0，4．0mmol／L，不予激光辐照。④给予不同剂量的激光辐照培养MGC-803胃癌细胞，能量分别为6．25，12．5，25．0，50．0，100J／cm^2，不给予5-氨基乙酰丙酸。以上4个实验均以四甲基偶氮唑盐法检测细胞活力，以不加5-氨基乙酰丙酸、无激光辐照培养的细胞作为空白对照，细胞存活率=处理组细胞吸光度值／对照组细胞吸光度值x100％。⑤培养MGC-803胃癌细胞，随机分为4组，即单纯MGC-803胃癌细胞组、单纯5-氨基乙酰丙酸组、单纯给予激光组及光动力学治疗组，使用吖啶橙-溴化乙锭染色法检测细胞凋亡情况。结果：①5-氨基乙酰丙酸浓度不同、激光辐射剂量相同：随5-氨基乙酰丙酸浓度逐渐递增，MOC-803细胞的存活率逐渐下降，各组细胞存活率之间差异有显著性意义（F=266．39，P〈0．01）；但在浓度到达2．0mmol／L后，细胞存活率不再随着5-氨基乙酰丙酸的浓度的增加而下降。②激光能量不同、5-氨基乙酰丙酸浓度相同：随着激光剂量的增加MGC-803细胞存活率显著下降，各组细胞存活率之间差异有显著性意义伊=226．31，P〈0．01）。③5-氨基乙酰丙酸浓度不同、不给激光辐射：各组细胞存活率之间差异均无显著性意义（F=0．79，P=0．54）。④激光辐射剂量不同、不给5-氨基乙酰丙酸：各组细胞存活率之间差异均无显著性意义（F=0．61，P=0．66）。⑤只有光动力学治疗组出现细胞凋亡现象。而其他细胞组基本无凋亡细胞。结论：在较低的浓度范围内，5-氨基乙酰丙酸介导的光动力疗法对人胃癌MGC-803细胞的杀伤作用随着5-氨基乙酰丙酸浓度的增加而增加。在较高浓度时则存在饱和现象，而且杀伤力与光剂量成正比。单纯激光不能产生光动力效应，5-氨基乙酰丙酸本身对细胞无毒性作用。5-氨基乙酰丙酸介导的光动力学治疗能够有效的治疗胃癌，光动力学疗法诱导肿瘤细胞凋亡是其可能作用途径之一。     

新城疫病毒HN基因重组体对人胃癌细胞BGC-823凋亡作用机制研究

目的本实验研究旨在探讨含新城疫病毒HN基因的重组质粒对人胃癌细胞BGC-823凋亡的联合作用机制。方法将含有HN基因的重组质粒pIRVP3IL-18HN经脂质体介导转染人胃癌细胞BGC-823，通过MTT方法检测细胞活力；电镜下观察细胞形态；罗丹明123和DCFA染色测定线粒体跨膜电位（△ψ）和活性氧（ROS）水平变化；底物染色反应检测Caspase-3活性。结果重组质粒pIRVP3IL-18HN转染人胃癌细胞BGC-823后，MTT法结果显示致肿瘤细胞死亡率升高，细胞活力下降；电镜观察肿瘤细胞呈现明显凋亡状态；与阴性空白质粒对照显示，线粒体△ψ下降，ROS水平升高；Caspase-3活性被激活。结论含新城疫病毒HN基因的重组质粒可以诱导人胃癌细胞BGC-823进入特定的凋亡程序，从而导致人胃癌细胞BGC-823的凋亡。     

内镜活检组织CD44v6蛋白检测对胃癌转移诊断的价值

目的：探讨内镜活检组织CC44v6检测对胃转移的诊断价值,方法：采用免疫组化方法检测胃癌活检组织和对照组织中CD44V6的表达。结果：慢性胃炎,胃溃疡,胃腺瘤和胃癌活检组织中CD44V6的表达阳性率分别为0％,5．3％,11．8％和62．8％。胃癌转移组活检组织CD44V6阳性表达率为80．7％,高于无转移组（27．6％）,具有高度显著性差异（P＜0．001）,癌前病变即开始逐渐出现高表趋势,结论：CD44V6与肿瘤的转移相关,胃癌活检组织中CD44V5蛋白表可作为预测胃癌转移潜能的生物学指标并在术前决策方面有临床价值。     

复方抗瘤冲剂结合化疗治疗晚期肺癌的疗效观察

目的：评价复方抗瘤冲剂联合全身化疗在治疗晚期肺癌中的价值。方法：65例经组织学证实均为晚期肺癌，随机分为两组。化疗组30例采用全身化疗用丝裂霉素、长春花碱酰胺和顺伯（MVP）方案；联合化疗组35例采用复方抗瘤冲剂＋MVP方案，化疗至少2疗程。结果：联合化疗完全缓解（CR）2例，部分缓解（PR）17例，有效率为54.3%；化疗组CR0例，PR10例，有效率为33．3％。联合化疗组的有效率较化疗组高，两组比较，有显著性差异（P＜0．05）。联合化疗组的临床症状改善有效率85．7％，化疗组50％，两组比较亦有显著性差异（P＜0．05）。两组毒副作用大致相同（P＞0．05），与化疗组相比，联合化疗组能提高肺癌患者外周血CD4、CD4／CD8值（P＜0．05或P＜0．01）。结论：复方抗瘤冲剂在联合全身化疗中对晚期肺癌的治疗可获得一定的疗效，可抑制癌细胞生长和提高机体的免疫功能。     

58例慢性萎缩性胃炎的临床治疗分析

目的：探讨慢性萎缩性胃炎的治疗方法。方法：将58例慢性萎缩性胃炎伴幽门螺旋菌（Hp）感染患者分为治疗组（29例）和对照组（29例）。治疗组给予奥克胶囊20mg，bid，po阿莫西林1．0g，bid，甲硝唑0.4g，bid，po共7天；再服用养胃冲剂（青春宝制药有限公司产品）5．0g，tid，po，共90天。对照组给予养胃冲剂5.0g，tid po，共三个月。治疗结束后复查胃镜和组织学检查，比较两组逆转效果。结果：治疗组临床总有效率为86.2％（25／29）显著高于对照组的55．2％（16/20）（P〈0．05）。结论：根除Hp加服养胃冲剂的逆转率明显优于单用养胃冲剂组。     

胃癌细胞-树突状细胞融合疫苗抗肿瘤效应的实验研究

[目的]研究胃癌细胞-树突状细胞(DC)融合疫苗对严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠胃癌模型的抗肿瘤效应.[方法]聚乙二醇法诱导胃癌细胞BGC-823与成熟DC融合制备疫苗,将SCID小鼠胃癌模型随机均分为4组:BGC-823/DC融合疫苗组、BGC-823+DC联合组、DC组和PBS组,分别皮下注射相应疫苗、细胞或试剂,检测小鼠脾脏细胞毒性T淋巴细胞(CTL)活性、皮下移植瘤体积、核因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达和癌细胞侵袭能力即穿膜细胞数.[结果]CTL活性在融合疫苗组、联合组、DC组及PBS组分别为(39.40±3.38)％、(18.07±1.49)％、(14.07±1.32)％、(10.70±1.11)％;移植瘤体积在以上四组分别为(165.03±30.96)mm3、(767.65±118.81)mm3、(1025.16±80.90)mm3、(1314.99士74.03)mm3:NF-κB表达分别为20.0％、70.0％、90.0％、100.0％;MMP-9表达分别为50.0％、80.0％、90.0％、90.0％;穿膜细胞数分别为15.17±4.67,39.73±6.09、59.36±13.87、90.86±4.97.融合疫苗组各检测指标与其他组比较均有显著差异(P＜0.05).[结论]融合疫苗能有效诱导CTL活化、下调NF-κB、MMP-9表达及癌细胞侵袭能力,产生特异性抗肿瘤免疫.     

护士长管理素质与护士工作压力相关性的调查与分析

目的 :探讨病房护士长的管理素质与护士工作压力的相关性。方法 :采用问卷调查法对 12 5名护士进行调查 ,调查结果用相关性分析进行统计学处理。结果 :护士长的管理素质与护士工作压力呈负相关。结论 :病房管理者只有努力提高自身的管理素质才能相应地减轻护士的工作压力     

老年脓毒血症患者胆碱酯酶水平与病情及预后的关系

目的探讨脓毒血症患者胆碱酯酶水平与患者病情及预后的关系。方法 2007年6月-2009年6月,将89例脓毒血症患者设定为脓毒血症组,进行血清胆碱酯酶测定及APACHEⅡ评分;另择82例健康人为正常组,测定血清胆碱酯酶值,比较两者之间差异;89例脓毒症患者按病况再分为存活组及死亡组,比较两者之间血清胆碱酯酶及APACHEⅡ评分差异。结果治疗前脓毒血症组胆碱酯酶水平明显低于正常组,有统计学意义（P〈0.01）;脓毒血症组APACHEⅡ评分与血清胆碱酯酶呈负相关;死亡组APACHEⅡ评分明显高于存活组,而血清胆碱酶低于存活组（P〈0.01）。结论胆碱酯酶同APACHEⅡ评分呈负相关,能明显反映脓毒症患者病情严重程度及预后。