平板免疫溶血试验检测大肠杆菌不耐热肠毒素的效果观察

杨正时等新近创建一种平板免疫溶血试验,用于检测大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)。为了探索其检测效果,我们于1985年对180株大肠杆菌同时采用平板免疫溶血试验、Biken试验和兔肠结扎试验检测LT,并进行比较。现报告如下。     

大肠杆菌不耐热肠毒素的粘膜免疫机理

大肠杆菌不耐热肠毒素（ＬＴ）是由Ａ、Ｂ两种亚单位组成的ＡＢ５型蛋白，其中Ａ亚单位具有ＡＤＰ－核糖基化活性，Ｂ亚单位具有与肠粘膜上皮细胞膜上的神经节苷脂结合的作用。它能引起人和猪等动物的腹泻。另外，它还是强有力的粘膜免疫原和粘膜免疫佐剂。了解其粘膜免疫机理，对于发展ＥＴＥＣ菌苗和粘膜免疫佐剂具有重要意义。本文分别从ＬＴ的粘膜免疫原性和佐剂效应两方面对其粘膜免疫机理作一讨论。     

产毒性大肠杆菌不耐热和耐热肠毒素基因克隆及序列分析

目的:用基因工程方法克隆产毒性大肠杆菌(ETEC)不耐热肠毒素(LT)和耐热肠毒素(ST)基因,以制备检测ETEC的单克隆抗体.方法:利用PCR技术扩增LT和ST基因并将它们插入T-easy载体中,采用全自动测序仪进行核苷酸序列分析.结果:DNA序列分析表明,克隆的ETEC-LT-B DNA序列与GenBank公布序列比较在17、69、101、102位点有碱基变异,同源性98.9%;ETEC-STDNA序列与GenBank公布序列一致.结论:成功获得正确的ETEC的LT和ST基因,为其重组表达及后续研究奠定了实验基础.     

产毒性大肠杆菌不耐热和耐热肠毒素基因克隆及序列分析

目的：用基因工程方法克隆产毒性大肠杆菌（ETEC）不耐热肠毒素（LT）和耐热肠毒素（ST）基因,以制备检测ETEC的单克隆抗体.方法：利用PCR技术扩增LT和ST基因并将它们插入T-easy载体中,采用全自动测序仪进行核苷酸序列分析.结果：DNA序列分析表明,克隆的ETEC-LT-B DNA序列与GenBank公布序列比较在17、69、101、102位点有碱基变异,同源性98.9%;ETEC-STDNA序列与GenBank公布序列一致.结论：成功获得正确的ETEC的LT和ST基因,为其重组表达及后续研究奠定了实验基础.     

检测产毒性大肠杆菌耐热肠毒素三种方法的比较

产毒性大肠杆菌是发展中国家引起肠胃炎及引起旅行者腹泻的最常见的病原菌。它亦可引起发展中国家腹泻病的暴发。该菌可产生1或两种肠毒素,即耐热肠毒素(ST)与不耐热肠毒素(LT)。其中与人类疾病最密切有关的ST是STa。乳鼠试验是检测STa的标准方法。但不适宜于大规模的研究。近几年来,DNA重组和合成的寡核苷酸探针已经制成。酶联免疫法亦己应用于STa的检测。本文将上述三种试验方法进行了比较。从183例3岁以下腹泻患儿但无其它肠道病原菌的粪便标本中分离细菌。选取在麦康凯平板上疑似大肠杆菌者进行生化检查。     

酶免疫法(ELISA)快速检测大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)

<正> 产毒大肠杆菌(ETEC)是致婴幼儿腹泻的重要病原菌,在小儿腹泻病原中检出率高达26.5％。ETEC产生不耐热(LT)和耐热性(ST)两种肠毒素。检测LT有动物试验、细胞培养和免疫血清学方法,其中多数方法需要特殊的仪器设备和试验动物,难以在基层医疗单位普遍推广使用。我们用双抗体夹心ELISA法对403株大肠杆菌和30     

卵黄IT抗毒素亲和层析纯化大肠杆菌不耐热肠毒素

大肠杆菌不耐热毒素(Escherichia coli heat-labileenteratoxintoxin,LT)是产毒性大肠杆菌(ETEC)感染人畜引起急性腹泻的主要毒素之一,关于它的提纯方法有不少报[1-3],一般采用沉淀、超滤、浓缩、凝胶层析,离子交换层析及超速离心等多种技术联合使用.     

大肠杆菌不耐热肠毒素的粘膜免疫原性(英)

大肠杆菌不耐热肠毒素（LT）是一种有效的粘膜免疫原，口服或鼻内接种后可诱导高分泌性和全身性抗体应答。此外，LT在抗其他共服抗原的抗体应答中起到佐剂作用。为了研究LT亚单位的粘膜免疫原性和佐剂作用，作者从超量产生的大肠杆菌培养基中分别克隆和提纯LT全毒素和无毒性B亚单位（LTB），并分别用重组 LT、LTB及两者混合物鼻内免疫小鼠，检测它们诱导血清LTB特异性IgG、IgA和粘膜S-IgA的能力。     

抗产肠毒素性大肠杆菌的耐热和不耐热肠毒素交联菌苗的研制

作者用碳化二亚胺使耐热(ST)和不耐热(LT)肠毒素结合的方法,研制 ST 和 LT 毒素交联菌苗,这种菌苗对产生 LT 或 ST 肠毒素的不同血清型的大肠杆菌都有防御作用。用 Clements 等方法从大肠杆菌711株提取纯化的 LT 全毒素,用 Staples 等方法提     

用简易的琼脂糖凝胶电泳提纯和分离致病性大肠杆菌不耐热肠毒素

大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)的提纯和分离沿用超声破碎、凝胶层析等方法。这些方法手续繁琐,需要一定的仪器设备,收获率也不高。本文作者改用琼脂糖电泳技术,不但方法新颖、简易、收获率高,而且能将 LT 分成两个纯的具有毒性的成分(T_1和 T_2)。     

产毒大肠杆菌不耐热肠毒素单克隆抗体的临床应用研究

<正> 产毒大肠杆菌(ETEC)产生不耐热(LT)和耐热(ST)两种肠毒素,是引起小儿腹泻的重要病原菌。近年来,用免疫学方法检测大肠杆菌LT有很大发展,但这些方法均需应用抗-LT血清。由于LT提纯复杂,大批量生产抗-LT血清还存在一定困难。为了解决这个问题,我们对解放军302医院研制的抗人源产毒大肠杆菌LT单克隆抗     

霍乱毒素单克隆抗体与大肠杆菌不耐热肠毒素的交叉反应

作者用纯化霍乱毒素(CT)以两种方案分别免疫纯系8～14周龄BALB/c雄性或雌性小鼠:(1)首先用1μg CT静脉注射,然后每次间隔2周,用2、5、5、5和10μgCT注射,再隔3周,用5μg CT连续2天作静脉加强免疫。2天后杀鼠取脾,制备脾细胞悬液;(2)首先腹腔内注射CT 2μg(含于0.5ml弗氏完全佐剂中),3周后,腹腔注射     

霍乱毒素与大肠杆菌不耐热肠毒素之间的免疫学关系

作者用人大肠杆菌286C_2株的不耐热肠毒素(LT)、霍乱毒素(CT)以及两种肠毒素A、B亚单位的六种相应抗血清检测LT与CT之间的抗原关系。免疫双扩散试验表明:两种肠毒素的A亚单位之间和B亚单位之间与羊抗CT血清形成的沉淀线部分相连,说明抗原性部分相同;而兔抗LT-A和LT-B血清只与同源亚     

用霍乱肠毒素和大肠杆菌不耐热肠毒素的特异性抗体作ELISA鉴别两种毒素

本文介绍了用两种酶联免疫吸附试验(ELISA)和家兔肠袢试验检测和鉴别霍乱弧菌肠毒素(CT)和产肠毒素性(ET)大肠杆菌不耐热肠毒素(LT).用免疫亲和柱层析法分别分离抗-CT和抗-LT单价特异性抗体以及抗CT和LT的共同抗体,用这些抗体建立了以下两种ELISA     

从两株大肠杆菌分离的不耐热肠毒素的免疫和理化特性

本文比较了从两株大肠杆菌(人型 H10407株和猪型711株)提纯的肠毒素(LT)的亚单位结构和免疫学的相互关系,作者还进行了 LT 质粒的株间转移试验;即将H10407株的 LT 质粒转移到711株上,从而使一个菌株能同时表达两种质粒的特性。     

耐热肠毒素试验检测产毒性大肠菌的体会

目前 ,我们在检测产毒素大肠埃希氏菌时 ,除血清学测验外主要是测定其肠毒素来证实。测定方法甚多 ,我国目前在测定LT(不耐热肠毒素 )时多采用双向琼脂扩散试验 ,测定ST(耐热肠毒素 )时多采用乳鼠灌胃试验。1　材料与方法1 1　材料　乳鼠 :分别按不同批次购于贵阳医学院动物室和省防疫站动物室 ,前者健康 4日龄小白鼠9只 ,2日龄 5只 ,共 1 4只 ;后者 3日龄 9只 ,4日龄5只的健康大白鼠。Honde氏产毒性肉汤培养基 :按何晓青主编卫生防疫细菌检验中的配方配制。菌株来源 :来源于一起食物中毒标本分离的产毒性大肠菌 (经血清学及生化学反应证…     

检测大肠杆菌肠毒素的小白鼠肠袢试验

本文介绍了小鼠肠袢试验的具体方法,并对小鼠肠袢试验的可靠性作了一些研究。本试验设有同体对照,以积液比值≥10作为肠毒素阳性反应的判断标准,经果明确。用标准产毒大肠杆菌和非产毒大肠杆菌,与乳鼠法和家兔法作了对比性实验,结果基本一致。它既可代替乳鼠法检测大肠杆菌耐热性肠毒素(ST),又可代替家兔法检测大肠杆菌不耐热性肠毒素(LT),手续简单。用此法检测了119株从腹泻患儿分离的大肠杆菌的肠毒素,检出产毒大肠杆菌59株,阳性检出率为49.6%。本试验保留了家兔肠袢试验的直接性和可靠性,但更经济、简便,可以满足较大数量的临床病例的检测和研究工作的需要。     

大肠杆菌不耐热肠毒素突变体可作为鼻腔免疫流感疫苗的佐剂

作者使用定点突变的大肠杆菌不耐热肠毒素(LT)作为佐剂,与流感病毒血凝素(HA)疫苗一起经鼻腔接种小鼠,对其免疫效果及安全性进行了探讨.取6～8周龄雌性BALB/c小鼠为免疫对象,HA疫苗由流感病毒PR8(H1N1)制备.用定点诱变方法替换Al亚单位上某一氨基酸,得到LT7K、LT61F、LT112K、     

产不耐热肠毒素大肠杆菌所致夏季婴幼儿腹泻的临床观察

1968年 Gorback 及 Sack 自霍乱样腹泻病人的粪便中分离出产肠毒素大肠杆菌 ETEC(Entero-toxigenic Escherichia Coli)后,国外对 ETEC的研究及报告较多。Sack 认为,ETEC 是发展中国家小儿急性腹泻的常见病因,是发达国家婴幼     

以CpG DNA和/或大肠杆菌不耐热肠毒素突变体为佐剂粘膜免疫小鼠

霍乱毒素 (ＣＴ)和大肠杆菌不耐热肠毒素 (ＬＴ)均为粘膜佐剂 ,可诱导动物体内的环腺苷酸 (ｃＡＭＰ)。但毒性阻碍了其在人体的应用 ,目前已经研制了多种不同的ＣＴ和ＬＴ亚单位或基因脱毒突变体。可在粘膜表面产生佐剂效果的另一类型的佐剂是含免疫刺激ＣｐＧ基元的合成寡脱氧核苷酸 (ＯＤＮ)。以往研究证实 ,小鼠鼻内 (ＩＮ)免疫ＣｐＧＯＤＮ和天然毒素后 ,两佐剂间存在协同作用 ,为此作者进一步研究这种协同作用是否与ｃＡＭＰ活性疫 1 0 μｇ单纯的破伤风类毒素 (ＴＴ)或乙型肝炎表面抗原 (ＨＢｓＡｇ) ,或加入 1 μｇ或 1 0 μｇＣｐＧ…