调神益气针法对睡眠剥夺大鼠ADMA/DDAH/NO途径及认知障碍的影响

目的:从非对称性二甲基精氨酸/二甲基精氨酸二甲胺水解酶/一氧化氮(asymmetric dimethylarginine/dimethylarginine dimethylaminohydrolase/nitric oxide,ADMA/DDAH/NO)途径探究调神益气针法对睡眠剥夺大鼠认知障碍的影响.方法:制备大鼠睡...     

氧化苦参碱抑制异丙肾上腺素诱导大鼠慢性心力衰竭及对ADMA代谢通路的影响

目的：探讨氧化苦参碱抑制异丙肾上腺素（ISO）诱导大鼠慢性心力衰竭及其对非对称二甲基精氨酸（ADMA）代谢通路的影响。 方法：雄性Sprague-Dawley大鼠,皮下注射ISO 5 mg·kg^-1·d^-1,连续给药7 d诱发大鼠慢性心力衰竭。氧化苦参碱（100,50 mg·kg^-1）于ISO注射前7 d灌胃给药,共14 d。检测血清学指标、心功能血流动力学参数、心脏质量,并观察心肌组织病理变化,同时采用Western blotting法测定相关蛋白的表达。 结果：氧化苦参碱（100,50 mg·kg^-1）可显著降低ISO诱导的心力衰竭大鼠升高的血清心肌肌钙蛋白I（cTn I）水平,改善左心室收缩和舒张功能及左心室重构,显著减轻ISO致大鼠心肌的病理学改变。还可降低ISO诱导心力衰竭大鼠血清ADMA含量（P<0.01）,增加心室肌组织中二甲基二甲胺水解酶2（DDAH2）蛋白的表达（P<0.01）,但对ISO诱导升高的蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）无影响。 结论：氧化苦参碱可改善ISO诱导的慢性心力衰竭大鼠的心功能,抑制心室重构,其作用机制与降低血清ADMA水平和增高心肌组织DDAH2表达水平有关。     

虎杖苷对ADMA作用的正常兔主动脉血管条内皮功能的影响

目的 研究虎杖苷(PD)与非对称性二甲基精氨酸(ADMA)对正常兔主动脉血管条内皮功能的影响及PD与ADMA之间的相互作用。方法 通过绘制主动脉条在ADMA与PD分别作用和共同作用时对苯肾上腺素(PE)的收缩量一效曲线，计算并比较Emax和Kd值。结果正常主动脉条对ADMA无反应，PD或ADMA预处理后亦不影响其对PE的收缩反应。但PD使受ADMA预处理的主动脉条对PE的收缩反应呈剂量依赖性减弱,并引起Kd值增大、Emax减小。结论 ADMA或PD单独作用并不影响正常主动脉条的收缩功能及PE对α-受体的亲和力和Emax；但在ADMA存在时,PD能非竞争性拮抗主动脉条对PE的收缩反应。     

甲基莲心碱对LPC诱导内皮细胞损伤的保护作用及与ADMA的关系

目的：观察甲基莲心碱对溶血性磷脂酰胆碱（1ysophosphatidylcholine，LPC）诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及其与非对称性二甲基精氨酸（asymmetricdimethylarginine，ADMA）的关系。方法：10mg&#183;L^-1的LPC孵育人脐静脉内皮细胞株（HUVEC-12）24h或0．1，1．0，10．0μmol&#183;L^-1甲基莲心碱预处理HUVEC-12细胞1h，再予LPC孵育细胞24h，收集细胞上清液测定-氧化氮（NO）、丙二醛（MDA），ADMA含量和收集细胞测定细胞内活性氧（ROS）水平。结果：LPC孵育HUVEC-12细胞24h后细胞上清液中MDA，ADMA含量及细胞内ROS水平显著性增加（P〈0．05），细胞上清液中N0含量显著性降低（P〈0．05）；0．1，1．0，10．0μmol&#183;L^-1的甲基莲心碱预处理组ROS水平，MDA，ADMA含量显著降低，NO含量显著性升高（P〈0．05）。结论：甲基莲心碱对LPC诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用，该作用可能与其降低ADMA水平有关。     

甲基莲心碱对LPC诱导内皮细胞损伤的 保护作用及与ADMA的关系

目的：观察甲基莲心碱对溶血性磷脂酰胆碱(lysophosphatidylcholine, LPC)诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及其与非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine, ADMA)的关系。方法：10 mg·L-1的LPC孵育人脐静脉内皮细胞株(HUVEC-12)24 h或0.1，1.0，10.0 μmol·L-1甲基莲心碱预处理HUVEC-12细胞1 h，再予LPC孵育细胞24 h，收集细胞上清液测定一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)，ADMA含量和收集细胞测定细胞内活性氧(ROS)水平。结果：LPC孵育HUVEC-12细胞24 h后细胞上清液中MDA，ADMA含量及细胞内ROS水平显著性增加(P<0.05)，细胞上清液中NO含量显著性降低(P<0.05)；0.1，1.0，10.0 μmol·L-1的甲基莲心碱预处理组ROS水平，MDA，ADMA含量显著降低，NO含量显著性升高(P<0.05)。结论：甲基莲心碱对LPC诱导的血管内皮细胞损伤有保护作用，该作用可能与其降低ADMA水平有关。     

血府逐瘀汤对动脉粥样硬化家兔血清非对称性二甲基精氨酸水平的影响

目的:观察血府逐瘀汤对动脉粥样硬化家兔血清非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)的影响,并探讨血府逐瘀汤抗动脉粥样硬化的机制.方法:24只雄性日本大耳家兔,随机分为3组(每组8只):正常组喂饲普通饲料;模型组喂饲高胆固醇高脂饲料100 g;血府逐瘀汤组在造模同时,灌胃给血府逐瘀汤7.10 g·kg~(-1)(含生药),每天1次.喂养8周后,测定家兔血清甘油三脂(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL)、血清ADMA和血清一氧化氮(NO)的浓度;取兔主动脉制成切片在光学显微镜下观察病理改变,并应用Optimas显微图像分析系统,测主动脉粥样硬化斑块灰度及斑块面积.结果:模型组家兔主动脉粥样硬化斑块灰度(198.91±5.08)及斑块面积(4.80±0.83)mm~2,均显著高于血府逐瘀汤组家兔斑块灰度(175.56±12.30)及斑块面积(1.96±0.48)mm~2(P<0.01),正常组家兔主动脉无动脉粥样硬化斑块形成.模型组家兔血清TC(23.42±7.80)mmol·L~(-1),TG(2.37±0.42)mmol·L~(-1),LDL(17.24±8.29)mmol· L~(-1)明显高于血府逐瘀汤组TC(15.63±4.12)mmol·L~(-1),TG(1.43±0.34)mmol·L~(-1),LDL(7.64±2.36)mmol·L~(-1)(均P<0.01).血府逐瘀汤组家兔血清TC,LDL明显高于正常组TC(P<0.01),而血府逐瘀汤组家兔血清TG与正常组TG无明显差异.模型组家兔血清ADMA水平(1.57±0.17)μmol·L~(-1)明显高于血府逐瘀汤组(1.01±0.13)μmol·L~(-1)(P<0.01),而NO水平(8.76±2.42)μmol·L~(-1)明显低于血府逐瘀汤组(15.90±2.38)μmol·L~(-1)(P<0.01).血府逐瘀汤组家兔血清ADMA及NO水平与正常组ADMA及NO水平无明显差别.家兔血清ADMA与NO水平呈负相关关系(r=-0.773,P<0.01).结论:血府逐瘀汤可以降低动脉粥样硬化家兔血清ADMA水平,降低血清ADMA水平可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一.     

温和灸对高脂血症合并动脉硬化患者ADMA、NO的影响

目的观察温和灸在降血脂、抗动脉硬化的同时是否影响不对称二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)。方法采用病例序列研究,连续纳入符合高脂血症、动脉硬化标准的17例患者。温和灸神阙与双侧足三里,每穴施灸10 min,隔日1次。治疗前和治疗6星期、12星期时分别检测血清ADMA和NO水平。结果 17例患者中,治疗前ADMA(35.41±12.68)?mol/L,治疗6星期时(29.57±12.12)?mol/L,较治疗前下降(P0.01),治疗12星期时(23.01±7.0)?mol/L,较治疗前下降(P0.01),较治疗6星期时下降(P0.05);NO治疗前水平(69.80±36.66)?mol/L,治疗6星期(64.97±44.87)?mol/L,治疗12星期(36.48±27.87)?mol/L,较治疗前下降(P0.01)。结论温和灸可显著下降高脂血症合并动脉硬化患者血清ADMA和NO水平。     

补肾化痰方对肥胖型多囊卵巢综合征患者血清ADMA和hsCRP的影响

目的观察补肾化痰方对肥胖型多囊卵巢综合征患者血清非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)、超敏C-反应蛋白(hysensitive C-reactive protein,hs CRP)的影响。方法按照完全随机化原则取补肾化痰方治疗组和苍附导痰方对照组各30例,在规定时间内测定血清ADMA、hs CRP、空腹血糖、血清胰岛素、性激素水平。结果治疗后两组性激素较治疗前均有改善(P0.05);在降低血清ADMA、hs CRP水平和降低胰岛素抵抗指数方面,对照组较治疗前有改善(P0.05),治疗组较治疗前有明显改善(P0.01);且各项指标改善情况治疗组均优于对照组(P0.05)。结论 "补肾化痰方"既可以改善肥胖型多囊卵巢综合征患者临床症状,改善内分泌环境,又可以降低远期并发症的危险因子。     

编码大鼠PRMT1基因shRNA质粒的构建和鉴定

目的研究蛋白精氨酸甲基转移酶1（PRMT1）基因表达的改变与血管内皮功能及动脉粥样硬化的关系。方法构建PRMT1短发夹RNA（shRNA）质粒。在GenBank中查到犬鼠PRMT1基因mRNA序列并输入siRNA网上设计软件OptiRNA中，选取两条靶序列，设计并合成编码shRNA序列的DNA单链，经退火连接后，与双酶切线性化处理回收的pGenesil-1质粒载体连接，用含卡那霉素抗性的LB平板筛选阳性克隆，小提质粒后行酶切鉴定并测序。结果构建的大鼠PRMT1-shRNA质粒经酶切鉴定及测序与预期相符。结论本研究结果为进一步研究基因干扰PRMT1基因对血浆同型半胱氨酸（Hcy）、非对称性二甲基精氨酸（ADMA）水平及血管内皮功能的影响奠定了基础。     

姜黄素对动脉粥样硬化家兔血管内皮功能的影响

目的: 观察姜黄素对实验性动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)家兔血浆一氧化氮(NO)水平,结构型一氧化氮合酶(constitutive NOS, cNOS)活性和非对称性二甲基精氨酸(asymmetric dimethylarginine,ADMA)的影响,探讨姜黄素抗AS作用及与ADMA的相关性. 方法: 38只雄性日本大耳白兔随机分为4组,即对照组(8只,喂食普通饲料)、模型组(10只,喂食高脂饲料)、低剂量姜黄素组(10只,喂食高脂饲料+100 mg·kg^-1·d^-1姜黄素)和高剂量姜黄素组(10只,喂食高脂饲料+200 mg·kg^-1·d^-1姜黄素).于实验的第12周末测定血浆TC,LDL-C,NO,内皮素(endothelin,ET),ADMA水平,主动脉组织cNOS活力,同时留取主动脉组织行病理检查. 结果: 喂食高脂饲料的3组较对照组家兔血浆ADMA和ET水平浓度均有升高(P<0.01),血浆NO浓度、动脉组织cNOS活性降低(P<0.01).姜黄素组家兔血浆ADMA和ET水平较模型组低(P<0.05),血浆NO浓度、动脉组织cNOS活性则要高出于模型组(P<0.01),2个姜黄素组之间未见显著性差异. 结论: 姜黄素有可能通过降低血浆ADMA水平,在AS进程中发挥重要的内皮保护作用.     

葛根素对氧自由基培养的脐静脉内皮细胞ADMA-DDAH系统的影响

目的 观察葛根素对氧自由基（oxidized free radical,OFR）培养的人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells,HUVECs）二甲基精氨酸-二甲基赖氨酸水解酶（dimethylarginine dimethylaminohydrolase,DDAH）活性及表达的影响,以探讨葛根素对不对称二甲精氨酸（ADMA）代谢机制的影响。方法 采用改良的Jaffe法培养原代HUVECs,取生长良好的3～6代HUVECs用于实验,分为（1）空白对照组：加DMEM培养液;（2）OFR组：加入OFR0．1mmol／L;（3）葛根素Ⅰ组：加0．1mmol／LOFR及0．5mg／ml葛根素;（4）葛根素Ⅱ组：加0．1mmol／LOFR和1．0mg／ml葛根素。共孵24h后,检测上清液中NO、NOS活性、ET、ADMA含量、L-胍氨酸（L—cit）浓度,采用Western blotting测定细胞裂解液中DDAH的蛋白表达。结果 OFR条件培养下,内皮细胞的代谢产物ADMA、ET含量均较空白对照组高,而NO及NOS的活性减少;反应DDAH酶活性的L—cit浓度显著降低,而DDAH的表达无明显变化。葛根素干预后,ADMA、ET含量较OFR组降低,NOS活性及NO增加,L-cit浓度明显升高。结论 OFR培养下,内皮损伤ADMA的增加与DDAH的活性减弱有关,而与DDAH的表达无关。葛根素通过增加DDAH活性促进ADMA代谢,使NOS活性增加,抑制OFR对内皮功能的损伤。     

枸杞色素抑制脂多糖致大鼠葡萄膜炎作用与机制的研究

目的:探讨枸杞色素(lycium pigment)抑制脂多糖(LPS)致大鼠葡萄膜炎的作用及其机制.方法:枸杞色素(50,100,200 mg·kg-1)灌胃给药30 d后,足跖注射LPS建立大鼠葡萄膜炎模型.眼组织进行病理学检测;房水蛋白、一氧化氮和非对称性二甲基精氨酸(ADMA),眼组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)以及血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和脂质过氧化物丙二醛(MDA)分别采用Western blot、酶联免疫(ELISA)和生物化学等方法进行测定.结果:病理学研究显示,枸杞色素(50,100,200 mg·kg-1)显著降低LPS诱导的葡萄膜炎大鼠睫状体基质附近炎性细胞浸润渗出;降低眼内房水蛋白和一氧化氮生成的增多,并提高ADMA产生的减少.枸杞色素(100,200 mg·kg-1)显著抑制LPS诱导葡萄膜炎大鼠眼组织iNOS表达的增加.此外,枸杞色素(100,200 mg·kg-1)还可提高LPS诱导的葡萄膜炎大鼠血清T-AOC,SOD和GSH-PX活力的降低,并相应降低脂质过氧化物MDA的含量.结论:枸杞色素对LPS所致大鼠葡萄膜炎具有抑制作用,其机制与调控眼部一氧化氮/ADMA的水平和提高机体抗氧化能力有关.     

针刺对高脂大鼠主动脉NO和NOS的影响

目的:为了观察高脂饮食对SD大鼠空腹血脂和主动脉NOS系统的影响以及针刺对高脂饮食大鼠主动脉NOS系统的效应。方法:17只SD大鼠喂以高脂饮食12周后检测空腹血脂、NO和MPO,按体重随机分为模型组(8只)和针刺组(9只),干预4周后检测主动脉NO、tNOS、iNOS和cNOS,并设普食对照组(9只)。结果:喂以高脂饮食12周后,高脂饮食大鼠空腹TG、TC和MPO明显高于普通饲料组,LDL-C高于对照组但无统计学意义,NO明显低于对照组。干预4周后,3组之间tNOS未见明显差异;模型组主动脉NO和cNOS明显低于对照组,iNOS有所升高但无统计学意义;针刺组NO和cNOS明显高于模型组。结论:高脂饮食造成了SD大鼠的高脂血症,增加了机体氧化应激水平;针刺对高脂饮食大鼠主动脉NOS系统具有良性调节作用。     

预适应对肢体缺血再灌注后血浆和肺组织NO/ET-1的影响

目的:观察肢体缺血预适应对大鼠肢体缺血再灌注后血浆和肺组织NO/ET-1比值的影响。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为对照组(C),肢体缺血再灌注组(LIR),缺血预适应组(IPC),每组8只。分别测定血浆及肺组织一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)含量,计算NO/ET-1比值。结果:LIR组血浆及肺组织的NO/ET-1比值明显减小;与LIR组比较,IPC组血浆及肺组织的NO/ET-1比值明显增大,差异均具有显著性。结论:缺血预适应可以调节肢体缺血再灌注后NO/ET-1比值失平衡而使组织损伤减轻。     

固通结合针刺对高脂血症血清NO NOS的影响

目的 :观察“固通结合”针刺取穴对高脂血症患者血清一氧化氮 (NO)、一氧化氮合酶 (NOS)等的影响。方法 :将 4 5例患者随机分为 3组 (均嘱予低脂饮食 ) :药物组、针刺组和对照组。入院次日测血脂 (TC、TG、HDL、LDL)、NO、NOS ,并计算致动脉粥样硬化指数 (AI:ApoB/ApoAⅠ )。治疗后复查上述各项指标。结果 :针刺组与药物组对脂类代谢有不同程度的改善 ,组间无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;针刺组与药物组血清NO、NOS在原低水平上有不同程度的升高 ,两组间比较 ,针刺组效果更好 (P <0 0 5 )。结论 :针刺调整脂类代谢疗效确切 ,其作用机制可能与提高高脂血症患者血NO、NOS有关。     

羟乙葛根素对大鼠脑缺血再灌注损伤一氧化氮和一氧化氮合酶的影响

 目的研究异黄酮类化合物羟乙葛根素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织一氧化氮(NO)含量和一氧化氮合酶 (NOS)活性的影响,为羟乙葛根素用于治疗缺血性脑血管病提供实验资料。方法雄性Wistar大鼠60只,随机分为假手术组; 缺血再灌注组;尼莫地平0.4 mg·kg^-1·d^-1组;羟乙葛根素30,60,120mg·kg^-1·d^-1组。以大脑中动脉栓线阻断法(MCAO)制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,以硝酸还原酶法测定脑组织中的NO水平,以化学比色法测定总NOS活性,并测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活力,观察羟乙葛根素对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO水平和NOS活性的影响,并探讨可能的作用机制。结果大鼠脑缺血1 h,再灌注48h后,脑组织中NO水平显著升高,总NOS和iNOS活性显著增加。羟乙葛根素30,60, 120 mg·kg^-1·d^-1均可显著降低缺血再灌注损伤大鼠脑组织NO含量和总NOS,iNOS活力。结论羟乙葛根素可能通过降低 NO对脑缺血再灌注损伤后的神经毒性作用而发挥保护缺血性脑损伤的作用。