大鼠脊髓损伤后肾上腺髓质素的mRNA表达

目的;观察大鼠正常及损伤脊髓组织中肾上腺髓质素ｍＲＮＡ的表达。方法;采用原位组织化学杂交技术,对正常及损伤脊髓组织中ＡＭ ｒＲＮＡ的表达进行组织定位,并采用计算机图像分析技术,进行定量分析。结果：正常大鼠脊髓组织即有大量ＡＭｍＲＮＡ表达。损伤后３０ｍｉｎ表达量增加,８ｈ达高峰,２４ｈ后逐渐减少,７２ｈ低于正常组。     

肾上腺髓质素在大鼠急性脊髓损伤中的表达及其意义

目的 观察肾上腺髓质素(AM)在大鼠损伤脊髓中的表达及甲基强的松龙(MP)干预对AM表达的影响,并探讨脊髓损伤的保护作用机制.方法 Allen's WD法制成大鼠急性脊髓损伤模型.免疫组化观察脊髓损伤后AM表达的变化;HE染色观察脊髓损伤情况.观察MP干预对脊髓损伤后AM表达、神经功能和组织学的影响.设假手术组、脊髓损伤非MP干预组(非干预组)作为对照.结果 免疫组化各组中均有AM的表达,其中假手术组AM持续低表达;MP组及非干预组AM表达增高,8h均达峰值,以后渐低,但伤后3d仍高于假手术组(P＜0.05);MP组AM表达于伤后8 h、1 d、2 d、3 d高于非干预组(P＜0.05),3组间在伤后2 h、6d时差异无显著性(P＞0.05).形态学显示假手术组无明显异常,MP组病理变化轻于非干预组.假手术组神经功能评分均高于非干预组和MP组(P＜0.01),MP组伤后3 d,6 d的神经功能评分高于非干预组(P＜0.05).结论 AM表达增高可能是脊髓损伤自身保护机制之一.通过药物上调AM的表达可起到保护脊髓的作用,这为AM治疗脊髓损伤的临床应用提供了实验依据.     

甲基强的松龙对大鼠脊髓损伤组织中肾上腺髓质素表达的影响

目的:观察甲基强的松龙(MP)对大鼠脊髓损伤(SCI)组织中肾上腺髓质素(AM)表达的干预作用.方法:SD大鼠108只随机分为假手术组、MP干预组(MP组)和脊髓损伤组(SCI组),每组36只.假手术组只切除椎板不损伤脊髓,MP组和SCI组采用Allen WD法制作大鼠急性脊髓损伤模型,并于术后1 h经尾静脉分别给予50mg/kg MP和等量生理盐水.于术后2 h、8 h、1 d、2 d、3 d、6 d取骨髓组织(每个时点6只大鼠),HE染色观察脊髓损伤情况,免疫组化染色观察AM的表达,并于术后1 d、3 d、6 d行运动功能评定.结果:HE染色,假手术组各时间点无明显异常,MP组病理变化轻于SCI组.免疫组化染色,假手术组中AM低表达,SCI组AM表达增高并于术后8 h达峰值,以后逐渐降低(P＜0.01),MP组AM的表达在术后8 h、1 d、2 d、3 d均高于SCI组,差异有统计学意义(P＜0.05).运动功能评分:假手术组1 d、3 d、6 d均高于MP、SCI组,MP组在术后3 d、6 d高于SCI组,P均＜0.01.结论:急性脊髓损伤后AM表达代偿性增高并存在动态变化,MP干预可上调AM的表达从而减轻脊髓的继发性损伤.     

脊髓损伤后肾上腺髓质素表达水平的变化

目的：观察肾上腺髓质素在大鼠正常及损伤脊髓组织中mRNA及蛋白表达的变化。方法：采用原位组织化学杂交、放免、计算机图象分析技术，对肾上腺髓质素在正常及损伤脊髓组织中mRNA及蛋白的表达，进行组织定位和定量分析。结果：在正常大鼠脊髓组织中即有大量肾上腺髓质素mRNA及蛋白表达，在损伤后30min表达量增加，8h达高峰，阳性细胞主要分布于灰质前角。结论：鼠脊髓损伤后肾上腺髓质素在脊髓中的含量有明显变化，提示其可能在继发损伤期中发挥了重要作用。     

肾上腺髓质素的分子生物学意义及对肾脏损伤的影响

0 引言 肾上腺髓质素(adrenomedullin,ADM)是一种从人嗜铬细胞瘤组织中分离纯化出的多肽,它在正常肾上腺髓质及源于肾上腺髓质的嗜铬细胞瘤中含量丰富.近年来发现ADM在肾脏功能调节方面起着重要作用,现对ADM的生物学特性、生物学作用及其对肾脏的作用进行概述.     

肾上腺髓质素的研究进展

肾上腺髓质素 (ａｄｒｅｎｏｍｅｄｕｌｌｉｎ -ＡＤＭ )是一种在体内分布广泛的内源性血管活性肽[1] ,如肺、肾脏、血管和脑等部位 ,具有广泛的生物学特性 ,参与调节机体多种生理和病理活动。1　ＡＤＭ的形成、来源ＡＤＭ是日本学者Ｋｉａｍｕｒａ等 1893年首次从人嗜铬细胞瘤组织中分离提纯的含 5 2个氨基酸的新肽[2 ] ,分子内有一个二硫键 ,分别连接第 16位和第 2 1位上的两个半胱氨酸 ,形成一个环状结构[3 ,4] 。实验观察人类肾上腺动脉、静脉血浆中ＡＤＭ并不明显升高 ,说明人类肾上腺髓质可能不是ＡＤＭ的主要来源。研究表明血管内皮…     

缺氧诱导下骨肉瘤细胞中肾上腺髓质素的表达

目的 观察MG-63骨肉瘤细胞在缺氧条件下肾上腺髓质素(ADM)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达,并分析两者的相关性.方法 将MG-63细胞分为4组:正常培养组,6 h、12 h和24 h缺氧诱导组,缺氧诱导6,12,24 h,分别应用real-time PCR法检测MG-63细胞中ADM和VEGF mRNA表达,...     

正常早期妊娠血浆和绒毛组织中肾上腺髓质素的测定

目的 :探讨肾上腺髓质素 (ADM)在正常早期妊娠中的作用。　方法 :应用放免法测定 30例正常早期妊娠和10例正常非妊娠者血浆ADM水平 ,用免疫组化和原位杂交方法检测ADM蛋白、ADM及其受体mRNA在绒毛组织中的表达。　结果 :正常早期妊娠者血浆ADM水平高于非妊娠者 (P <0 .0 5 )。正常早期妊娠绒毛组织中细胞滋养细胞和合体滋养细胞细胞质中均有ADM蛋白、ADM及其受体mRNA的表达。　结论 :血浆ADM可能参与调节人类早期妊娠母体内环境稳定 ,而绒毛组织中的ADM可能促进滋养细胞的侵袭和血管系统的建立。     

尾加压素刺激血管内皮细胞分泌肾上腺髓质素的机制

OBJECTIVE: To study the mechanism of urotensin II(U II)-stimulated adrenomedullin secretion in human vascular endothelial cells. METHODS: In cultured human vascular endothelial cells (HEVCs), different concentrations of U II was used to stimulate the secretion of Adm, and different inhibitors were used to study the changes in the secretion after block of different signal transduction pathways. The contents of Adm in the medium were detected with radioimmunoassay. RESULTS: U II-stimulated Adm secretion in the HEVCs in a time- and concentration-dependent manner. Adm contents of the treatment groups were comparable with that of the control group (P<0.05 ), and the secretion of Adm could be inhibited by the inhibitor of extracellular signal-regulated protein kinases (PD098059), p38 kinase inhibitor (SB202190), calmodulin inhibitor (W7) and Ca(2+) inhibitor (nicardipine)(P<0.05), but calcineurin inhibitor and protein kinase C inhibitor (H7) had no such effect (P>0.05). CONCLUSION: Ca(2+), MAPK, CaM-PK and p38 signal transduction pathways may play major roles in U II-stimulated secretion of Adm in HVECs.     

糖尿病大鼠血浆肾上腺髓质素的动态变化及依那普利的干预效应

OBJECTIVE: To observe the dynamic changes of plasma adrenomedullin (ADM) levels and the effect of enalapril intervention in diabetic rats. METHODS: Fifty-two wistar rats were grouped into 1- and 3-month groups (7 each), both including a control and a streptozotocin-induced diabetic group. The 5-month group was divided into control, diabetic and enalapril-treatment diabetic groups (8 each, the last group receiving oral enalapril treatment at the daily dose of 2 mg/kg from the first to the fifth month after diabetes induction). Blood samples were collected from the heart of the rats at the end of 1, 3 and 5 months for determination of plasma ADM concentrations radioimmunoassay. RESULTS: Plasma ADM levels were significantly higher in diabetic rats than in the corresponding control rats in 1- and 3-month groups. ADM levels in the diabetic rats of 5-month group were significantly decreased in comparison with that of 1- and 3-month groups. In 5-month group, plasma ADM levels of enalapril-treated diabetic rats elevated significantly in comparison with that in the control rats and the diabetic rats without enalapril treatment. CONCLUSION: ADM may play an important role in the pathophysiology of diabetes.     

重组sCR1对大鼠急性脊髓损伤组织补体表达的影响

目的探讨重组可溶性补体受体Ⅰ型(sCR1)对大鼠急性脊髓损伤组织补体表达的影响及对脊髓损伤的保护作用.方法采用改良Allen重物打击法制成SD大鼠脊髓急性损伤模型,采用斜板实验评定sCR1组与生理盐水(NS)组大鼠下肢运动神经功能,观察两组在伤后12 h,1,3,7,14 d时间点损伤组织C3c,C9及CD59阳性表达的部位及时程,并比较组间差异.结果sCR1组在伤后3,7,14 d时间点大鼠下肢运动功能明显优于NS组(分别为P＜0.05,P＜0.05,P＜0.01);sCR1组在伤后各个时间点C3c,C9阳性表达均明显轻于NS组,差异有非常显著性(P＜0.01);sCR1组在伤后12 h,1,3 d时间点CD59的表达明显轻于NS组,差异有非常显著性(P＜0.01),伤后7 d两组间差异有显著性(P＜0.05),伤后14 d两组间差异无显著性.结论重组可溶性补体受体Ⅰ型可显著减轻急性脊髓损伤组织中补体的表达,可通过抑制补体系统激活机制减轻继发性脊髓损伤.     

急性脊髓损伤后胎鼠脊髓的脊髓内移植及其影响因素

本文利用显微外科技术建立了大鼠急性脊髓损伤后胎鼠脊髓的移植方法,并用形态学技术研究了胎龄及其他因素对移植物的影响。结果表明,在E_(14)～E_(20)胎龄中,以取自E_(14)的移植物存活率最高,为70.83％。E_(16)以后,无一例移植物存活。附于移植物的结缔组织严重阻碍移植物的存活与生长。脊髓损伤及继发的病理反应也对移植物的存活与生长带来不良影响。我们认为,胚胎神经组织移植时,除注意技术操作和改善脊髓损伤外,事先确定移植物的分化程度至关重要。     

普鲁泊福对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用

目的:研究普鲁泊福对大鼠急性脊髓损伤的治疗作用及其机制.方法:SD大鼠60只,随机分为假手术组、损伤组和普鲁泊福组(n=20).采用改良的Allen's打击法致伤大鼠脊髓,假手术组仅做椎板切除术.普鲁泊福组在脊髓损伤后30 min以60 mg/(kg*h)的速度持续输注1%的普鲁泊福1 h,其余两组以相同的方法给予0.9%的生理盐水.应用斜板试验和BBB(Basso,Beattie and Bresnahan)评分法进行后肢运动功能评价,分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量变化,同时观察组织形态学变化.结果:普鲁泊福组行为学评分明显高于损伤组 (P<0.05);与假手术组相比,损伤组血浆MDA含量升高,SOD活力降低,而与损伤组相比,普鲁泊福组血浆MDA含量降低,SOD活力升高;损伤组脊髓病理变化较重,可见大量神经元坏死,普鲁泊福组神经元坏死较轻.结论:普鲁泊福对大鼠急性脊髓损伤有较好的治疗作用,其机制与抗氧化作用有关.     

强啡肽A及其受体拮抗剂对大鼠脊髓损伤后脊髓血流量的影响

目的；探讨强啡肽Ａ在脊髓损伤（ＳＣＩ）中的作用。方法，采用Ａｌｉｅｎ打击法复制大鼠ＳＣＩ模型，应用强啡肽Ａ放免检测技术和氢清除法分别测定伤段脊髓组织２４ｈ内主Ａ含量和脊髓血流量（ＳＣＢＦ）的变化，并观察脊髓蛛网膜下腔注射强啡肽Ａ及其受体拮抗剂ｎｏｒ－ＢＮＩ对ＳＣＢＦ的影响。结果；ＳＣＢＦ在伤后１０ｍｉｎ即有明显下降，２ｈ较１ｈ略有回升，４－８ｈ又进一步下降，两次下降相差显著；ＳＣＩ后脊髓蛛网膜下腔     

带血运的组织并胚胎脊髓移植对损伤脊髓的修复作用

目的 探讨带蒂的大网膜、椎旁肌并胚胎脊髓移植对损伤脊髓的修复作用。方法 采用大鼠脊髓半切洞损伤模型,将动物分为胚胎脊髓移植 大网膜组、胚胎脊髓移植 椎旁肌组、胚胎脊髓移植组、损伤对照组。移植后1、2、4、8、12周,进行HE、Nissl、嗜银染色、电镜检查和免疫细胞化学检查,观察移植存活、分化及其宿主之间的关系。结果 提供血运的胚胎脊髓移植到损伤的脊髓后,移植物膛逐渐增大,充满损伤的洞腔,并可在宿主脊髓内继续分化发育,与宿主脊髓形成部分纤维和血管联系。结论 带蒂的大网膜和胚胎脊髓组织联合移植能较好地修复损伤的脊髓。     

大黄对大鼠脊髓损伤后血-脊髓屏障的保护作用

目的 观察不同浓度大黄对大鼠脊髓损伤(SCI)后血-脊髓屏障(BSCB)的影响,筛选大黄煎药灌服的最佳浓度,拟为临床治疗SCI提供一定的依据.方法 成年健康SD大鼠125只,随机分为假手术组(Sham组)、模型组及大黄低、中、高剂量组.大黄各剂量组用大黄水溶液灌胃,其余两组用等量生理盐水.记录大鼠SCI后双后肢运动功能(BBB)评分、脊髓含水量以及荧光显微镜观察注入伊文思蓝(EB)后的BSCB情况.结果 (1)BBB评分:模型组和大黄低、中、高剂量组与Sham组比较差异均有统计学意义(P<0.05).(2)脊髓含水量的测定:模型组和大黄低、中、高剂量组与Sham组比较差异均有统计学意义(P<0.05).(3)荧光显微镜下观察到Sham组没有EB染出,模型组EB大量染出,以3 d时染出最多,大黄各剂量组EB染出较模型组有不同程度减少,以大黄中剂量组EB染出最少.结论 中剂量组大黄有效地降低了大鼠SCI后BSCB的通透性,对其保护作用最为明显.     

C3c、CD59在大鼠脊髓损伤组织中的表达及甲基强的松龙的干预作用

目的:探讨C3c、CD59在大鼠脊髓损伤组织的表达,并观察甲基强的松龙(MP)的干预作用.方法:采用改良Allen重物打击法制成SD大鼠急性脊髓损伤模型,观察MP组与生理盐水(NS)组在伤后12 h,1,3,5,7 d时间点损伤组织C3c、CD59阳性反应物的表达部位及时程,并比较两组间差异.结果:MP组与NS组脊髓损伤组织中存在C3c、CD59的阳性表达.MP组在伤后各个时间点C3c阳性表达均明显轻于NS组,有显著性差异(P＜0.01);MP组在伤后12 h(P＜0.01)、1 d(P＜0.05)、3 d(P＜0.05)时间点CD59的表达明显轻于NS组,伤后5 d,7 d时间点两组间无明显差异.结论:急性脊髓损伤组织中存在C3c、CD59的动态阳性表达,甲基强的松龙可通过抑制补体系统激活机制减轻继发性脊髓损伤.     

大鼠急性脊髓损伤后tau蛋白表达规律及意义

目的：探讨急性脊髓损伤后Wistar大鼠脊髓组织中tau蛋白动态表达规律及意义.方法：健康Wistar大鼠56只,雌雄不限随机分为两组,其中1组用改良Allen法制备成急性脊髓损伤模型,即作为手术组（48只）;另1组则作为对照组（对照组仅开椎板,不损伤大鼠脊髓组织n=8）.分别在12h、1d、3d、5d、7d、10d取出大鼠在T10及部分T9、T11椎板下的损伤脊髓组织制作蜡块并切片.采用HE染色及免疫组化法测定大鼠脊髓损伤后受损脊髓组织中tau蛋白的表达.结果：Wistar大鼠在急性脊髓损伤后,受损脊髓组织内即出现tau的阳性表达,随着时间的延长,tau蛋白的阳性表达结果逐渐增多;伤后3d阳性表达到达最大表达值,10d表达仍呈阳性且高于对照组.结论：损伤大鼠的脊髓组织后,组织中tau蛋白表达明显增加,且在不同时间点上有一定的变化关系,为急性脊髓损伤后临床的早期干预时机提供了一定的理论依据.