膀胱癌BIU-87细胞羟基喜树碱耐药的蛋白质组学研究

目的研究与膀胱癌BIU-87细胞羟基喜树碱（HCPT）耐药相关的蛋白质。方法应用二维凝胶电泳（two-dimensionalelectrophoresis，2-DE）和基质辅助激光解吸电离一串行飞行时间质谱（matrix-assistedlaserdesorption-ionizationtimeofflighttandemmassspectrometry，MALDI-TOF-TOF）寻找羟基喜树碱耐药的膀胱癌BIU-87细胞与非耐药细胞的差异表达蛋白质。结果通过对2组细胞总蛋白质二维凝胶电脉图谱进行分析，找到差异蛋白质点12个；通过质谱分析，12个蛋白质均得到鉴定。这些蛋白质包括热休克蛋白27、细胞角蛋白8、nm23蛋白等。结论通过蛋白质组学技术，发现了膀胱癌羟基喜树碱耐药细胞和非耐药细胞之间差异表达蛋白质12个，这些差异蛋白质可能参与膀胱癌细胞羟基喜树碱耐药的过程。     

基于结核性脑膜炎患者脑脊液的蛋白质组学研究

目的探讨结核性脑膜炎患者脑脊液的蛋白质组学。方法选择进展期和好转期结核性脑膜炎患者的脑脊液,采用双向电泳技术对脑脊液全蛋白进行分离,利用软件分析找出差异表达蛋白,之后再通过基质辅助激光解吸/电离串联飞行时间质谱技术分析差异表达蛋白质。结果进展期和好转期结核性脑膜炎患者的脑脊液总蛋白双向电泳图谱共产生差异点68个,蛋白质的相对分子质量为(10~100)×103,等电点至为p13~p110;鉴定出和结核性脑膜炎相关的蛋白包括超氧化物歧化酶、视黄醇结合蛋白和38×103糖脂蛋白。结论差异表达蛋白可以作为结核性脑膜炎诊断的候选标志物、治疗或者疫苗的候选物,进行更加深入的研究。     

脑脊液S-100B与儿童病毒性脑炎脑脊液蛋白组学关系的研究

目的分析病毒性脑炎(VE)患儿和对照组儿童脑脊液(CSF)蛋白质组的表达差异,筛选VE特异性蛋白,探讨其与VE的关系,为VE的早期诊断提供线索。方法以三氯醋酸/丙酮沉淀法提取VE患儿和对照组儿童CSF总蛋白,固相pH梯度二维聚丙烯酰胺凝胶电泳(2-DE)技术分离蛋白质,应用双向电泳凝胶分析软件(PDQuest 7.3.1)对2-DE凝胶进行量化比较分析,识别差异表达明显的蛋白质点,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)得到肽质量指纹图谱(PMF),在Mascot数据库中进行蛋白质匹配,鉴定部分差异蛋白质。结果VE患儿和对照组CSF蛋白2-DE凝胶图谱上分别平均显示442和401个点,有23个点蛋白质表达存在2倍以上的差异,选取5个表达明显上调的蛋白质点进行质谱鉴定,成功鉴定出钙结合蛋白S100B。结论钙结合蛋白S100B在VE患儿和无中枢神经系统病变的对照组儿童CSF的蛋白表达上存在明显差异,可能是VE密切相关的疾病特异性蛋白,并有可能成为VE诊断的分子标志物。     

Ⅰ期非小细胞肺癌相关血清差异表达蛋白的研究

目的:寻找Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)与健康人血清的差异表达蛋白.方法:收集天津市胸科医院经手术、病理证实的6例Ⅰ期NSCLC患者血清,等量混合后设为肺癌组;同期15例健康体检血清,等量混合后设为健康对照组.利用双向凝胶电泳(2-DE)和基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分离、筛选和鉴定2组间的差异表达蛋白.结果:成功获得了2组的双向凝胶电泳图谱,PDquest软件分析显示,2组间差异大于2倍的蛋白质点共有128个,质谱鉴定后确定了10种蛋白质,其中7种表达量上调,分别为α1-酸性糖蛋白、C1酯酶抑制物、血管紧张素原、转铁蛋白、转甲状腺素蛋白、间-α-胰蛋白酶抑制剂重链H2及无花果酶-3;3种表达量下调,分别为纤连蛋白、补体C4-A及补体C3.结论:应用2-DE及MALDI-TOF-MS在Ⅰ期NSCLC血清中鉴定出4种与肿瘤关系密切的差异表达蛋白,可作为开发NSCLC早期诊断标志物的候选蛋白.     

DADS诱导人结肠癌细胞双向电泳图谱的差异分析

目的近年来,蛋白质组学技术已广泛应用于肿瘤研究领域,但对结肠癌的研究较少。该实验旨在研究二烯丙基二硫(DADS)体外诱导人结肠癌SW 480细胞蛋白质组差异表达的相关分子机制。方法采用蛋白质组学相关技术,如二维电泳、图像分析、质谱技术等方法,获得DADS体外培养的人结肠癌SW 480细胞蛋白质组的肽质量指纹图,将所得的数据进行生物信息学处理。结果在相同条件下,对DADS处理前后SW 480细胞两种样品的总蛋白质进行双向电泳,经PDQuest软件分析,结果显示,其中167个匹配的蛋白质点存在表达量上的差异,与对照组相比,处理组蛋白质表达量下调的有69个,利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱技术(MALD I-TOF-MS)对其中8个表达明显下调的蛋白质斑点进行分析鉴定,获得相应的肽质量指纹图谱(PMF),通过数据库搜索,初步确定这8个蛋白质分别是:细胞角蛋白19(Cytokeratin-19)、肌动蛋白解聚因子(Actin-de-polym erizing factor)、V-1蛋白(V-1 prote in)、果糖二磷酸醛缩酶(Fructose b isphosphate aldolase,FBA)、FK506结合蛋白(FK506-b ind ing prote in,FKBP)、成帽蛋白(Capp ing prote in)、硫氧还蛋白过氧化物酶(Th ioredoxin peroxidase)和敏感性转化蛋白(Transform ation-sensitive prote in)。结论这些差异蛋白质涉及细胞周期调控、细胞分化、细胞凋亡及细胞分裂增殖等众多事件,从而说明,DADS可能具有抑制结肠癌细胞生长,阻滞细胞周期,诱导细胞分化及凋亡的作用。     

癌胚抗原、腺苷脱氨酶和C反应蛋白在胸腔积液鉴别诊断中的意义

目的 探讨癌胚抗原（CEA）、腺苷脱氨酶（ADA）和C反应蛋白（CRP）在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的意义.方法 收集胸腔积液标本60例（结核性胸腔积液33例、癌性胸腔积液27例）,检测胸腔积液中ADA、CRP和CEA的含量并比较.结果 CEA在癌性胸腔积液中明显高于结核性胸腔积液,ADA在结核性胸腔积液明显升高,在癌性胸腔积液明显偏低（P＜0.01）.CRP在在结核性胸腔积液升高值高于癌性胸腔积液（P＜0.01）.结论 CEA、ADA和CRP联合检测对良恶性胸腔积液的鉴别诊断有较好临床价值.     

应用SELDI—TOFMS技术筛选乳腺癌蛋白标志物

目的：应用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（ SELDI-TOF MS）筛选乳腺癌的特异性蛋白标志物,建立诊断模型。方法用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱仪及CM10蛋白芯片检测35例乳腺癌患者标本及53例对照组标本（包括35例乳腺良性病变和18例正常人）的血清蛋白指纹图谱,Ciphergen Proteinchip 软件自动采集数据,Ciphergen Biomaker Wizard 软件筛选差异蛋白,Biomarker Pattern软件建立乳腺癌的分类树诊断模型。结果乳腺癌组及对照组血清蛋白质谱图共检测到59个蛋白质峰,其中19个蛋白峰表达差异具有显著性（P＜0．01）。以2个蛋白质峰（质荷比分别为M6636．62,M13889．6）建立的诊断模型,诊断的准确率达到94．3％,灵敏度和特异度分别为80．0％和71．7％。结论 SELDI-TOF MS技术可用于乳腺癌特异性蛋白的筛选,为其快速诊断奠定基础。     

线粒体DNA缺失A549细胞与其母本细胞核蛋白质组差异分析(英文)

目的比较线粒体DNA(mtDNA)缺失A549细胞(Rho0细胞)与其母本细胞(Rho+细胞)核蛋白表达谱,并探讨细胞核对线粒体功能缺陷的应答反应。方法二维凝胶电泳(2-DE)和表面增强激光法解吸电离-飞行时间(SELDI-TOF)蛋白芯片测定Rho0细胞和Rho+细胞核蛋白表达谱,基质辅助激光解吸电离-飞行时间(MALDI-TOF)质谱结合数据库检索鉴定差异表达的蛋白点,Western印迹法测定核磷蛋白和P53表达,激光共聚焦显微镜测定线粒体膜电位。结果 2-DE显示Rho0细胞核中11个蛋白点表达下调,21个蛋白点表达上调。基于NP20蛋白质芯片的SELDI-TOF质谱分析发现4个蛋白质峰在Rho0细胞核中明显下降。其中1个表达下调的蛋白点被鉴定为eIF-6,4个表达上调的蛋白点被鉴定为核磷蛋白,SFRS1,SFRS3和hnRNP G。Western印迹实验结果显示,Rho0细胞中核磷蛋白表达增加。P53和线粒体膜电位(MMP)测定结果显示,Rho0细胞中P53表达高于Rho+细胞,两种细胞MMP基本一致。结论 mtDNA缺失诱导了细胞核蛋白质组改变。Rho0细胞可以作为研究线粒体与核交互作用的模型。     

脑梗死大鼠脑组织的二维凝胶电泳及质谱分析

目的探讨二维凝胶电泳和质谱分析在脑组织分析的应用价值。方法采用大脑中动脉阻塞建立大鼠脑梗死模型。采用二维凝胶电泳对正常大鼠脑组织和脑梗死后大鼠脑组织进行蛋白分离和图像分析;分离蛋白后进行质谱分析及数据库搜索,从而鉴定部分蛋白质斑点。结果筛选出5种差异性蛋白斑点,并通过数据库比对分析各自的功能。结论二维电泳凝胶图谱并作质谱分析可为研究脑梗死发病过程中蛋白质表达改变提供新的方法及途径。     

维吾尔族及汉族健康人群血清蛋白质谱的比较研究

目的观察汉族与维吾尔族健康人群之间血清蛋白表达谱的变化。方法对30名维吾尔族及50名汉族健康体检者血清，采用弱阳离子交换蛋白芯片（CMIO）和表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱技术检测蛋白谱。结果汉族和维吾尔族间血清蛋白质谱存在明显差异，其中汉族组中质荷比为1280、2747的2个蛋白质丰度显著高于维吾尔族组（P〈0．05）。结论维吾尔族与汉族健康人群之间的血清蛋白质指纹图谱有较明显差异，对建立新疆地区血清蛋白质指纹图谱疾病诊断模型具有参考价值。     

胸腔积液486例临床分析

目的探讨胸腔积液的病因和诊断方法。方法回顾性分析486例胸腔积液住院患者的临床资料。结果486例病因依次为：结核（58.4％）、恶性肿瘤（24.5％）、心功能不全（3.5％）、肺炎或肺部感染（3.3％）、外伤（2.9％）。结核性胸腔积液以40岁以下患者为主,占77.3％;恶性胸腔积液以60岁以上患者居多,占60.0％。260例行血清癌胚抗原（CEA）检测恶性组高于良性组（P〈0.01）。结论胸腔积液主要病因是结核和肿瘤,结核患者以青年居多,恶性肿瘤以老年患者居多。临床综合分析是判断病因的关键。     

ADA、CEA及PFLMNF在胸腔积液鉴别中的临床意义

目的：分析腺苷脱氨酶（ADA）、癌胚抗原（CEA）及淋巴细胞微核细胞率（PFLMNF）在胸腔积液鉴别中的意义。方法根据病理类型将本院收治的68例胸腔积液患者分为恶性肿瘤性胸腔积液组（33例）和结核性胸腔积液组（35例）,分别对两组患者的胸腔积液ADA、CEA的表达水平及PFLMNF进行检测。结果恶性肿瘤性胸腔积液组患者的ADA值低于结核性胸腔积液组（P〈0.05）,CEA及PFLMNF值均高于结核性胸腔积液组（P〈0.05）。恶性肿瘤性胸腔积液组患者的ADA、CEA及PFLMNF阳性率均高于结核性胸腔积液组（P〈0.05）,ADA、CEA及PFLMNF的联合阳性率高于结核性胸腔积液组（P〈0.05）;恶性肿瘤性胸腔积液组患者ADA、CEA及PFLMNF的联合阳性率均高于三项指标单独阳性率（P〈0.05）。结论ADA、CEA及PFLMNF的联合检测对良恶性胸腔积液鉴别诊断具有重要意义。     

结核性与肿瘤性胸腔积液ADA、CEA、CA125、LDH水平分析

目的：检测结核性与肿瘤性胸腔积液中腺苷脱氨酶（ADA）、癌胚抗原（CEA）、糖链抗原125（CA125）、乳酸脱氢酶（LDH）水平,探讨其在鉴别诊断中的价值。方法选择2010年1月至2013年6月在该院住院的不明原因渗出性胸腔积液（胸腔积液生化、血常规、脱落细胞、细菌学、B超、肺CT等检查仍未确诊者）患者,经内科胸腔镜检查,确诊结核性胸腔积液组88例和肿瘤性胸腔积液组70例。术中同时抽取胸腔积液标本检测其ADA、CEA、CA125、LDH水平,进行统计学分析。结果结核性胸腔积液ADA水平显著高于肿瘤性胸腔积液,差异有统计学意义（t=21.490,P＜0.01）;肿瘤性胸腔积液CEA、CA125水平均显著高于结核性胸腔积液,差异均有统计学意义（t=41.300、18.400,P＜0.01）;结核性和肿瘤性胸腔积液LDH水平比较,差异无统计学意义（t=1.562,P＞0.05）。结论 ADA水平越高,结核可能性越大;CEA、CA125水平越高,肿瘤的可能性也更大;CEA、CA125水平均同时增高,肺癌可能性更大;LDH水平在结核与肿瘤性胸腔积液中差异不明显,所以联合检测ADA、CEA、CA125、LDH水平对胸腔积液性质的鉴别诊断具有重要的参考价值。     

可溶性Apo-1/Fas对结核性和恶性胸腔积液的鉴别诊断价值

目的 通过检测血清及胸水中可溶性Apo-1/Fas(sApo-1/Fas)的水平,探讨其对鉴别良恶性疾病的意义.方法 采用酶联免疫吸附法(ELISA)法检测50例恶性胸腔积液患者和48例结核性胸腔积液患者血清和胸水中sApo-1/Fas的含量.结果 恶性胸腔积液患者血清和胸水中sApo-1/Fas的含量分别为(16.3±2.5)μg/L、(38.6±13.5) μg/L,均明显高于结核性胸腔积液组(均P＜0.05).两组胸水/血清sApo-1/Fas比值差异有统计学意义(P＜0.05).血清sApo-1/Fas+胸水sApo-1/Fas对恶性胸腔积液诊断的敏感度为66.0％、特异度为93.8％、准确度为79.6％.结论 血清和胸水中sApo-1/Fas的测定有利于良恶性胸水的鉴别.     

流式细胞仪分析联合CEA检测对结核性和癌性胸腔积液鉴别诊断价值探讨

目的探讨流式细胞仪分析联合CEA检测对结核性和癌性胸腔积液鉴别诊断价值。方法采用流式细胞仪联合CEA检测对26例恶性胸水和36例结核性胸水脱落细胞做DNA含量测定、细胞周期分析。结果 CEA：恶性组为（70.15±65.23）ng/ml;结核组为（7.92±3.51）ng/ml,两组比较差异有显著性（P〈0.01）。恶性组胸水G2/M、S期细胞比例明显高于结核组（P〈0.01）,而G0/G1期明显低于结核组（P〈0.01）。胸水CEA检测对恶性胸水诊断敏感率为76.9%,特异性为90.9%;胸水DNA含量分析对恶性胸水诊断敏感率为73.1%,特异性为100.0%,若两者同时阳性其敏感率57.7%,特异性为100.0%,若两者之一阳性敏感率92.3%,特异性为88.5%。结论联合应用胸水CEA和流式细胞分析,可使恶性胸水诊断率提高,有助于提高良恶性胸水的鉴别诊断。     

联合检测CEA、NSE胸腔积液/血清比值对恶性胸腔积液的诊断价值

目的探讨联合检测癌胚抗原（CEA）、神经元特异性烯醇化酶（NSE）在胸腔积液与血清中的比值对恶性胸腔积液的诊断价值。方法 79例临床已确诊的胸腔积液患者（恶性47例,结核性32例）的血清和胸腔积液采用酶免疫法进行CEA、NSE含量测定。计算CEA、NSE在胸腔积液与血清中的比值（P/S）。应用受试者工作特性曲线（ROC曲线）确定诊断恶性胸腔积液的最佳临界值,以最佳临界值为判断良恶性胸腔积液标准,计算P/S（CEA）、P/S（NSE）及联合检测两者（并联试验）的诊断敏感度、特异度、准确度及Youden指数。结果恶性组P/S（CEA）、P/S（NSE）分别较结核组高。以P/S（CEA）≥1.1、P/S（NSE）≥1.3为恶性胸腔积液界值,并联试验显示对联合检测P/S（CEA）、P/S（NSE）对诊断恶性胸腔积液的敏感度为91.49%,特异度为62.50%,准确度为79.94%,Youden指数为0.54,较单一检测P/S（CEA）或P/S（NSE）能提高诊断的敏感度、准确度及Youden指数。结论联合检测CEA、NSE在胸腔积液与血清中的比值对恶性胸腔积液的诊断有较大价值,能提高诊断敏感度,减少漏诊率,尤其适合于基层医院推广应用。     

胸腔镜及较大剂量滑石粉诊治恶性胸腔积液30例

目的观察胸腔镜及较大剂量滑石粉诊治恶性胸腔积液的疗效。方法回顾分析30例恶性胸腔积液应用胸腔镜行胸膜活检、同时采用较大剂量滑石粉(10～30 g)固定胸膜。结果 30例恶性胸腔积液确诊率100%,治疗有效率93.3%。结论胸腔镜及较大剂量滑石粉诊治恶性胸腔积液是有效的方法。     

MTS比色法检测非小细胞肺癌细胞体外对常用化疗药物的敏感性

目的采用MTS比色法检测非小细胞肺癌（NSCLC）患者癌性胸水中肿瘤细胞对常用化疗药物的敏感性。方法采用密度梯度离心法提取19例NSCLC患者癌性胸水中的肿瘤细胞,应用MTS比色法检测其对顺铂（DDP）、多西他赛（DOC）、长春瑞滨（NVB）、氟尿嘧啶（5-FU）、博来霉素（BLM）、奈达铂（NDP）、吉西他滨（GEM）、培美曲塞（MTA）等8种化疗药物的敏感性,以及这8种化疗药物对NSCLC胸水细胞的抑制作用。结果19例NSCLC患者胸水标本中肿瘤细胞均成功提取。各化疗药物对NSCLC抑制作用之间差异均有统计学意义（P〈0．001）,从高到低依次为：NDP〉DDP〉GEM〉NVB〉5-FU〉MTA〉DOC〉BLM。随着药物浓度的增加,各化疗药物对肿瘤细胞的抑制作用逐渐增大,癌性胸水中肿瘤细胞对各化疗药物的敏感性增加。结论MTS比色法作为一种简便、快速、安全、灵敏性高的体外药敏试验方法,可用于NSCLC患者的个体化治疗选择合适的化疗药物。     

可溶性细胞黏附分子1、血管生长因子、C反应蛋白联合检测在胸腔积液鉴别诊断中的价值

目的 探讨可溶性细胞黏附分子1( sICAM-1)、血管生长因子(VEGF)、C反应蛋白(CRP)在良恶性胸腔积液鉴别诊断中的价值.方法 分别检测46例恶性胸腔积液和43例良性胸腔积液sICAM-1、VEGF和CRP水平.结果 恶性胸腔积液组sICAM-1、VEGF水平和阳性率明显高于良性胸腔积液组(t=7.125、6.271,x2=33.929,均P＜0.05),CRP水平和阳性率明显低于良性胸腔积液组(t=5.963,x2=31.430,均P＜0.05).结论 sICAM-1、VEGF、CRP在良恶性胸腔积液中表达存在明显差异,可作为良恶性胸腔积液鉴别诊断指标.     

化疗联合深部热疗治疗肺癌恶性胸腔积液的临床研究

目的探讨化疗联合深部热疗治疗肺癌恶性胸腔积液的临床疗效。方法收集我院近期收治住院的恶性胸腔积液患者86例,遵照知情同意原则分为两组,对照组40例行胸腔内灌注顺铂（DDP）化疗,实验组46例联合深部热疗,对比两组患者的临床疗效及并发症发生情况。结果实验组患者的总有效率为97．8％,高于对照组的85．0％（P〈0．05）,且实验组患者的胸液消失时间、胸膜增厚度、包裹性脓胸、胸膜反应均优于对照组（P〈0．05）。结论运用化疗联合深部热疗治疗肺癌恶性胸腔积液,可使患者的临床疗效得到显著提高,减少术后并发症的发生。