四川省大竹县鼠类携带肾综合征出血热(HFRS)病毒调查

目的了解鼠类携带肾综合征出血热(HFRS)病毒情况,为制订防制措施提供科学依据。方法采用人工挖、放鼠笼及夹夜法等方式捕获鼠类,无菌解剖取肺,编号,冰冻切片,冷丙酮固定,进行LFT染色,用免疫荧光技术检测HFRS病毒抗原。结果捕获鼠类301只,5个品种,黑线姬鼠占捕获总数的44.19%,为优势种。在301只鼠类中,有43只鼠检出HFRS病毒抗原,带毒率为14.29%。5种鼠有4种携带HFRS病毒抗原,鼠类间带毒率比较经统计学处理,差异无统计学意义(χ~2=3.49,P0.05)。结论大竹县鼠类携带HFRS病毒率高,需采取有效的综合防制措施,控制鼠类密度,从而有效控制HFRS的发生和流行。     

山东省家猪感染肾综合征出血热病毒流行病学调查和实验研究

目的了解家猪在肾综合征出血热(HFRS)疫区的流行病学意义,探讨家猪与HFRS发病的关系。方法以HFRS病毒(HFRSV)抗原和抗体为指标,采用反向间接血凝法(RPHA),血凝抑制法(RPHI),酶标葡萄球菌A蛋白(HPR-SPA),间接免疫荧光法(IFA)和PCR反应对山东部分地区家猪自然感染HFRSV的情况进行检测。结果家猪心、肝、脾、肺、肾等脏器及血、尿、粪和猪圈内污物检出HFRSV抗原与抗体,脏器抗原阳性率为3.33%~5.00%。而血、尿、粪和圈内的污染物抗原阳性率分别为3.67%、7.04%、2.51%和5.56%,血清抗体阳性率为1.96%,并从HFRSV抗原阳性的多种标本分离出病毒。人工感染后病毒可随血液波及多个脏器,二次感染乳鼠脑可检出HFRSV抗原。二次组织病理学检查发现肺、肝、肾等脏器有一过性病理改变;HFRSV可在猪体内增殖,并经多途经排出体外。结论家猪可能是HFRSV的扩散宿主动物。     

山东战略要地肾综合征出血热宿主动物自然带毒与分离毒株抗原型的调查研究

目的：为摸清山东战略要地HFRS传染源及宿主动物自然带毒与地方毒株的抗原型，探讨病毒抗原型发病的关系。方法：从调查点收集动物组织标本，采用免疫荧光法(IFA)和细胞或乳鼠脑培养来分别检测组织HFRSV抗原和病毒分离与鉴定。结果：从8种动物肺中检出HFRSV抗原，其中大仓鼠、褐家鼠和黑线姬鼠带毒率较高，分别为8．15％、6．40％和6．19%。同时从鼠肺、早期病人血和尿等标本分离出6株病毒，抗原成份分析表明，有3株不含Ⅰ型病毒抗原成份，毒力较弱；3株为含Ⅰ型抗原成份的Ⅱ型毒株。结论：从病原学证实当地HFRS疫区呈多宿主性，鼠肺病毒抗原型与宿主种类相一致：分离毒株抗原成份及毒力有差异，检出含有Ⅰ型抗原成份的Ⅱ型病毒。     

山东省家猪感染肾综合征出血热病毒流行病学调查和实验研究

目的 了解家猪在肾综合征出血热(HFRS)疫区的流行病学意义，探讨家猪与HFRS发病的关系。方法 以HFRS病毒(HFRSV)抗原和抗体为指标，采用反向间接血凝法(RPHA)，血凝抑制法(RPHI)，酶标葡萄球菌A蛋白(HPR-SPA)，间接免疫荧光法(IFA)和PCR反应对山东部分地区家猪自然感染HFRSV的情况进行检测。结果 家猪心、肝、脾、肺、肾等脏器及血、尿、粪和猪圈内污物检出HFRSV抗原与抗体，脏器抗原阳性率为3.33％～5．00％。而血、尿、粪和圈内的污染物抗原阳性率分别为3.67％、7.04％、2．51％和5.56％，血清抗体阳性率为1．96％，并从HFRSV抗原阳性的多种标本分离出病毒。人工感染后病毒可随血液波及多个脏器，二次感染乳鼠脑可检出HFRSV抗原。二次组织病理学检查发现肺、肝、肾等脏器有一过性病理改变;HFRSV可在猪体内增殖．并经多途经排出体外。结论 家猪可能是HFRSV的扩散宿主动物。     

陕西延安地区肾综合征出血热自然疫源地调查研究初报

目的 :查明陕西延安地区是否为肾综合征出血热 ( HFRS)自然疫源地及新疫区。方法 :选择有疫情报告地区 ,进行人间疫情调查、健康人群特异性抗体检测 ;鼠间疫情调查在调查点野外和居民区 ,用夹夜法捕鼠 ,调查鼠种及鼠密度 ,采集鼠肺及血清标本。鼠肺冰冻切片用免疫荧光法检测汉坦病毒抗原 ;鼠血用间接免疫荧光法和酶联免疫法检测 Ig G抗体。结果 :对延安市防疫站 2 0 0 1年统计的 7例 HFRS患者进行流行病学调查 ,均属在当地感染 ;检测延安市洛川县交口河镇 2 4 5例人血标本汉坦病毒特异性 Ig G抗体 ,阳性 5 0例 ,人群隐性感染率为 2 0 .41 %。检测 2 2份鼠肺及鼠血标本 ,HV抗原均为阴性 ;HV抗体 IFA法阳性 1例 ,ELISA法阳性 5例。结论 :延安地区有 HFRS散发病例 ,洛川交口河镇健康人群、褐家鼠、小家鼠中有汉坦病毒感染 ,证实了延安市洛川县交口河镇为 HFRS自然疫源地及新疫区。     

肾综合征出血热病毒单克隆抗体的研究与应用

作者概要地报道我室近年来对肾综合征出血热病毒单克隆抗体(McAb)的研究与应用,包括:①肾综合征出血热病毒及其血凝素抗原McAb杂交瘤细胞系的建之与鉴定,②选择其中高效优质的McAb进行病毒的抗原性分析;③以McAb亲和层析纯化病毒结构蛋白及其分析鉴定,④纯化HFRS-McAb及其应用;⑤以Mcab-IFAT检验HFRS患者外周血白细胞中的病毒抗原;⑥建立了McAb-ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原、检测不同疫区人和动物血清中特异性抗体(IgM和IgG)、患者血清中血凝抑制抗体等。并已应用于研究HFRS病毒结构及其特征、纯化病毒抗原组份及保护性抗原,对本病的早期快速检验诊断、流行病学调查、研究疫苗及免疫治疗等都有重要意义。     

自然感染肾综合征出血热病毒大鼠组织中病毒抗原及抗体的定位研究

作者应用小鼠抗肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）单克隆抗体（ＭＡｂｓ）对经检测血清抗体阳性率为２８％的５０只大鼠组织中病毒抗原及抗体（内源性免疫球蛋白，ＥＩｇ）进行了研究。结果：５０只大鼠中，１５只仅检测到病毒抗原阳性，１０只仅检测到ＥＩｇ阳性，１８只抗原、ＥＩｇ均阳性，７只抗原、ＥＩｇ均阴性，其中的血清抗体阳性鼠分别有２，６，３，３只。总抗原阳性率为６６％，ＥＩｇ阳性率为５６％。病毒抗原分布于心肌细胞、肝细胞、脾淋巴细胞、肺支气管粘膜上皮及肺泡壁、肾小管上皮细胞、唾液腺闰管及腺上皮，以及肾上腺腺细胞，Ｇ２抗原多为弥漫性，ＮＰ抗原呈颗粒状包涵体或弥漫性阳性，其中１８只组织中可同时有抗体阳性。ＥＩｇ阳性见于各组织的血管内皮，特别是肾小球毛细血管，以及单核吞噬细胞系统；在心肌和肝脏有呈散在分布的心肌及肝细胞ＥＩｇ阳性。以上结果提示：血清抗体，组织中抗原和抗体三者间无明确一致关系，抗原的检测可能更好地反映动物的带毒状况；另外，大鼠组织中有抗原和免疫复合物存在，作者在本文对大鼠感染ＨＦＲＳＶ病变不严重，亦不引起发病进行了讨论。     

双单克隆抗体ELISA间接夹心法检测HFRS病毒抗原的实验研究

间接荧光抗体技术(IFAT)已广泛用于肾综合征出血热(HFRS)病毒抗原的检测,其不足之处是需用荧光显微镜,有一定主观性及不能检测可溶性抗原。本文建立了以同样的抗HFRS病毒单克隆抗体(McAb)作为包被和第二抗体,以酶标葡萄球菌A蛋白(SpA)作指示抗体的双McAb ELISA间接夹心法,初步用于感染细胞培养上清及组织标本中HFRS病毒抗原的检测,获得较满意结果。     

肾综合征出血热患者血清中和抗体的实验研究

目的：了解肾综合征出血热患(HFRS)血清中是否存在HFRS病毒中和抗体和中和抗体滴度的高低。方法：用近几年患病愈后血清中的HFRS病毒，以固定病毒量、稀释血清抗体方法，用小白鼠乳鼠中和实验，测定血清中和抗体对病毒的中和效价。结果：HFRS病后和隐性感染人群血清中和抗体滴度(GMT)均较高，其中，家鼠型GMT为422．7、野鼠型GMT为302．6、隐性感染GMT也达157．1。结论：中和抗体在血清中存留稳固而持久，是HFRS病后抗体免疫力的标志。     

广东小鼠腺病毒血清学调查及病毒和抗体在人工感染小鼠体内消长规律研究

目的了解我省小鼠腺病毒(Mad)自然感染情况及探究人工感染Mad小鼠体内各脏器组织中病毒分布规律及血清抗体变化。方法采用ELISA方法对2007年和2015年饲养于普通环境小鼠血清及2013年~2015年广东省12家监督单位和32家委托单位SPF级小鼠血清进行病毒抗体检测。利用腹腔注射方法感染36只3周龄BALB/c小鼠,0.2 m L/只,浓度为4.5×106copies/μL,每天观察动物临床表现,并于攻毒前第0天和攻毒后第3、7、10、15、18、21、30、37、44、51、60天剖检小鼠(各3只),取组织标本(心、肝、脾、肺、肾、脑、胃、盲肠内容物)及血清,应用实时荧光定量PCR(QPCR)方法检测组织病毒核酸,ELISA方法检测血清抗体水平。结果普通饲养小鼠抗体阳性率为24.44%~84.15%,其中以Mad-2型K87株血清型为主。SPF级小鼠Mad血清抗体阳性率均为0%。所有攻毒小鼠均呈隐性感染,无临床表现。攻毒后第3天及7天小鼠各组织病毒核酸检测阳性率均为100%(3/3),其中以脾脏100%阳性率维持时间最长(60 d)。除肝脏外,小鼠各组织病毒含量均在攻毒后7 d达到高峰,其中以脾脏病毒含量最高(5.5×105copies/μL),其次是心脏(3.4×105copies/μL)、盲肠内容物(2.6×105copies/μL)和胃(2.6×105copies/μL),脑为0.8×105copies/μL。攻毒后15 d可测出血清抗体,在37 d达到峰值,此后至60 d一直维持高水平。结论 SPF级小鼠Mad感染率低,普通环境饲养小鼠Mad感染率高。人工感染小鼠脾脏病毒含量最高,阳性率维持时间最长,说明病毒可以在脾脏内长期复制,感染后第7天为组织病毒核酸最佳检测时间点。血清抗体在感染后15~60 d内均可以作为监测指标。     

自然感染肾综合征出血热病毒大鼠组织中病毒抗原及抗体的定…

作应用小鼠抗肾综合征出血热病毒（ＨＦＲＳＶ）单克隆抗体（ＭＡｂｓ）对经检测清抗体阳性率为２８％的５０只大鼠组织中病毒抗原及抗体（内源性免疫球蛋白，ＥＩｇ）进行了研究。结果：５０只大鼠，１５只仅检测到病毒抗原阳性，１０只仅检测到ＥＩｇ阳性，１８只抗原、ＥＩｇ均阳性，７只抗原、ＥＩｇ均阴性，其中的血清抗体阳性鼠分别有２，６，３，３只。总抗原阳性率为６６％，ＥＩｇ阳性率为５６％。病毒抗原分布于心肌细胞     

赤峰市首次在褐家鼠肺中检出肾综合征出血热病毒抗原

20 0 2年 4月 2 4日实验室检出一患者血清肾综合征出血热 (HFRS)抗体阳性 ,滴度达到 1∶ 3 2 0 ,确诊为 HFRS患者。随即进行了流行病学调查 ,捕鼠 5 1只 ,采人血 1 1 5份。人血 HV抗体均阴性 ;3只褐家鼠鼠肺中检出 HV抗原。这是赤峰市首次在褐家鼠肺中检出 HV抗原 ,鼠的带毒率为 5 .88%。1 998年曾在一只小家鼠肺中检出 HV抗原 [1 ] 。1　材料与方法1 .1　疫情调查时间及地区于 2 0 0 2年 4月 2 7日～ 4月 3 0日对敖汉旗四家子镇和该镇的芦家地村居民区进行了流行病学调查。1 .2　病人和健康人群 HV抗体检测采病人血 3～ 5 ml,分离…     

HFRS疫苗接种后人血片特异性抗原的消长规律研究

以HFRS疫苗人工免疫健康个体，经免疫荧光技术检测，在人血片白细胞中可检出HFRS病毒特异性抗原。血片白细胞特异性抗原在初次免疫7d后，阳性率为100％，强阳性率为77.7％，再次免疫7d后，强阳性率高达88.8％，但当继续加强免疫后，抗原阳性率及强阳性率均下降。在检测血片白细胞中抗原的同时，检测血清中特异性抗体，结果初次免疫7d后，低滴度抗体阳性率为88.8％，强阳性率仅为22.2％。     

EB病毒膜蛋白家兔免疫血清的制备及其特性研究

目的：制备高效价EB病毒膜蛋白抗体,并对其效价及其与EBV结合的特异性进行鉴定。方法：将B95-8细胞培养至3×10^5/mL时,超声破碎,纯化获得EB病毒膜蛋白抗原;EB病毒膜蛋白抗原经弗氏佐剂乳化,在家兔背部皮下多点免疫注射,间隔2周免疫,共3次,并分别于免疫前和每次免疫后1周取兔血清,检测兔免疫血清抗体IgG;进一步采用Western blot检测制备的血清抗体与EBV结合的特异性,同时采用ELISA法检测兔血清抗体水平及各周抗体滴度的变化趋势。结果：所有家兔在全程免疫后都产生了高效价膜蛋白的特异性抗体,最高滴度达1：6400。结论：用B95-8细胞制备的EB病毒膜蛋白抗原免疫家兔,可成功制备高效价的特异性血清抗体,为EB病毒膜蛋白抗原的免疫学检测奠定了基础。     

北京地区肾综合征出血热疫源地调查与病毒分离

1982～1986年在北京地区8个监测点先后检测1905只鼠。结果仅于1985,1986两年从通县、朝阳、某机场、顺义4个点的鼠类中检出6份黑线姬鼠鼠肺肾综合征出血热(HFRS)抗原、带毒率为0.9％～1.9％;检出抗体25份、阳性率为0.6％～11.2％;并以2份抗原阳性鼠肺接种Vero-E_6细胞首次分离出2株HFRS病毒。确定了北京地区HFRS的主要传染源为本地黑线姬鼠,并非由外地传入。从而证实北京地区HFRS自然疫源地的存在。     

ICR小鼠感染呼肠孤病毒Ⅲ型的实验研究

目的 利用呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo-3)感染ICR小鼠,分析小鼠的临床体征、靶器官病毒载量及血清抗体水平的动态变化.方法 通过动物体内适应试验增强病毒毒力,利用尾静脉注射与腹腔注射途径建立系统性感染ICR小鼠模型,观察动物临床体征,于感染0d、4d、7d、18d、25 d、35 d、72 d、129 d分别采集小鼠(2～3只小鼠)血液并剖检.47d、81d、103 d随机对3只小鼠进行血液采集跟踪.采用实时qPCR方法检测靶器官病毒核酸量,ELISA方法检测血清抗体水平.结果 病毒经过4次小鼠体内适应其毒力明显增强.小鼠攻毒后6d、7d、9d、10d、11d、16d出现死亡,实时qPCR结果显示,肝脏病毒载量最高,其次是心、脾、肺.多数器官病毒载量峰值出现在6～11d,129 d后,多数靶器官检测阴性.血清抗体最早在18d达到阳性,25 d达到峰值,并维持高抗体水平至试验结束.结论 小鼠体内适应方法可以明显增强Reo-3毒力,该病毒感染可引起小鼠多器官炎症反应,并导致小鼠死亡.本研究为该病毒模型建立及致病机理研究提供了参考数据.     

Epstein-Barr病毒与类风湿性关节炎

近年来,国内尚未见到对类风湿性关节炎(RA)患者开展抗病毒抗体研究的报道。本文采用间接免疫荧光技术,检测 RA 患者血清和滑液,及两者中所含 IC 的抗 Epstein-Barr 病毒胞膜抗原的抗体(EBV-VCA-Ab)水平,以探讨 EBV 与抗 EBV 抗原抗体系统与 RA 异常的体液免疫反应之间的关系。材料与方法一、标本收集、血清标本132例。其中RA69例(其中 RF 阳性者42例),并以其它关     

黏膜感染SIV病毒的恒河猴在生殖道、肠和淋巴组织特征性的细胞因子、化学因子和Foxp3表达

[目的]阐明SARS病毒感染后能否再次感染,疫苗产生的抗体中长期保护效果,被动免疫是否真正安全有效等,为防治SARS提供实验依据。[方法]实验分4组,分别为一组(SARS恒河猴恢复组):用感染SARS-CoV发病12月后的4只恒河猴,均有中和抗体产生。二组(SARS食蟹猴恢复组):用感染SARS-CoV发病12月后的3只食蟹猴,均有中和抗体产生。三组(SARS血清输入恒河猴组):3只恒河猴,病毒接种时中和抗体阴性。病毒接种两天后输入抗体阳性血清(恒河猴血清,感染获得,效价为:1:128),用量10ml/只,分别经肌肉和静脉输入,各5ml。四组(恒河猴SARS-CoV感染组):2只恒河猴,病毒接种时中和抗体阴性。SARSCo-V经鼻腔接种,在感染的第1天开始到7天安乐死时,不同时间取咽拭子、血液和脏器,进行病毒分离,RT-PCR检测和中和抗体测定。[结果]一组(SARS恒河猴恢复组):接种SARS-CoV后未见发热等异常临床表现。血清生化无ALT、LDH、CK、总蛋白和血清白蛋白异常。3只猴在接种病毒后的咽拭子中,RT-PCR分别未检出、第1天检出、第1-3天中检出病毒。第2、5、7天咽拭子中、7天安乐死时血、肺、肝、脾和淋巴结等组织中病毒分离均为阴性。2只猴肺组织病理学检查见轻度肺炎。二组(SARS食蟹猴恢复组):接种3只未见任何不良临床表现,血清生化5项正常。3只猴在接种病毒后的咽拭子标本中,RT-PCR分别未检出SARS病毒、在第1-2天检出、在第1-3天中检出病毒。第2、5、7天咽拭子中、7天安乐死时血、肺、肝、脾和淋巴结等组织中病毒分离均为阴性。3只猴肺组织病理学检查见轻度肺炎等。三组(SARS血清输入恒河猴组):3只恒河猴在病毒接种的第2-5天时有一过性的体温升高,3940℃。血清生化5项正常。3只猴在接种病毒后的咽拭子标本中,RT-PCR分别在第1-3、第1-4天和第1-2天检出SARS病毒。2只猴第7天咽拭子中病毒分离阳性。另外1只在第2、5、7天咽拭子中、7天安乐死时血、肺、肝、脾和淋巴结等组织中病毒分离均为阴性。3只猴肺组织病理学检查见轻度肺炎等。四组(SARS恒河猴SARS-CoV感染组):2只猴病毒接种后,第2-4天时有一过性的体温升高,3940℃。2只进行接种病毒后1-7天安乐死时,RT-PCR在恒河猴的咽拭子标本中连续检出SARS病毒。在第2、5天咽拭子中、7天安乐死时肺组织中病毒分离阳性。2只猴肺等组织病理学检查发现肺组织表面局部有轻度发灰实变现象,可见到间质性肺炎病变,内皮细胞受损,出血和水肿。大多数肺泡没有完整的内衬细胞残留,肺泡间隔变宽并被以吞噬细胞为主的单核炎症细胞浸润,同SARS肺炎改变。实验表明,前期感染产生中和抗体的恒河猴、食蟹猴再次感染病毒,和模型对照猴比较,动物肺组织等只出现轻微或无病理变化,RT-PCR检出时间大大缩短,病毒培养未能分离出病毒,所有这些指标,均证实中和抗体有明显的保护作用,是有效的。被动免疫从结果来看,有一定的作用,但保护作用弱。     

肾综合征出血热病毒灭活疫苗的研究 Ⅰ、疫苗病毒株选择的研究

从34株HFRS病毒中选育出的3株病毒,在乳鼠脑内的分布相同,小鼠以嗜神经症状为主,表现为后肢麻痹;3株病毒的毒力基本一致,但41D株毒力略高于A16和R63株,从16株单克隆抗体反应结果来看,3株病毒与多数克隆抗体均起反应。其中A16抗原决定簇较完全。三株病毒与不同毒株的免疫血清反应表现出抗原的一致性,交叉中和试验能产生高滴度的中和抗体并能中和病毒。故认为3株病毒均达到了制备灭活疫苗的基本条件,并用A16病毒制备了灭活疫苗。     

金标免疫斑点法检测肾综合症出血热病毒抗体及临床应用

<正> 肾综合征出血热(HFRS·原名:流行性出血热,EHF)是由HFRS病毒引起的自然疫源性疾病,患者多为青壮年,发病凶猛、死亡率高,是我国重点防治的传染病之一。我们采用金标免疫斑点法快速检测血清中HFRS病毒抗体)、(IgM、IgG),自1998年5月共检测标本42例。通过分析旨在评价该方法诊断HFRS的正确性及诊断价值。