血浆巨细胞病毒多聚酶链反应检测用于指导干预性治疗

目的：分析用血浆巨细胞病毒（cytomegalovirus,CMV)多聚酶链反应（plymerase chain reaction,PCR)检测结果指导抗CMV干预性治疗的临床意义。方法：1999年8月至2001年7月行异基因造血干细胞移植（hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)的所有患者自预处理开始，常规用PCR法检测血浆的CMV－DNA（采用华美公司生产的巨细胞病毒4℃ PCR检测试剂盒），每周1次。其中尚无CMV病的临床表现而检测到血浆CMV阳性的患者89例。随机选取52例阳性患者给予干预性治疗。将上述89例患者分为3组（分别为停止治疗时血浆CMV－PCR转阴组、停止治疗时未转阴组、血浆CMV阳性未治疗组）比较各组CMV病的发生率。CMV病的发生率采用Kaplan-Meier曲线表示，曲线间的比较用Log-Rank（曲线无交叉）或Breslow（曲线交叉）检验，某时点率的比较采用RXC列联表或χ^2检验。结果：100d内CMV病的发生率，在治疗后血浆CMV－PCR由阳性转为阴性组为10．26％，治疗结束时血浆CMV－PCR仍为阳性组为66.67%，血浆CMV－PCR阳性未治疗组为36．24％（P＝0.0000)。上述3组中任两组移植后100d CMV病的发生率差异均有显著性。移植后1年时上述3例CMV病累积发生率分别为30.65%、75.00%、42.95%(P=0.0009)，治疗未转阴组与治疗转阴组和阳性未治疗组相比，CMV病的发生率明显升高。结论：血浆CMV－PCR检测结果用来指导干预性治疗有一定临床意义。干预性治疗后血浆CMV－DNA仍未转阴者，应考虑换药或联合用药治疗。     

造血干细胞移植后巨细胞病毒感染临床分析

目的观察各种类型的造血干细胞移植（HSCT）后巨细胞病毒（CMV）感染的发生情况及疗效。方法选择我院59例异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）和自体造血干细胞移植（auto—HSCT）患者移植后不同时期血和尿标本，检测CMV—pp65抗原及（或）CMV—DNA（荧光定量PCR法）进行动态观察分析。CMV感染的预防采用更昔洛书（DHPC）5～10mg／kg，1次／12h，分别在移植前第8天至移植当天及当CMV血清学检测阳性或发生CMV病时应用2-4周，并可同时应用大剂量丙种球蛋白。结果CMV感染在allo—HSCT后好发，非亲缘性移植CMV感染率高，9例allo—HSCT出现CMV感染发生在移植后＋42-＋68天，其中5例均存在不同程度的移植物抗宿主病（GVHD），尤其是Ⅱ～Ⅳ度急性GVHD，2例进展为巨细胞间质性肺炎（CMV-1P）；多为既往CMV感染被激活，对CMV—DNA阳性而无症状者进行预防治疗可使CMV—DNA阴转，可降低CMV病的发生。结论CMV病是allo—HSCT的常见并发症及主要致死原因之一；因此积极防治GVHD的发生及发展、定期监测CMV血清学阳性患者、早期干预性治疗可以提高移植的成功率。     

异基因外周血造血干细胞移植并巨细胞病毒感染的分析

目的探讨异基因外周血造血干细胞移植(PBSCT)中对巨细胞病毒(CMV)感染的监测及早期干预性治疗的可行性。方法对2005年1月~2006年12月在上海交通大学附属第一人民医院接受异基因PBSCT的35例患者进行回顾分析,分析CMV病的发生率及其相关的危险因素。结果35例患者中22例发生CMV血症,6例出现CMV病。其中2例发生CMV间质性肺炎(CMV-IP),均治疗无效死亡。通过CMV-DNA检测,对结果阳性而无临床症状者进行干预性治疗使CMV-DNA转阴,同时减少可能导致CMV病发生的高危因素,则可降低CMV病发生率。结论CMV病是异基因PBSCT的常见并发症,也是主要致死原因之一。本组所采用的方法可减少CMV病的发生率及CMV病的病死率。     

造血干细胞移植患者巨细胞病毒感染危险因素和疗效分析

目的 :了解造血干细胞移植 (hematopoieticstemcelltransplantation ,HSCT)后巨细胞病毒 (Cy tomegalovirus,CMV)感染的发生率、相关危险因素及抗病毒药物疗效。 方法 :选择 1 998年 1月至 2 0 0 0年 1 2月在我所行HSCT的 2 0 2例患者进行回顾性分析。移植前预处理采用化疗联合全身照射或马利兰联合环磷酰胺方案。多数异基因HSCT移植后移植物抗宿主病 (graft versushostdisease,GVHD)预防采用环孢菌素A联合短程甲氨喋呤。CMV感染预防采用更昔洛韦 (ganciclovir,DHPG) 1 0mg·kg-1 ·d-1 ,分两次静点 ,移植前第 9天至移植前第 2天连续 8d。移植后应用多聚酶链反应 (PCR)定期进行病毒DNA监测 ,CMV阳性或发生CMV病的患者应用DH PG或 /和膦甲酸钠或联合这两种制剂进行治疗。结果 :HSCT后CMV活动性感染率为 35 .6 % (72 /2 0 2 ) ;间质性肺炎最常见占感染人数的 4 4 .4 % (32 /72 ) ,单纯病毒血症占 33.3% (2 4 /72 ) ,CMV肠炎占 1 3.9% (1 0 /72 )。感染的高峰时间为移植后第 6 0～ 90天。DHPG或 /和膦甲酸钠治疗的总有效率约为 6 0 %。经单因素分析证明异基因HSCT ,急、慢GVHD是HSCT后CMV感染的重要危险因素 ,而年龄、性别、疾病种类、移植前CMV血清学状态、预处理方案与CMV感染无显著相关性。结论 :CMV感     

肝脏活检在异基因造血干细胞移植中的应用

目的评价肝脏活检在异基因造血干细胞移植（Allo—HSCT）后肝功能损害患者中的诊断及治疗意义。方法病例选自北京大学人民医院血液病研究所1999年2月至2004年1月所做的10例Allo—HSCT并接受肝脏活检的患者,男5例,女5例。年龄15～56岁（中位34．5岁）。其中白血病8例,骨髓异常增生综合征1例,重症再生障碍性贫血1例。移植方式包括非血缘骨髓移植1例,同胞全相合Allo—HSCT6例,单倍体移植1例,脐带血移植2例。预处理方案,采用全身照射加环磷酰胺2例,非全身照射方案8例。移植物抗宿主病全部采用环胞菌素A加短程甲氨蝶呤加霉酚酸酯方案。移植前供受者常规接受肝功能及乙肝、丙肝病毒检测。10例患者均接受经皮肝穿刺活检,得到肝组织标本分别经苏木素-伊红和Masson染色在光学显微镜下观察及免疫组织化学检测。结果10例患者Allo—HSCT后出现肝功能损害的时间为2～5个月,中位3．8个月。移植前7例患者HBV、HCV检测阳性,移植后仍阳性。移植前后3例患者HBV、HCV检测全部阴性,临床诊断为移植物抗宿主病（GVHD）肝损害。10例患者在出现肝功能损害时,9例伴有不同程度慢性GVHD（cGVHD）其他表现。10例患者均根据临床诊断采用初始治疗后,肝功能改善不好。分别于Allo—HSCT后4～12个月（中位5．5个月）行肝脏活检。病理结果3例肝炎病毒阴性者为cGVHD肝损害,其余7例为肝炎病毒感染合并cGVHD肝损害。3例单纯诊断为cGVHD肝损害患者,经调整抗GVHD药物后,肝功能恢复;其余7例患者采用抗病毒及调整免疫抑制剂等综合治疗,结果2例肝功能恢复并存活。5例死亡,其中2例在治疗中肝功能改善不好,因合并肺部感染死亡,3例因肝功能衰竭,肝昏迷死亡。结论Allo—HSCT后,对于临床诊断肝脏GVHD肝损害而治疗效果不好的患者,肝脏活检可起到鉴别诊断和指导进一步治疗的作用。肝炎病毒感染与GVHD肝损害合并存在者预后差。肝活检对指导治疗具有一定局限性,还需结合临床及病理制订治疗方案。     

造血干细胞移植患者侵袭性真菌病的二级预防

侵袭性真菌病(IFD)是造血干细胞移植(HSCT)后常见的严重并发症,大剂量化疗、长时间粒细胞缺乏、免疫抑制剂及移植物抗宿主病(GVHD)等因素增加其发病风险,严重影响HSCT的成功率^[1]。中国血液病患者IFD流行病学(CAESAR)研究显示:IFD在血液肿瘤化疗患者中发生率为2.1%^[2],而在异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)患者中发生率达7.7%^[3],严重影响患者的预后。     

造血干细胞移植受者免疫抑制治疗 与巨细胞病毒感染的关系

目的：探讨异基因造血干细胞移植(HSCT)术后免疫抑制治疗个体外周血中巨细胞病毒(CMV)脱氧核糖核酸( DNA)与免疫抑制剂环孢素A(CsA)血药浓度变化的关系,并评价其潜在的临床应用价值。方法：选择行异基因HSCT的32例患者进行回顾性分析。移植前采用更昔洛韦预防CMV感染。移植后应用核酸扩增(PCR)荧光检测法定期进行CMV DNA监测。根据CMV DNA检测结果将患者分为CMV DNA阴性组和CMV DNA阳性组。用酶放大免疫技术（EMIT）定期监测CsA血药浓度,分析CMV DNA与CsA血药浓度的关系。结果：异基因造血干细胞患者CMV感染率为53.13%(17/32);DNA阳性组的CsA血药浓度明显高于CMV DNA阴性组（P＜0.05）;通过ROC曲线得出异基因干细胞移植患者使用CsA药物第7,14,21天时曲线下面积与0.5比较,差异具有统计学意义（P＜0.05）,分别对应的血药浓度为203.15, 215.55和302.65 ng/mL。结论：免疫抑制药物浓度可影响CMV DNA的动态变化,CsA血药浓度偏高可能是导致造血干细胞移植受者移植后对CMV易感的原因之一,适时监测CsA血药浓度对指导临床用药有一定的辅助价值。     

急性髓系白血病异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒血症对白血病复发的影响

目的 探讨急性髓系白血病(AML)患者异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后巨细胞病毒(CMV)感染对白血病复发的影响.方法 回顾性分析2005年1月至2014年1月中山大学附属中山医院血液内科接受allo-HSCT的62例AML患者(除外急性早幼粒细胞性白血病),观察患者移植后白血病复发与CMV感染及供受者临床特征的关系.结果 单因素分析显示,初诊时白细胞＞100×109/L、疾病高危、移植后环孢素浓度低于200 μg/L的患者复发率高,而移植后CMV阳性及慢性GVHD患者复发率低;Cox多因素分析显示,疾病高危(RR=3.296,95％ CI:1.274～8.530,P＝0.014)、无慢性GVHD(RR =0.167,95％ CI:0.042～0.668,P=0.011)及CMV阴性(RR＝0.285,95％CI:0.084 ～0.973,P=0.045)是移植后复发的独立危险因素.结论 AML患者allo-HSCT后CMV血症是影响复发的有利因素之一.     

异基因造血干细胞移植术后患者血CM V-DNA 的定期监测及危险因素分析

目的：观察异基因干细胞移植术（allo‐HSCT ）后患者血液巨细胞病毒DNA （CM V‐DNA ）阳性率,探讨巨细胞病毒感染的危险因素。方法收集30例在2012年7月至2014年9月行allo‐HSCT患者,用PCR方法定量检测患者移植术后第1个月（1次／周）、第2～3个月（1次／2周）、第4～6个月（1次／月）静脉血中CM V‐DNA的拷贝数,统计各时期的阳性率。结果30例患者有13例感染巨细胞病毒,感染率为43．3％。第1个月内阳性患者有4例（13．3％）,第2个月有11例（36．7％）,第3个月有2例（6．7％）,第4个月0例,第5个月有2例（6．7％）,第6个月0例。异基因干细胞移植术后半年内第2个月患者CM V‐DNA阳性率较高。相关分析提示CMV‐DNA阳性率与兔抗人胸腺细胞免疫球蛋白（ATG）、巴利昔单抗（CD25单抗）的使用、急性移植物抗宿主病（GVHD）的发生程度有关,与性别、年龄、原发病危险分层、人类白细胞抗原（HLA）相合情况、预处理方案、中性粒细胞恢复时间等无关。结论定期监测allo‐HSCT后患者血液CM V‐DNA可及时干预,减少巨细胞病毒感染并发症。     

异基因外周血造血干细胞移植后巨细胞病毒间质性肺炎

目的：探讨异基因外周血造血干细胞移植(Allo-PBSCT)后间质性肺炎（IP）的病因,危险因素及防治方法。方法;将Allo-PBSCT患者分为更昔洛韦（GCV）预防组18例和对照组（未预防组）22例,比较两组巨细胞病毒南性肺炎（CMV－IP）的发生率。结果：对照组Allo-PBSCT患者中并发CMV－IP5例,预防组无1例发生CMV－IP。发生CMV－IP的高危因素为女性供者,合并移植物抗宿主病（GVHD）。4例治愈,1例治疗无效死亡。结论：Allo-PBSCT后CMV感染是IP的主要病因,IP的发生与GVHD严重程度及妇性供者密切相关,GCV能有效预防和治疗CMV－IP。     

造血干细胞移植后患者血浆巨细胞病毒DNA拷贝数与巨细胞病毒病的关系

目的 评价实时定量聚合酶链式反应(RQ-PCR)法监测造血干细胞移植后患者血浆巨细胞病毒(CMV)DNA水平的临床意义.方法 对2005年1月至2007年1月之间进行异基因造血干细胞移植的318例患者,自移植应采用RQ-PCR每周监测血浆CMV-DNA水平,6×102拷贝/ml视为CMV-PCR阳性.结果 共136例患者(42.8%)检测出1025例次血浆CMV-DNA阳性,首次阳性出现的中位时间为42 d,最高拷贝数及初始拷贝数中位值分别为1.5×104拷贝/ml和4.5×103拷贝/ml.318例患者中共发生CMV肺炎及肠炎23例,累积发病率为7.2%.14例患者在发生CMV病之前出现CMV血症,4例在出现临床表现后方检测出病毒阳性,另有5例CMV血症阴性的患者诊断为CMV疾病.发生CMV病的患者其CMV-DNA最高拷贝数高于未发生组患者(4.3×104拷贝/ml比1.3×104拷贝/ml,P=0.009),但初始拷贝数差异无统计学意义(3.7×103拷贝/ml比4.7×103拷贝/ml,P=0.63).CMV-DNA最高拷贝数随着发生CMV感染的次数增加而增高,在发生CMV感染1～4次的患者中,中位数值分别为82.6×102、261.3×102、440.8×102和10 659.0×102拷贝/ml(P<0.01),且CMV肺炎及CMV肠炎发病率也从2.7%(5/182)明显上升至50%(2/4)(P=0.001).结论 采用RQ-PCR法监测造血干细胞移植后患者血浆CMV-DNA水平对CMV病的发生有一定的预测意义,高CMV-DNA拷贝数及多次感染者预示着CMV病发生概率升高.     

异基因造血干细胞移植后巨细胞病毒肺炎临床特点分析

目的：研究定量监测血浆巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)DNA水平指导的抗病毒抢先治疗下, 造血干细胞移植后CMV肺炎的临床特点及预后。方法:分析2005年1月至2008年8月之间行异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem-cell transplantation, allo-HSCT)后发生CMV肺炎的22例患者, 总结发病的临床特征及评价影响预后的相关因素。结果:750例allo-HSCT患者中共22例发生24例次CMV肺炎(2.9%), 发病中位时间为+51d(+30～180 d), 16例(72.7%)患者在发病前后出现CMV血症, 6例患者血浆CMV-PCR持续阴性。23例次患者胸部CT上出现间质性改变(如弥漫的磨玻璃影、多发斑片影等)。治疗上抗病毒药物联合皮质激素疗效较好, CMV肺炎总体治愈率为83.3%。单因素分析发现男性患者及重度急性移植物抗宿主病(acute graft-versus-host disease, aGVHD)是CMV肺炎的不良预后因素(P=0.034, P=0.023)。结论: 通过定量PCR监测CMV-DNA水平, 尽早诊断并给予适当抗病毒治疗可以明显改善CMV肺炎患者的预后。     

ABO血型不合对异基因造血干细胞移植的影响

目的:分析ABO血型不合对异基因造血干细胞移植(allo-HSCT )的影响.方法: 对北京大学人民医院血液病研究所148例ABO血型不合的allo-HSCT受者按不同的移植方式进行分析,并选用同期85例ABO血型相合的受者作比较.结果:主要ABO血型不合骨髓移植(BMT)组红细胞输注量多,红系恢复时间长.ABO血型不合的BMT、外周血干细胞移植(PBSCT)以及BMT PBSCT患者急性移植物抗宿主病(aGVHD)的发生率、巨细胞病毒(CMV)发生率及5年无病存活率与ABO血型相合患者相比差异无统计学意义.结论:ABO血型不合不影响造血干细胞移植的植活、主要合并症及预后.ABO血型不合的PBSCT与BMT相比,红细胞输注量少,红系恢复较快.     

清髓性不含抗胸腺细胞球蛋白方案的非血缘脐血移植后免疫重建与巨细胞病毒感染情况分析

目的：探讨清髓性不含抗胸腺细胞球蛋白(ATG)方案的非血缘脐血移植(UCBT)后巨细胞病毒(CMV)感染(血症)的发病情况。方法回顾性分析100例接受清髓性不含ATG 方案的 UCBT 患者移植后 CMV 血症及 CMV 病发生情况,同时初步分析 UCBT 后受者早期淋巴细胞重建情况。结果 UCBT 后受者外周血 CMV 拷贝数>10/ ml 发生率为92．7%,血 CMV 拷贝数>103/ ml 发生率为75．3%;中位发生时间为42 d。 CMV 病发生率为1．03%。 CMV 转阴的中位时间为94 d。 UCBT 后淋巴细胞持续稳定上升,中位CD3+ CD8+ T 细胞及 CD3+ CD4+ T 细胞分别于移植后2个月及5个月达正常范围。结论清髓性不含 ATG 方案的UCBT 后 T 细胞免疫重建相对较快,CMV 血症发生率高,但CMV 病发生率较低。     

Valganciclovir for pre-emptive therapy of cytomegalovirus viraemia after hematopoietic stem cell transplantation: a prospective multi-center trial

Background Despite its widespread use in the management of HIV-related cytomegalovirus （CMV） infection, there have been surprisingly few reports of the use of valganciclovir （VGC） in the post-allotransplant setting.So far, no multi-center, non-crossover trial data have been available with the use of this drug as the primary pre-emptive.The present study evaluated the efficacy and safety of VGC for preemptive therapy of CMV infection after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation （HSCT）.Methods From January to April 2007, VGC was adopted in eleven centers in mainland China for pre-emptive therapy of CMV infection in consecutive patients undergoing allogeneic HSCT.Allogeneic HSCT recipients were followed weekly via CMV pp65 antigenemia assay or real-time quantitative polymerase chain reaction （PCR） for detection of CMV-DNA.Patients with a positive assay were treated with VGC, 900 mg P.O.twice a day for 14 days followed by 900 mg P.O.once a day for 14 days after a negative result or the CMV-DNA load was lower.Results A total of 54 patients （15 siblings, 28 mismatched related donors, 11 unrelated donors） had a positive assay treated with oral VGC.The seroconversion rate was 89% （48/54） as confirmed by a negative assay; six patients failed oral VGC.No significant toxicity was encountered.No case of CMV disease was diagnosed in the responding patients with a median follow-up of 5.3 months after the drug administration.Conclusion Pre-emptive therapy of CMV viraemia with oral VGC is safe and effective in allogeneic HSCT.     

环孢素A＋甲氨蝶呤＋霉酚酸酯＋抗胸腺细胞球蛋白四联方案预防无关供体造血干细胞移植中的移植物抗宿主病

OBJECTIVE: To evaluate the efficacy of quadruple therapy with cyclosporine (CsA), methotrexate (MTX), mycophenolate mofetil (MMF) and low-dose antithymocyte globulin (ATG) for graft-versus-host disease (GVHD) prophylaxis in unrelated donor hematopoietic stem cell transplantation (URD-HSCT). METHODS: Thirteen patients with leukemia received URD-HSCT, of whom 11 had HLA genotypes and 2 had mismatch for 1 genetic locus. Another 11 leukemia patients all serologically matched underwent related donor (RD)-HSCT. Total body irradiation (TBI) plus cyclophosphamide (CTX) was adopted in 19 cases and modified BuCY conditioning regimen (hydroxyurea, busulfan, Ara-C, Cyclophosphamide ) in the other 5 cases. All the patients received CsA+MTX protocal for GVHD prophylaxis, and in those undergoing URD-HSCT, additional MMF and low-dose ATG were used. RESULTS: The incidence and severity of regimen-related toxicity differed little between unrelated and related transplantation. Acute GVHD (aGVHD) occurred in 46.2% of the patients undergoing URD- HSCT and in 55.6% of those with RD-HSCT, respectively. Four patients had chronic GVHD (cGVHD), in the 7 ones who could be followed up after URD-HSCT; 6 of the 9 patients with RD-HSCT developed cGVHD postoperatively. One patient with URD-HSCT died of hemorrhagic cystitis and another with RD-HSCT died of cytomegalovirus (CMV) pneumonia. The at one-year disease-free survival rate was 87.5% and 90.9% in patients with unrelated and related transplantation respectively. Significant difference was not noted in the positivity rate of CMV antigen between the patients receiving URD-HSCT or RD-HSCT. CONCLUSION: CsA+MTX in combination with MMF and low-dose ATG may decrease the incidence and severity of aGVHD without increasing transplant-related mortality or CMV infection.