无细胞毒性猪去细胞真皮基质制备及转归研究

DM植入SD大鼠皮下后未引发免疫排斥.术后3周,PADM与创面黏附牢固,不易从创面揭离;术后24周仍然可见其结构;早期PADM被大量炎性细胞浸润,随时间延长成纤维细胞逐渐增多,并出现新生的毛细血管,胶原纤维逐渐排列规则、致密.结论 高渗盐水/氢氧化钠方法 制备PADM过程简单,所得真皮基质无细胞毒性,生物安全性高,在体内可作为真皮支架长期存在.     

激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质

目的 探讨激光打孔制备微孔猪脱细胞真皮基质（PADM）的可行性。 方法 采用胰蛋白酶/TritonX-100的方法制备PADM，使用CO2激光加工机进行打孔。对比激光微孔PADM与传统网状PADM的外观。将48只SD大鼠背部制作全层皮肤缺损创面，随机分为3组，每组16只。微孔组：移植激光微孔PADM＋自体刃厚皮；网状组：移植网状PADM＋自体刃厚皮；对照组：仅移植自体刃厚皮。术后定期观察各组大鼠创面愈合情况，计算移植物成活率和创面收缩率。结果激光微孑LPADM微孔呈矩阵样整齐排列，与网状PADM比较真皮基质分布更均匀。术后6周，微孔组移植物成活率与对照组比较差异无统计学意义，但明显高于网状组（P〈0．05）；微孔组创面收缩率明显低于网状组和对照组（P〈0．05）。结论 激光打孔可制备激光微孔PADM，其真皮基质与自体刃厚皮复合移植可提高创面修复质量。     

混合表皮细胞与脱细胞真皮基质构建复合皮的移植和转归研究

探讨混合表皮细胞与脱细胞真皮体外构建的复合皮作创面移植后的转归。将BALB／c小鼠的表皮细胞和人表皮细胞按一定比例混合，种植于脱细胞真皮基质表面，经体外培养后形成复合皮，然后移植于BALB／c小鼠全层皮肤缺损创面，观察人表皮细胞的转归。结果显示，复合皮移植后可封闭创面，人表皮细胞多位于新生表皮上层，随时间延长，数量逐渐减少并最终被小鼠自体表皮细胞替代。提示两种不同的表皮细胞按一定比例混合培养构建复合皮可封闭全层皮肤缺损创面，可望节省自体皮源，缩短体外培养时间。     

异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植治疗增生性瘢痕临床应用探讨

目的:异体脱细胞真皮基质与自体皮片复合移植是治疗深度烧伤增生性瘢痕的较好方法,可以明显改善手术部位的外观及功能,探讨该方法在不同部位中的应用及具体操作方法和注意事项.方法:在56例患者共78个创面上用商品化的同种异体脱细胞真皮与自体大张刃厚皮片复合移植,术区选择前臂、小腿、大腿、胸部等非功能部位以及膝关节、踝关节、肩关节、髋关节等功能部位,采用一步法.结果:76个创面的复合移植皮片完全成活,前臂、小腿、大腿等非功能部位术区皮片外观、质地和弹性均令人满意,无明显瘢痕形成;胸部术区皮片外观、质地和弹性欠佳,膝关节、踝关节、肩关节、髋关节等功能部位术区皮片外观、质地和弹性绝大多数令人满意,无明显瘢痕形成,关节活动功能明显改善,2个创面因基底血运不良成活欠佳,残留明显瘢痕.结论:一步法复合移植具有较高的成功率,术后效果与术区部位、网状异体脱细胞真皮基质拉网大小、创面基底、自体刃厚皮片质量有关.     

无细胞真皮基质的血管化研究进展

深度皮肤缺损多见于烧伤、创伤、慢性皮肤溃疡、瘢痕整形等患者 ,传统的治疗方法常常导致植皮区及供皮区创面收缩、色素沉着及瘢痕形成 ,严重影响外观及功能 ,而皮肤缺损面积较大又面临自体皮源严重不足的问题 ,无细胞真皮基质的临床应用为改善创面修复质量 ,解决皮源问题 ,开辟了新途径。无细胞真皮基质 (Acellulardermalmatrix ,ADM )是指通过酶消化、高渗盐浸泡等方法去除异体 (种 )皮中的表皮层和真皮细胞成分 ,而保留正常的胶原三维结构及基底膜的真皮支架 ,在皮肤重建中具有较高的应用价值。目前临床多用自体薄层皮片移植或ADM加自…     

瘢痕畸形应用脱细胞异体真皮复合移植的疗效观察

目的评价脱细胞异体真皮在烧伤后期瘢痕畸形整形中的应用价值。方法对24例烧伤后期瘢痕畸形病人整形后继发创面进行脱细胞异体真皮与自体刃厚皮片复合移植。结果24例病人复合移植皮片成活率为95％。成活的复合移植皮片具有外观平整,颜色与邻近正常皮肤相近似,无明显收缩,触之柔软,耐磨,弹性好等特点。结论脱细胞异体真皮是烧伤后期瘢痕畸形整形中比较理想的材料。     

含表皮细胞的无细胞真皮复合皮的构建及生长活性研究

为探讨体外构建复合皮的可能性，制备来源于猪皮的无细胞真皮基质，在其表皮面种植表皮细胞于体外培养，定期消化分离无细菌真皮上的表皮细胞，采用细胞计数法和增殖试验观察表皮细胞增殖活力，并分别于1周和2周后通过组织切片HE染色、扫描电镜观察细胞生长状况。结果显示，表皮细胞随培养时间延长，数量明显增多，且仍具有一定的增殖潜力。培养1周、2周后分别形成单层细胞膜片及含3－6层细胞的复层膜片。提示以异种无细菌真皮为载体，可于体外成功构建含表皮细胞层的活性复合皮。     

无细胞真皮研究进展

皮肤是人体最大的组织器官,无论在平时还是战时,皮肤损伤都是最常见的。皮肤创伤修复是一个复杂而渐进的过程,需要多方面的协同作用,不仅需要机体内部的生理修复,同时也需要人为提供创伤修复材料及时覆盖伤口,提供有利于伤口愈合的环境。因此,近年来对创伤修复材料的研究很多。创伤修复材料主要分为天然材料和人工材料。天然生物材料是最早使用的创伤修复材料之一,同时也是其他生物材料不可替代的重要材料,尤其在近20年来发展更快。     

异种无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后细胞外基质的变化

目的观察异种无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后细胞外基质的动态变化。方法以SD大鼠为动物模型,在其背部造成4 cm×5 cm的全层皮肤缺损。大鼠分为薄自体皮移植组和猪无细胞真皮基质+薄自体皮移植组,分别于移植后1,2,3,4,8,12,16周取标本,检测羟脯氨酸含量、Ⅰ/Ⅲ型前胶原mRNA的表达、透明质酸含量及纤维连接蛋白的变化。结果猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后,各时相点羟脯氨酸含量、Ⅰ型前胶原mRNA的表达均低于薄自体皮移植组(P<0.05);Ⅲ型前胶原mRNA的表达与薄自体皮移植组差异无统计学意义(P>0.05);透明质酸含量高于薄自体皮移植组(P<0.05);而纤维连接蛋白的表达在早期高于薄自体皮移植组,后期则低于薄自体皮移植组(P<0.05)。结论猪无细胞真皮基质与薄自体皮复合移植后能够减少胶原合成和Ⅰ型前胶原mRNA的表达,增加皮肤中透明质酸含量,从而减轻瘢痕增生。纤维连接蛋白早期表达增高有利于创面愈合及基底膜的重塑,而后期表达降低有助于减轻瘢痕增生。     

无细胞真皮复合皮制备及移植的实验研究

体外构建表皮细胞-无细胞真皮活性复合皮，移植于裸鼠背部创面，并与单纯移植表皮细胞膜片相对照。术后观察创面愈合情况，行光镜、电镜及免疫组化检测。结果示复合皮移植后创面覆盖率高，外观情况良好，收缩程度低。组织学检测提示复合皮移植后上皮分化充分，胶原增生有序，表皮-真皮连接结构重建明显，提示无细胞真皮复合皮移植可改善创面愈合质量。     

三倍频Nd:YAG激光器不同扫描速度对猪脱细胞真皮基质微孔孔径的影响

目的 探讨三倍频Nd:YAG激光器不同扫描速度对猪脱细胞真皮基质微孔孔径的影响.方法 在输出功率、频率等参数固定的前提下,调整激光束扫描速度(10～600 mm/s),以轮廓迂回法对猪脱细胞真皮基质进行打孔.分别测量打孔后真皮基质Triton X-100溶液浸泡洗涤前、后微孔入口及出口的孔径,计算真皮基质热损伤率.结果 激光束扫描速度小于或等于80 mm/s,热损伤率较低,微孔孔径变化不明显;随着激光束扫描速度的加快,热损伤率增大,孔径随之增大;当扫描速度加快至500 mm/s,孔径开始缩小;当扫描速度为600 mm/s,激光束不能穿透真皮基质形成微孔.结论 不同激光束扫描速度下,真皮基质微孔形成情况不同,综合考虑热损伤率与打孔效率,80 mm/s为最适宜的激光束扫描速度.     

脱细胞真皮基质的改建及其作为软骨细胞移植载体在兔软骨缺损修复中的应用

目的:探讨脱细胞真皮(acellular dermal matrix,ADM)经改建后作为软骨细胞移植载体的可行性。方法:取新生小牛背部真皮组织,分别用自制脱细胞剂和表面活性剂对其进行脱细胞处理后,观察得出自制脱细胞剂脱细胞的效果良好,但脱细胞后的胶原纤维结构需要改建;将自制脱细胞剂脱细胞后的真皮组织分别用按一定浓度配比的消化液和胃蛋白酶消化,发现经配比消化液改建后的胶原纤维表面光滑、孔隙均匀,符合软骨细胞移植载体的要求;比较戊二醛和水溶性交联剂对改建后脱细胞真皮基质的交联效果,可见水溶性交联剂交联后的ADM载体植入大鼠皮下后,其生物相容性良好;用生长因子对改建和交联后的ADM进行纤维表面修饰,然后接种乳兔软骨细胞,观察细胞粘附及生长情况;最后将接种有兔自体软骨细胞的ADM植入兔胫骨软骨缺损部位,术后定期取材观察修复效果。结果:(1)经戊二醛交联后的ADM植入大鼠皮下后有强烈的炎症反应,并有组织出血坏死;而经水溶性交联剂交联的ADM的组织相容性较好。(2)在植入接种有自体软骨细胞的ADM24周后,大白兔胫骨的软骨缺损修复完好,附和的细胞能够存活且增殖,ADM本身基本降解。结论:经脱细胞、纤维改建、交联及生长因子修饰的ADM孔隙均匀,组织相容性好,适于细胞粘附及长期生长。ADM胶原支架在兔体内可基本降解,未见排异反应,移植24周后骨缺损修复。     

防水型防晒乳膏皮肤刺激性及光毒性的实验研究

目的研究防水型防晒乳膏对动物皮肤的刺激性和光毒性实验,为其安全使用提供临床前安全性评价依据。方法将防水型防晒乳膏单次、多次重复涂抹于家兔背部完整脱毛皮肤上,采用同体左右侧自身对比,涂药期间每日观察局部皮肤红斑及水肿情况;取防水型防晒乳膏适量涂抹于豚鼠背部完整皮肤上,给一定剂量长波紫外线照射,3d后观察光敏反应。结果防水型防晒乳膏性质温和、安全,对皮肤无刺激性及光毒性。结论防水型防晒乳膏是一种安全性较好的外用制剂。     

MEBT/MEBO联合异种(猪)脱细胞真皮基质敷料在深Ⅱ度烧伤中的应用效果分析

目的 对比分析烧伤创疡再生医疗技术(MEBT/MEBO)联合异种(猪)脱细胞真皮基质敷料治疗深Ⅱ度烧伤创面的临床效果.方法 选取2014年12月至2018年12月楚雄彝族自治州人民医院收治的分别采用MEBT/MEBO联合异种(猪)脱细胞真皮基质敷料治疗的25例深Ⅱ度烧伤患者(设为观察1组)以及采用磺胺嘧啶银乳膏联合凡士...     

异种(猪)去细胞真皮基质与自体微粒皮及自体刃厚皮复合移植的比较研究

目的　比较异种 (猪 )去细胞真皮基质 (PADM)与自体刃厚皮、PADM与自体微粒和同种异体皮以及自体微粒皮加同种异体皮覆盖烧伤创面后愈合质量的差异。方法　72只SD大鼠背部全层皮肤缺损创面分别用PADM +自体刃厚皮 (实验组I)、PADM +自体微粒皮 +同种异体皮 (实验组II)和微粒皮 +同种异体皮 (对照组 )覆盖 ,术后定期观察创面愈合情况并计算植皮成活率和收缩率 ,同时行组织学观察。结果　实验组I、II复合皮外观较平整 ,植皮成活率高 ,收缩程度轻 ,与对照组比较差异有统计学意义 (P <0 0 5 ) ,且实验组I创面愈合情况优于实验组II。组织学观察实验组I、II上皮化良好 ,胶原纤维排列有序 ,基底膜结构完整。结论　异种 (猪 )去细胞真皮基质与自体刃厚皮覆盖烧伤创面后愈合质量最佳 ,异种 (猪 )去细胞真皮基质与自体微粒和同种异体皮覆盖烧伤创面后愈合质量次之 ,但明显优于微粒皮加同种异体皮组。     

猪腹膜脱细胞基质联合微骨折技术修复兔膝关节软骨缺损

目的:检测猪腹膜脱细胞基质(pig peritoneum-derived acellular matrix,PPAM)支架材料联合微骨折修复兔膝关节软骨缺损的效果。方法:采用CCK-8 Kit测定SD大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMMSCs)在PPAM支架上的生长状态,Live/Dead染色观察细胞在PPAM支架上的活性。用直径4mm环钻造成深度约1.5 mm的新西兰大白兔膝关节软骨缺损,微骨折术后将PPAM支架植入软骨缺损处,单纯微骨折技术(Microfracture,MF)作为对照组,分别在第6周、12周和24周取材。大体观察、HE染色、甲苯胺蓝染色和II型胶原(COL II)免疫组化染色检测软骨缺损修复的效果。结果:CCK-8 Kit和Live/Dead染色结果显示PPAM支架支持细胞生长和增殖,无细胞毒性。大体观察和组织学检测显示PPAM联合MF修复软骨缺损能促进软骨缺损填充组织的质量,组织学评分优于单纯MF组。结论:PPAM支架是一种有良好生物相容性的天然材料来源组织工程材料,联合MF技术能促进关节软骨缺损的修复。     

参附注射液在肝移植术后的应用

目的探讨参附注射液在肝移植术后应用的疗效。方法2004年1月~2005年3月实施的同种异体原位肝移植手术病例30例,随机均分为2组,对照组予以常规补液、对症支持等治疗,治疗组在此基础上加用参附注射液100ml静注,两组进行对比分析研究。结果两组患者在治疗前平均动脉压(MAP)、心率(HR)及血乳酸、IL-6、IL-8、TNF-α差异无显著性(P>0·05)。参附注射液治疗结束后120min,治疗组MAP从53·21±8·52mmHg增至75·62±7·58mmHg,HR从115·3±13·2/min降至90·1±7·2/min,血乳酸、IL-6、IL-8和TNF-α分别从9·82±3·96mmol/L、89·02±43·75pg/ml、58·24±33·61pg/ml和42·33±28·15pg/ml降至4·31±2·11mmol/L、30·08±25·12pg/ml、29·83±20·05pg/ml和24·52±15·61pg/ml,与对照组相比有显著性差异(P<0·05)。结论肝移植术后用参附注射液治疗的患者平均动脉压和心率均有所改善,并降低了血乳酸和炎症因子水平,对循环和缺血再灌注损伤有较好的改善作用。     

MEBO治疗腋臭微创术后皮肤缺损45例临床应用体会

目的:以皮肤原位再生医疗技术与传统方法在腋臭微创原位植皮术后的应用,对部分皮肤缺损治疗后的愈合时间、单次费用、总费用等方面进行对比.方法:对腋臭微创原位植皮术后有部分皮肤缺损的病例,采用皮肤原位再生医疗技术,以MEBO油纱贴于皮肤缺损处,外用多层干纱布加压固定,每24小时换药1次,对于路程较远的患者直接采用患处涂药,每6小时自行换药1次,换药前需清除陈旧药膜,每周门诊随访.结果:皮肤原位再生医疗技术与传统方法单次治疗费用相差不大,但平均愈合天数及治疗总费用远低于对照组,同时无需二期缝合,均换药治愈.结论:应用MEBO治疗腋臭微创术后创面,可防止创面感染,改善创面局部微循环,促进创面愈合,该疗法适合在临床推广应用.