乙酰胆碱对海马CA1区痛兴奋神经元电活动的影响

目的 研究侧脑室注射乙酰胆碱(acetylcholine,Ach)对大鼠海马 CA1 区痛兴奋神经元(pain-excitation neurons, PEN)电活动的影响.方法 以电脉冲刺激右侧坐骨神经作为伤害性刺激,用玻璃微电极细胞外记录神经元放电.结果 1) 伤害性刺激使海马 CA1 区 PEN 诱发放电频率增加; 2)与对照组相比,脑室注射 Ach (20μg/10μl)后PEN诱发放电频率的净增值减少,潜伏期延长(P<0.05).结论 Ach 参与了海马CA1区伤害性信息的调制.     

脑室注射催产素及抗催产素血清对大鼠游泳持续时间的影响

为探讨催产素(OT)在应激过程中的作用,采用侧脑室注射OT及抗OT血清,观察了50只大鼠游泳持续时间的变化。生理盐水组及正常兔血清组对大鼠无明显影响。脑室注射0.625、1.25、2.5及5.0ngOT,游泳持续时间缩短,且与给药剂量之间呈负相关(r=-0.950,P<0.05)。在注射抗OT血清2、4及8 μl后1～4d大鼠游冰持续时间均延长(P<0.01)。上述结果表明中枢内OT含量增多对游泳活动不利。     

纳洛酮对催产素所致小鼠记忆减退的影响

目的观察侧脑室分别给予纳洛酮、催产素（oxytocin,OT）对小鼠学习记忆的影响及阿片受体在OT影响小鼠学习记忆中的作用。方法按分层随即区组设计将小鼠分成4组（n=7）：生理盐水组（NS组）、纳洛酮组（Nal组）、OT组、Nal＋OT组。采用避暗实验分别测定给药后第1天、第2天小鼠的潜伏期及错误次数。结果用药后第2天,与NS组相比,OT组错误次数增加（P〈0．01）,潜伏期缩短（P〈0．05）;与OT组相比：Nal＋OT组的错误次数减少（P〈0．05）,潜伏期差异无统计学意义（P〉0．05）。结论在本实验条件下,侧脑室微量注射OT能损伤小鼠的记忆功能,而侧脑室给予阿片受体拮抗剂纳洛酮后,可逆转OT所致的记忆损伤,提示OT损害记忆的作用与阿片受体有关。     

催产素预处理对胎鼠海马脑片缺氧无糖损伤后OTR、GABAAR β1表达的影响

目的：研究催产素（OT）预处理对胎鼠海马脑片缺氧无糖损伤后催产素受体（OTR）、γ-氨基丁酸A受体β1亚基（GABAARβ1）表达的影响,探讨OT神经保护的作用机制。方法：采用胎龄20dSD大鼠海马脑片,实验组经含10-6mol&#183;L-1OT人工脑脊液（ACSF）孵育预处理后行缺氧无糖损伤（OGD）,对照组经正常ACSF孵育后直接行OGD,各15min,SP免疫组化法半定量测定海马CA1区OTR、GABAARβ1表达变化,电镜观察神经元损伤情况。结果：实验组海马CA1区OTR、GABAARβ1表达均显著高于对照组（t=2.118、P=0.048;t=2.272、P=0.036）。对照组大量神经元受损,核固缩或碎裂,部分核膜溶解,实验组细胞核、粗面内质网、线粒体均较对照组有所改善,核膜较光滑,胞浆肿胀较对照组减轻。结论：OT上调胎鼠海马OTR、GABAARβ1表达,减少神经元变性坏死,增强大脑耐受缺氧损伤的能力,对胎儿中枢神经系统起保护作用。     

在脊髓水平由去甲肾上腺素和5-羟色胺引起的抗痛作用中阿片样物质只对前者起介导作用:大鼠福尔马林试验的电生理观察(英文)

在痛觉调制中 ,脑干下行抑制系统被认为至少包括去甲肾上腺素 (NE)能和 5 羟色胺 (5 HT)能两类下行投射纤维 ,在脊髓背角中实现对痛信号上传的阻断作用。对于NE能或 5 HT能末梢是否要通过内啡肽能中间神经元介导其镇痛作用 ,现在仍然存在争议。福尔马林皮下注射是一种常用于行为学观察的化学性慢痛模型 ,本实验则采用乌拉坦麻醉的Wistar大鼠 ,用常规细胞外放电记录技术 ,以后肢脚掌皮下注射福尔马林 (5 % ,5 0 μl)诱发的丘脑束旁核 (PF)神经元伤害性放电的改变作为背角中痛信号传递过程受调制的指标 ,观察鞘内注入NE和 5 HT对于福尔马林诱发的PF神经元伤害性放电的影响以及阿片受体拮抗剂纳络酮 (NAL)对于NE和 5 HT效应的影响。结果发现 :①皮下注射福尔马林可诱发PF神经元产生同行为反应类似的双相伤害性放电 ;②鞘内注入NE(6nmol,10 μl)或 5 HT(12 0nmol,10 μl)可显著抑制上述伤害性放电的第二相 ;③鞘内注入NAL(5 0nmol,10 μl)对伤害性放电第二相无明显影响 ;④鞘内注入同量的NAL能取消NE(6nmol,10 μl)引起的对伤害性放电的抑制效应而不能取消 5 HT(12 0nmol,10 μl)引起的对伤害性放电的抑制效应。上述结果表明 ,鞘内给予的NE可能要通过内啡肽能中间神经元释放阿片样物质以实现镇痛作用     

乙酰胆碱对海马CA1区痛反应神经元电活动的影响

目的 研究侧脑室注射乙酰胆碱(Ach)对大鼠海马CA1区痛反应神经元电活动的影响. 方法 以电脉冲刺激右侧坐骨神经作为伤害性刺激,用玻璃微电极细胞外记录神经元放电.结果 脑室注射Ach(20μg/10μl)可使痛兴奋神经元(PEN)放电频率的净增值减少,潜伏期延长;使痛抑制神经元(PIN)放电频率的净增值增加,完全抑制时程明显缩短. 结论 Ach能够减弱海马CA1区内的痛反应神经元对伤害性刺激的反应,表现为镇痛效应.     

侧脑室注射GABA,PTX对猫背海马神经元伤害性放电的影响

本实验观察了侧脑室注射γ-氨基丁酸及其拮抗剂印防己毒对背侧海马伤害性相关神经元诱发放电的影响。实验结果如下:<1>侧脑室注射γ-氨基丁酸可使多数背海马伤害性兴奋神经元的增频反应明显减弱(P<0.01);与此同时,多数背海马伤害性抑制神经元的减频反应亦明显减弱(P<0.01)。侧脑室注射γ-氨基丁酸对伤害性无关神经元有不同程度的激活作用。<2>侧脑室注射印防己毒对背海马伤害兴奋神经元及伤害性抑制神经元的伤害性反应,有呈现对抗性反应的,有加强的,还有无改变的。<3>侧脑室注射印防己毒可以使外源性γ-氨基丁酸对多数伤害性兴奋神经元的抑制作用明显减弱(P<0.01)。 上述结果提示:伤害性刺激时背海马伤害性相关神经元的诱发反应形式与脑内γ-氨基丁酸水平密切相关。     

依托咪酯对大鼠海马CA1区长时程增强的影响

目的:观察依托咪酯对大鼠海马CA1区锥体神经元产生的长时程增强(LTP)的影响.方法:断头法分离Wistar大鼠海马半脑,用切片机切出400 μm厚度的海马脑片,实验分4组.脂肪乳剂LTP组、依托咪酯LTP组、D-2-氨基-5-磷酸戊酸(D-APV) 脂肪乳剂LTP组、D-APV 依托咪酯LTP组的脑片分别以30 μl脂肪乳剂、30 μl依托咪酯(相当于5 μmol/L)、50 μmol/L D-APV 30 μl脂肪乳剂、50 μmol/L D-APV 5 μmol/L依托咪酯预孵60 min,记录基础兴奋性突触后电流(EPSC)10 min,然后给予高频刺激(HFS),继续记录EPSC 40 min.结果:给予NMDA受体竞争性拮抗剂D-APV后,大鼠海马CA1区HFS不能诱发LTP;脂肪乳剂LTP组给予HFS后,产生LTP,HFS后0～10 min 、11～40 min 的EPSC值分别为基础值的154.2%和150.7 %;依托咪酯LTP组给予HFS后,EPSC值迅速增加,然后逐渐下降,HFS后0～10 min的EPSC值为基础值的127.8%,10 min后达基线水平,HFS后11～40 min的EPSC值与HFS前差异无统计学意义(P＞0.05).结论:我们的实验条件所诱发的LTP是NMDA受体依赖型的,5 μmol/L依托咪酯不影响大鼠海马CA1区锥体神经元LTP的诱导,但损害LTP的维持.     

侧脑室注射腺苷对海马痛单位的影响及其可能机制

目的 :探讨腺苷 (Ado)对海马痛单位的影响及其可能机制。方法 :采用侧脑室给药法 ,参照 Sawyer兔脑图谱 ,用 SN-2型推进器以 2μm/ s速度将玻璃微电极插入海马 P2～ 5 ,L3～ 6 ,H6～ 9处引导神经元自发放电。在 P1 L4,5 H6 处埋藏套管 ,用牙托水配牙托粉固定 ,作脑室注射用。结果 :共引导 35 8个海马放电神经元 ,选择对伤害性刺激起反应的痛单位 80个 ,侧脑室分别注射不同剂量的腺苷及腺苷非选择性受体拮抗剂 8-苯茶碱 (8- PT)、腺苷 A1 受体选择性拮抗剂 8-环戊 - 1,3-二现代在嘌呤(DPCPX)和 ATP敏感性钾通道抑制剂格列苯脲 (Gli)后 ,发现腺苷能抑制大部分海马痛单位放电活 ,且呈明显的剂量依赖性。而腺苷的上述抑制作用均被 8- PT,DPCPX所阻断。格列苯脲能翻转腺苷对海马痛单位放电的抑制作用 (P <0 .0 0 1)。结论 :腺苷能抑制海马痛神经元的放电活动 ,其人造用机制可能与腺苷作用于海马痛神经元上的 A1 受体而引起神经元细胞膜上的 ATP敏感性钾通道激活有关     

癫痫大鼠海马白细胞介素6免疫反应性的变化

目的　探求白细胞介素 6 (IL 6 )与癫痫发病之间的关系。方法　将 6 1只Wistar大鼠分成 3组 ,实验组侧脑室注入马桑内酯 (CL) ,2 μl(0 0 5mg/kg体重 ) ,生理盐水对照组注入等量的生理盐水 ,空白对照组不做任何处理。实验中对大鼠的行为及脑电图 (EEG)进行观察和记录 ;同时运用免疫组织化学方法 ,对大鼠海马IL 6的免疫反应性进行分析。结果　实验组大鼠侧脑室注射CL过程中即诱发癫痫 ,且测到痫性脑电图 ,生理盐水对照组、空白对照组无癫痫症状及癫痫样脑电图出现 ;实验组大鼠海马CA1、CA2 区IL 6免疫反应性较生理盐水对照组及空白对照组显著增强 (P <0 0 1) ,表现为海马CA1、CA2 区阳性反应细胞数目增多 ,着色明显加深 ;生理盐水组和空白对照组之间差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。结论　癫痫的发病过程中海马神经元内的IL 6含量有显著的变化 ,二者之间可能存在着密切的联系。     

催产素对大鼠中缝大核痛放电的影响

采用玻璃微电极胞外记录的方法,观察皮下注射不同剂量的催产素（OT）对大鼠中缝大核（NRM）神经元伤害性诱发放电的影响。结果：OT使痛兴奋性神经元（PEN）伤害性诱发放电频率降低,使痛抑制性神经元（PIN）伤害性诱发放电频率增加,且都有量效关系。结论：OT的镇痛作用与中缝大核的痛兴奋神经元及痛抑制神经元的电活动有关。     

红藻氨酸对海马CAl区突触传递的作用

OBJECTIVE: To investigate the effect of activated kainate receptor on both the excitatory and inhibitory synaptic transmission in the neurons in the hippocampal CA1 region. METHOD: Blind whole-cell voltage-clamp recordings were performed on the CA1 pyramidal cells in adult rat hippocampal slices to examine and analyze the effect of bath-applied kainate (10 micromol/L) on CA1 afferent fiber-evoked excitatory postsynaptic currents (EPSCs) and inhibitory postsynaptic currents (IPSCs), respectively. RESULTS: Activation of kainate receptor significantly depressed both IPSCs (P <0.01) and EPSCs (P <0.01) in neurons in the hippocampus CA1 region. CONCLUSION: Activation of kainate receptors directly inhibit excitatory and inhibitory input in those neurons, which contributes to the development of epilepsy in the hippocampus by affecting the dynamic balance of the hippocampal neurons.     

催产素干预兔骨质疏松模型骨微结构变化规律的实验研究

目的 采用显微CT(Micro-CT)评估催产素(oxytocin, OT)干预骨质疏松(osteoporosis, OP)后的骨质及骨微结构时序变化规律。 方法 60只20周龄新西兰雌性大白兔随机分为对照组、OP模型组和OT干预组,每组20只。对照组施行假手术,OP组行双侧卵巢切除术(ovariectomy, OVX)。OT组在兔OVX术后第2周起,每天皮下注射催产素持续8周或至实验时间点为止,对照组和OP组则皮下注射生理盐水。三组分别在术后第0、4、8、10、12周处死,获取兔左后股骨上段行Micro-CT扫描,计测骨组织矿物质密度(tissue mineral density, TMD)和主要骨微结构参数,三组间结果进行比较、统计学分析。结果 OP组TMD、骨体积分数(bone volume fraction, BV/TV)、骨小梁数目(trabecular number, Tb.N)、骨小梁厚度(trabecular thickness, Tb.Th)从第8周开始较对照组明显降低(P＜0.05),骨结构模型指数(structure model index, SMI)、骨小梁间隙(trabecular space, Tb.Sp)则较对照组明显升高(P＜0.05)。OT组TMD直到第12周较对照组明显降低(P＜0.05),而BV/TV、Tb.N从第8周开始较OP组明显增加(P＜0.05),Tb.Th从第10周开始较OP组增加(P＜0.05),SMI、Tb.Sp从第8周开始较OP组明显降低(P＜0.05)。结论 OP模型兔早期活体OT干预可有效减缓骨质衰败程度,Micro-CT能动态观察其病理生理变化过程,OT可能是一种有效防治OP的药物。     

中央灰质注射升压素和催产素受体拮抗剂对刺激视上核镇痛和加强电针镇痛效应的影响

观察中央灰质（ＰＡＧ）在化学刺激视上核（ＳＯＮ）镇痛和加强电针（ＥＡ）镇痛中的作用。方法：ＰＡＧ内微量注射精氨酸升压素（ＡＶＰ）受体拮抗剂和催产素（ＯＴ）受体拮抗剂后，观察对ＳＯＮ内注射Ｌ－谷氨酸（Ｌ－Ｇｌｕ）引起的镇痛和加强电针镇痛的影响。结果：ＰＡＧ内注射Ｖ１拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）ＡＶＰ对化学刺激ＳＯＮ引起的镇痛和加强电针镇痛无影响；Ｖ１Ｖ２受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｅｔ）ＤＡＶＰ可部分抑制这种效应；ＰＡＧ内注射２００ｐｇＯＴ受体拮抗剂ｄ（ＣＨ２）５Ｔｙｒ（Ｍｅ）２，Ｏｒｎ８－ｖａｓｏｔｏｃｉｎ（ＯＶＴ）则可完全阻断这种效应。结论：ＰＡＧ参与刺激ＳＯＮ镇痛和加强电针镇痛的过程，ＳＯＮ释放的ＯＴ通过作用于ＰＡＧ内的ＯＴ和Ｖ２受体而发挥镇痛和加强电针镇痛作用。     

氯胺酮对大鼠海马脑片突触长时程增强效应的影响

目的：观察氯胺酮对大鼠海马脑片突触长时程增强(LTP)效应的影响,并探讨其影响记忆的机制。方法：98只雄性SD大鼠,断头后取出海马组织,制备厚400 μm的海马脑片。取49张脑片,随机分为7组：对照组、氯胺酮1、5、10、30、50和100 μmol•L^-1组。各组脑片分别灌流人工脑脊液(ACSF)、氯胺酮1、5、10、30、50和100 μmol•L^-1。采用细胞外微电极记录技术,记录海马脑片CA1区细胞外群体峰电位(PS)的变化。另取49张脑片,随机分为7组：LTP组、氯胺酮LTP 1、5、10、30、50和100 μmol•L^-1组。各组脑片分别灌流ACSF、氯胺酮1、5、10、30、50和100　μmol•L^-1。海马脑片记录PS 30 min后,施以100 Hz的高频强直刺激(HFS),诱发LTP,观察各组脑片HFS后PS幅值的变化。结果：与对照组比较,氯胺酮1、5和10 μmol•L^-1组给药后PS幅值无明显改变(P>0.05),氯胺酮30、50和100 μmol•L^-1组给药后PS幅值明显降低(P<0.01)。LTP组HFS后PS幅值增高,较刺激前增加了(52±12)% (P<0.01)。与LTP组比较,氯胺酮LTP 1和5 μmol•L^-1组HFS后其PS幅值无明显改变(P>0.05),氯胺酮LTP 10、30、50和100 μmol•L^-1组HFS后其PS幅值均明显降低(P<0.01)。结论：氯胺酮能够抑制海马LTP的形成而影响记忆功能,其机制与抑制海马N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体有关。     

外源性NO供体对脑缺血/再灌注神经元的保护作用

目的观察外源性一氧化氮（NO）供体硝普钠（SNP）和亚硝基谷胱甘肽（GSNO）对脑缺血/再灌注过程中c-jun N末端激酶3（JNK3）磷酸化的影响,及其对再灌注海马CA1区锥体神经元的作用。方法采用四动脉结扎法建立大鼠全脑缺血模型。SNP（5 mg/kg）溶于生理盐水,间隔1.5 h分别腹腔注射3次,第1次注射时间在全脑缺血前30 min。GSNO（100μg/kg）溶于生理盐水,缺血前20 min于侧脑室注射给药。大鼠随机分为假手术组、缺血/再灌注组、缺血/再灌注溶剂对照组、缺血/再灌注给予SNP组和缺血/再灌注给予GSNO组,缺血15 min后分别灌注1天或5天。利用免疫印迹、免疫沉淀和焦油紫染色法检测相关蛋白的表达、磷酸化水平及神经元细胞的存活。结果给予SNP组和GSNO组与生理盐水对照组相比,能够显著抑制脑缺血/再灌注过程中JNK3的磷酸化,并且能显著提高再灌注过程中海马CA1区锥体神经元的存活。结论外源性NO供体能够抑制脑缺血/再灌注过程中JNK3的磷酸化,进一步对海马CA1区锥体神经元发挥了保护作用。本研究为外源性NO对脑卒中的有效治疗提供了参考价值。     

去松果体对大鼠下丘脑-神经垂体系激素分泌影响免疫细胞化学研究

探讨松果体摘除对下丘脑－神经垂体系血管升压素（ＶＰ）、催产素（ＯＸＴ）合成和分泌影响。方法选用成年雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠，自然光照，分成正常对照组、假手术对照组和松果体摘除组。用改良的手术方法摘除松果体，术后１，２，４，８周取下丘脑，Ｂｏｕｉｎｓ液固定，石蜡包埋连续切片，用免疫细胞化学Ｓ－Ｐ法染抗ＶＰ、抗ＯＸＴ和抗垂体后叶激素运载蛋白（ＮＰ），再用计算机图像分析仪测定下丘脑视上核、室旁核中各阳性细胞数及染色程度。结果松果体摘除后１周室旁核中ＶＰ阳性神经元数量及视上核、室旁核两核之和的ＶＰ、ＮＰ阳性细胞增多（Ｐ＜０．０５），术后４周时视上核及室旁核之和的各阳性细胞数量均较对照组明显升高并延续至术后第８周，而同期染色强度则从术后２周起下降。结论松果体摘除解除了对下丘脑－神经垂体系的抑制作用，因而促进血管升压素、催产素合成、转运和分泌，该作用从术后１周起开始出现。     

催产素与其反义肽抗体的相似性

观察了催产素反义肽抗体（ａｎｔｉｂｏｄｙｏｆａｎｔｉｓｅｎｓｅｐｅｐｔｉｄｅｏｘｙｔｏｃｉｎ，简称ＡＳ－　ＯＴ－Ａｂ）对催产素受体（ＯＴＲ）的识别特性。该反义肽是按照牛催产素（ＯＴ）和它的结合蛋白ＮｅｕｒｏｐｈｙｓｉｎＩ（ＮＰＩ）氨基端前十二个氨基酸（包括ＯＴ［１－９］）编码ＤＮＡ的互补序列固相合成的，简称ＡＳ－ＯＴ。ＡＳ－ＯＴ与甲状腺球蛋白联结后，制备兔抗ＡＳ－ＯＴ多克隆抗体（ＡＳ－ＯＴ－Ａｂ），间接酶联免疫吸附测定（ＥＬＩＳＡ）证明，ＡＳ－ＯＴ－Ａｂ能与催产素受体（ＯＴＲ）相互结合，而这一结合能被ＯＴ所阻断，显示了ＯＴ与其反义肽抗体的相似性。