1型糖尿病对大鼠心肌细胞线粒体通透性转换孔开放的影响

目的 研究1型糖尿病对心肌线粒体通透性转换孔(MPTP)开放的影响,探讨MPTP开放在1型糖尿病心肌病发生发展中的作用.方法 16只Wistar大鼠随机分为正常对照(NC)组和1型糖尿病(DM)组(n=8).1型糖尿病模型通过一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)建立.12周末,荧光分光光度计检测心肌线粒体活性氧(ROS)产生速率和线粒体膜电位(ΔΨm),TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况,分光光度计测定血清还原型谷胱甘肽(GSH)水平.结果 DM组心肌线粒体ROS产生速率[28.79±6.11U/(s·mg)]明显高于NC组[13.01±3.31U/(s·mg),P<0.01],心肌细胞凋亡指数(0.40±0.03)亦明显高于NC组(0.26±0.02,P<0.01),而ΔΨm(9.65±1.69U)明显低于对照组(19.88±1.38U)比较明显降低(P<0.01),血清GSH含量(7.88±1.76mg/L)与对照组(11.97±1.15mg/L)比较也明显降低(P<0.01).DM组心肌线粒体ROS产生速率与ΔΨm水平呈负相关(r=-0.976,P<0.05).结论 糖尿病诱导氧化应激损伤可导致MPTP开放,心肌细胞凋亡增加.     

应用超声背向散射积分技术观察自发性高血压大鼠心肌纤维化的动态改变

目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)血压增高的初期、增高期和稳定期心肌超声背向散射积分(IBS)与心肌内胶原含量的改变,探讨IBS与心肌纤维化的关系。方法:分别选用6、14和24周的SHR及Wistar京都(WKY)大鼠(对照组)各6只。采用Bergman氏法测定各组大鼠的心肌组织内羟脯氨酸含量(HC);应用超声背向散射积分技术获取各组大鼠室间隔基底部心肌组织的心肌超声背向散射积分(IBS)变化曲线图。应用二维超声心动图测量各组大鼠的左室短轴缩短率(FS)。结果:SHR心肌内HC和室间隔心肌IBS平均值在6周时与WKY组差异无显著性意义(P>0.05),14周时开始升高(与6周时及同期对照组间比较,P<0.05),24周时升高更明显(与6周时及同期对照组间比较,P<0.01)。SHR室间隔IBS值与其心肌内HC之间存在着良好的相关性(r=0.76,P<0.001)。SHR的左室FS和室间隔IBS随心动周期变化幅度(IBScv)值在6周时和14周时无明显变化(P>0.05),在24周时明显下降(P<0.01)。SHR与WKY的室间隔IBScv值与其FS之间均存在着良好的相关性(r=0.70,P<0.001)。结论:通过监测IBS可以观察高血压病心肌组织纤维化的程度,通过监测IBScv可以反映高血压病中晚期心肌收缩功能的改变。     

自发性高血压大鼠心肌血管内皮生长因子表达水平的检测

 目的探讨血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在自发性高血压大鼠(Spontaneously hyper-tensive rat,SHR)心肌细胞中的表达情况,分析其与高血压时心肌毛细血管稀少及微小动脉"重塑"(remodeling)的关系.方法应用免疫组化SP染色法及计算机图像分析技术,对幼年(6周,n=15)和成年(12个月,n=15)SHR大鼠及幼年(6周,n=10)和成年(12个月,n=10)同系正常血压对照组京都Wistar大鼠(Wistar-Kyoto,WKY)心肌VEGF蛋白的表达水平进行了定量分析.结果在4组大鼠心脏各部(心房肌、心室肌、房间隔、室间隔等)心肌细胞浆中及冠状动脉各级分支的血管平滑肌细胞中均见有阳性VEGF表达,6周龄、12个月龄WKY及6周龄SHR三组间表达水平差异无统计学意义(P＞0.05),而12个月龄SHR组表达水平较其他三组均高(P＜0.05).结论随着成年SHR大鼠血压的升高,心肌及血管平滑肌细胞中VEGF蛋白的表达水平上调,可能是对高血压所致的靶器官继发性毛细血管减少的一种代偿反应,高表达的VEGF可对抗由于缺氧诱导的内皮细胞凋亡,维持其存活,并促进微血管再生.     

贝伐单抗抑制骨肉瘤血管生成及与放疗的协同作用研究

目的 观察贝伐单抗及其联合放疗对骨肉瘤裸鼠移植瘤血管生成的抑制作用.方法 人骨肉瘤细胞系9901接种的裸鼠16只,随机均分为4组.贝伐单抗组(每周注射贝伐单抗2mg/kg,1次/周,共2次),放疗组(5Gy/周,共2次),联合组(联用贝伐单抗和放疗)和对照组(无菌生理盐水注射).治疗过程中测量肿瘤长径、短径,并计算肿瘤体积,治疗第13天计算抑瘤率(TIR).通过病理观察和免疫组织化学染色法观察肿瘤的坏死、微血管密度(MVD)以及肿瘤细胞的增殖和凋亡情况.结果 贝伐单抗组、放疗组和联合组的TIR分别为32.87%、26.39%和87.50%(P<0.01),3组的肿瘤坏死率分别为11.49%±0.20%,10.30%±0.12%和27.15%±1.08%(P<0.01).对照组的MVD及增殖指数高于、凋亡指数低于其余各组(P<0.01),联合组的MVD及增殖指数低于、凋亡指数高于放疗组和贝伐单抗组(P<0.01).结论 贝伐单抗能显著抑制骨肉瘤的血管生成和肿瘤细胞的增殖,诱导细胞凋亡,且贝伐单抗与放疗具有协同作用.     

开搏通对自发性高血压大鼠血管内皮细胞功能的影响

为探讨开搏通(CPT)对自发性高血压大鼠(SHR)的血管内皮细胞(VEC)功能的影响,本文对9只SHR给予CPT(CPT组)7d,分别以10只WKY大鼠和10只SHR为正常对照组(WKY组)和实验对照组(SHR组),观察大鼠的血浆一氧化氮(NO)、内皮素(ET)的浓度及给药前后血压(BP)的变化。结果显示,CPT组给药第4天和给药第7天BP均较给药前下降(P<0.001);CPT组的NO高于SHR组(P<0.01),而其ET低于后者(P<0.01)。提示CPT可改善SHR的VEC功能,增加NO合成与释放、减少ET的产生与分泌,这可能是CPT降压的又一重要机制。     

维甲酸对原发性高血压大鼠心肌血管平滑肌增殖的作用及其机制

目的:探讨维甲酸对自发性高血压大鼠(SHR)心肌、血管平滑肌增殖的影响和肾素-血管紧张素-醛固酮系统(RAS)所起的作用。方法:18只SHR大鼠随机分为全反式维甲酸治疗组、对照组、卡托普利治疗组,每组6只。分别予治疗组和对照组皮下注射全反式维甲酸(ATRA)10mg/Kg体重或溶媒,高血压药物治疗组予卡托普利0.25mg/Kg体重管饲,每天一次,均疗程4周。疗程结束后观察各组SHR大鼠心肌、血管平滑肌(VSMC)增殖细胞核抗原(PCNA)的变化以及心肌ACE-mRNA、ACE2-mRNA的表达。结果:维甲酸治疗组心肌、血管平滑肌增殖细胞核抗原(PCNA)表达显著低于对照组(P<0.01),卡托普利治疗组的PCNA表达也显著低于对照组(P<0.01),但维甲酸治疗组与卡托普利组比较也有显著差异(P<0.01);维甲酸治疗组ACE-mRNA的表达低于卡托普利组及对照组(P<0.01),卡托普利组ACE-mRNA的表达也低于对照组(P<0.01);而维甲酸组ACE2-mRNA的表达则高于对照组及卡托普利组(P<0.01),后两组之间则无显著差异(P>0.05)。结论:维甲酸能抑制SHR模型心肌、血管平滑肌PCNA的表达,并在增加ACE2-mRNA表达的同时减少ACE-mRNA的表达,从而有可能干预增殖性血管疾病的病程。     

超声背向散射积分评价缬沙坦药物治疗对自发性高血压大鼠心肌组织纤维化的逆转作用

目的:应用心肌超声背向散射积分技术(IBS)评价缬沙坦药物治疗对自发性高血压大鼠(SHR)心肌组织纤维化的逆转作用。方法:选用24周WKY大鼠7只(W24组);SHR 21只,其中14只作为对照组分别于14周(SHR-C14组)、24周(SHR-C24组)进行检测,另7只14周SHR大鼠每天予以缬沙坦30mg/kg灌胃,持续至第24周(SHR-T24组)。测量各组大鼠的尾动脉收缩压;采用Bergman氏法测定各组大鼠的心肌组织内羟脯氨酸浓度(HC);应用传统超声测量各组大鼠室间隔及左室后壁厚度及左室短轴缩短率(FS);应用超声背向散射积分技术获取各组大鼠室间隔基底部心肌组织的心肌超声背向散射积分(IBS)变化曲线图。结果:缬沙坦药物治疗可以有效地控制及降低SHR的收缩压(SHR-T24 vs SHR-C14,P<0.01;SHR-T24 vs SHR-C24,P<0.01)、心肌内羟脯氨酸浓度(SHR-T24 vs SHR-C14,P<0.05;SHR-T24 vs SHR-C24,P<0.01)以及其室间隔心肌超声背向散射积分平均值(AII)(SHR-T24 vs SHR-C14,P<0.05;SHR-T24 vs SHR-C24,P<0.01);能提高左室FS(SHR-T24 vs SHR-C14,P<0.05;SHR-T24 vs SHR-C24,P<0.01)室间隔IBS随心动周期变化幅度(CVIB)(SHR-T24 vs SHR-C14,P<0.01;SHR-T24 vs SHR-C24,P<0.01);SHR大鼠在治疗前后及其对照组中,其室间隔心肌AII与HC之间存在良好的相关性(r=0.78,P<0.001)。其室间隔CVIB与FS之间也存在较好的相关性(r=0.72,P<0.001)。结论:缬沙坦药物治疗可以对高血病心肌纤维化起逆转作用并同时改善心肌收缩功能。治疗前后,通过监测IBS可以观察其心肌组织纤维化的逆转程度;通过监测CVIB可以反映其心肌收缩功能的改变。     

自发性高血压大鼠血浆及动脉组织甘丙素浓度的变化及巯甲丙脯酸对其影响

本工作应用放免法测定了自发性高血压大鼠(SHR)及对照组WKY大鼠血浆及胸主动脉组织甘丙素(galanin)含量,同时观察血管紧张素转换酶抑制剂一巯甲丙脯酸对其影响.结果表:SHR血浆及胸主动脉组织甘丙素含量显著高于WKY大鼠(P<0.05～0.01).滴注巯甲丙脯酸后SHR血压下降49%(P<0.05),血浆甘丙素下降33%(P<0.01),主动脉组织甘丙素下降19%.提示:甘丙素在高血压疾病中可能具有重要发病学意义.     

完全弗氏佐剂诱导胸腺细胞凋亡对NOD鼠1型糖尿病发生的影响

目的 探讨完全弗氏佐剂(CFA)诱导胸腺细胞凋亡对NOD鼠1型糖尿病的预防作用.方法 42只3周龄NOD雌鼠随机均分为CFA组和PBS组(n=21),分别给予NOD鼠后足板一次性注射CFA 50μl、磷酸盐缓冲液(PBS)50μl,于6、12周(各取5只小鼠)及30周(11只小鼠)时观察胰岛β细胞凋亡、胸腺细胞凋亡、胰岛炎程度和糖尿病发病率.结果 与PBS组相比,6周、12周时CFA组胰岛炎积分明显降低(P<0.01),胰岛β细胞凋亡率明显减少(P<0.01),而经地塞米松诱导可见更多的胸腺细胞凋亡(P<0.01).6周、12周时胰岛炎积分与B细胞凋亡率呈正相关(r=0.511,P<0.05),与胸腺淋巴细胞凋亡率呈负相关(r=-0.549,P<0.05);β细胞凋亡率与胸腺淋巴细胞凋亡率呈负相关(r=0.614,P<0.01).30周时,CFA组糖尿病发病率为9.1%(1/11).而PBS组糖尿病发病率为81.8%(9/11),两组间差异具有统计学意义(P=0.001).结论 CFA可通过调节胸腺细胞凋亡,导致胰岛β细胞凋亡的减少,可能是减轻NOD鼠胰岛炎并预防1型糖尿病的机制之一.     

胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝组织中PTEN表达与肝星状细胞凋亡的关系研究

目的 探讨胆汁淤积性肝纤维化大鼠肝组织中磷酸酶张力蛋白同源物基因(PTEN)的动态表达与在体肝星状细胞(HSC)凋亡的关系.方法 健康雄性SD大鼠50只,随机分为模型组(n=40)及假手术组(n=10).模型组采用胆总管结扎法建立胆汁淤积性大鼠肝纤维化模型,并分别于结扎后1、2、3、4周(每个时间点取10只)麻醉后留取肝组织.假手术组大鼠亦于相应时间麻醉后留取肝组织.采用免疫组化法测定大鼠肝组织中PTEN蛋白的表达;采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法(TUNEL)及α-SMA免疫组化双染法检测在体活化HSC的凋亡情况.结果 正常大鼠肝组织未见凋亡的HSC.随着肝纤维化程度加重,肝组织中PTEN蛋白的表达量逐渐减少(P<0.01),而活化HSC增多,凋亡HSC也增多.造模1、2、3、4周,大鼠肝组织的HSC凋亡指数(分别为4.57%±0.41%、4.02%±0.48%、3.45%±0.37%、2.88%±0.50%)逐渐减少(P<0.01).大鼠肝纤维化组织中PTEN的蛋白表达量与在体HSC的凋亡呈显著正相关(r=0.76,P＜0.01).结论 胆汁淤积性大鼠肝纤维化组织中PTEN的蛋白表达下调与在体活化HSC的凋亡减少相一致.