毛菊苣中山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品的制备研究

目的建立维药毛菊苣中山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品的制备分离方法。方法取毛菊苣药材醇提浸膏的乙酸乙酯萃取部位上样于硅胶柱色谱分离,收集黄酮苷富集流份,继续用凝胶柱色谱及制备HPLC进行分离纯化,通过NMR、MS等波谱方法鉴定化合物结构,经TLC、HPLC-UV及MS联用等技术进行质量分数检测。结果制备分离得到2个化合物分别鉴定为山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(1)和山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(2),质量分数均大于98%,其中2为首次从该属植物中分离得到。结论该法制备得到的2个黄酮苷类对照品符合中药化学对照品的相关技术要求,为药材毛菊苣和含毛菊苣的成方制剂的质量控制及药效物质基础研究提供化学对照品。     

高效液相半制备色谱法制备决明酮-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品

目的 制备用于含量测定的决明酮-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品。方法 采用大孔吸附树脂柱和ODS柱色谱结合高效液相半制备色谱进行分离,质谱和核磁共振波谱数据鉴定结构,高效液相色谱不加校正因子的主成分自身对照法检测纯度。结果 从虎杖中分离制备了符合含量测定用要求的决明酮-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷对照品,HPLC检测质量分数>98.0%。结论 本研究制备的决明酮-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷可作为含有该成分的天然产物及其制剂质量评价和药效物质基础研究的对照品。     

大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷药理作用研究进展

大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(EG)的药理作用研究在国内外取得明显的研究进展。EG对谷氨酸诱导产生的神经损伤和缺血再灌注造成的神经损伤等均具有保护作用,可以逆转β淀粉样蛋白对神经细胞功能的影响,通过可逆性抑制胆碱酯酶的活性起促智作用,具有促成骨细胞增殖和分化及抑制骨溶解作用,并能明显延长小鼠睡眠时间,能显著降低3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶活性起降血脂等作用;同时EG还具有抗菌抗病毒和抗肿瘤等作用。EG毒性较小,其药代动力学研究发现,其代谢符合单室模型一级动力学过程,在大鼠心、肝、脑和肾中分布较多,大约有45%的原形药物经尿和粪便排出体外。     

高效液相色谱法测定何首乌中二苯乙烯苷及大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的：探讨高效液相色谱法（HPLC法）对何首乌中有效成分二苯乙烯苷及大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷含量进行测定。方法：采用Phenomenex C18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相选择乙腈∶水=25∶75,流速为1.0mL/min,检测波长为322nm,柱温为25℃。结果：二苯乙烯苷的线性回归方程为：Y=3.247×105X+1.951×104（r=0.9999）,在4.021～40.12μg/mL范围内线性关系良好;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷线性回归方程为：Y=1.501×105X+0.352×104（r=0.9998）,在0.012～25.00μg/mL范围内线性关系良好。二苯乙烯苷的平均加样回收率为99.79%,RSD=1.23%,大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷平均加样回收率为99.51%,RSD=1.52%。结论：高效液相色谱法测定何首乌中的两种有效成分,操作简单快速,稳定性好,精密度高,重现性好,为何首乌中有效成分的含量测定提供了有效的方法。     

HPLC-ELSD法测定赤雹不同药用部位中山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷的含量

摘 要 目的：建立赤雹不同药用部位（根、茎、果实）中山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-鼠李糖苷含量的PLC ELSD测定方法。方法: 采用高效液相色谱法 蒸发光散射检测器检测。色谱柱：Alltima C₁₈ 柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相：乙腈-水( 19∶81);柱温：30 ℃,流速：0.8 ml·min^-1。ELSD条件：漂移管温度：105℃;载气流速：2.8 L·min^-1。结果: 山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖-7-O-α-L-李糖苷在51.15～920.70 μg·ml^-1浓度范围内线性关系良好（r=0.999 8）;平均回收率根、茎、果实分别为100.1%,100.5%,101.1%,RSD分别为1.82%,1.79%,1.54%（n=6）。结论:该方法简便、准确,可用于赤雹药材的质量控制。     

HPLC法测定白花蛇舌草中槲皮素-3-O-β-d-吡喃葡萄糖苷的含量

目的:建立测定白花蛇舌草中槲皮素-3-O-β-d-吡喃葡萄糖苷含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-1%冰醋酸(60∶40,V/V),检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,柱温为35℃。结果:槲皮素-3-O-β-d-吡喃葡萄糖苷的质量浓度在5.24⁵2.40μg/ml范围内与其峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 9);精密度、稳定性、重复性试验的RSD均<1.97%;平均加样回收率为99.57%,RSD=1.28%(n=6)。结论:该方法操作简便,结果准确、可靠,可用于白花蛇舌草药材中黄酮类活性成分的含量测定。     

HPLC法测定壮药异叶爬山虎中槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的 建立运用HPLC测定异叶爬山虎中槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷含量的方法,并测定广西不同地区的异叶爬山虎中槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷的含量。方法 采用Inersil-C₁₈色谱柱(4.6×25㎜,5μm),流动相为甲醇-水-磷酸(46:54:0.05%),流速1mL/min,检测波长258nm,柱温25℃,进样量10ｕL,分析时间 32min。结果 槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷进样量在20～200μg范围内,与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r为0.9999(n=6);槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷的平均回收率(n=6)为98.53%,RSD为0.79%。结论 该法操作简便,重复性好,可用于测定异叶爬山虎中槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷含量。     

HPLC法测定喉咽清口服液中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷含量

摘 要 目的:建立喉咽清口服液中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量测定方法。方法: 色谱柱为Hibar C₁₈（250 mm×4.6 mm,5 μm）,乙腈-0.4%磷酸（34∶66）为流动相;流速为1.0ml·min^-1;检测波长为203 nm。结果:齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在0.146～4.848 μg(r=1.000 0)范围内线性关系良好,平均回收率为98.86%,RSD为1.62%（n=6）。结论:所建立的方法简便,准确,为该制剂质量标准的建立提供一定的参考。     

大黄中大黄酚的提取、分离和纯化方法研究

目的探讨获得高纯度大黄酚的可行性。方法先用稀硫酸溶液将大黄中总蒽醌苷水解成苷元,再用热氯仿提取苷元,以碱液将氯仿液中大黄酸、大黄素、芦荟大黄素除去,并用柱层析法分离大黄酚和大黄素,经乙醇反复多次重结晶,得高纯度的大黄酚;采用高效液相色谱法测定其中大黄酚的含量。结果本方法提纯得到的大黄酚纯度达98%以上。结论本方法操作简单、重现性好、成本低、毒性小,可用于大批量生产。     

HPLC法测定扶正颗粒中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的对扶正颗粒中的主要有效成分2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷,建立含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,测定本制剂中二苯乙烯苷的含量。结果 2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定线性范围在0.026～0.130mg·mL~(-1),平均回收率为99.32%。结论建立的方法准确、稳定、重现性好,可用于该制剂的质量控制。     

酚性2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷的合成 及抗抑郁活性

目的 设计合成酚性2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D-吡喃葡萄糖苷并研究其抗抑郁活性。方法 以N-乙酰氨基葡萄糖为起始原料经多步反应合成目标化合物,化合物结构经1H-NMR、13C-NMR、IR、高分辨质谱确证;选择经典的抗抑郁动物模型—小鼠悬尾、强迫小鼠游泳、利血平拮抗、小鼠5-HTP增强实验等对部分化合物进行抗抑郁活性的筛选。结果与结论 设计合成了12个化合物,其中有8个是未见文献报道的新化合物。对所合成的5个化合物进行抗抑郁活性筛选,发现有3个表现出明显的抗抑郁活性,有进一步研究开发的价值。     

醋柳黄酮中β-谷甾醇-β-D-葡萄糖苷的鉴定与含量测定

目的鉴定醋柳黄酮中的β-谷甾醇(Sito)及其β-D-葡萄糖苷(SitoG),并测定其含量。方法采用TLC法鉴定醋柳黄酮中的Sito及其SitoG;采用RP-HPLC法测定其中的SitoG,色谱柱为Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为100%甲醇,流速为1.0 ml.min-1,检测波长为205 nm,标准曲线法定量。结果醋柳黄酮中含有Sito和SitoG,后者的含量为3.1%~3.8%。结论所用方法可用于醋柳黄酮及其制剂的质量控制。     

大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的体内外遗传毒性评价

目的:评价大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷(EG)的体内外遗传毒性,并比较体外细胞试验及大鼠体内实验评价结果的差异。方法:采用体外二维(2D)、三维(3D)细胞培养法分别构建2D、3D HepaRG细胞模型,造模成功后,分别将2D、3D HepaRG细胞分为空白对照组[0.5%二甲基亚砜(DMSO)]、丝裂霉素C组(阳性对照,0.1μg/mL)和EG低、中、高剂量组(10、50、200μg/mL),然后检测各组HepaRG细胞的微核形成率和尾DNA百分含量。将SD大鼠分为空白对照组(0.5%羧甲基纤维素钠)、甲磺酸乙酯组(阳性对照,200 mg/kg)和EG低、中、高剂量组(100、300、1 000 mg/kg),每组6只,连续灌胃给药15 d,每天1次;15 d后检测各组大鼠骨髓嗜多染红细胞、肝细胞的微核形成率及外周血淋巴细胞、肝细胞的尾DNA百分含量、尾距。结果:在体外2D HepaRG细胞模型中,与空白对照组比较,丝裂霉素C组HepaRG细胞的微核形成率和尾DNA百分含量均显著升高(P<0.01),EG各剂量组HepaRG细胞的微核形成率和尾DNA百分含量差异无统计学意义(P>0.05);在3D HepaRG细胞模型中,与空白对照组比较,丝裂霉素C组HepaRG细胞的微核形成率和尾DNA百分含量均显著升高(P<0.01或P<0.001),EG高剂量组HepaRG细胞的尾DNA百分含量显著升高(P<0.01)。在大鼠体内实验中,与空白对照组比较,甲磺酸乙酯组大鼠骨髓嗜多染红细胞、肝细胞的微核形成率和外周血淋巴细胞、肝细胞的尾DNA百分含量、尾距均显著升高(P<0.01),EG高剂量组大鼠外周血淋巴细胞尾DNA百分含量显著升高(P<0.01),EG各剂量组大鼠骨髓嗜多染红细胞、肝细胞的微核形成率和肝细胞尾DNA百分含量、尾距差异无统计学意义(P>0.05),但随剂量增加有升高趋势。结论:本研究结果提示在2D细胞模型中,EG未导致染色体断裂及DNA损伤,但3D细胞模型长期给药和体内重复给药结果均显示EG存在一定DNA损伤风险,故3D HepaRG细胞模型的评价结果更接近大鼠体内实验结果。     

RP-HPLC法测定小儿清肺化痰口服液中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷的含量

目的:建立测定小儿清肺化痰口服液中槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil-C18柱,流动相为乙腈-0.1%醋酸水溶液(9∶91),流速为0.8mL·min-1,检测波长为260nm,进样量为10μL,柱温为25℃。结果:槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷检测浓度在5～60μg·mL-1范围内与峰面积积分值具有良好的线性关系(r=0.9999);槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖-7-O-β-D-龙胆双糖苷平均回收率为104.2%,方法精密度RSD=0.65%(n=6)。结论:该法分离效果好、灵敏、准确,可用于小儿清肺化痰口服液的质量控制。     

HPLC法测定银杏降脂胶囊中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的应用高效液相色谱法测定银杏降脂胶囊中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量.方法采用Diamonsil C18(5μm,250mm×4.6mm),乙腈-0.2%磷酸溶液(23∶77)为流动相,流速:1mL·min-1,检测波长为320nm.结果线性范围为0.0964~0.482μg,r=0.9998,平均回收率为98.00%,RSD=0.98%.结论该方法用于测定银杏降脂胶囊中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量,简便、快速、准确.     

大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷对皮肤黑色素瘤A375细胞凋亡的影响及机制研究

目的:研究天然产物大黄素甲醚8-O-β-吡喃葡萄糖苷(PG)对皮肤黑色素瘤A375细胞凋亡的影响及机制。方法:以0、10、20、50μg/mL的PG作用于A375细胞24、48、72 h后,采用CCK-8法测定细胞的存活率;以0(对照)、20、50μg/mL的PG作用于A375细胞48 h后,通过流式细胞仪以膜联蛋白Ⅴ/碘化丙啶(PI)双染法检测细胞凋亡率;免疫印迹法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)和多腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的蛋白表达以及细胞色素C在线粒体内外的蛋白表达;以0(对照)、5、10μmol/L的PG作用于A375细胞48 h后,采用酶底物法测定细胞中Caspase-8、Caspase-9的活性。结果:PG能有效降低A375细胞的存活率;与对照比较,20、50μg/mL的PG作用后细胞凋亡率明显升高(P<0.01),细胞中Caspase-3、PARP及细胞基质中细胞色素C的蛋白表达均明显增强(P<0.05或P<0.01),线粒体中细胞色素C蛋白表达明显减弱(P<0.05或P<0.01);5、10μmol/L的PG作用后细胞中Caspase-9活性明显增强(P<0.05或P<0.01),Caspase-8活性无明显变化。结论:PG能抑制A375细胞活性、促进细胞凋亡;其是通过破坏线粒体膜电位、促进细胞色素C外流来发挥促凋亡作用的。     

高效液相色谱法测定首乌丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量

目的 高效液相法测定测定首乌丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷成分含量;方法 采用RP-HPLC,色谱柱Ultimate XB-C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相为乙腈-水(2575);检测波长:320nm;流速:1mL· min-1;柱温30℃.结果 3批首乌丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量为3.895～4.136mg·g-1;结论 该法稳定、简便,适用于首乌丸制剂质量控制.     

HPLC法测定退障明目丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的建立高效液相色谱法测定退障明目丸中何首乌的含量方法。方法以2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为指标,采用高效液相色谱法,十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱,流动相∶乙腈-水(20∶80);紫外检测器检测。结果 2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在10.1~60.6μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 6;样品加样回收率为99.30%,RSD为1.17%。结论所建立的方法准确可行,重复性好,可有效控制退障明目丸的质量。     

HPLC测定三乌胶丸中2,3,5,4''-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量

目的:建立三乌胶丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量测定方法.方法:采用高效液相色谱法,用Hypersil ODS2 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:乙腈-水(20:80);柱温:室温;检测波长:320 nm.结果:2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷浓度在0.5～2.5 mg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,r=1.000 0,平均回收率为98.56%(RSD为1.5%).结论:本方法专属、重复性好,可用于三乌胶丸中2,3,5,4'-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定.     

HPLC法测定黄精赞育胶囊中四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的建立黄精赞育胶囊中(制何首乌、黄精等)四羟基二苯乙烯-2-O--βD-葡萄糖苷的含量测定方法。方法采用HPLC法,Lichrospher 5-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(22∶78);检测波长320 nm。结果四羟基二苯乙烯-2-O--βD-葡萄糖苷的线性范围在8.09μg~1.62μg,r=0.9999,平均回收率为98.8%,RSD为1.74%。结论该法简便快捷,准确实用,可用于黄精赞育胶囊的质量控制。