心肌细胞缺钙复钙现象的观察

本文在细胞水平观察了成年大鼠心肌细胞的缺钙复钙现象。在分离心肌细胞后,按3mg细胞蛋白/ml分管,每管2ml细胞悬液。实验分对照组(1mM Ca~(2 ) 37℃孵育60分钟)无钙组(0mM Ca~(2 )30分钟,复Ca~(2 )(1 mM)     

654-2对缺钙复钙所致内皮细胞损伤的保护作用

山莨菪碱(654-2)对缺钙复钙所致肺动脉内皮细胞损伤是否有保护作用尚未见报导。本实验初步观察了664-2对小牛肺动脉内皮细胞缺钙复钙损伤时对乳酸脱氢酶(LDH)释放及细胞存活率的影响。实验取培养     

缺氧对培养的猪肺动脉内皮细胞胞浆游离钙的影响

本文应用荧光探针Fura-2/AM测定胞浆游离钙浓度([Ca~(2+)]i)技术,观察培养的猪肺动脉内皮细胞[Ca~(2+)]i在缺氧时变化。实验发现:向细胞悬液中充氮气造成缺氧时,肺动脉内皮细胞[Ca~(2+)]i升高81±21%(P<0.05,n=8)。结果提示肺动脉内皮细胞钙信使系统可能参与缺氧所致血管反应。     

川芎嗪对离体血管舒张的机理

用离体器官浴的方法,在家兔主动脉及肺动脉血管条制备上,观察了川芎嗪(四甲基吡嗪Tetramethyl-pyrazine)松驰血管平滑肌作用与Ca~(++)的关系。 氯化钾(50mM)使主动脉条(n=6)及肺动脉条(n=5)收缩后,川芎嗪10~(-4)g能引起明显地松驰作用,并能被提高浴液中Ca~(++)浓度所拮抗,显示了川芎嗪与Ca~(++)之间存在     

缺氧时肺动脉内皮细胞对平滑肌细胞胞浆游离钙的影响

本文应用Ca~(2 ) 荧光探针Fura-2/AM,研究猪肺动脉内皮细胞条件培养液对猪肺动脉平滑肌细胞胞浆游离钙浓度([Ca~(2 )]_i)的影响;同时观察缺氧对肺动脉内皮细胞[Ca~(2 )]_i的直接作用。实验发现:1.常氧培养的内皮细胞培养液可使平滑肌细胞[Ca~(2 )]_i升高,而缺氧培养的内皮细胞培养液较常氧培养的内皮细胞培养液作用显     

缺氧家兔组织钙调蛋白水平及钙调蛋白拮抗剂对血流动力学的影响

为观察Ca~(++)和钙调蛋白(CaM)在缺氧致所需动脉高压等血流动力学改变中的作用,我们采用环磷酸腺苷磷酸二脂酶的方法测定了缺氧兔的肺动脉,肺和心肌组织钙调蛋白的水平,观察了脂质体包裹的钙调蛋白拮抗剂三氟啦嗪(TFP)对缺氧家兔的血流动力学影响,     

钙调素的研究

<正> 四十年来,Ca~(++)和环核苷酸(cAMP,cGMP)作为细胞内的第二信使,其重要性已逐渐被公认。但有关Ca~(++)作用的分子机理一直不明瞭。近来对钙结合蛋白(calciumbinding protein,CaBP)的研究表明,许多依赖Ca~(++)的细胞过程,都是通过CaBP而实现的。目前已发现的CaBP多达200多种,而钙调素(Calmodulin,CaM)是其中最重要的一种。现已证明,CaM广泛存在于各类真核细胞内,是细胞内主要的钙受体,Ca~(++)的许多功能如物质代谢、肌肉收缩、突触传递、神经递质的合成与释放、激素分泌、细胞生长和基因表达等都是通过CaM完成的。Ca~(++)可通过电压依赖性钙通道或受三磷酸肌醇(IP_3)激发从内质网释放而进入胞浆。当胞浆Ca~(++)浓度升高时,Ca~(++)即和CaM结合,并使CaM构象发生改变,形成活性CaM(CaM*)。CaM*和靶蛋白或靶酶结合后,引     

脑损伤对大鼠不同脑区的钙、磷含量影响

采用20g重物从10cm高度垂直坠落至一侧暴露的硬脑膜制成大鼠脑损伤模型,用原子吸收分光光度法及比色法分别测定了伤后不同脑区的组织总钙(Cat)、组织总磷(Pt)含量变化;还调整致伤高度观察了不同致伤条件下伤灶Cat、Pt含量的差异。结果表明:原发脑损伤可以使大部分脑区的细胞受到不同程度的影响并发生Ca~(++)内流,外伤程度决定了Ca~(++)的内流程度和持续时间。在Ca~(++)内流严重时,胞内游离Ca~(++)水平将失去稳定并诱发一系列有害杀伤细胞,导致脑细胞的继发性破坏;Ca~(++)内流较轻时,细胞可以依赖自身的代偿机制维持胞内Ca~(++)环境稳定从而免受继发损伤。     

胰岛素对分离脂细胞质膜高亲和力Ca~(++)-ATP酶的抑制

为了解胰岛素使胞质Ca~(++)浓度增高,而调节细胞代谢的可能机理,作者研究了胰岛素对具有排出胞质Ca~(++)、维持膜内外电化学梯度的Ca~(++)-ATP酶的抑制作用。作者从大鼠脂细胞中分离了富集高亲和力的Ca~(++)-ATP酶的质膜亚细胞片段。在不同Ca~(++)浓度的组中加入胰岛素.与对照组相比(实验结果见表),发现胰岛素对Ca~(++)-ATP酶的活性有显著的抑制作用。实验证实,在Ca~(++)浓度最小时,胰岛素对Ca~(++)-ATP酶的抑制百分率最大;而在Ca~(++)浓度增高时,抑制百分率则降低,提示胰岛     

Na~+、Ca~(++)与房室结自律细胞动作电位升支的形成

多年来,关于房室结细胞动作电位形成过程中离子成份问题一直存在争议,许多学者都认为房室结细胞无快钠电流,其去极化过程与窦房结细胞一样,既使不是全部,也主要是由Ca~(++)携带的慢内向电流is产生。近年研究表明,Na.+、Ca~(++)都参与is的形成,且Ca~(++)大于Na~+。本研究分别观察了低钠、低钙、高钙、TTX及异搏定对房室结自律细胞动作电位的影响,拟对其去极化电流的离子特性作进一步探索。     

内毒素对肺动脉内皮细胞的损伤及产生前列环素的影响

内毒素在革兰氏阴性杆菌感染引起休克的发生发展过程中起重要作用,而肺组织的瘀血、水肿并发展为呼吸窘迫综合征是休克病人难以救治的重要原因。因此,内毒素对肺血管内皮的损伤及产生前列环素的影响是一个值得研究的问题,本实验用培养的牛肺动脉内皮细胞进行,24孔板内每孔细胞数约2×10~5个,每孔加铬酸钠~(51)Cr 2μCi,37℃孵育40分钟,弃上清,冲洗后加入含内毒素50μg/ml的培养基,37℃孵育30分钟,取上清在γ计     

腺嘌呤核苷酸对大鼠心脏肌浆网(SR)中钙的结合作用

肌浆网(SR)是控制肌肉收缩和舒张的重要环节。已知大鼠的心肌收缩和舒张特性不同于其它哺乳动物,据报道大鼠心肌SR转运钙的速度也比狗、兔、豚鼠的SR为慢,这究竟是动物种属差异还是方法学问题呢?为此,本文研究了ATP、ADP与大鼠心肌SR中钙的结合之间的关系和从新估价钙结合的测定方法。微孔过滤法是研究钙结合和转运的常用方法,以往文献报道的方法各不相同,作者发现在孵育时Ca~(2+)和ATP加入的次序会影响实验结果。若先与ATP孵育再加Ca~(2+)开始反应,则Ca~(2+)的结合偏低。大鼠心脏SR具有很高的由Mg~(2+)激活的ATP酶(1.37±0.16μMol.Pi/min/mg在25℃)的活     

钨对A_(23187)损伤肺动脉内皮细胞的保护作用

肺血管内皮细胞损伤和肺毛细血管通透性增加在ARDS的发生发展中具有十分重要作用。本实验旨在探讨钨对A23187(A)损伤肺动脉内皮细胞的保护作用。结果发现:用A孵育牛肺动脉内皮细胞,其乳酸脱氢酶(LDH)释     

Ca~(++)、Mg~(++)对红细胞凝集的影响

<正> 早已明确,Ca~(++)和Mg~(++)在凝集反应后的溶血反应中能加强补体的活住。至于Ca~(++)、Mg~(++)在凝集反应中有无作用问题,本文通过一组实验,证实这些离子在红细胞的凝集过程中也是有重要作用的。 材料和方法 一、异种动物血凝材料:分别采集奶牛与山羊血液,分离出血清和红细胞。血清经56℃30分钟灭活,红细胞经生理盐水洗涤三次后配成2％浓度进行交叉凝集试验,结果凝集反应十分明显。将奶牛血清和山羊红细胞作为本实验的血凝材料。 二、EDTA抑制试验:取二组小试管做血凝试验,其中一组加入1％EDTA,另组不加,二组进行比     

冬眠型动物与非冬眠型动物心肌细胞Ca~(++)内流的比较

冬眠型动物黄鼠的心肌细胞能耐受0℃以下的低温。作者曾在-5℃条件下记录到其心脏乳头肌的动作电位。并注意到50％复极化时程(APD_(50))在低温下显著延长,其原因除了因低温而降低离子运动速率外,很可能是Ca~(++)内流增加,本实验将用Ca~(++)通道阻断剂证实。同时,我们还观察到黄鼠的(APD_(50))在冬季还不到夏季的一半。这提示,在冬眠季节     

Klotho蛋白减轻低氧/复氧诱导的心肌细胞系H9C2损伤

目的研究Klotho蛋白对低氧-复氧诱导的心肌H9C2细胞系损伤的保护作用及其机制。方法将H9C2心肌细胞分为对照组、低氧/复氧组(1%O_2低氧6 h, 5%CO_2以及95%空气培养箱中复氧2 h)和Klotho蛋白(10μg/mL)干预组。通过酶标仪间接测定细胞内钙离子([Ca~(2+)]_i)水平;CCK8法和TUNEL法分别检测细胞活性及细胞凋亡;分光光度法检测细胞中钠ATP酶(Na~+/K~+-ATPase,NKA)和反向模式钠/钙交换体(Na~+/Ca~(2+)-exchange,NCX)的活性。结果体外培养的H9C2细胞低氧/复氧(6 h/2 h)处理后可明显降低H9C2细胞活性(P0.05);增加细胞内Ca~(2+)水平和凋亡率(P0.05);降低细胞中Na~+/K~+-ATPase的活性(P0.05);增加反向模式Na~+/Ca~(2+)交换体的活性(P0.05);10μg/mL Klotho蛋白处理可明显减轻上述损伤。结论 Klotho蛋白可减轻低氧/复氧诱导下的H9C2细胞内钙超载,最终减少该细胞系细胞的凋亡。     

缺氧对大鼠肺动脉平滑肌细胞~(45)Ca~(2 )跨膜内流及细胞内钙含量的影响

为探讨缺氧时血管平滑肌细胞的钙动力学改变及其在HPV发生中的意义,我们研究了:(一)肺泡性缺氧对大鼠灌流肺的肺动脉压和肺动脉平滑肌细胞~(45)Ca~(2 )跨膜内流的影响:Wistar大鼠22只,随机分为缺氧组     

钙调素(Calmodulin)在人自然杀伤细胞活性中的作用

目前已知钙在自然杀伤细胞(NK)的溶解机制中有重要作用。钙在细胞内的许多作用都是通过钙调素介导的。钙调素是一种分子量为16,500道尔顿的蛋白质,普遍存在于真核细胞中。最初(1970)它被当作脑磷酸二酯酶,后来认识到它是一种细胞内的钙结合蛋白,具有调解多种酶的功能,其中包括环核苷磷酸二脂酶,Ca~(++)Mg~(++)三磷酸腺苷酶,以及肌浆球蛋白轻链激酶。近来研究表明trifluoperazine对小鼠NK细胞的溶解活性有明显的抑制作用;虽然已知此物质与钙调素结合,但它尚有其它作用,故不能得出对钙调素起特异性结合作用的结论。另一方面,以依赖钙的方式与钙调素结合的特异性钙调素抑制剂(茶-磺胺类)近来已有商     

钙与受损害的心肌细胞

无论是持续性的缺氧,冠脉狭窄、痉挛或阻塞引起心肌缺血后重恢复血流供应,或是数分钟无钙灌流后再给与Ca~(2+),均可见受损伤的心肌细胞内Ca~(2+)超载的现象(overloading),本文的目的在于探讨上述各情况下Ca~(2+)超载的原因,Ca~(2+)进入受损伤细胞的途径及其后果。     

人嗜碱细胞可摄取~3H-组氨酸并转化成H~3-组胺重新释放

<正> 我们用H~3-组氨酸掺入健康人全血嗜碱细胞,并观察其转化为~2H-组胺重新释放能力。 4名输血员,每份抗凝全血分成0.25ml一管,共4管,2管测掺入,2管测释放。分别加入0.1mlH~3-组氨酸(含5μCi)及50μl载体,37℃旋转温育20分钟,以冷Tyrode's液洗涤3次,上清放射性本底可降至400opm以下。掺入管即可加0.1ml12.5％TAC,离心后吸上清待测(混合闪烁液,允许含水50μl/1ml)。释放管则加0.1mlConA(最终5μg/ml)及Ca~(++)、Mg~(++)继续温育50分钟,离心后吸上清测定。所有管均吸5μl在DEAE纤