RNA干扰靶向抑制PI3Kp85α蛋白对大肠癌细胞增值的影响

目的:探讨RNA干扰靶向抑制PI3K p85α蛋白表达对大肠癌细胞增值的影响。方法:设计4条shRNA干扰载体及1条阴性对照载体,分别稳定转染大肠癌SW480细胞。用Western Blot筛选出一组抑制效率最高的细胞进行CCK-8细胞增值实验。结果:转染shRNA/324干扰载体的SW480细胞PI3K p85蛋白表达显著降低,抑制率约90%,选择该组细胞作为有效干扰组。CCK-8细胞增值实验显示,接种48h、72h及96h后,干扰组细胞生长速度明显低于对照组细胞(P<0.05)。结论:PI3K p85α蛋白表达缺失可降低大肠癌SW480细胞的增值速度,PI3K p85可能是大肠癌靶向治疗的新靶点。     

PI3K p85α蛋白表达缺失联合5-FU诱导大肠癌细胞凋亡的分子机制

目的:探讨PI3Kp85α蛋白表达缺失联合5-FU对大肠癌SW480细胞促凋亡作用的机制。方法:复苏培养PI3Kp85α干扰组SW480细胞(PI3Kp85ɑ/RNAi-SW480)和SW480对照组细胞,Western blot鉴定干扰效果,采用Western blot方法比较两组细胞中凋亡蛋白Bax、Bcl-6、Bim表达的差异。结果:Western blot结果显示SW480干扰组细胞PI3Kp85α蛋白抑制率为84%,5-FU刺激48h后,PI3Kp85ɑ/RNAi-SW480细胞组凋亡蛋白Bax、Bcl-6、Bim的表达较SW480对照组细胞显著增加(P=0.000)。结论:PI3Kp85α蛋白表达缺失联合5-FU可通过增加促凋亡蛋白的表达促进大肠癌SW480细胞凋亡,为进一步阐明大肠癌细胞恶性增值的分子机制打下基础。     

胰岛素抵抗对血小板内磷脂酰肌醇3-激酶活性影响的研究

摘要 目的：探讨胰岛素抵抗对血小板内磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-K）活性的影响。方法：比格犬24只,随机分为对照组及试验组,对照组动物给予普通喂养,试验组动物给予高脂喂养建立胰岛素抵抗动物模型,并以正常血糖-高胰岛素钳夹试验确认。6个月后确认胰岛素抵抗模型建立成功后检测两组动物血小板内磷脂酰肌醇3-激酶（PI3-K）活性及血小板粘附率、聚集率。结果：实验组动物血小板内PI3-K活性高于对照组（P＜0.05）,血小板黏附率、聚集率增加（P＜0.001）。结论：胰岛素抵抗增加血小板内PI-3-K活性,是胰岛素抵抗导致血小板活性增强的关键环节。     

胰岛素PI3K/PKB信号转导通路研究进展

糖尿病是一种以高血糖为主要症状的代谢性紊乱疾病,其重要病理机制为胰岛素分泌不足或外周组织胰岛素抵抗。因此,阐明胰岛素的作用机制对于研发降低血糖、治疗糖尿病药物具有重要意义。胰岛素磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB)信号转导通路在胰岛素作用途径中具有极其重要的作用,它参与介导胰岛素作用的葡萄糖转运、抑制脂肪分解,糖原、蛋白和脂肪的合成以及细胞分化、增殖和凋亡等。本文参阅国内外文献,综述了胰岛素在PI3K/PKB途径中的信号转导过程的最新进展。     

α-硫辛酸对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢紊乱的改善作用

目的:研究α-硫辛酸对胰岛素抵抗HepG2细胞糖代谢紊乱的改善作用.方法:采用MTT法测定25～1000μmol/Lα-硫辛酸对人肝癌细胞HepG2存活率的影响,以确定α-硫辛酸给药浓度.实验设阴性对照组、胰岛素抵抗组(1×10-7 mol/L胰岛素)、联合抵抗组(30μmol/L亚砷酸钠+1×10-8 mol/L胰岛...     

蜕皮甾酮对胰岛素抵抗HepG2细胞胰岛素信号转导蛋白表达的影响

目的 探讨蜕皮甾酮对胰岛素抵抗HepG2细胞磷脂酰肌醇3激酶(P13K)与葡萄糖转运蛋白-4(GLUT-4)蛋白表达的影响.方法 胰岛素抵抗HepG2细胞模型建立后,培养液中加入蜕皮甾酮共同孵育,观察蜕皮甾酮及吡格列酮对模型细胞葡萄糖掺入率的影响;应用免疫细胞化学染色法及Western blot等方法观察蜕皮甾酮对胰岛素抵抗HepG2细胞P13K与GLUT-4蛋白表达的影响.结果 与模型细胞组比较,1×10-5M蜕皮甾酮可使胰岛素抵抗HepG2细胞P13K、GLUT-4蛋白的表达增加(P＜0.05).结论 蜕皮甾酮的胰岛素增敏作用可能与胰岛素信号转导分子P13K、GLUT-4蛋白的表达增强有关.     

妊娠期糖尿病患者血清apelin水平及其与胰岛素抵抗的关系

目的：探讨妊娠期糖尿病（GDM）患者血清（apelin）水平及其与胰岛素抵抗（IR）的关系。方法检测56例GDM患者和60例正常糖耐量孕妇（NGT组）的血清apelin、空腹血糖（ FPG）、空腹胰岛素（ FINS）和糖化血红蛋白（HbA1c）水平,计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。结果GDM组血清apelin明显高于NGT组（P〈0.01）。apelin与FPG、FINS、HbA1c 及HOMA-IR 均呈显著正相关（P〈0.01）。结论 GDM患者血清apelin明显增高且与IR密切相关。     

小檗碱改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗与PI-3K、GLUT4蛋白相关性的研究

目的观察小檗碱对2型糖尿病大鼠骨骼肌组织磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI-3K)之p85亚基、葡萄糖转运子4(glucose transporter4,GLUT4)蛋白表达的影响,以探讨小檗碱改善胰岛素抵抗,防治2型糖尿病的分子机制。方法采用尾静脉注射小剂量链脲佐菌素(streptozotocin,STZ,30mg.kg-1)加高脂高热量饲料喂养的方法建立2型糖尿病大鼠模型,以小檗碱干预10wk,检测血糖和血清胰岛素,用Western blot方法检测小檗碱干预后2型糖尿病大鼠骨骼肌组织PI-3K之p85亚基、GLUT4蛋白表达水平。结果小檗碱干预的2型糖尿病大鼠骨骼肌组织PI-3K之p85亚基、GLUT4蛋白表达水平均较模型组显著增加。结论小檗碱对2型糖尿病的治疗效应可能与提高骨骼肌组织中PI-3K之p85亚基、GLUT4蛋白表达水平有关。     

高脂高糖诱导脂肪肝胰岛素抵抗大鼠模型的建立

目的高脂乳剂灌胃并配合自由饮用糖水建立脂肪肝胰岛素抵抗大鼠模型。方法SD大鼠灌胃高脂乳剂及自由饮用浓度为180g.L-1的蔗糖水,每日1次,连续10wk。观察大鼠体重等一般状况;检测肝脏TG和FFA的含量;血清ALT、AST、FFA、HDL-C、LDL-C、葡萄糖(FBG)和胰岛素(FINS)水平以及肝脏的病理形态学变化。结果模型组大鼠肝脏TG、FFA含量升高,血清LDL-C、FFA、FBG、FINS含量升高,血清HDL-C降低,IRI水平升高,ISI水平降低,出现胰岛素抵抗。造模6wk末肝脏病理形态学显示出单纯性脂肪肝,8wk末为轻中度脂肪性肝炎,10wk末为中重度脂肪性肝炎。结论灌胃高脂乳剂及饮用高糖饮料10wk,可成功建立脂肪肝胰岛素抵抗大鼠模型。     

血浆母系表达基因3和H19水平与妊娠期糖尿病胰岛素抵抗的关系

目的 探讨血浆母系表达基因3(MEG3)、H19水平与妊娠期糖尿病(GDM)胰岛素抵抗(IR)的关系.方法 选取2016年1月至2019年1月间孕24～28周在南京医科大学康达学院第一附属医院行口服葡萄糖耐量试验(OGTT)并确诊为GDM的孕妇65例为GDM组,另外选取同期80例孕周为24～28周正常妊娠孕妇为对照组,...     

高糖对PI3K-Akt信号传导途径及内皮细胞增殖的影响

目的观察高糖对PI3K-Akt信号传导途径的抑制作用及对内皮细胞增殖的影响.方法用不同浓度的D-葡萄糖处理人脐静脉内皮细胞,观察其增殖情况以及Akt、磷酸化Akt(Thr308)、磷酸化Akt(Ser473)、磷酸化GSK3β的表达变化.同时观察加入PI3K抑制剂LY294002后内皮细胞的增殖情况.结果高糖明显抑制内皮细胞的增殖及磷酸化Akt(Thr308)和磷酸化GSK3β的表达,且抑制作用随其浓度增高而增强(P＜0.05或P＜0.01).但对内皮细胞中磷酸化Akt(Ser473)的表达无影响(P＞0.05).LY294002抑制内皮细胞增殖,抑制作用随其浓度增高而增强(P＜0.01).渗透压改变对内皮细胞增殖无影响(P＞0.05).结论高糖可能通过PI3K-Akt信号途径抑制内皮细胞增殖,并参与糖尿病大血管并发症的发生发展.     

肝细胞胰岛素信号传导通路与胰岛素抵抗

肝脏在人体的葡萄糖代谢中有着重要作用,从胰岛素与其受体(InsR)结合开始,肝脏糖代谢构成了一个复杂的传导通路,起到稳定血糖的生理作用。对这一信号通路的深入研究将有利于进一步阐明糖尿病的发病机制并为糖尿病的治疗提供思路。基于此原因,本文综述了肝细胞胰岛素信号传导通路的传导机制及其意义。     

脂糖舒对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的影响

目的：观察脂糖舒(ZTS)对2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的改善作用。方法 分别对2型糖尿病胰岛素抗性模型两组大鼠灌服不同剂量的ZTS(每日1次)，连续9周，同时以健康大鼠(正常对照组)、二甲双胍和格列齐特作对照，进行糖耐量试验，测定血浆葡萄糖(Glu)、胰岛素(Ins)、甘油三脂(TG)、游离脂肪酸(NEFA)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL—c)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL—c)含量并称体重和脂肪组织重量，计算胰岛素抵抗指数(IRI)。结果 脂糖舒抑制病鼠体重和脂肪组织重量增长以及降糖降脂(TG、NEFA及LDL)和降IRI作用优于格列齐特(P＜0．01)。与二甲双胍比较，脂糖舒降NEFA作用较强(P＜0．05)，降IRI作用与二甲双胍相当(P＞0．05)，且脂糖舒降IRI作用呈剂量依赖关系。结论 脂糖舒明显改善2型糖尿病的胰岛素抗性。     

妊娠期糖尿病患者脂联素水平与胰岛素抵抗的关系

目的分析脂联素(APN)与胰岛素抵抗(HOMA-IR)的关联性,探讨APN水平变化在妊娠期糖尿病中的发病机制,寻找早期诊断和防治妊娠期糖尿病的新途径。方法以孕中期糖筛查试验结果将病例分为3组:妊娠期糖尿病(GDM)组24例、妊娠期糖耐量受损(GIGT)组32例,正常糖耐量(GNGT)组30例作为对照组。分别记录3组病例在孕早中晚期的体重,空腹血糖、胰岛素,留置血清同批测定脂联素。根据空腹血糖和胰岛素水平计算胰岛素抵抗指数。结果 3组病例随着孕早中晚期孕程增加其APN水平各自均呈下降趋势,胰岛素抵抗指数(INR-IRI)呈上升趋势,同组相邻期间比较差异有统计学意义(P<0.05)。而在同一孕程,GDM组APN水平低于GIGT组、GNGT组,差异有显著性。GDM组APN水平与HOMA-IRI负相关。结论妊娠期糖尿病病人孕期,尤其是在孕早期即出现了APN水平显著下降,APN水平与HOMA-IRI呈负相关。APN对于妊娠期糖尿病的早期诊断、早期干预具有临床意义,早期补充外源性APN也是防治妊娠期糖尿病的一种探索。     

熊果酸对妊娠期糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用

目的 观察熊果酸对妊娠期糖尿病(GDM)大鼠胰岛素抵抗的作用,探究其作用机制。方法 建立GDM孕鼠模型,随机分为模型组、二甲双胍组(200 mg·kg^-1)、熊果酸高和低剂量组(100、50 mg·kg^-1),同时另设未造模孕鼠作为正常组,每组14只,给药治疗19 d,检测孕鼠空腹血糖(FGB)、空腹胰岛素(FINS)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),记录孕鼠、胎鼠及胎盘质量,测定胰腺组织氧化应激指标水平,染色观察胰腺病变及胰岛细胞凋亡情况,Western blot检测胰腺组织磷酯酰肌醇-3-激酶(PI3K)及蛋白激酶B (Akt)蛋白磷酸化。结果 与正常组比较,模型组孕鼠FBG和HOMA-IR显著升高,FINS显著降低,孕鼠体质量、胎鼠和胎盘质量均升高,胰腺超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力降低,丙二醛(MDA)含量升高,胰岛组织损伤明显,凋亡细胞增加,PI3K、Akt蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。与模型组比较,熊果酸高、低剂量组孕鼠FBG、HOMA-IR降低,FINS升高,...     

高糖、高脂诱导大鼠肝脏胰岛素抵抗评价

目的:比较高糖、高脂等不同饮食诱导大鼠肝脏胰岛素抵抗模型的差异.方法:SD大鼠分成4组,分别给予普通、高糖、高脂、高糖高脂饲料,12周后检测各组空腹血糖水平、葡萄糖耐量、空腹血清胰岛素水平(FI)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、肝糖原含量及肝脏葡萄糖转运体2(GLUT2)、葡萄糖转运体4(GLUT4)表达水平.结果:口服糖耐量试验中,高脂组、高糖高脂组血糖曲线下面积分别为(91.6±5.5)和(106.1±4.6)mmol·min·L-1,较对照组明显增大(P<0.05或0.001).高脂组的FI与HOMA-IR分别为(20.2±0.9) μIU·L-1和(5.1±0.3),高糖高脂组则分别为(31.4±2.0) μIU·L-1 和(8.2±0.7),均较对照组显著升高(P<0.05或0.001).高糖高脂组的肝糖原含量为(1.3±0.0) mg·g-1,也较对照组显著增多(P<0.01).高脂组和高糖高脂组的GLUT2表达分别为(75.8±4.0)%和(60.0±4.5)%,均比对照组明显降低(P<0.05或0.001);高糖、高脂、高糖高脂组的GLUT4表达分别为(60.6±5.2)%,(72.3±3.8)%,(57.1±2.9)%,同样较对照组显著降低(P<0.001).结论:高糖结合高脂饮食更适合胰岛素抵抗模型的制备.     

高脂大鼠非酒精性脂肪肝与胰岛素抵抗的关系

目的 :研究高脂大鼠胰岛素抵抗与脂肪肝的关系。方法 :采用高脂饮食复制大鼠胰岛素抵抗动物模型 ,检测血糖、血清胰岛素、血清甘油三酯和血清游离脂肪酸及肝脏甘油三酯 (TG)含量 ,并做病理切片 ,测定肝脂变面积。结果 :胰岛素抵抗模型组大鼠血糖、血清胰岛素、血清甘油三酯和游离脂肪酸含量、肝脏 TG含量均高于正常对照组。结论 :胰岛素抵抗与脂肪肝的发生密切相关 ,高胰岛素血症、胰岛素抵抗是脂肪肝形成的危险因素。     

PI3K/Akt信号通路与阿尔茨海默病关系的研究进展

神经系统活动的基础是神经元以及它们之间的联系。在生长发育过程中,如果这些结构出现变化就会导致相应的疾病发生,如轻度认知障碍(mild cognitive impairment,MIC)、阿尔茨海默病(Alzheimer′s disease,AD)、帕金森病(Parkinson disease,PD)等老化疾病。导致这些疾病发生的机制很多,包括基因水平改变、细胞内外部环境变化等。目前认为磷脂酰肌醇-3-激酶/丝/苏氨酸激酶(phosphatidylinositol-3-kinases/serine threonine kinase,PI3K/Akt)信号通路与细胞生存、细胞代谢以及细胞凋亡等机制密切相关。因     

HCV-F基因在hepG2细胞中的表达以及对PI3K的影响

探讨丙型肝炎病毒(HCV)F基因对PI3K表达的影响.应用PCR技术从含有HCV全长开放阅读框的质粒中获得HCV-F基因片段,利用基因重组技术将其克隆至真核表达载体pcDNA3.0(-)中.通过酶切、PCR及测序鉴定,HCV-F基因已正确插入到pcDNA3.0(-)中,再利用脂质体转染HepG2细胞.经RT-PCR及Western blot检测,HCV的F基因在HepG2细胞中获得表达,而且在表达重组HCV-F的转染HepG2细胞中,检测到PI3K蛋白的表达.实验表明HCV-F可在体外激活PI3K及其信号通路.     

PI3K/Akt信号通路在肝癌中相关机制及药物研究进展

肝癌在我国的死亡率逐年提升,发病年龄也日趋年轻化,发现时大多已处于中、晚期,失去了最佳手术时机.随着近年来高通量测序技术水平的不断提高,多条信号通路的调控机制对肝癌的辅助治疗成为研究热点,对肝癌的靶点进行分子靶向治疗成为一项有效的手段.多条信号通路在肝癌的发病过程中发挥作用;其中,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt...