人子宫内膜容受性相关基因的研究进展

良好的子宫内膜容受性是胚胎着床成功的关键因素,近年来通过基因芯片技术展开了对子宫内膜容受性相关基因的高通量筛选研究。学者们通过对正常妇女正常月经周期子宫内膜基因表达差异的研究,初步总结出一些与子宫内膜容受性相关的基因,同时也发现子宫内膜异位症及不明原因不孕的妇女子宫内膜基因表达异于正常妇女,某些基因的异常表达可能影响子宫内膜容受性,从而造成植入失败引起不孕。而近期,促排卵周期子宫内膜基因的表达成为学者们研究的热点,人们正努力寻找能用于指导临床的子宫内膜容受性相关基因,这对了解植入失败原因、评估子宫内膜功能和预测妊娠结局将起到重要作用。     

子宫内膜容受性相关调控因子的时序表达及功能

胚胎着床是复杂的程序化的生理过程。子宫内膜仅在极短时期内允许胚泡植入,此时子宫内膜达到最大胚泡种植容受性。子宫内膜容受性形成过程中受多种细胞因子、蛋白分子调控,这些特定调控因子在子宫内膜发育分化过程中呈现较为显著的时空表达特征,对内膜容受性形成有重要作用。相关细胞因子(白血病抑制因子、白细胞介素)、蛋白分子(胎盘蛋白、半乳糖凝集素-1)及特定转录因子(同源框基因)在子宫内膜容受性形成过程中伴随短暂、瞬间性高表达,其表达量为增生期的4～5倍,该时期与着床窗期时间一致,呈现出时空特异性。表明这几类生物活性分子可能与子宫内膜容受性形成密切相关。     

子宫肌瘤对子宫内膜容受性的影响

子宫内膜容受性是影响胚胎着床的重要因素之一,子宫肌瘤是生育期女性最常见的良性肿瘤,对子宫内膜容受性的影响深受关注,其对子宫内膜容受性的影响不是局限于肌瘤表面而是遍布整个宫腔。除了引起宫腔形态改变外,子宫肌瘤可通过局部血供受损、子宫内膜免疫状态失衡、细胞因子分泌异常、着床相关因子改变等损害子宫内膜容受性;但子宫肌瘤是否影响子宫内膜着床尚未达成一致意见。     

子宫内膜容受性相关调控因子的时序表达及功能

胚胎着床是复杂的程序化的生理过程.子宫内膜仅在极短时期内允许胚泡植入,此时子宫内膜达到最大胚泡种植容受性.子宫内膜容受性形成过程中受多种细胞因子、蛋白分子调控,这些特定调控因子在子宫内膜发育分化过程中呈现较为显著的时空表达特征,对内膜容受性形成有重要作用.相关细胞因子(白血病抑制因子、白细胞介素)、蛋白分子(胎盘蛋白、半乳糖凝集素-1)及特定转录因子(同源框基因)在子宫内膜容受性形成过程中伴随短暂、瞬间性高表达,其表达量为增生期的4～5倍,该时期与着床窗期时间一致,呈现出时空特异性.表明这几类生物活性分子可能与子宫内膜容受性形成密切相关.     

对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜容受性的研究

目的:建立胚泡着床障碍小鼠模型,并研究其子宫内膜容受性。方法:于妊娠d4上午利用米非司酮诱导昆明小鼠胚泡着床障碍,12h后处死小鼠,观察小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数,利用光镜观察小鼠子宫内膜形态结构,采用免疫组化SP法检测子宫雌、孕激素受体(ER、PR)表达,采用RT-PCR检测子宫ER、PR基因表达。结果:与对照组相比,模型组小鼠胚泡着床率及平均着床胚泡数明显降低,子宫内膜发育明显受抑制;子宫内膜腺体、间质ER、PR表达范围和强度均显著降低。结论:米非司酮能成功诱导建立胚泡着床障碍模型,其着床期子宫内膜发育受抑制,子宫内膜容受性降低,胚泡着床失败。     

子宫内膜容受性的调控及其特征标记的研究进展

胚泡着床是一复杂的生理过程。着床只发生在具有接受性的子宫内膜,子宫对胚泡的接受性叫容受性。子宫内膜容受性的调控机制尚不清楚,涉及卵巢甾体激素,细胞因子和黏附分子等的自分泌及旁分泌机制。综述子宫内膜容受性的调节机制及特征性标记。     

瘦素与子宫内膜容受性相关研究进展

近年来,随着辅助生殖技术的发展而获得的优质胚胎数量日趋增多,但胚胎着床率始终未能达到较高的水平。因此,良好的子宫内膜容受性成为胚胎成功着床的关键一环。瘦素作为一种常见的脂肪因子,可通过与靶细胞膜上的瘦素受体结合,激活下游信号通路并合成转录因子后,与特定基因启动子区域的DNA元件相互作用,启动目的基因转录,从而发挥重要的生物学功能。瘦素已被广泛证实对人体的生殖功能有重要影响,特别是瘦素会影响与胚胎着床有关的生殖调控因子表达水平、母体内分泌和代谢状况及子宫内膜微环境等。更有研究发现,瘦素及其受体在人类和啮齿动物的子宫内膜上均有较高水平的表达,因此认为其直接或间接地影响子宫内膜容受性。现就瘦素与子宫内膜容受性的相关研究进展进行综述,尝试为临床对子宫内膜容受性的评估提供一个崭新的分子标志物。     

子宫内膜容受性的调控及其特征标记的研究进展

胚泡着床是一复杂的生理过程.着床只发生在具有接受性的子宫内膜,子宫对胚泡的接受性叫容受性.子宫内膜容受性的调控机制尚不清楚,涉及卵巢甾体激素,细胞因子和黏附分子等的自分泌及旁分泌机制.综述子宫内膜容受性的调节机制及特征性标记.     

瘦素与子宫内膜容受性相关研究进展

近年来,随着辅助生殖技术的发展而获得的优质胚胎数量日趋增多,但胚胎着床率始终未能达到较高的水平。因此,良好的子宫内膜容受性成为胚胎成功着床的关键一环。瘦素作为一种常见的脂肪因子,可通过与靶细胞膜上的瘦素受体结合,激活下游信号通路并合成转录因子后,与特定基因启动子区域的DNA元件相互作用,启动目的基因转录,从而发挥重要的生物学功能。瘦素已被广泛证实对人体的生殖功能有重要影响,特别是瘦素会影响与胚胎着床有关的生殖调控因子表达水平、母体内分泌和代谢状况及子宫内膜微环境等。更有研究发现,瘦素及其受体在人类和啮齿动物的子宫内膜上均有较高水平的表达,因此认为其直接或间接地影响子宫内膜容受性。现就瘦素与子宫内膜容受性的相关研究进展进行综述,尝试为临床对子宫内膜容受性的评估提供一个崭新的分子标志物。     

上皮-间质转化和蜕膜化与子宫内膜容受性

人类生殖过程涉及各种复杂因素,其中胚胎能否着床是受孕过程中的关键步骤。顺利的着床需要有正常生命力的胚胎在适当的时间植入具有接受性的子宫内膜,且胚胎与内膜达到同步交流状态。着床过程中任何一个环节出现差错都会影响妊娠率,而子宫内膜容受性下降可能是导致不孕的主要原因之一。着床初期子宫内膜上皮细胞发生上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）为后续胚胎的植入做准备,随后子宫内膜间质细胞发生蜕膜化为胚胎提供良好的发育环境。这提示EMT与蜕膜化是维持子宫内膜容受状态的基本条件,而良好的子宫内膜容受性是胚胎植入并充分发育的生物学基础。     

早孕期人绒毛趋化因子CCL2及其受体CCR2的表达

目的:分析人早孕绒毛组织趋化因子CCL2及其受体CCR2的转录和翻译表达。方法:收集人早孕期胎盘组织30例,分离出绒毛组织,采用半定量RT-PCR、免疫组织化学法分析正常人早孕绒毛组织CCL2/CCR2的表达。结果:人早孕绒毛滋养细胞中等水平转录和翻译CCL2及CCR2。结论:CCL2/CCR2表达于母-胎界面的胎儿面绒毛组织,可能参与滋养细胞功能调控。     

子宫肌瘤中环氧合酶-2的表达与前列腺素E-2的测定及临床意义

目的探讨子宫肌瘤、肌瘤假包膜组织及肌瘤周围正常子宫肌层组织中环氧合酶2(COX2)的表达及其相关产物前列腺素E2(PGE2)水平与子宫肌瘤发生的关系。方法对2002年12月至2003年5月东莞市人民医院53例子宫肌瘤组织、46例肌瘤假包膜组织及肌瘤周围正常子宫肌层组织用SP免疫组化方法检测COX2表达,放射免疫法测定PGE2水平。结果(1)COX2在子宫肌瘤组织中的阳性表达率明显高于子宫肌层组织及肌瘤假包膜组织(P<0.05);COX2表达与患者的年龄、肌瘤大小、肌瘤个数及其类型无明显相关(P>0.05)。(2)肌瘤组织的PGE2水平明显高于子宫肌组织及肌瘤假包膜组织(P<0.05)。(3)肌瘤组织中COX2表达与PGE2水平成正相关,而肌瘤假包膜和肌层组织中则无明显相关性。结论COX2蛋白高表达可能导致前列腺素类物质生物合成增加,可能与子宫肌瘤的发生相关。     

BMP-2对人卵巢浆液性囊腺癌HO8910细胞浸润能力的影响及机制研究

目的 检测骨形态发生蛋白-2（BMP-2）对人卵巢浆液性囊腺癌HO8910细胞的浸润能力有无影响,并探讨其可能的影响机制。方法 2008至2009年于中国医科大学盛京医院应用细胞黏附实验、cross-river实验和matrigel-transwell实验观察BMP-2对HO8910细胞浸润能力的影响,并检测BMP-2作用后HO8910细胞中MMP-2、TIMP-2的变化。结果 BMP-2作用后HO8910细胞黏附能力增强,cross-river时间延长,穿过matrigel-transwell侵袭模型的细胞数量减少,且MMP-2表达较前减弱,TIMP-2表达较前增强。结论 BMP-2抑制HO8910卵巢癌细胞浸润能力。     

Cyclooxygenase-2 selective inhibitor prevents implantation of eutopic endometrium to ectopic sites in rats

OBJECTIVE: To evaluate Cox-2 inhibition on surgically induced endometriosis in rats. DESIGN: Prospective, randomized study SETTING: Academic facility. ANIMAL(S): Seventy adult female Sprague-Dawley rats. INTERVENTION(S): Uterine fragments were implanted into abdominal peritoneum with suture (site A), and/or into the pelvic cavity without suture (site B). Oral gavage of Cox-2 inhibitor (5 mg/kg/day, twice/day) was started 4 weeks postimplantation (protocol-1), after implantation (protocol-2), or beforehand (protocol-3). Controls received vehicle. Immunohistochemistry evaluated Cox-2 expression after treatment. MAIN OUTCOME MEASUREMENT(S): Presence and size of ectopic implants after treatment. RESULT(S): Protocol-1: After 4 weeks' treatment, size of ectopic implants (site A) was significantly reduced compared with pretreatment size. After 8 weeks' treatment, no ectopic implants were detected in 2 (40%, site A) and 3 (60%, site B) rats. Protocol-2: After 2 weeks' treatment, no ectopic implants were detected in 3 (50%, site A) and 2 (33%, site B) rats. After 4 weeks' treatment, no ectopic implants were detected in 3 (50%, site A) and 3 (50%, site B) rats. Protocol-3: After 2 or 4 weeks' vehicle-only treatment, ectopic implants were in all rats (site B). CONCLUSION(S): Cox-2 selective inhibition was effective in a rat model of endometriosis, particularly in prevention of ectopic implants.     

特发性胎儿生长受限与胎盘细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系

目的 探讨特发性胎儿生长受限(FGR)与胎盘细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系.方法 应用透射电镜、脱氧核苷酸末端转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)、流式细胞技术(FCM)检测特发性FGR孕妇(FGR组)及正常妊娠妇女(对照组)各15例的胎盘细胞凋亡情况,并采用RT-PCR技术观察两组胎盘细胞中bcl-2基因相对表达量.结果 电镜下观察到FGR组胎盘合体滋养细胞核膜皱缩,核仁消失,染色质致密、凝聚;TUNEL 检测 FGR 组胎盘细胞凋亡率为13.68%,高于对照组的4.05%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);FCM检测胎盘S期细胞比率FGR组为3.4%,对照组为2.2%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),FCM检测的胎盘细胞凋亡率变化趋势与TUNEL检测结果一致;FGR组胎盘细胞bcl-2基因相对表达量为0.19±0.13,对照组为0.55±0.17,两组比较,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 特发性FGR的发生与胎盘细胞凋亡增加有关,胎盘细胞凋亡增加与胎盘细胞中bcl-2基因表达下调有一定关系.     

RNA干扰技术抑制Her2基因表达对卵巢上皮性癌细胞生物学特性的影响

目的 应用RNA干扰技术,观察稳定转染Her2基因的短发夹状RNA(shRNA)对不同恶性程度的卵巢上皮性癌(卵巢癌)SKOV3和SKOV3.ipl细胞Her2基因表达及细胞生物学特性的影响.方法 将表达Her2的质粒pHer2 shRNA分别转染SKOV3和SKOV3.ipl细胞,经抗性筛选获得稳定转染的细胞系.RT-PCR技术、蛋白印迹法检测转染前后细胞Her2 mRNA和蛋白的表达,体外侵袭实验观察转染前后细胞侵袭能力的改变,裸鼠接种肿瘤细胞观察转染前后细胞成瘤能力的改变.结果 转染前后SKOV3.ipl、SKOV3细胞的Her2 mRNA表达量分别为(99.9±1.3)%和(42.4±2.5)%、(68.0±3.1)%和(40.8±2.0)%.Her2蛋白的表达量分别为(98.2±1.7)%和(40.7±2.1)%、(72.1±3.4)%和(36.4±1.5)%,稳定转染后,两种细胞的Her2基因表达均明显下降,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).稳定转染pHer2 shRNA后,SKOV3.ipl细胞的穿膜细胞数由(36.2±9.7)个下降为(15.7±7.2)个,SKOV3的穿膜细胞数由(7.6±1.1)个下降为(1.8±0.8)个,细胞侵袭能力均显著下降,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).稳定转染pHer2 shRNA后,SKOV3.ip1和SKOV3细胞的成瘤重量分别由(1.55±0.31)g下降为(0.69±0.20)g、(1.14±0.10)g下降为(0.38±0.03)g,两种细胞的成瘤能力均显著下降,分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 (1)针对Her2基因的RNA干扰技术可以显著降低卵巢癌细胞Her2基因的表达水平.(2)经RNA干扰作用降低Her2基因表达后,卵巢癌细胞的生物学特性改变,恶性度降低.     

1,25二羟维生素D3联合顺铂对子宫内膜癌HEC-1-A细胞增殖及Skp2/p27表达的影响

目的:探讨1,25二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]与顺铂(DDP)联合抑制人子宫内膜癌HEC-1-A细胞的增殖,测定二者作用下S期激酶相关蛋白(Skp2)、抑癌基因p27蛋白的表达。方法:用CCK-8法测定1,25(OH)2D3、DDP及二者联合处理后细胞增殖情况,用流式细胞仪分析细胞周期,用W estern blot检测Skp2及p27蛋白表达的变化。结果:与对照组相比,1,25(OH)2D3、DDP作用下细胞吸光度(OD)值减少,细胞增殖受到抑制(P0.01),二者联用时此作用明显增强;1,25(OH)2D3、DDP均能增加G0/G1期细胞比例,降低S、G2/M期细胞比例,从而降低细胞增殖指数(P0.01);二者作用下Skp2表达减少,p27蛋白表达增多。结论:1,25(OH)2D3有增强DDP抗肿瘤的作用,二者均可能通过下调Skp2、上调p27蛋白表达,抑制癌细胞增殖。     

华蟾素对子宫内膜癌Ishikawa细胞RRM2表达的影响和意义

目的:探讨华蟾素对体外培养的子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、侵袭力及其对RRM2表达的影响和意义。方法:体外培养Ishikawa细胞,经不同浓度华蟾素干预后,用RT-PCR及Western blot分别检测RRM2在mRNA及蛋白水平上的表达,用MTT法检测处理前后细胞的增殖,transwell小室分析细胞体外的侵袭力。结果:华蟾素能显著减少RRM2在mRNA及蛋白水平的表达,有效地抑制Ishikawa细胞增殖,降低侵袭力,研究证实华蟾素终浓度3.0mg/ml是最佳抑制浓度,对照组Ishikawa细胞组则无上述效应。结论:华蟾素可明显降低Ishikawa细胞中RRM2表达,抑制细胞增殖,降低细胞侵袭力。     

bcl-2表达下调参与PCOS患者颗粒细胞的凋亡增加

目的比较PCOS患者和正常妇女颗粒细胞的凋亡差异,并初步探讨其发生的可能机制。方法采用病例对照的方式,选择体外受精-胚胎移植（IVF-ET）中PCOS患者23例以及对照组31例,收集其颗粒细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡率,用Hochest 33342荧光染色观察凋亡细胞核形态。用免疫组化和WesternBlot法分析两组原代培养颗粒细胞间bcl-2蛋白的表达差异。结果PCOS组和对照组颗粒细胞凋亡率分别是（0.26±0.18）和（0.16±0.10）,PCOS颗粒细胞的凋亡率明显增高（P〈0.05）,Hochest 33342荧光染色在PCOS组颗粒细胞中可见更多的凋亡细胞核形态。免疫组化显示bcl-2主要表达在颗粒细胞胞浆中表达,形态计量学积分显示PCOS组和对照组的H-Score分别是（7.45±3.85）和（10.73±4.17）,在PCOS组颗粒细胞中bcl-2蛋白表达明显下调（P〈0.05）。结论PCOS患者颗粒细胞凋亡增多;bcl-2表达下调可能是导致PCOS患者颗粒细胞凋亡增多的关键因素。     

冷冻保存对人卵巢组织雌二醇分泌功能的影响

目的:探讨冷冻保存对人卵巢组织E2分泌功能的影响。方法:收集20例卵巢良性肿瘤手术患者的正常卵巢皮质,随机分为新鲜对照组和玻璃化冷冻组,冻融后行体外培养,比较冻融前、后人卵巢组织的内分泌功能。结果:①在体外培养期间,所有卵巢组织均能持续分泌E2。新鲜对照组E2分泌水平始终高于冷冻组,培养前10d,差异有统计学意义(P<0.05);培养12d之后,组间E2水平无统计学差异(P>0.05)。②体外培养初期E2分泌水平较平稳,随培养时间延长E2水平呈波动性变化。结论:人卵巢组织冷冻解冻后仍具有内分泌功能,随着培养时间的延长,新鲜组与冷冻组间E2分泌水平可能无差异。