米非司酮对大鼠胚泡着床影响的研究

大鼠妊娠第１ｄ给予２．５～１２．５ｍｇ／ｋｇ米非司酮或妊娠第１,２ｄ,２．５～５．０ｍｇ．ｋｇ＾－１／ｄ。结果显示：（１）大鼠妊娠第１ｄ皮下注射米非司酮１０ｍｇ／ｋｇ可完全抗着床,同一剂量单次与分次给药差别无显著性;（２）大鼠妊娠第１或１,２ｄ应用大剂量米非司酮致妊娠第８ｄ血中雌,孕激素明显下降;（３）大鼠妊娠第１ｄ应用米非司酮１０ｍｇ／ｋｇ后４８ｈ血中雌,孕激素显著降低,提示用药后血中雌,孕激素     

米非司酮对大鼠胚泡着床影响的研究

大鼠妊娠第１ｄ给予２．５～１２．５ｍｇ／ｋｇ米非司酮或妊娠第１，２ｄ２．５～５．０ｍｇ·ｋｇ－１／ｄ。结果显示：①大鼠妊娠第１ｄ皮下注射米非司酮１０ｍｇ／ｋｇ可完全抗着床，同一剂量单次与分次给药差别无显著性；②大鼠妊娠第１或１，２ｄ应用大剂量米非司酮致妊娠第８ｄ血中雌、孕激素明显下降；③大鼠妊娠第１ｄ应用米非司酮１０ｍｇ／ｋｇ后４８ｈ血中雌、孕激素显著降低。提示用药后血中雌、孕激素下降致胚泡与子宫内膜发育不同步可能是米非司酮影响着床的重要原因     

补肾安胎方及其拆方对着床障碍小鼠胚泡着床疗效观察

目的:观察补肾安胎方及其构方中补肾组分、益气活血组分对胚泡着床障碍小鼠胚泡着床位点数的影响。方法:将妊娠小鼠随机分为正常组、模型组、补肾安胎组、补肾组及益气活血组。妊娠第3、4天,正常组小鼠每天2次皮下注射麻油0.12ml,其余四组皮下注射吲哚美辛油剂0.12ml,造成小鼠胚泡着床障碍的动物模型。分别收集妊娠第5、6、8天小鼠子宫,计数着床位点个数并比较其大小形态。结果:补肾安胎组小鼠着床位点数与模型组比较显著提高(P<0.05),补肾组和益气活血组小鼠着床位点数较模型组多,但无统计学意义;补肾组和益气活血组小鼠着床位点数较补肾安胎组少,但无统计学意义。第5、6天着床位点胚泡,正常组和补肾安胎组左右两侧子宫分布均匀,胚泡大;模型组胚泡分布明显不均,且比正常组及补肾安胎组小;补肾组和益气活血组胚泡分布尚均匀,比正常组及补肾安胎组稍小。妊娠第8天正常组和补肾安胎组胚泡大而且各胚泡大小均等,形状规则,胚泡间界限清楚,无相互融合现象;模型组胚泡大小形状不一,各胚泡之间发生融合;补肾组和益气活血组胚泡大小较均匀,但有融合现象。结论:集补肾和益气活血为一体的补肾安胎方可以明显提高小鼠着床位点数,改善胚泡的形态和宫内的分布。     

与胚泡着床密切相关的一类特殊细胞的研究

与胚泡着床密切相关的一类特殊细胞的研究首都医学院生殖医学研究中心史小林，诸定寿，王兴翠，翁静，路欣本实验室研究的主要方向之一是对胚泡着床的机理进行探讨。我们将研究重点放在着床机理的探讨上。胚泡在植入子宫内膜的过程中，存在着胚泡通过怎样的自我变化进入子...     

保胎液对胚泡着床障碍小鼠着床位点数及分布形态影响的实验研究

目的观察保胎液对胚泡着床障碍模型小鼠着床位点数及分布形态的影响。方法采用米非司酮小鼠胚泡着床障碍模型。将孕鼠随机分为正常组、模型组、西药对照组和中药(高、中、低三种剂量)治疗组,从妊娠第1天起分别给予生理盐水、地屈孕酮和保胎液(高、中、低三种剂量)灌胃治疗。于妊娠第4天上午皮下注射米非司酮,每只0.08 mg。正常组不予任何处理。于妊娠第5天腹腔静脉注射1%浓度的Trypan Blue 0.3 mL,观察10 min,取出子宫,观察蓝染点,计算胚泡着床位点数。结果中药高、中、低治疗组,西药对照组,模型组小鼠胚泡着床位点数均低于正常组(P<0.05);与模型组比较,中药各治疗组、西药组小鼠着床位点数明显提高(P<0.05)。结论保胎液能够增加着床障碍小鼠的胚泡着床位点数,从而有利于胚泡的着床,提高妊娠率。     

小鼠胚泡体外着床行为的研究

目的：用对比的方法观察纤粘连蛋白包被和与人蜕膜细胞共培养对小鼠胚泡体外着床的影响。方法：在FN包被组和共培养组分别移入胚泡观察并统计粘附率和铺展率。结果：FN包被组胚泡的粘附率(77．42％)与共培养组(93．33％)相比．差异无显著性(P＞0．05)，而共培养组的铺展率(80．00％)明显高于FN包被组(38．71％)．差异有圾显著性(P＜0．01)。结论：小鼠胚泡与人蜕膜细胞共培养是一个比较理想的体外着床馍型，可用来观察胚泡的粘附和铺展情况。     

补肾安胎方对胚泡着床障碍小鼠胚胎着床局部COX-2蛋白和mRNA表达的影响

目的:观察补肾安胎方对胚泡着床障碍小鼠胚胎着床局部环氧化酶-2(COX-2)蛋白和mRNA表达的影响,探讨其作用机制。方法:将妊娠小鼠随机分为正常组、吲哚美辛组(模型组)、补肾安胎方组(中药组)。用伊文思蓝注射后收集妊娠第5天、第6天小鼠子宫,采用免疫组织化学法和RT-PCR半定量方法检测小鼠胚胎着床局部COX-2蛋白和mRNA表达。结果:妊娠第5天正常组COX-2的表达呈强阳性,与模型组胚泡着床延迟比较有显著性差异(P<0.05),中药治疗后与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。妊娠第6天模型组COX-2表达呈强阳性,正常组表达下降,两组比较有显著性差异(P<0.05),中药组表达也低于模型组,二者比较有显著性差异(P<0.05)。结论:补肾安胎方改善胚泡着床障碍小鼠胚胎着床可能与调节着床位点的COX-2的表达有关。     

台盼兰染色小鼠胚泡着床点的观察研究

本实验探讨用硫堇和台盼兰染料对妊娠４～５ｄ小鼠进行活体染色以显示胚泡着床位点的可能性。研究结果：１台盼兰可用作胚泡着床点的染色反应,具体方法是：尾静脉注射０５％台盼兰０３ｍｌ,１０ｍｉｎ后观察,而硫堇则无效;２着床点数目在两侧子宫角内的分布有显著差别,左右子宫角内分别为６４０±１６４和４８０±２４０个;３着床点的间距为２２５±０８７ｍｍ。     

胚泡着床过程中小鼠子宫内膜细胞表面糖基变化的研究

目的：探讨细胞表面糖基在胚泡着床中的作用,方法：用刀豆凝集素（ConA)、荆豆凝集素（UEA）、胚凝集素（WGA）、花生凝集素（PNA）和麦凝集素（WGA）为分子探针作亲合细胞化学染色,检测了与4种凝集素相对应的受体糖基在小鼠子宫内膜中的表达变化。结果：在胚泡植入期间,ConA受体一直为弱阳性,变化不明显;UEA受体主要分布于内膜表面上皮和腺上皮细胞表面,随妊娠天数增加含量逐渐减少直至消失;PNA受体出现于孕5d在着床处的蜕膜细胞膜上明显增多;着床前期;WGA受体主要分布于子宫内膜表面皮和腺上皮细胞膜上,胚胎植入后,WGA受体在着床处的蜕膜细胞膜上明显增多,结论：在着床期子宫内膜各种细胞的凝集素受体糖基呈现规律性变经,提示了宫内膜糖基的变人与胚泡着床密切相关。     

Effects of Acupuncture on Progesterone and Prolactin in Rats of Embryo Implantation Dysfunction

Objective:To investigate the effect of acupuncture on progesterone(P4) and prolactin(PRL) in rats of embryo implantation dysfunction(EID).Methods:On the first day of pregnancy,72 female Wistar rats were randomly allocated into the normal group,the EID model group,the acupuncture group and the P4 group(18 in each group).The normal group was injected sesame oil,while the other three groups were given mifepristone to establish the EID model.The acupuncture group and the P4 group were given treatment of acupuncture and P4 injection,respectively.The serum of P4 and PRL were detected by radioimmunoassay,and the mRNA and protein expressions of P4 receptor(PR) and PRL receptor(PRLR) were detected using real-time polymerase chain reaction and immunohistochemical method,respectively.Results:Compared with the normal group,the serum levels of P4 and PRL as well as the mRNA and protein expression levels of PR and PRLR in the EID model group were significantly lowered(P<0.01 or P<0.05).The above indices in the acupuncture group and the P4 group were significantly elevated compared with the EID model group(P<0.01 or P<0.05).Conclusion:Acupuncture can promote embryo implantation effectively,which might be related to the effects of acupuncture on upregulating the P4 and PRL levels in serum and the PR and PRLR expression levels in rats.     

GFP小鼠对三维体外着床模型的定位及验证

目的 本研究将基于已经建立的三维小鼠体外胚胎着床模型,运用绿色荧光（GFP）小鼠胚胎替代ICR小鼠胚胎,验证三维着床模型的可行性。方法 将孕第4天GFP小鼠及ICR小鼠囊胚与ICR小鼠的内膜组织进行体外共培养。观察两组胚胎黏着率的差异。对GFP小鼠囊胚组通过荧光显微镜进行观察,共培养后进行组织学研究。结果 GFP小鼠囊胚及ICR小鼠囊胚与ICR小鼠子宫内膜组织共培养28h后的胚胎黏着率分别为46.6%及54.8%;两组黏着率之间差异无统计学意义（P=0.364）。GFP小鼠囊胚与ICR小鼠子宫内膜组织共培养28h及40h后均可在荧光显微镜下见到胚胎,组织学研究证实GFP小鼠囊胚可以黏着于ICR小鼠子宫内膜。结论 三维着床模型确实能够实现不同来源小鼠胚胎的黏附着床。运用GFP小鼠胚胎还发现了胚胎与子宫内膜组织之间存在着信息及分子联系。     

鸡胚电转染-RNA干扰技术在体模型的建立

目的 建立在体鸡胚电转染-RNA干扰技术(RNAi)模型.方法 通过SOE-PCR方法,利用shRNA 中的Loop环作为交叠区序列成功的建立了一种方便的shRNA表达序列构建方法,将Isl-1特异性的shRNA序列插入到pEGFP-H1-shRNA质粒中,通过注射后电转染,利用免疫组织化学方法检测Isl-1在鸡胚神经管和背根神经节(dorsal root ganglia,DRG)中的表达.结果 鸡胚神经管和DRG中Isl-1的表达受到明显抑制.结论 成功建立了在体鸡胚电转染-RNAi模型,为以鸡胚为模式动物研究神经管和DRG发育相关基因的功能提供了有力的工具.     

前列腺增生大鼠模型的建立

目的:探讨丙酸睾酮对去势和不去势SD大鼠前列腺增生的影响.方法:8周龄雄性SD大鼠25只,随机分为正常对照组(n=5)、不去势模型组(n=15)及去势模型组(n=5);不去势模型组按注射丙酸睾酮剂量又分为不去势低剂量组、中剂量组和高剂量组,注射剂量分别为1.25,2.5,5 mg/(kg·d);去势模型组无菌切除双侧睾丸1周后注射丙酸睾酮5 mg/(kg·d);去势模型组和不去势模型组均连续注射丙酸睾酮4周,于末次给药后分离大鼠前列腺,检测其湿重、体积和脏器系数;组织切片HE染色,光镜下观察前列腺组织变化.结果:不去势小剂量组和中剂量组的前列腺湿重、体积和脏器系数增加,与正常对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05),不去势高剂量组和去势组的前列腺体积和脏器系数与正常对照组相比,差异均具有统计学意义(P＜0.01);去势组和不去势组大鼠前列腺体积和腺腔大小均较正常对照组增大,且不去势组前列腺腺体与周围组织界限更清楚,腺腔内乳头状突起也比去势组更加明显.结论:使用不去势、皮下注射5 mg/(kg·d)丙酸睾酮的方法可有效的建立前列腺增生大鼠模型.     

大鼠体外循环动物模型的建立

目的探讨建立大鼠体外循环动物模型的可行性.方法以SD大鼠为研究对象,尾动脉插管灌注,右颈静脉插管引流,建立常温大鼠体外循环模型.转流1h,比较体外循环大鼠与对照大鼠的生理学指标.结果现有条件下能够建立常温大鼠体外循环模型,较高流量(200ml@min-1@kg-1)转流1h,转流期间保持存活,但容易出现代谢性酸中毒和动脉血压降低;转流结束后因血液过度稀释不能够长期存活.结论无血预充常温大鼠体外循环模型可以成功建立,但是不能长期存活.     

特发性高草酸尿大鼠模型的建立

目的 建立特发性高草酸尿(IH)的大鼠模型.方法 将第1代72只SD大鼠(雌雄各半)分别置于大鼠代谢笼中,在适应饮食5 d后收集连续2 d的24 h尿,用离子色谱仪测定24 h尿草酸排泄量.将第1代大鼠中尿草酸排泄量最高的3只雄鼠与6只雌鼠进行交配,按同样的方法检测其子代(作为近交系)的24 h尿草酸排泄量,再选择尿草酸排泄量最高的3只雄鼠与6只雌鼠进行交配.依此类推,连续对每代大鼠进行检测、筛选和近交传代至第5代.结果 根据第1代大鼠的检测值确定大鼠24 h尿草酸排泄量的正常值范围(x ±2s):雄性为(4.82±2.94) mg;雌性为(5.21±3.26) mg.第5代近交系大鼠24 h尿草酸排泄量(x ±s):雄性为(12.54±2.46) mg (n=16);雌性为(13.51±2.63) mg (n=16).将24 h尿草酸排泄量高于正常值范围且在2.5倍以内的大鼠定义为IH大鼠,则在第5代近交系大鼠中,雌、雄性IH大鼠的出现率均超过90%.结论 该实验建立的IH大鼠模型可稳定传代,可用于IH的病因学研究.     

大鼠体外循环动物模型的建立

目的探讨建立大鼠体外循环动物模型的可行性.方法以SD大鼠为研究对象,尾动脉插管灌注,右颈静脉插管引流,建立常温大鼠体外循环模型.转流1h,比较体外循环大鼠与对照大鼠的生理学指标.结果现有条件下能够建立常温大鼠体外循环模型,较高流量(200ml@min-1@kg-1)转流1h,转流期间保持存活,但容易出现代谢性酸中毒和动脉血压降低;转流结束后因血液过度稀释不能够长期存活.结论无血预充常温大鼠体外循环模型可以成功建立,但是不能长期存活.     

急性心肌梗塞动物模型的建立

目的　探索建立急性心肌梗塞动物模型的适宜方法及最佳时间。方法　以 38只Wistar大鼠为研究对象 ,在动物呼吸机的支持下 ,麻醉满意后打开胸腔 ,暴露心脏 ,结扎左冠脉前降支 ,应用心电图动态监测、病理组织切片来确定模型建立情况。结果　心电图动态监测显示ST段在冠脉结扎后呈持续性升高 ;4 0min后可见Q波 ,同时病理组织切片可见结扎区域心肌纤维排列紊乱 ,肌丝断裂溶解 ,细胞核固缩甚至碎裂 ,间质充血水肿 ,有炎性细胞浸润 ;超声检查显示结扎后动物射血分数较结扎前无明显下降 ,无显著统计学意义。结论　通过结扎左冠脉前降支的方法 ,在结扎后 4 0min ,能够建立稳定的心肌梗塞动物模型 ,从而为加强心肌梗塞的进一步研究打下基础     

大鼠睡眠呼吸暂停综合征动物模型的建立

目的建立小动物的吸入麻醉方法。方法选用20只新西兰白兔,将麻醉气体输出管连接到小动物呼吸机实施兔的吸入麻醉。结果本方法能顺利实施兔的吸入麻醉,而且呼气末异氟醚浓度和吸入氧浓度与氧流量成正比。结论应用小动物呼吸机可实施小动物的吸入麻醉,通过调节氧流量可达到需要的吸入麻醉药浓度和吸入氧浓度。     

抗精子抗体阳性大鼠动物模型的建立

目的　建立抗精子抗体 (AsAb)阳性大鼠动物模型。方法　同种Wistar大鼠精子抗原人工免疫法建立模型 ,通过ELISA法检测血清AsAb ;光镜HE染色观察大鼠附睾组织形态学改变 ;考马斯亮蓝顶体染色法检测精子的顶体反应率 ;化学比色法检测精子的ATP酶活性。结果　模型AsAb阳性大鼠血清样品的AsAb符合实验要求 ,其精子的顶体反应率、Na+ -K+ ATP酶、Ca2 + -ATP酶活性与对照组相比均显著降低 (P <0 0 1;P <0 0 5 ;P <0 0 5 )。结论　成功建立抗精子抗体阳性大鼠动物模型。