新鲜羊膜移植对碱烧伤大鼠角膜缘干细胞增殖效应的影响

目的：观察新鲜羊膜移植对碱烧伤大鼠模型角膜缘干细胞增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的影响。

方法：SD大鼠40只40眼制作眼碱烧伤模型; 随机选取20只20眼行新鲜羊膜移植为实验组,对照组为不处理的烧伤模型眼。于术后1,2,3,4wk取角膜缘组织,采用免疫组化技术观察PCNA在角膜缘干细胞的表达情况。

结果：PCNA在实验组和对照组的角膜缘干细胞中均有表达,位于角膜缘上皮细胞基底层的细胞核内,但羊膜移植组显著高于对照组,两者比较有统计学意义(P<0.05); 羊膜移植术后1,2,3,4wk时PCNA蛋白在角膜缘干细胞的表达不一致,呈线性趋势,1wk达到高峰,以后逐渐降低。

结论：眼碱烧伤后行羊膜移植术可促进角膜缘干细胞的增殖表达,利于角膜上皮的修复。     

培养角膜干细胞羊膜片移植治疗角膜缘功能障碍

目的：临床观察培养的角膜干细胞羊膜移植片治疗角膜缘功能障碍的效果。方法：人角膜缘干细胞原代培养后接种生长于羊膜上,临床选择角膜缘烧伤后（碱烧伤、酸烧伤、其他化学烧伤等）,角膜新生血管的患者进行干细胞羊膜片移植,术后观察角膜上皮、组织浸润和新生血管情况。结果：术后患者自觉症状轻,视力有一定提高,角膜缘移植片紧密贴附,角膜上皮完整,轻度基质炎性浸润,浅层新生血管减少,深层新生血管充盈减轻,睑球粘连得到     

羊膜移植联合自体角膜缘干细胞移植治疗眼部烧伤

目的：探究羊膜移植联合自体角膜缘干细胞移植治疗对眼部烧伤患者眼表修复时间、修复率及并发症的影响。

方法：回顾性分析我院行自体角膜缘干细胞移植治疗(对照组)和行羊膜移植联合自体角膜缘干细胞移植治疗(观察组)的各61例61眼眼部烧伤患者临床资料。记录两组术后眼表修复率、修复时间、术后12wk视力情况及并发症发生情况(睑球粘连、角膜新生血管、角膜溶解溃疡),并比较两组术前及术后2wk细胞因子\〖血管内皮生长因子(VEGF)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)\〗水平差异。

结果：观察组术后眼表修复率高于对照组(P<0.05),且修复时间低于对照组(P<0.05)。术后12wk时,观察组视力情况明显优于对照组(P<0.05)。观察组术后并发症总发生率明显低于对照组(P<0.05)。术后2wk时,两组血清VEGF、TGF-β1、IGF-1水平均较术前升高(P<0.05),且对照组高于观察组(P<0.05)。

结论：羊膜移植联合自体角膜缘干细胞移植对眼部烧伤患者治疗效果显著,可促进患者眼表修复,改善术后视力,调节患者角膜血管新生情况,降低术后并发症风险。     

全角膜羊膜覆盖和绷带型角膜接触镜用于较大翼状胬肉切除术的疗效比较

目的：针对较大翼状胬肉,采用胬肉切除、角膜缘干细胞移植联合全角膜羊膜覆盖术,或胬肉切除和角膜缘干细胞移植术后配戴绷带型角膜接触镜进行治疗,观察两种方法的临床效果。

方法：将侵及瞳孔区的较大翼状胬肉40眼随机分成两组,一组行翼状胬肉切除、角膜缘干细胞移植术联合全角膜羊膜覆盖术(羊膜组),另一组行胬肉切除和角膜缘干细胞移植术后配戴绷带型角膜接触镜(绷带镜组),每组各20眼。比较两组患者手术时间,以及术后第1、3d,1、3wk眼部舒适程度和角膜愈合情况与随访复发情况等。

结果：平均手术时间：羊膜组为61.4±5.2min,绷带镜组为34.5±2.7min,绷带镜组手术时间明显缩短,两组差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者的眼部舒适度在术后第1d无明显差异,但在术后第3d和术后1wk,绷带镜组患者的眼部舒适度明显优于羊膜组(P<0.01),至术后3wk时两组间差异无统计学意义(P>0.05)。术后3wk时两组患者的角膜愈合率评分分别为0.85±0.18分和1.15±0.18分,两组差异无统计学意义(P=0.25)。羊膜组有1眼胬肉复发。

结论：在侵及角膜的较大翼状胬肉治疗中,胬肉切除和角膜缘干细胞移植术后联合全角膜羊膜覆盖或术后配戴绷带型角膜接触镜均有助于缓解眼部不适症状和促进角膜创面修复,使用绷带型角膜接触镜患者更舒适,治疗更便捷。     

翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植与联合羊膜移植的疗效比较

目的：探讨翼状胬肉手术切除联合自体角膜缘干细胞移植术与联合羊膜移植术临床疗效对比。

方法：选择本院2007-03/2010-03收治的角膜缘翼状胬肉患者90例90眼,均单眼手术,随机分为两组,角膜移植组给予手术切除联合自体角膜缘干细胞移植,羊膜移植组给予手术切除胬肉联合羊膜移植治疗,观察两组治疗效果。

结果：两组术后随访2a,角膜移植组术后创面愈合时间短于羊膜移植组,差异有统计学意义(P<0.05),角膜移植组术后治愈42例,复发3例; 羊膜移植组术后治愈39例,复发6例,两组术后复发率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。

结论：手术切除联合角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉,术后复发率低,并发症少,愈合时间短,值得应用。     

退翳明目汤联合自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉

目的：探讨退翳明目汤联合自体角膜缘干细胞移植治疗翼状胬肉的临床价值。

方法：回顾性分析。收集2016-01/2018-01我院收治的翼状胬肉患者80例98眼,按治疗方式分为自体角膜缘干细胞移植组34例39眼与退翳明目汤联合自体角膜缘干细胞移植组46例59眼。比较两组患者手术前后UCVA、角膜屈光度、角膜散光度、BUT、SⅠt、角膜上皮修复时间、并发症及复发率。

结果：术前,两组患者UCVA、角膜屈光度、角膜散光度、BUT、SⅠt比较无差异(均P>0.05),术后1mo,两组UCVA均改善,BUT、SⅠt均增加,角膜屈光度、角膜散光度均降低,退翳明目汤联合自体角膜缘干细胞移植组UCVA优于自体角膜缘干细胞移植组,角膜屈光度、角膜散光度低于自体角膜缘干细胞移植组(均P<0.05); 退翳明目汤联合自体角膜缘干细胞移植组角膜上皮修复时间短于自体角膜缘干细胞移植组(P<0.05),术后并发症发生率及随访12mo复发均低于自体角膜缘干细胞移植组(P<0.05)。

结论：退翳明目汤联合自体角膜缘干细胞移植可改善翼状胬肉患者视力,减轻角膜散光,促进角膜上皮细胞修复,降低复发率,且并发症少,安全性肯定。     

不同移植手术治疗角膜缘干细胞缺损的实验研究

目的探讨以人羊膜为载体培养的角膜缘干细胞，自体及异体移植治疗全角膜缘干细胞缺损。方法制作兔眼角膜缘干细胞完全缺损3个月的模型。实验动物随机分为自体移植组和异体移植组，前者取对侧眼角膜缘组织，后者取异体兔眼角膜缘组织，均以去除上皮细胞的羊膜基底膜为载体，培养12d后行角膜缘干细胞羊膜移植术。术后观察3个月，以角膜上皮染色、角膜浑浊和新生血管3项指标进行临床疗效评定，通过病理检查评估术后角膜上皮修复情况，印迹细胞学检查移植前后角膜上皮的细胞表型。结果体外培养的兔角膜缘干细胞可在羊膜上粘附生长并增生，体外培养12d可形成复层。自体移植组和部分异体移植组术后角膜上皮逐渐愈合，透明度提高，基质细胞浸润减轻，新生血管减退或消失。印迹细胞学检查显示：移植前角膜上皮细胞PAS阳性，而移植后转为阴性；组织病理学显示：移植前角膜上皮大部分缺损，移植后呈现角膜上皮结构。部分异体移植组术后出现了免疫排斥反应。结论兔自体角膜缘干细胞羊膜移植术可重建眼表；免疫排斥反应仍是异体角膜缘干细胞羊膜移植术失败的主要原因。     

自体角膜缘干细胞移植治疗角膜缘功能衰竭症

目的　探讨自体角膜缘干细胞移植在角膜缘功能衰竭症治疗中的作用。方法　将 83例 90眼初发性翼状胬肉、外伤性角膜缘板层缺损及角膜缘碱烧伤患者随机分为A、B组。A组为自体角膜缘干细胞移植组 (干细胞治疗组 ) 4 2例 4 5眼 ,其中 30眼翼状胬肉行翼状胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植术 ,外伤性角膜板层损伤 10眼、角膜缘碱烧伤 5眼行自体角膜缘干细胞移植术 ;B组为传统单纯翼状胬肉切除 ,外伤性角膜缘板层损伤、碱烧伤行结膜瓣移植术 (对照组 ) ,4 1例 4 5眼 ,其中翼状胬肉 30眼行单纯翼状胬肉切除 ,外伤性角膜缘板层缺损 11眼、碱烧伤 4眼行结膜瓣移植术 ,术后观察角膜上皮修复时间、角膜缘新生血管、角膜透明度、泪膜破裂恢复时间以及胬肉复发率 ,术后随诊 6～ 2 4月。结果　A组术后角膜上皮修复时间 2～ 4d、BUT(6 .7± 0 .8)d ,无角膜缘新生血管生长 ,术后翼状胬肉复发率为 0 ,角膜透明 ;B组术后角膜上皮修复时间 5～ 7d ,BUT(7.9± 0 .5 )d ,角膜缘有 3～ 8支新血管生长 ,角膜有不同程度的云翳 ,翼状胬肉复发率 13.33% ,A、B 2组各项指标比较有统计学差异。结论　自体角膜缘干细胞移植治疗角膜缘功能衰竭症是一种简单、安全、有效的手术方法。     

组织工程角膜上皮移植重建眼表面的临床研究

目的 观察组织工程角膜上皮移植重建眼表面治疗完全性角膜上皮干细胞缺乏的短期临床效果.方法 系列病例研究.6例(6眼)单眼全角膜缘干细胞缺乏患者,包括碱烧伤3例、爆炸伤2例、热烧伤1例.采用去上皮羊膜组织作为载体,体外扩增患者自体健眼角膜上皮干细胞,构建组织工程角膜上皮.然后进行组织工程角膜上皮移植重建眼表面.术前及术后检查指标包括裸眼视力、裂隙灯显微镜、超声生物显微镜、泪液分泌试验.结果 患者自体来源的角膜上皮干细胞在去上皮羊膜上培养3周后均可形成直径15 mm的复层上皮片.组织工程角膜上皮均成功移植于所有受体眼表面.移植术后3个月,所有患者角膜上皮完整光滑,角膜瘢痕及纤维血管翳明显减轻,6例患者视力均有不同程度的提高.结论 患者自体来源的角膜上皮干细胞构建的组织工程角膜上皮移植可以成功重建全角膜缘干细胞缺乏患者的眼表面,为这类患者的复明带来希望.     

复发性翼状胬肉切除联合角膜缘干细胞移植术或羊膜移植术的疗效比较

目的:观察显微镜下复发性翼状胬肉患者自体角膜缘干细胞移植术与羊膜移植术后疗效比较。方法:将复发性翼状胬肉患者90例96眼随机分为A,B两组,A组40例42眼行胬肉切除联合自体角膜缘干细胞移植;B组50例54眼行胬肉切除联合羊膜移植,观察术后患者自觉症状,角膜愈合情况,角膜缘处结膜组织愈合情况,新生血管及2a内胬肉组织增生情况。结果:角膜缘干细胞移植组治愈39眼(93%),复发3眼(7%);羊膜移植组治愈48眼(89%),复发6眼(11%),两组比较差异无统计学意义(χ2=0.0456,P>0.05)。角膜创面平均愈合时间角膜缘干细胞移植组为(4.12±1.08)d,羊膜移植组(7.38±1.12)d,两组比较有显著性差异(t=4.307,P<0.05)。结论:角膜缘干细胞移植与羊膜移植均效果良好,复发率低,但角膜缘干细胞移植术具有角膜创面上皮愈合快,患者不适感随之消失较快的优点,值得临床推广。     

角膜缘移植联合羊膜移植治疗角膜缘缺陷症

目的 探讨角膜缘移植联合羊膜移植术在治疗角膜缘缺陷症中的作用。方法 以自体或异体角膜缘移植手术治疗复发性翼状胬肉、眼化学烧伤、热烧伤等角膜缘缺陷症患者52例59眼，术中随访5－24月。结果 随访期内植片存活，角膜上皮重建，角膜透明性增另，新生血管减退。仅2眼翼状胬肉复发。结论 角膜缘移植联合羊膜移植是一种较好的治疗角膜缘缺陷症的手术方法。     

羊膜移植联合带角膜缘的全板层角膜移植治疗眼部重度碱烧伤

目的 探讨羊膜移植联合带角膜缘的全板层角膜移植对眼部重度碱烧伤的治疗效果.方法 选择住院行羊膜移植联合带角膜缘的全板层角膜移植的眼部重度碱烧伤12例(13眼).术后观察羊膜、角膜植片及视力情况,并随访10-14个月.结果 2眼术后2周时羊膜融解、脱落,出现部分睑球粘连,其余11眼羊膜植片愈合良好;1眼移植角膜发生轻度排斥反应,有少量新生血管长入,其余12眼角膜植片恢复透明;13眼视力均有提高.结论 对于眼部重度碱烧伤,羊膜移植联合带角膜缘的全板层角膜移植是一种安全有效的手术治疗方法.     

培养角膜缘干细胞羊膜移植治疗碱烧伤动物的实验研究

目的 观察培养生长于羊膜的角膜缘干细胞移植的治疗角膜缘碱烧伤伤的效果。方法 将兔角膜缘干细胞在的代培养后接种于羊膜,对新西兰大白兔角膜缘碱烧伤动物模型行角膜缘干细胞羊膜移植术,并对治疗后的角膜进行临床及病理学检查。结果 体外培养的兔角膜缘士细胞可在羊膜上继续增殖、分化为密集的角膜上皮细胞层;角膜缘干细胞移植术后兔角膜缘轻度充血、角膜上皮完整基质细胞浸润减轻、新生血管减少。组织病理学染色证实,角膜缘     

Quantification of corneal neovascularization after ex vivo limbal epithelial stem cell therapy

AIM: To assess cultured limbal epithelial stem cell transplantation in patients with limbal stem cell deficiency by analyzing and quantifying corneal neovascularization.METHODS: This retrospective, interventional case series included eight eyes with total limbal stem cell deficiency. Ex vivo limbal epithelial stem cells were cultured on human amniotic membrane using an animal-free culture method. The clinical parameters of limbal stem cell deficiency, impression cytology, and quantification of corneal neovascularization were evaluated before and after cultured limbal stem cell transplantation. The area of corneal neovascularization, vessel caliber (VC), and invasive area (IA) were analyzed before and after stem cell transplantation by image analysis software. Best-corrected visual acuity (BCVA), epithelial transparency, and impression cytology were also measured.RESULTS: One year after surgery, successful cases showed a reduction (improvement) of all three parameters of corneal neovascularization [neovascular area (NA), VC, IA], while failed cases did not. NA decreased a mean of 32.31% (P=0.035), invasion area 29.37% (P=0.018) and VC 14.29% (P=0.072). BCVA improved in all eyes (mean follow-up, 76±21mo). Epithelial transparency improved significantly from 2.00±0.93 to 0.88±1.25 (P=0.014). Impression cytology showed that three cases failed after limbal epithelial stem cell therapy before 1y of follow-up.CONCLUSION: This method of analyzing and monitoring surface vessels is useful for evaluating the epithelial status during follow-up, as successful cases showed a bigger reduction in corneal neovascularization parameters than failed cases. Using this method, successful cases could be differentiated from failed cases.     

综合疗法治疗早期中重度眼表烧伤的疗效观察

目的探讨综合疗法治疗急性中重度眼表化学伤和热灼伤临床治疗效果。方法对我科住院急性中重度眼烧伤40例(41只眼)进行综合治疗,包括手术前后正确及时的处理;Ⅱ～Ⅲ度眼烧伤行羊膜移植,Ⅳ度眼烧伤联合角膜缘移植,术后均联合软性角膜接触镜治疗。结果术后随访1～3个月,26只眼Ⅱ～Ⅲ度眼烧伤角膜透明。15只眼Ⅳ度眼烧伤中,角膜斑翳2只眼,角膜云翳3只眼;新生血管者5只眼。所有患眼均无睑球粘连,视力均有不同程度恢复。结论合理正确综合疗法治疗急性中重度眼烧伤疗效可靠,值得推广。     

兔角膜碱烧伤新鲜羊膜移植后的角膜病理学及超微结构观察

目的观察兔角膜碱烧伤立即行新鲜羊膜移植后的角膜病理学和超微结构变化。方法40只新西兰白兔中随机取4只作为正常对照组,剩余36只制作双眼碱烧伤模型,右眼立即行新鲜羊膜移植术,左眼不做羊膜移植。分别在术后7、14、28d取材分别行HE染色和透射电镜观察。结果光镜、电镜结果显示:羊膜移植组与未移植组相比,上皮愈合好,基质纤维排列整齐,炎细胞浸润轻,新生血管少。结论兔角膜碱烧伤急性期行新鲜羊膜移植可以减少炎症反应、促进角膜上皮愈合、减轻角膜瘢痕形成、减少角膜新生血管形成。     

羊膜移植对于减少碱烧伤后角膜新生血管的临床研究

目的:观察羊膜移植手术对于减少碱烧伤后角膜新生血管的疗效.方法:回顾性病例对照研究.2006-2010年期间该院收治的Ⅲ度角膜碱烧伤的患者19例23眼,其中行羊膜移植术(治疗组)11例13眼,未行羊膜移植术(对照组)8例10眼.该两组的年龄和手术外的处理基本匹配.伤后3 d治疗组行羊膜移植术.分别在伤后14、60 d测量各组角膜新生血管面积.应用SPSS12.0统计学软件将此两组的面积进行配对t检验.以P<0.05作为差异有统计学意义.结果:在烧伤后14 d治疗组新生血管面积(62.133±8.571)mm2,明显低于对照组(89.561.4±9.741)mm2,治疗组较对照组减低30.6%,两组差异具有统计学意义(P<0.05).烧伤后60 d治疗组新生血管面积(112.019±17.362)mm2,明显低于对照组为(129.481±13.534)mm2,治疗组较对照组减低13.5%,两组差异具有统计学意义(P<0.05).结论:羊膜移植术能明显抑制碱烧伤所致角膜新生血管的生长.     

培养兔自体角膜缘干细胞移植的实验研究

目的 观察以羊膜为载体的兔角膜缘于细胞膜片移植治疗兔角膜缘于细胞缺损的效果。方法 制造兔角膜缘干细胞缺损的动物模型,以右眼为实验眼,从兔左眼取角膜缘组织,将兔角膜缘干细胞消化下来,接种于铺有羊膜的无菌六孔培养板中,待细胞形成多层角膜上皮细胞后,对兔角膜缘干细胞缺损动物模型行角膜缘干细胞羊膜移植术,并对治疗后的角膜进行裂隙灯及病理学检查。结果 临床和组织病理学染色证实：体外培养的兔角膜缘干细胞可在羊膜上继续增生、分化为多层角膜上皮细胞;角膜缘干细胞移植术后兔角膜缘轻度充血、角膜上皮完整、基质细胞浸润减轻、新生血管减少或消失。结论 应用角膜缘干细胞羊膜移植术可恢复其角膜上皮结构的完整性,减少角膜新生血管的形成,维持角膜缘的细胞屏障功能。