胎鼠平滑肌细胞移植对心肌缺血大鼠受损心功能的保护作用

目的研究胎鼠平滑肌细胞移植对心肌缺血大鼠受损心功能的作用。方法选取孕18d的SD胎鼠9只,取胎鼠胃组织,用酶消化法分离、提取平滑肌细胞,进行体外培养、扩增,移植前BrdU标记。结扎大鼠左冠状动脉前降支,制成心肌缺血模型。移植组(n=10)将培养的平滑肌细胞注射移植到冠脉结扎后2周形成的心肌缺血组织中;对照组(n=10)则用同样的方法注射等量DMEM培养液;两组动物术后均给予环孢霉素A(5mg/kg·d)抑制免疫排斥反应。4周后,超声检查评价移植组和对照组的心功能、测量左心室前壁厚度;心脏标本用免疫组化染色的方法检测移植细胞的存活情况,并研究细胞移植后心肌缺血组织的促血管新生作用。结果移植后4周,植入的平滑肌细胞在心肌缺血组织中存活,并形成肌样组织;和对照组比较,移植组左心室前壁明显增厚[分别为(2.54±0.23),(1.34±0.18)mm,P<0.01],心肌瘢痕组织中血管新生明显[(血管密度分别为(3.92±0.45),(0.52±0.26)/mm2,P<0.01],左心室舒张末容积缩小[分别为(1.22±0.11),(1.82±0.17)mL,P<0.01],射血分数提高[(分别为(55.8±7.1)%,(31.5±3.2)%,P<0.01]。结论平滑肌细胞移植后能在心肌缺血组织中存活,并通过促进局部血管新生,改善室壁顺应性,限制心腔扩大,抑制心室重构,增加心室输出,保护受损的心功能。     

烟酰胺对大鼠急性心肌缺血的保护作用

近年来ＫＡＴＰ通道开放剂在国外已得到迅速发展,在动物实验中发现ＫＡＴＰ通道开放剂可以改善心肌缺血后的功能,并可有效地缩小心肌梗死面积,研究的药物主要是Ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ和Ｐｉｎａｃｉｄｉｌ。烟酰胺类为最初确诊的ＫＡＴＰ通道开放剂,目前国内文献研究甚少,...     

大鼠胎鼠中脑神经干细胞的分离培养

目的 探讨神经干细胞分离、培养及鉴定的方法，并了解其生物学特性。方法 分离大鼠胎鼠腹侧中脑组织，加入丝裂原bFGF进行克隆密度细胞培养。用免疫细胞化学方法进行神经千细胞及其分化细胞的鉴定。结果 培养的神经干细胞具备神经干细胞的基本特性，以对称和不对称分裂方式增殖形成神经球，并分化为神经元、神经胶质细胞、少突胶质细胞。结论 成功建立了神经干细胞的分离培养方法。     

参附注射液对大鼠胰腺移植的保护作用

目的：探讨参附注射液对大鼠胰腺移植的保护作用。方法：糖尿病大鼠随机分为缺血再灌注组（I-R组）和参附注射液组（SF组）各30只，2组移植前2日,再灌注3和7日各随机处死6只大鼠，取血测血糖及淀粉酶,同时取胰腺组织行HE染色，用于观测各种代谢指标；其余6只大鼠观察1个月存活率。结果：再灌注后SF组1个月存活率高于I-R组（5/6∶3/6），各时间点血糖、血淀粉酶、进食量、排尿量和饮水量均低于I-R组（P〈0.01或0.05）；I-R组移植胰的损伤程度大于SF组。结论：参附注射液预处理可增加大鼠胰腺移植的存活率，降低血淀粉酶活性，减轻胰腺的再灌注损伤程度，对大鼠胰腺移植具有保护作用。     

胎脑提取液对坐骨神经损伤大鼠脊髓神经元的保护作用

目的：研究大鼠坐骨神经损伤后，胎脑提取液对脊髓运动神经元酸性磷酸酶（acid phosphatase，ACP）活性的影响。方法：Wistar大鼠54只，随机分为实验组、对照组和正常组，前两组再随机分成术后4个时间组。无菌条件下制作坐骨神经钳夹损伤模型，酶组织化学方法结合显微图像分析，观察各组大鼠脊髓运动神经元ACP活性的变化。结果：ACP反应产物的光密度值正常组为0.28&;#177;0.03；对照组术后1d为0.35&;#177;0.05，术后1周为0.40&;#177;0.05，术后2周为0.47&;#177;0.06，术后3周为0.38&;#177;0.04；实验组术后1d为0.30&;#177;0.04，术后1周为0.38&;#177;0.04，术后2周为0.34&;#177;0.05，术后3周为0.30&;#177;0.06。结论：胎脑提取液对坐骨神经损伤后脊髓前角运动神经元具有保护作用。     

胎鼠胰腺干细胞与胰岛联合移植保护胰岛

背景：胰腺干细胞可在体外维持胰岛的结构,减少胰岛细胞坏死及凋亡,延长胰岛的体外存活时间,保护胰岛的活性。 目的：探索胎鼠胰腺干细胞与胰岛共移植体内保护移植胰岛,提高胰岛移植疗效的可行性。 方法：将成年大鼠35只随机等分为联合移植组、单独胰岛移植组、单纯胰腺干细胞移植组、模型组及对照组,前4组均腹腔注射链脲佐菌素-柠檬酸盐缓冲液建立糖尿病模型。联合移植组、单独胰岛移植组、单纯胰腺干细胞大鼠分别在左侧肾包膜下移植分离纯化孕16 d SD大鼠胎鼠胰腺干细胞和/或成年SD大鼠胰岛。 结果与结论：联合移植组大鼠移植后5 d内血糖可降至正常,血浆胰岛素达到正常水平,胰岛存活时间（18.2±2.4） d;单独移植组大鼠血糖可于移植后1周内降至正常,胰岛存活时间（14.4±2.1） d;两组胰岛存活时间比较差异有显著性意义（P 〈0.05）。而其他组糖尿病大鼠血糖均未能降至正常范围。说明胎鼠胰腺干细胞与胰岛共移植可延长胰岛体内存活时间,保护胰岛功能,提高移植疗效。     

自体平滑肌细胞移植心肌梗死大鼠心功能变化观察

背景：细胞移植是近年来出现的治疗心肌缺血性疾病的新方法，目前对于平滑肌细胞移植的研究报道尚不多见。目的：研究自体平滑肌细胞移植到心肌梗死区后的存活情况及其对心功能恢复的影响。设计：以实验动物为研究对象的观察对比研究、单位：一所军医大学的胸心外科研究所。材料：实验于2003—01／2003—06在第二军医大学全军胸心外科研究所完成。选择成年、雄性SD大鼠24只，体质量(300&;#177;20)g，清洁级。随机分为2组，即移植组和对照组，每组12只，所有大鼠饲养于清洁环境。方法：用酶消化法从SD大鼠的输精管中分离、提取自体平滑肌细胞，进行体外培养、扩增。移植组将BrdU标记后的自体平滑肌细胞直接注射移植到左冠脉前降支结扎后2周形成的心肌梗死区瘢痕组织中；对照组注射同等剂量的DMEM培养液。超声检查评估移植前和移植后4周的心功能状况。用免疫组化染色的方法，检测心肌瘢痕组织中是否有植入的平滑肌细胞存活以及促血管新生的情况。主要观察指标：①自体平滑肌细胞培养及移植后的形态学观察；②自体平滑肌细胞移植后对心肌梗死瘢痕区的促血管新生作用；③移植后两组心脏超声检查比较。结果：移植的自体平滑肌细胞能在心肌梗死区内存活并形成肌样组织。与对照组比较，移植组左心室舒张末容积(LVEDV)明显减小(P&;lt;0．01)，左心室射血分数(LVEF)显著提高(P&;lt;0．01)，心肌瘢痕组织血管新生明显(P&;lt;0．01)。结论：自体平滑肌细胞移植能防止心肌梗死后的心室腔扩大，促进梗死区血管新生，改善心脏功能。     

烟酰胺对实验性心肌缺血的保护作用

用异丙基肾上腺素制备心肌缺血模型 ,通过监测大鼠心肌酶学及组织学改变来观察烟酰胺对缺血心肌的保护作用。1　材料与方法1 .1　实验动物 :Wistar大鼠 36只 ,雌雄不限 ,体重 2 0 0～ 2 5 0 g。随机分为正常对照组和心肌缺血模型组和烟酰胺治疗组 ,每组 1 2只 ,实验前腹腔内注射 3%戊巴比妥钠 45 m g/ kg。正常对照组腹腔内注射生理盐水 1 .5 m l;模型组采用异丙基肾上腺素 85 0 μg/ kg,用生理盐水稀释到 1 .5 m l腹腔注射 ;治疗组用异丙基肾上腺素 (剂量同上 )腹腔注射 ,并肌肉注射烟酰胺 5 0 m g/ kg。将制备成的动物模型分别放于笼中 ,…     

血栓通对急性心肌缺血大鼠的保护作用

目的：探讨复方血栓通胶囊对大鼠急性心肌缺血的保护作用及其机制。方法：ＳＤ大鼠４０只,随机分为４组,每组１０只,即对照组、复方血栓能中剂量组、血栓通高剂量组、地奥心血康组。利用垂体后叶素（ｐｉｔ）制作心肌缺血模型,舌下静脉注射ｐｉｔ后,分别于即刻,１．５ｍｉｎ、２ｍｉｎ、３ｍｉｎ、４ｍｉｎ、８ｍｉｎ、１０ｍｉｎ,用二道仪记录心电图,随后分别取血和心尖部心肌做超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和丙二醛（ＭＤＡ）     

自体平滑肌细胞移植心肌梗死大鼠心功能变化观察

背景细胞移植是近年来出现的治疗心肌缺血性疾病的新方法,目前对于平滑肌细胞移植的研究报道尚不多见.目的研究自体平滑肌细胞移植到心肌梗死区后的存活情况及其对心功能恢复的影响.设计以实验动物为研究对象的观察对比研究.单位一所军医大学的胸心外科研究所.材料实验于2003-01/2003-06在第二军医大学全军胸心外科研究所完成.选择成年、雄性SD大鼠24只,体质量(300±20)g,清洁级.随机分为2组,即移植组和对照组,每组12只,所有大鼠饲养于清洁环境.方法用酶消化法从SD大鼠的输精管中分离、提取自体平滑肌细胞,进行体外培养、扩增.移植组将BrdU标记后的自体平滑肌细胞直接注射移植到左冠脉前降支结扎后2周形成的心肌梗死区瘢痕组织中;对照组注射同等剂量的DMEM培养液.超声检查评估移植前和移植后4周的心功能状况.用免疫组化染色的方法,检测心肌瘢痕组织中是否有植入的平滑肌细胞存活以及促血管新生的情况.主要观察指标①自体平滑肌细胞培养及移植后的形态学观察;②自体平滑肌细胞移植后对心肌梗死瘢痕区的促血管新生作用;③移植后两组心脏超声检查比较.结果移植的自体平滑肌细胞能在心肌梗死区内存活并形成肌样组织.与对照组比较,移植组左心室舒张末容积(LVEDV)明显减小(P<0.01),左心室射血分数(LVEF)显著提高(P<0.01),心肌瘢痕组织血管新生明显(P<0.01).结论自体平滑肌细胞移植能防止心肌梗死后的心室腔扩大,促进梗死区血管新生,改善心脏功能.     

胎鼠血及新生鼠外周血分次移植对造血干细胞植入影响的实验研究

我们拟在建立鼠 鼠同种异体脐血移植动物模型的基础上 ,采用胎鼠血及新生鼠外周血 (ＦＮＰＢ)单次或分次移植 ,观察移植后免疫和造血重建 ,试图探讨促进脐血造血干细胞(ＨＳＣ)植入 ,提高脐血移植 (ＵＣＢＴ)效率的新策略 ,为克服ＵＣＢＴ存在的问题和进一步开发利用提供实验和应用依据。材料和方法1　动物模型　以Ｃ5 7ＢＬ/6 (Ｈ 2 ｂ)鼠 (雌∶雄 =2∶1,8～ 12周龄 ,体重 2 2～ 2 6ｇ ,中国科学院上海实验动物中心提供 )为供鼠 ,ＢＡＬＢ/ｃ(Ｈ 2 ｄ)鼠 (雌性 ,清洁级 ,8～ 12周龄 ,18～ 2 2ｇ ,中山医科大学实验动物中心提供 )为受鼠 ,…     

胎脑提取液对大鼠的抗疲劳作用

目的：探讨胎脑提取液的抗疲劳作用。方法：选用Wiustar大鼠240只，随机分为常温组、低温组和高温组，每组再分成4组；观察记录大鼠注射不同剂量胎脑提取液后，在不同温度水中自由游泳最终沉入水中的时间。结果：胎脑提取液能显延长大鼠在不同温度水中的游泳时间，并具有良好的显效关系。结论：胎脑提取液具有一定的抗疲劳作用     

牛磺酸对大鼠缺血心肌缺血再损伤的保护作用

目的：探讨大鼠心肌缺血损伤与凋亡蛋白Bcl—2和Bax的关系及牛磺酸的影响。方法：选择健康SD大鼠30只，随机分为假结扎组、结扎组和牛磺酸保护组，每组10只。结扎大鼠冠状动脉左前降支建立心肌缺血模型。检测3组心肌线粒体中超氧化物歧化酶(supevoxide dismutase，SOD)、Ca^2+-ATP酶活性和丙二醛含量，用免疫组化法检测心肌中的Bct-2和Bax蛋白。结果：结扎冠状动脉左前降支可致心肌线粒体丙二醛含量升高[假结扎组：(4．89&;#177;0．54)μmol／g；结扎组：(9．85&;#177;0．68)μmol／g]，SOD和Ca^2+-ATP酶活性下降[假结扎组：(8．63&;#177;0．35)μmol／(g&;#183;s)，(13．97&;#177;1．97)mmol／(g&;#183;s)；结扎组：(6．73&;#177;0．39)μmol／(g&;#183;s)，(8．54&;#177;2．28)mmol／(g&;#183;s)]。缺血心肌Bax蛋白表达呈显著升高(t=3．931，P&;lt;0．01)，牛磺酸能明显减少缺血心肌线粒体丙二醛的生成[牛磺酸保护组：(5．46&;#177;0．72)μmol／g]，降低心肌BAT蛋白的表达，增加Bcl—2蛋白的表达(t=3．716，P&;lt;0．01)。结论：结扎大鼠冠状动脉左前降支所致心肌缺血损伤与Bcl—2和Bax蛋白的表达有关，牛磺酸对缺血心肌Bcl—2和Bax蛋白的表达有较好的调控作用。     

磷酸肌酸对心肌缺血损伤的保护作用

目的：探讨外源性磷酸肌酸在体外循环手术中对心肌缺血的保护作用。方法：选择76例体外循环手术病人阴机分为对照组38例和实验组38例。常规在体外循环下进行各种手术，均采用4℃ThomasⅡ号液间断顺灌行心肌保护。实验组在灌注液中加入磷酸肌酸2g/L，分别在阻断主动脉前和开放主动脉后0min,1,6,24h测定心肌酶，比较两组自动复跳率、开放主动脉后心脏复跳时间、复跳后血流动力学、围术期升压药应用、心律失常发生率、死亡率、术后心功能和术后住院时间等指标。结果：实验组心肌酶含量低于对照组（P＜0．05），其余各指标优于对照组。结论：外源性磷酸肌酸对心肌缺血有良好保护作用，值得临床应用。     

胎鼠胰腺干细胞体内移植向胰岛样细胞团的分化

背景:由于干细胞的转分化受细胞外基质和基因程序的调控,因此在体外很难模拟体内干细胞巢的微环境而使干细胞定向分化,或许干细胞原位移植是可行方法之一.目的:探讨胎鼠胰腺干细胞在糖尿病鼠体内不同部位移植后分化为胰岛细胞团的可能性.设计、时间及地点:细胞学体内观察,于2006-03/2007-04在深圳市人民医院中心实验室完成.材料:16 d龄SD胎鼠12只,10周龄200-250 g的SD雌鼠50只,均由广东省实验动物中心提供.方法:分离纯化胎鼠胰腺干细胞.经荧光原位杂交检测为雄性的第5代胎鼠胰腺干细胞用于体内移植.50只SD雌鼠取10只作为正常对照组,余40只通过腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病模型,造模后分为4组:胰腺实质内移植组在胰腺实质内多点注射1×106个雄性胎鼠胰腺干细胞,肝内移植组行门静脉穿刺注射等量细胞悬液,肾包膜下移植组于左肾包膜下注射等量细胞悬液,模型对照组胰腺实质内多点注射相同体积的PBS液,10只,组,培养8周.主要观察指标:定期监测大鼠血糖及血浆胰岛素水平,观察胰腺、肝脏及肾脏组织病理学变化.结果:雄性胎鼠胰腺干细胞培养传3代后,巢蛋白阳性细胞率为74.1%.胰腺实质内移植组在移植后第3周血糖开始下降,血浆胰岛素水平逐渐升高;第5周血糖降至正常水平并维持,血浆胰岛素达到正常水平,病理学观察在胰腺内可见外源性胰岛样细胞团,胰岛素免疫组化染色呈阳性,巢蛋白免疫组化染色呈强阳性,荧光原位杂交检测Y染色体呈阳性.肝内移植组、肾包膜下移植组大鼠仍维持高血糖状态,相应组织内均未见外源性细胞团形成.结论:分离纯化的胎鼠胰腺干细胞存胰腺内原位移植后,于体内可转分化为胰岛样细胞团,并使血糖降至正常水平.     

不同时间经静脉移植人脐血单个核细胞对心肌梗死大鼠心功能及结构重构的影响

目的观察不同时间经静脉移植人脐血单个核细胞(HUCBC)对心肌梗死(MI)大鼠心功能及结构重构的影响。方法入选雄性Wistar大鼠共80只,结扎左前降支,制备心肌梗死模型,于梗塞后1d、5d、10d以及30d经尾静脉注入0.5ml人脐血[含单个核细胞(1～3)×107]或0.5ml磷酸盐缓冲溶液(PBS)。不使用免疫抑制剂。术后4周行超声心动图和血流动力学检查,随后处死大鼠,取出梗死心肌,以甲醛固定,进行苏木素伊红(HE)染色以及转移酶介导的三磷酸脱氧鸟苷-生物素刻痕末端标记(TUNEL)计算凋亡细胞。结果 PBS组大鼠左室明显扩大,梗死部位变薄。移植后瘢痕面积减少,室壁较对照组增厚。5d和10d移植瘢痕面积明显减小。与对照组相比,5d和10d移植大鼠左室射血分数(EF),左室压力最大变化率(±dp/dtmax)明显升高,左室收缩末内径(LVESD)明显减小,左室后壁(LVPW)增厚率更高。而梗死后10d移植EF,±dp/dtmax,以及LVPW增厚率的改善最明显。移植大鼠心肌和对照组相比凋亡细胞没有明显差异。结论大鼠心肌梗死后5d和10d经静脉移植HUCBC可以明显抑制心室重构,改善心功能。在梗死后第10天移植对梗死心肌的结构重塑改善最明显,但对细胞凋亡没有明显作用。     

久强脑立清对急性高血压大鼠重要器官的保护作用

目的探讨久强脑立清（JNQ）对急性高血压大鼠重要器官脑、肾、心的影响。方法采用左旋硝基精氨酸（L-NNA）制做急性高血压大鼠模型，然后给高、中、低剂量JNQ和阳性对照药硝苯地平，观察心功能指标及重要器官HE染色的变化。结果急性高血压大鼠血压两周后比对照升高36％，脑、肾、心均可见病理性改变，但各组大鼠的心率、心电图和血压未见明显差异。经JNQ治疗的大鼠心肌收缩力和心肌耗氧量明显下降，左室内压上升速度明显减慢；脑、心、肾病理改变有不同程度改善。结论尽管JNQ对急性高血压大鼠的心率、血压无明显影响，但可降低心肌耗氧，改善心功能指标，对重要器官脑、肾、心的病变有较明显的保护作用。     

自体骨髓单个核细胞心肌移植对猪慢性缺血心肌心功能的影响

目的：探讨自体骨髓单个核细胞心肌移植对猪慢性缺血心肌心功能的改善作用。方法：实验于2005-01／2005—10在香港大学动物实验中心进行。①取健康巴马小型猪17只，开胸后在左回旋支起始部放置Ameroid环。②将存活的16只巴马小型猪随机分成2组，自体骨髓单个核细胞移植组9只，对照组7只。术后4周在C型臂X射线机的引导下心肌定位注射导管进入左心室，移植组猪于心肌缺血部位1注射自体骨髓单个核细胞，将细胞总数为1．5&;#215;10^8的细胞悬液1．5mL进行15个点的注射，每个点注射0．10mL。对照组按照同样的方法注射相同数量的生理盐水。③移植后4周进行心脏超声检查，检测心脏功能。结果：17只猪中1只因肺部感染于术后21d死亡，其余16只均进入结果分析。①猪第1次手术后1月左右冠状动脉造影显示左冠状动脉回旋支均闭塞，左前降支通畅。②心脏M型超声检查显示移植组左室侧后壁运动较对照组明显增强，二维超声心动图检查显示移植组较对照组室壁明显增厚、运动度增强。移植组较对照组的心功能有明显改善。结论：自体骨髓单个核细胞心肌移植可改善慢性缺血心肌的心功能，可用于缺血性心脏病的治疗。     

调脾护心方对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的:观察调脾护心方对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用.方法:本实验将SD大鼠(Sprague Dawley,SD)分为4组,每组10只,分别为模型组、假手术组、调脾护心方高、低剂量组,采用结扎大鼠心脏冠状动脉左前降支(LAD)的方法建立心肌缺血再灌注损伤大鼠模型.各组给药如下:调脾护心方低剂量组(5.85g生药/kg);调脾护心方高剂量组(23.4g生药/kg);模型组、假手术组灌胃等量生理盐水(10mL/kg),连续灌胃14天后,检测血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白(cTnⅠ)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)和乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化物(SOD)、丙二醛(MDA);经HE染色后观察心肌组织病理变化.结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清中CK-MB、cTnⅠ、AST和LDH、MDA水平显著增高,SOD水平显著降低(P＜0.05),心肌组织严重梗死和坏死.与模型组比较,调脾护心方各剂量组能明显降低大鼠血清中CK-MB、cTnⅠ、AST和LDH、MDA水平,提高SOD含量(P＜0.05),同时可使心梗面积缩小,减少心肌组织内炎性细胞的浸润,改善心肌缺血再灌注损伤的病理变化.结论调脾护心方对心肌缺血再灌注损伤大鼠有明显保护作用,其具体机制尚未明确,需进一步研究探索.     

大鼠胎脑神经细胞与胶原复合体移植对脑损伤的修复

目的：评价胶原蛋白(collagen)的细胞相容性；研究胶原蛋白(C)与大鼠胎脑神经细胞(FBN)复合体(C-FBN)脑内移植对脑损伤的修复作用。方法：将大鼠FBN与胶原蛋白联合体外培养，进行光镜、扫描电镜观察。并将体外联合培养3～5d的C-FBN(移植前48h培养液中加入BrdU)移植到大脑皮质损伤模型的大鼠脑损伤部位，术后3，6，10，15及30d光镜、BrdU免疫细胞化学染色(ICC)、透射电镜观察脑组织对移植物的反应、移植细胞生长状态及载体在体内的降解情况等。结果：胶原蛋白对FBN生长无不良影响；脑组织对移植物无明显的免疫排斥反应；胶原蛋白与周围脑组织整合好，有血管长入移植物中；载体内有大量存活神经细胞，而且术后各时段都检出BrdU阳性细胞；移植区有突触形成；胶原蛋白海绵吸收、降解快，可诱导组织再生。结论：胶原具有良好的细胞相容性和组织相容性，是神经组织工程的一种较为理想的生物载体材料；生物材料与胎脑神经细胞联合培养移植是治疗脑损伤较有前途的新方法。