右美托咪啶对急性肺损伤大鼠肺功能的保护作用及机制

[目的]研究右美托咪啶(DEX)对急性肺损伤(ALI)的保护作用及机制.[方法]12周龄健康SPF级SD大鼠45只,随机分为对照组(NS组),ALI组和DEX组,每组15只.ALI组腹腔注射脂多糖(LPS)500 μg/kg;DEX组先予DEX 100 μg/kg 腹腔注射,30 min后腹腔注射LPS 500 μg/kg;NS组腹腔注射相同容积的生理盐水.分别在模型构建后2 h、6 h、12 h、24 h采集颈动脉血液进行血气分析和计算氧合指数(PaO2/FiO2),并采集支气管肺泡灌洗液(BALF)检测中性粒细胞凋亡情况,分别检测2 h和12 h的BALF中IL-1β、TNF-α水平.[结果]ALI组PaO2/FiO2逐渐下降,在24 h内,ALI组共有7只大鼠死亡,病死率为46.7%.在6~24 h的3个时间点中,DEX组PaO2/FiO2逐渐上升,与ALI组相比有显著差异(P<0.05或P<0.01);DEX组病死率为20%.在6~ 24 h的时间段内,ALI组的多性核中性粒细胞(PMN)凋亡比率开始明显下降,与NS组相比具有明显差异(P<0.05).DEX组PMN凋亡比率呈缓慢下降趋势,在12 h时和24 h时,DEX组PMN凋亡率显著高于ALI组(P<0.05).在12 h时,与NS组相比,ALI组白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平显著升高(P<0.05),DEX组差异不显著(P>0.05);而DEX组与ALI组相比,IL-1β、TNF-α水平均明显下降(P<0.05).[结论]DEX可改善ALI大鼠的肺功能,促进肺组织局部PMN凋亡过程和减轻炎症反应.     

大鼠全肝缺血再灌注后肺细胞凋亡及异丙酚对细胞凋亡的影响

目的 探讨大鼠全肝缺血再灌注后肺组织细胞凋亡情况及异丙酚对细胞凋亡的影响.方法 24只SD大鼠随机分为3组(n=8),异丙酚组、缺血再灌注组与假手术组.阻断肝门30 min后开放血流,建立大鼠全肝缺血再灌注模型.异丙酚组与缺血再灌注组分别于肝门阻断前10min腹腔注射异丙酚50 mg/kg或相应剂量生理盐水,于再灌注1 h处死动物.假手术组不阻断肝门,于上述各相应时间点注射生理盐水与处死动物.留取肺脏组织,原位末端转移酶(TUNEL)法检测细胞凋亡,同时检测肺组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、湿/干重(W/D)比值及肺组织病理.结果 (1)与假手术组相比,缺血再灌注组W/D比值、AI与MDA含量均显著增高(P均＜0.01);SOD活性显著降低(P＜0.01);病理学方面,缺血再灌注组肺泡腔完整性破坏,间隔增厚,并可见中性粒细胞浸润.(2)与缺血再灌注组相比,异丙酚组W/D比值、细胞凋亡指数(AI)与MDA含量显著降低(P均＜0.01);而SOD活性显著增加(P＜0.01);病理学改变减轻.结论 细胞凋亡可能在全肝缺血再灌注肺损伤发生过程中具有重要意义;异丙酚对全肝缺血再灌注后肺细胞凋亡具有抑制作用,其作用机制可能与清除自由基、抑制脂质过氧化有关.     

大黄对家兔内毒素性急性肺损伤的保护作用研究

目的:观察大黄对家兔内毒素性急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法:12只雄性新西兰兔待氧合指数(PaO2/FiO2)≤300mmHg(1mmHg=0.133kPa)时,将动物随机分为两组,每组6只。生理盐水对照组注入等量生理盐水;大黄组胃内注入大黄20g/kg。观察基础值,ALI时以及ALI后1、2、3、4、5和6h各时间点两组胃肠黏膜内pH值(pHi)、PaO2/FiO2、肺动态顺应性(Cdyn),测定ALI的生物学指标超氧化物歧化酶(SOD)活性,以及支气管肺泡灌洗液(BALF)中蛋白的含量。实验结束后,开胸取肺行组织学检查。结果:生理盐水对照组pHi在ALI后4、5和6h均较基础值时降低(P均<0.05),在ALI后5h和6h较ALI时降低(P均<0.05);大黄组pHi在ALI后4h和5h较生理盐水对照组升高(P均<0.05),而在6h较生理盐水对照组同时间点显著升高(P<0.01)。两组PaO2/FiO2在ALI后均有不同程度下降,且两组PaO2/FiO2在ALI后5h和6h差异有显著性(P<0.05和P<0.01)。两组Cdyn在ALI后均有不同程度的下降,但大黄组下降幅度较小,且两组Cdyn在ALI后5h和6h差异有显著性(P均<0.05)。两组SOD活性大黄组显著高于生理盐水对照组(P<0.01)。大黄组BALF中蛋白含量低于生理盐水对照组(P<0.05)。肺组织切片显示大黄组肺组织损伤明显较生理盐水对照组轻。结论:胃内注入大黄对兔内毒素性ALI有保护作用。     

参附注射液对大鼠内毒素性急性肺损伤的保护作用

目的:观察参附注射液(SF)对大鼠内毒素性急性肺损伤(ALI)时肺组织湿/干重比(W/D)等的影响,探讨其对ALI是否具有保护作用.方法:采用大鼠气管内滴注内毒素诱导ALI模型,30只大鼠随机分为NS组、LPS组、SF组,每组10只.观察每组肺组织W/D、肺泡灌洗液中性粒细胞比、蛋白含量、血清NO、肺组织丙二醛(MDA)含量及比较动脉血气分析的结果.同时观察肺组织病理形态学改变.结果:与NS组比较,LPS组、SF组的肺组织W/D、肺泡灌洗液中性粒细胞比、蛋白含量、肺组织MDA和血清NO显著增加,而PaO2和HCO3-明显降低(P<0.01);与LPS组比较,SF组以上指标显著降低而PaO2和HCO3-明显升高(P<0.05或P<0.01).病理学检查显示SF组肺组织损伤程度较LPS组明显减轻.结论:SF对内毒素性ALI具有防治作用.     

卡托普利对急性肺损伤大鼠肺气体交换的影响

目的:探讨卡托普利对急性肺损伤(ALI)大鼠肺气体交换的影响。方法:36只Wistar大鼠随机平均分成对照组、烟雾致伤组(ALI组)和卡托普利干预组(CAP组)。CAP组腹腔注射卡托普利(5mg/kg),对照组和ALI组腹腔注射等量生理盐水。15min后复制烟雾吸入性ALI模型。致伤后5min、5h分别采动脉血行血气分析,光镜观察肺病理变化。结果:ALI组血氧分压(PaO2)、动脉血氧饱和度(SaO2)及氧合指数(PaO2/FiO2)呈进行性下降,与对照组相比差异有显著性(P<0.01),肺病理改变明显。CAP组致伤后5hPaO2及PaO2/FiO2较5min显著改善(P<0.01),与ALI组相比差异有显著性(P<0.01),肺病理改变较轻。结论:卡托普利能明显改善ALI时肺的气体交换。     

亚低温对急性肺损伤大鼠肺泡表面活性蛋白A含量的影响

目的 探讨亚低温对内毒素脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺泡表面活性蛋白A(SP-A)含量的影响.方法 按随机数字表法将40只雄性Wistar大鼠分组.采用气管内滴入LPS制备ALI动物模型;对照组气管内只滴人生理盐水.模型组和对照组分别于术后1 h和8 h处死8只大鼠;亚低温组于滴入LPS 1 h后将体温降低并维持在32.5～33.0℃,8 h后处死8只大鼠.各组分别于术前及术后1 h、8 h测定动脉血气,并计算氧合指数(PaO2/FiO2);采用酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中SP-A含量;光镜下观察肺组织形态结构的变化.结果 气管内滴入LPS 1 h后,大鼠PaO2/FiO2均达到ALI的诊断标准.与对照1 h组比较,模型1 h组BALF中SP-A含量(μg/L)明显降低(53.27±1.95比74.81±6.55,P＜0.01);模型8 h组和亚低温8 h组SP-A含量(4.35±2.76和51.36±2.33)均较对照8 h组(70.81±5.01)明显降低,但亚低温8 h组SP-A含量较模型8 h组明显增高(均P＜0.01).光镜下观察,对照1 h和8 h组肺泡结构基本正常;模型8 h组肺组织炎症反应最重;模型1 h组和亚低温8 h组肺组织炎症反应较模型8 h组有所减轻.结论 亚低温能延缓内毒素诱导的ALI大鼠早期肺泡内SP-A含量下降的程度,在一定程度上可减轻肺损伤.

Abstract：

Objective To investigate the effect of hypothermia (HT) on the concentration of surfactant protein A (SP-A) during lipopolysaccharide (LPS) induced acute lung injury (ALI) in rats.Methods Forty male Wistar rats were randomly divided into three groups. The ALI model was reproduced by LPS intratracheal instillation; only saline was instilled intratracheally for control group. Rats in both model group and control group were sacrificed respectively at 1 hour and 8 hours (each n= 8). In HT group the body temperature was lowered to 32. 5 - 33.0 ℃ 1 hour after LPS instillation, and 8 rats were sacrificed st 8 hours. The arterial blood gas was determined in all the groups before and 1 hour and 8 hours after instillation of saline or LPS, and the oxygenation index (PaO2/FiO2) was calculated. The concentration of SP-A in bronchoalveolar lavage fluid (BALF) was determined by enzyme linked immunosorbent assay. The morphological changes in lung tissue of rats were observed under light microscope. Results At 1 hour after intratracheal instillation of LPS, the PaO2/FiO2 of each group reached the diagnostic criterion of ALI.Compared with control 1-hour group, the SP-A (μg/L) in BALF of model 1-hour group was decreased (53. 27±1.95 vs. 74. 81±6. 55, P＜0. 01); the SP-A in model 8-hour group and HT 8-hour group (4.35±2. 76 and 51.36±2. 33) was both obviously decreased compared with control 8-hour group (70. 81±-5. 01,both P＜0. 01). Compared with model 8-hour group, the SP-A of HT 8-hour group was obviously increased (P＜0. 01). Results of light microscopic examination, it was revealed that the alveolar structure of control 1-hour group and control 8-hour group was almost normal. Inflammatory response in lung tissues in model 8-hour group was found to be most serious; compared with model 8-hour group, inflammatory response in lung tissues in model 1-hour group and HT 8-hour group was reduced in certain degree. Conclusion A certain extent of HT may reduce lung injury of early endotoxin-induced ALI rats by delaying lowering of alveolar SP-A levels.     

N-乙酰半胱氨酸对大鼠肺缺血/再灌注损伤诱导细胞凋亡的保护机制

目的 研究N-乙酰半胱氨酸(NAC)对大鼠肺缺血/再灌注损伤(LIRI)中细胞凋亡及天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达的影响,并探讨其可能机制.方法 雄性SD大鼠42只,按随机数字表法均分为假手术组、LIRI组(阻断肺门45 min后再开放)、NAC组(于LIRI前腹腔注射NAC 150 mg/kg)3组,各组分别于3h、6h取肺组织,用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)和碘化丙啶(PI)双染法通过流式细胞仪检测凋亡细胞并计算凋亡率,测定丙二醛(MDA)浓度(硫代巴比妥法)和超氧化物歧化酶(SOD)活性(黄嘌呤氧化酶法),用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测caspase-3 mRNA表达,电镜下观察肺脏超微结构的改变.结果 与假手术组相比,LIRI组3h、6h肺组织细胞凋亡率明显增加[(25.60±3.22)％比(2.19±0.48)％,(26.01±4.50)％比(2.55±0.36)％],MDA浓度(nmol/mg)升高(3.26±0.32比0.73±0.23,3.53±0.46比1.08±0.42),SOD活性(U/mg)下降(32.80±3.82比60.51±6.81,33.44±3.24比64.19±6.60),肺组织caspase-3 mRNA表达显著增加(0.717±0,037比0.216±0.046,0.744±0.046比0.227±0.037),差异均有统计学意义(均P＜0.01);与LIRI组相比,NAC组3h、6h肺组织细胞凋亡率明显减少[(14.42±1.61)％比(25.60±3.22)％,( 10.02±1.64)％比(26.01±4.50)％],MDA浓度(nmol/mg)明显下降(1.75±0.33比3.26±0.32,2.15±0.25比3.53±0,46),SOD活性(U/mg)明显升高(42.76±2.06比32.80±3.82,44.94±3.11比33.44±3.24),肺组织caspase-3 mRNA表达显著减少(0.441±0.038比0.717±0.037,0.410±0.037比0.744±0.046),差异均有统计学意义(均P＜0.01).NAC组肺组织超微结构损害较LIRI组明显减轻.在LIRI 3 h、6h时,caspase-3与肺组织细胞凋亡率、MDA呈显著正相关,与SOD呈显著负相关(3h:r值分别为0.9036、0.9216、-0.9511,6h:r值分别为0.9655、0.9650、-0.9574,均P＜0.01).结论 在LIRI早期,NAC可下调caspase-3表达从而抑制细胞凋亡的发生,起到保护肺组织的作用.     

硫辛酸对大鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征模型的保护机制

目的:探讨代谢性抗氧化剂硫辛酸(LA)对内毒素(LPS)诱发大鼠急性肺损伤/急性呼吸窘迫综合征(ALI/ARDS)模型的保护机制,为ALI/ARDS药物治疗提供新的途径.方法:选择Wister雄性大鼠40只,随机分为正常对照组(NS组)、ALI/ARDS模型组(LPS组)、LA干预组(LA组)和谷胱甘肽(GSH)干预组(GSH组),每组各10只.除NS组外,余3组均给予LPS 6 mg/kg尾静脉注射诱发大鼠造成ALI/ABDS模型,LA组和GSH组分别于注射LPS后0.5 h注射LA和GSH各100 mg/kg.注射后1、2、4和6 h观察血清肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,6 h后处死大鼠,测定动脉血氧分压(PaO2)、血清脂过氧化物水平(LPO)、肺湿干比(wet/dry weight ratio,W/D)、肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中蛋白浓度和TNF-α水平.结果:LA组和GSH组PaO2水平较LPS组明显增高(P<0.01);血清LPO水平、W/D、BALF中蛋白浓度明显下降(P<0.01);LA组TNF-α水平呈进行性下降.在注射后各时点与LPS组比较均明显降低(P<0.01).结论:LA对LPS诱发的大鼠ALI/ARDS模型的损伤有一定保护作用.     

己酮可可碱对大鼠内毒素性急性肺损伤iNOS和NO的影响

目的 :探讨己酮可可碱 (PTX)对大鼠内毒素性急性肺损伤 (ALI)iNOS和NO的影响。方法 :采用大鼠内毒素ALI模型。 2 4只SD大鼠随机分为生理盐水对照组 (CON)、内毒素组 (LPS)和PTX组 ,每组 8只。观察PTX对氧合指数 (PaO2 /FiO2 )、支气管肺泡灌洗液 (BAL)中蛋白含量、肺组织iNOS、NO3- /NO2 - 、髓过氧化物酶 (MPO)活性的影响 ,计算肺湿 /干比值(W /D)并行肺组织病理学检查。结果 :PTX组自 2h起各时间点PaO2 /FiO2 均高于LPS组 (P <0 0 5 ) ,W /D、BAL中蛋白含量、肺组织iNOS、NO含量和MPO活性均较LPS组显著降低 (P <0 0 5 )。病理学检查显示PTX组肺组织损伤程度较LPS组减轻。结论 :PTX对内毒素性ALI的保护作用可能与其抑制肺组织iNOS活性和减少NO生成有关。     

褪黑素对全肝缺血再灌注大鼠肺细胞凋亡的影响及相关机制

目的 探讨褪黑素对全肝缺血再灌注大鼠肺组织细胞凋亡的影响作用及相关机制.方法 30只SD大鼠随机分3组:褪黑素治疗组,缺血再灌注组与假手术对照组.阻断肝门30 min后开放血流,建立大鼠全肝缺血再灌注模型.褪黑素组与缺血再灌注组分别于肝门阻断前15 min和再灌注前10 min静脉注射褪黑素溶液或相同剂量溶剂,于再灌注1 h处死动物.假手术组不阻断肝门,于上述各相应时间点注射溶剂与处死动物.留取肺脏组织,原位末端转移酶(TUNEL)法检测细胞凋亡、PCR法检测Bcl-XL与Bax mRNA表达,考马斯亮兰法检测肺泡灌洗液(BALF)总蛋白含量,同时进行肺组织病理学检查.结果 与缺血再灌注组相比,褪黑素组病理学改变减轻;BALF总蛋白含量、细胞凋亡指数(AI)与Bax mRNA表达显著降低(P＜0.01);而Bcl-XL mRNA表达及Bcl-XL/Bax比值显著增加(P＜0.01).结论 褪黑素可能通过影响Bcl-XL/Bax比值来抑制大鼠全肝缺血再灌注后肺细胞凋亡.     

不同时间给予猪肺表面活性物质对大鼠油酸型急性肺损伤疗效的影响

目的 探讨不同时间给予猪肺表面活性物质(PPS)混悬液对油酸致大鼠急性肺损伤(ALI)的治疗作用.方法 将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、0.5 h PPS治疗组和2 h PPS治疗组.假手术组仅行气管和颈动脉插管手术操作,其余各组大鼠静脉注入油酸诱发ALI;0.5 h PPS治疗组和2 h PPS治疗组分别于油酸注入后0.5 h和2 h经气道均滴入100 mg/kg和150 mg/kg两个剂量的PPS,实验过程中计数大鼠呼吸频率,测定动脉血气指标;于实验4 h计算大鼠存活率后处死动物,观察肺组织病理学改变,并检测肺系数及支气管肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白(TP)含量和血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)浓度.结果 与模型组比较,0.5 h给予PPS 100 mg/kg和150 mg/kg以及2 h给予PPS 150 mg/kg治疗都能显著降低大鼠的呼吸频率,提高动脉血氧分压(PaO2)及大鼠存活率,降低肺毛细血管通透性及肺出血、肺水肿发生率,降低血浆中TNF-α和BALF中TP含量(P均＜0.05).而2 h给予100 mg/kg PPS的治疗作用不明显.结论 早期气道内滴入≥100 mg/kg的PPS,能明显改善油酸型ALI大鼠的呼吸功能、减轻肺损伤;晚期较大剂量的PPS(150 mg/kg)才有治疗作用.     

盐酸戊乙奎醚联合地塞米松对大鼠内毒素性急性肺损伤的保护作用

目的探讨盐酸戊乙奎醚(PHC)联合地塞米松(DXM)对大鼠急性肺损伤(ALI)的保护作用。方法40只SD大鼠随机分为对照组、内毒素(LPS)组、PHC组、DXM组、PHC+DXM组,每组8只。采用尾静脉注射内毒素制备大鼠内毒素性ALI模型后,PHC组和DXM组分别给予PHC和DXM进行干预,PHC+DXM组同时给予PHC和DXM进行干预。各组大鼠于上述处理后6 h留取标本,测定各组肺湿/干值(W/D值)、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、中性粒细胞(PMN)计数以及TNF-α和IL-1β的含量,计算肺通透指数,检测肺匀浆髓过氧化物酶(MPO)的活性和丙二醛(MDA)含量。结果LPS组动脉血气指标PH、PaO2、PaCO2均较Ctrl组明显降低(P<0.01或0.05),经DXM、PHC或DXM+PHC干预后各指标不同程度升高,DXM+PHC组的PH值、PaO2均不同程度高于DXM组和PHC组,而明显高于LPS组(P<0.01)。LPS组肺W/D比、肺通透指数和BALF中PMN计数、MPO、MDA、TNF-α和IL-1β与Ctrl组比较差异有统计学意义(P<0.01),经DXM、PHC或DXM+PHC干预后各项指标明显改善,与LPS组比较差异有统计学意义(P<0.01或0.05),而DXM+PHC组的各项指又明显好于DXM组或PHC组(P<0.01或0.05)。结论PHC联合DXM对大鼠LPS性ALI具有明显的保护作用,其效果优于单用PHC或DXM。     

短期针刺对急性肺损伤大鼠血浆白细胞介素-1β含量及海马c-fos基因表达的影响

目的 探讨针刺对急性肺损伤(ALI)的干预作用及其可能机制.方法 将36只Wistar大鼠按随机数字表法分为对照组、模型组、假针刺组、针刺组,每组9只.采用经尾静脉注射油酸0.2 ml/kg后4 h注射脂多糖(LPS)2 mg/kg的"二次打击"复制大鼠ALI模型.针刺组于制模前5 d每日针刺大鼠肺俞、足三里穴;假针刺组针刺离穴位5 mm非经非穴处;对照组和模型组不给予任何治疗.于制模后2 h取血检测大鼠动脉血氧分压(PaO2)及血浆白细胞介素-1β(IL-1β)含量;取肺组织进行病理观察及形态学积分测定;取脑组织检测海马CA2～3区c-fos表达.结果 与对照组比较,模型组PaO2[mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa):57.56±5.61比107.22±3.233明显降低(P<0.01),血浆IL-1β含量(ug/L:0.76±0.06比0.25±0.02)、肺组织病理形态学积分(分:12.16±0.82比1.68±0.14)及海马c-fos阳性表达(灰度值:94.22±7.89比189.28±8.45)均明显升高(均P<0.01).针刺组PaO2[(64.56±5.77)mm Hg]改善及血浆IL-1β含量C(0.71±0.05)μβ/L]下降,肺损伤减轻[病理形态学积分(11.58±0.50)分]及海马c-fos阳性表达OX度值129.16±8.73)明显减少,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 大鼠海马CA2～3区通过c-fos途径参与ALI免疫调节过程;针刺对ALI具有一定的保护作用,其机制可能与降低血浆IL-1β含量、抑制c-fos表达有关.     

右美托咪定对大鼠移植肝缺血/再灌注所致急性肺损伤中细胞凋亡及CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白的影响

目的 探讨右美托咪定预处理对大鼠原位移植肝缺血/再灌注(I/R)所致急性肺损伤(ALI)中细胞凋亡及CCAAT增强子结合蛋白(C/EBP)同源蛋白(CHOP)的作用.方法 选择雄性SD大鼠40只,按随机数字表法分为假手术组、I/R模型组、右美托咪定低剂量组和右美托咪定高剂量组,每组10只.采用二袖套法结扎并切断肝动脉,供体肝脏移植入后即可完全开放门静脉复制肝I/R模型;假手术组开腹后只游离肝周韧带,不进行其他特殊处理;右美托咪定低剂量组和高剂量组分别于I/R前1 h静脉泵注右美托咪定 2.5μg·kg-1·h-1和5.0μg·kg-1·h-1,1 h内完成.实验结束后留取肺组织,检测肺组织湿/干质量(W/D)比值;光镜下观察肺组织病理学变化并进行肺泡损伤定量评估(IQA),电镜下观察肺组织超微结构变化;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CHOP mRNA表达水平;蛋白质免疫印迹法(Western Blot)检测CHOP的蛋白表达水平;原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况,并计算凋亡指数(AI).结果 与假手术组比较,I/R模型组肺W/D比值(4.94±0.84比2.29±0.54)、IQA〔(40.52±5.15)%比(4.55±1.85)%〕和AI〔(36.57±5.85)%比(2.85±0.95)%〕均明显升高(均P<0.0l);光镜和电镜下均显示肺组织结构发生明显的损伤.与I/R模型组比较,右美托咪定低剂量组和右美托咪定高剂量组肺W/D比值(3.29±0.85,2.68±0.78比4.94±0.84)、IQA〔(23.69±2.62)%,(15.86±3.61)%比(40.52±5.15)%〕 和AI〔(25.73±3.71)%,(14.66±2.61)%比(36.57±5.85)%〕均明显降低(均P<0.01),光镜和电镜下可见肺组织结构损伤明显减轻.I/R模型组有大量肺血管内皮细胞和肺泡上皮细胞发生凋亡,而右美托咪定低剂量组和高剂量组细胞凋亡则明显减少.与假手术组比较,I/R模型组CHOP mRNA〔吸光度(A)值:0.96±0.18比0.43±0.08〕及蛋白(灰度值:2.79±0.74比1.02±0.27)表达水平均明显升高(均P<0.01).与I/R模型组比较,右美托咪定低剂量组和高剂量组CHOP mRNA(A值:0.69±0.13、0.56±0.12比0.96±0.18)及蛋白(灰度值:1.96±0.58、1.34±0.49比2.79±0.74)表达水平均明显降低,且以高剂量组的降低更显著(均P<0.01).结论 右美托咪定对移植肝I/R肺组织具有保护作用,该作用可能与其抑制CHOP的活化、减少肺组织细胞凋亡有关.     

Toll样受体4在失血性休克小鼠肺组织HO-1表达中的作用

目的 探讨Toll样受体4(TLR4)在失血性休克并发急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织血红素加氧酶-1(HO-1)表达中的作用.方法 采用小鼠失血性休克复苏模型,48只TLR4基因突变型小鼠C3H/HeJ和野生型小鼠C3H/HeN随机分为2组:①假手术组;②失血休克复苏组.分别于失血性休克复苏后6 h、24 h和48 h取颈动脉血行血气分析,检测肺组织HO-1蛋白和mRNA的表达、肺组织IL-6含量及髓过氧化物酶(MPO)活性.采用方差分析进行数据统计.结果 失血休克复苏后24 h C3H/HeN和C3HL/HeJ的肺组织中HO-1 mRNA和蛋白含量的表达、IL-6含量、MPO活性与假手术组比较显著增加(P＜0.01或P＜0.05);与C3H/HeN鼠比较,休克复苏后24 h C3H/HeJ鼠的HO-1mRNA和蛋白含量、IL-6含量和MPO活性明显降低(P＜0.01或P＜0.05).C3HL/HeN鼠休克复苏后24 h并发ALI并且PaO2/FiO2＜300 mmHg.结论 TLR4受体激活在失血性休克致ALI肺组织HO-1的表达中扮演重要角色.     

三七总皂苷对急性肺损伤犬血管外肺水及呼吸力学的影响

目的 探讨三七总皂苷(PNS)对急性肺损伤(ALI)犬血管外肺水(EVLW)与呼吸力学参数的影响.方法 18只犬被随机均分为正常对照组、模型组,PNS治疗组.均给予犬气管插管建立人工气道并实施机械通气支持[潮气量(VT)10 ml/kg,呼气末正压(PEEP)0,吸人氧浓度(FiO2)1.00].静脉注射油酸建立ALI犬模型.成模后PNS组静脉给予PNS 10 mg/kg(溶于葡萄糖注射液中,2.5 ml/min),正常对照组和模型组给予等量葡萄糖注射液.连续监测各组犬的呼吸力学参数及动脉血气.成模后4 h处死动物,采用重力法测定EVLW,计算血管外肺水指数(EVLWI).结果 PNS能显著降低ALI犬的EVLWI[(14.10±1.45)ml/kg比(17.97±0.85)ml/kg,P<0.05],但仍显著高于正常对照组[(8.82±0.54)ml/kg,P<0.01].制模成功后,氧合指数(PaO2/FiO2)及静态肺顺应性(Cst total)显著下降;静脉注射PNS 2 h后PaO2/FiO2和Cst total较模型组显著升高(P<0.05或P<0.01);而气道阻力(Raw)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)则无明显变化,3组间比较差异亦无统计学意义(P均>0.05).结论 PNS对ALI犬具有一定的保护作用,使EVLW降低、肺顺应性增高,有助于改善低氧血症.     

急性肺损伤大鼠肺血管通透性的变化规律

目的:通过静脉注射脂多糖(LPS)建立大鼠急性肺损伤(ALI)模型,研究大鼠ALI时肺血管通透性的改变,探讨肺血管通透性改变的机制。方法:将大鼠随机分成对照组和LPS组。以LPS静脉注射建立ALI模型,对比观察0.5、2、4、6、8h后肺血管通透性、肺系数、肺水含量、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量变化,光镜观察肺组织病理变化。结果:LPS组的肺血管通透性在0.5h后即高于对照组(P<0.05),2h后则显著高于对照组(P<0.01),8h达到高峰。LPS组的肺系数、肺水含量、BALF蛋白含量在2h后高于对照组(P<0.05),4h后则显著高于对照组(P<0.01),至6h达到顶峰。结论:LPS可以破坏肺血管内皮细胞屏障,导致肺血管通透性增加。但肺血管内皮细胞通透性和肺泡上皮细胞通透性在肺损伤时的变化并不完全同步,其原因需进一步探讨和研究。     

异丙酚后处理对急性肺损伤大鼠肺组织Toll样受体4表达的影响

目的 探讨异丙酚后处理对脂多糖(LPS)诱导急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织中Toll样受体4(TLR4)表达的影响.方法 将30只SD大鼠按随机数字表法分为对照组、ALI组及异丙酚后处理组3组,每组10只.经股静脉泵入8 mg/kg LPS 30 min诱导ALI模型,对照组给予等量生理盐水.异丙酚后处理组于制模后股静脉推注20 mg/kg异丙酚,再以40 mg· kg-1·h-1微量泵匀速泵入维持1h.于给药结束后6h处死大鼠,取肺脏测定湿/干重(W/D)比值,计算肺通透性指数(LPI),用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定肺组织TLR4 mRNA表达.结果 与对照组比较,ALI组肺W/D比值、LPI、TLR4 mRNA表达及BALF中TNF-α水平(ng/L)均明显升高[肺W/D比值:5.30±0.28比4.21 ±0.14,LPI(×10-3):8.7±2.2比3.3±2.0,TLR4 mRNA:2.451±0.028比0.998±0.021,TNF-α:643.46±62.31比120.43±12.65,均P＜0.05];而异丙酚后处理组肺W/D比值、LPI、TLR4 mRNA表达及BALF中TNF-α水平均较ALI组明显降低[肺W/D比值:4.68±0.19比5.30±0.28,LPI(×10-3):5.8±2.0比8.7±2.2,TLR4 mRNA:1.126±0.025比2.451±0.028,TNF-α:290.53±32.01比643.46±62.31,均P＜ 0.05],但仍显著高于对照组(均P＜0.05).结论 异丙酚后处理能明显改善LPS诱导的ALI,其作用机制可能是通过下调TLR4 mRNA表达,从而抑制“瀑布样”炎症反应.     

通腑泻肺法对脓毒症大鼠的肺保护作用研究

目的 观察通腑泻肺法对盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症大鼠的肺保护作用,并探讨其可能机制.方法 42只SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组(n=6)、模型组(n=18)和通腑泻肺组(n=18).模型组和通腑泻肺组采用CLP制备脓毒症模型,制模后即刻通腑泻肺组灌胃通腑泻肺颗粒0.01 mL/g,模型组灌胃等量生理盐水,空白对照组不给予任何处理.制模后3、6、12 h经腹主动脉取血行血气分析;经下腔静脉取血检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)含量;行支气管肺泡灌洗留取灌洗液(BALF)检测总蛋白(TP)、总磷脂(TPL)、饱和磷脂酞胆碱(DSPC)含量;取肺组织测定湿/干质量(W/D)比值和肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)、丙二醛(MDA)含量;光镜下观察肺组织病理学改变.结果 与空白对照组比较,模型组制模后pH值、动脉血氧分压(PaO2)、碳酸氢根(HCO3-)、剩余碱(BE)降低,动脉血二氧化碳分压(PaCO2)升高,血清TNF-α和IL-6逐步升高,BALF中TP升高,TPL、DSPC/TPL降低,肺W/D比值及肺组织MDA、MPO含量升高.与模型组比较,通腑泻肺组pH值在制模后3 h升高(7.27±0.04比7.18±0.07,P<0.05),PaO2 (mmHg,1 mmHg=0.133 kPa)在制模后3、6、12 h升高(3 h:128.00±16.05比106.78±10.73,6 h:98.46±15.97比72.80±16.33,12 h:90.70±9.31比74.28±12.19,均P<0.05);血清TNF-α(ng/L)在制模后12 h显著降低(508.20±94.08比756.60±138.77,P<0.05),IL-6(ng/L)在制模后6 h、12 h显著降低(6 h:687.80±35.00比849.40±148.28,12 h:728.80±214.41比917.00±245.96,均P<0.05);BALF中TP(g/L)在制模后12 h显著降低(1.01±0.23比1.60±0.47,P<0.05),TPL(mg/L)在制模后12 h显著升高(86.40±11.33比62.40±16.33,P<0.05),DSPC/TPL在制模后6 h、12 h显著升高(6 h:0.58±0.13比0.38±0.10,12 h:0.45±0.13比0.24±0.07,均P<0.05);肺W/D比值在制模后3 h显著升高(3.84±0.25比2.99±0.50,P<0.01),制模后12 h显著降低(3.21±0.53比4.89±1.14,P<0.05);肺组织匀浆中MDA(nmol/mg)在制模后6 h、12 h显著降低(6 h:4.04±2.58比8.89±2.61,12 h:11.31±3.60比20.60±8.10,均P<0.05),MPO(U/g)在制模后12 h显著降低(4.79±0.66比7.22±1.76,P<0.05).光镜下通腑泻肺组肺组织水肿、充血、渗出和纤维化等病理变化均较模型组减轻.结论 通腑泻肺法治疗脓毒症大鼠能改善低氧血症和代谢性酸中毒,减轻肺水肿和肺组织病理损伤;其肺保护作用机制可能是通过抗氧化、抑制炎症因子表达和释放以及抑制肺表面活性物质降解等途径实现.     

依达拉奉对脓毒症大鼠的保护作用研究

目的 探讨依达拉奉及地塞米松对脓毒症大鼠的保护作用.方法 将50只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、地塞米松治疗组、依达拉奉治疗组、地塞米松与依达拉奉联合治疗组,每组10只.用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立脓毒症大鼠模型.各治疗组于术后即刻经阴茎背静脉分别注射地塞米松和(或)依达拉奉各5 mg/kg,假手术组及模型组给予等量生理盐水.于术后12 h采集腹主动脉血,用化学反应法检测血清丙二醛(MDA)含量和总抗氧化能力(T-AOC);取肺组织,采用原位末端缺刻标记法(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况,并进行病理评分.结果 与假手术组比较,模型组MDA及细胞凋亡指数(AI)升高,而T-AOC水平下降;与模型组比较,各治疗组MDA及AI降低,T-AOC升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01),且联合治疗组疗效优于地塞米松组和依达拉奉组.模型组大鼠肺组织中肺泡破坏、间质水肿、炎性细胞浸润明显,用药物干预后损害程度降低.结论 依达拉奉可通过减少氧自由基产物,抑制组织中脂质过氧化,从而减轻脓毒症.依达拉奉和地塞米松联合应用对脓毒症有更好的治疗效果.