血脂康、叶酸及两药合用对兔动脉粥样硬化形成的抑制

目的:观察血脂康、叶酸及两药合用对兔动脉粥样硬化病变形成的抑制作用。方法:实验于2005-09/2006-01在锦州医学院科技楼生化实验室完成,选用健康日本大耳白兔40只,先给予普通颗粒饲料喂饲1周,然后采用随机数字表法分为5组,每组8只:①空白组:用普通颗粒饲料喂养。②高脂组:用高脂饲料(普通饲料 10g/L胆固醇 80g/L猪油)喂养。③叶酸组:高脂饲料 叶酸1.3mg/(kg·d)。④血脂康组:高脂饲料 血脂康0.05g/(kg·d)。⑤合用组:高脂饲料 血脂康0.05g/(kg·d) 叶酸1.3mg/(kg·d)。分组后共喂养12周。于给药12周末观察各组家兔主动脉组织病理形态学改变并观察其病变指标,包括主动脉斑块与内膜面积比值、内膜厚度、内膜与中膜厚度比值。结果:40只家兔全部进入结果分析,无脱失。①各组家兔给药12周末主动脉组织的病理形态学改变:光镜见,空白组无内膜增厚和脂质沉积;高脂组内膜增厚最显著,斑块内脂质增加,含大量泡沫细胞;合用组最轻,斑块内脂质和泡沫细胞数量明显减少;叶酸组、血脂康组均介于高脂组和合用组之间。②各组家兔的主动脉斑块与内膜面积比值、内膜厚度、内膜与中膜厚度比值比较:叶酸组、血脂康组及合用组的斑块与内膜面积比、内膜厚度、内膜与中膜厚度比均显著低于高脂组[斑块面积/内膜面积:(80.31±1.25,80.05±1.64,66.23±1.32,87.63±2.15)%,(P<0.05);内膜厚度:(119.11±1.45,119.33±1.23,66.39±1.41,144.95±2.88)μm,(P<0.05);内膜厚度/中膜厚度:(40.92±0.97,40.83±1.01,23.42±1.38,52.05±1.30)%,(P<0.05)]。结论:血脂康与叶酸均有抑制动脉粥样硬化形成的作用,两药联合使用抗动脉粥样硬化效果更佳。     

阿托伐他汀对ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化模型中血清一氧化氮、肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:探讨阿托伐他汀抗动脉粥样硬化的机制。方法:24只载脂蛋白E基因敲除小鼠随机分为3组(n=8),分别给予普通饮食(空白对照组)、高脂饮食(高脂饮食组)、高脂饮食+阿托伐他汀(高脂他汀组),建立动脉粥样硬化模型,人工饲养8周后检测各组小鼠血清一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平及行小鼠主动脉弓HE染色。结果:(1)HE染色结果显示:空白对照组主动脉内膜未见明显增厚,泡沫细胞含量极少;高脂饮食组小鼠主动脉弓可见明显动脉粥样硬化斑块,内膜明显增厚,其内可见大量泡沫细胞及增生的纤维组织,胞体大,胞浆呈空泡状,纤维帽薄;高脂他汀组主动脉亦可见明显动脉粥样硬化斑块,内膜稍增厚,泡沫细胞含量极少,可见较厚纤维帽。(2)普通饮食组、高脂饮食组、高脂他汀组血清NO分别为(56.104±16.104)、(29.881±12.009)、(53.713±16.430)μmol/L,TNF-α分别为(3.138±0.435)、(5.163±0.523)、(3.938±0.452)pg/mL(P<0.05)。结论:已知NO及TNF-α与动脉粥样硬化相关,阿托伐他汀能够调节小鼠血清NO、TNF-α的表达,提示阿托伐他汀能够通过调整炎性介质的表达发挥其抗动脉粥样硬化的作用。     

链脲佐菌素结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型

目的:研究如何运用链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)结合高糖高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型.方法:40只健康雄性SD大鼠随机分为高脂组、糖尿病对照组、正常组.高脂组用STZ 60 mg/kg一次性左下腹腔注射,并结合4周的高糖高脂饮食.糖尿病对照组用相同剂量STZ一次性左下腹腔注射,普通饲料喂养4周.正常组用相同剂量的柠檬酸缓冲液一次性左下腹腔注射,普通饲料喂养4周.于注射药物后72 h及1、4、8、12周等不同时间点测量空腹体重、血糖、尿糖等指标,进行统计分析.结果:高脂组与糖尿病对照组、正常组相比空腹血糖、体重明显增加,差异有显著性(P<0.05).高脂组与糖尿病对照组相比血糖增高并能保持长时间的稳定、尿糖强阳性.结论:STZ一次性左下腹腔注射结合高糖高脂饮食4周可成功诱导2型糖尿病大鼠模型.     

携GL-7靶向微泡造影剂对高脂饮食兔腹主动脉内膜的靶向作用

目的 探讨携GL-7靶向微泡造影剂对高脂饮食兔腹主动脉内膜体外特异性结合及体内增强显影效果.方法 14只新西兰兔用高脂饮食法建立腹主动脉内膜损伤模型,并随机分为两组,4周后分别使用对照微泡和靶向微泡造影剂进行腹主动脉超声造影,以视频密度法评价两种造影剂对动脉内膜的增强效果,荧光显微镜观察两种造影剂体内结合情况及与动脉内膜荧光染色的结合情况及荧光强度统计分析.结果 对照微泡、靶向微泡造影后血管内膜回声均较造影前增强,靶向微泡造影与对照微泡造影比较,血管内膜峰值视频密度差异有统计学意义(P<0.05).荧光显微镜观察,靶向微泡血管腔内呈现绿色荧光,而对照微泡血管腔内仅有微弱的绿色荧光.动脉血管冰冻切片结果显示,靶向微泡造影组动脉内膜有绿色荧光表达,而对照微泡造影组绿色荧光表达较弱,两组荧光强度差异有统计学意义(P<0.05).结论 GL-7靶向微泡造影剂与兔动脉血管内膜体内、体外特异性结合,可显著增强兔腹主动脉内膜靶向显影.     

粒细胞集落刺激因子动员骨髓干细胞治疗大鼠急性脑梗死

目的:探讨粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠脑梗死的治疗效果。方法:采用线栓法制备大鼠脑梗死模型,于术后24 h进行神经病学评分分级,入选2分及以上的大鼠共20只,被随机分为给药组和对照组,每组10只。给药组腹腔注射G-CSF 10μg.kg-1.d-1;对照组腹腔内注射等量生理盐水均连用10 d。两组分别均于术前、术后10、20和27 d进行神经病学评分分级,于术前及术后10 d和27 d进行体重测定,并计算体重减轻率。术后27 d,将大鼠麻醉后处死取脑,进行氯化三苯四唑(TTC)染色,计算脑梗死容积与全脑容积比值。结果:术前两组体重比较差异无统计学意义(P>0.05);术后10 d和27 d,给药组大鼠体重减轻率显著小于对照组〔(-13.15±0.05)%比(-16.46±0.06)%,(9.72±0.10)%比(-8.97±0.05)%,P均<0.01〕;术后10 d,两组神经病学分级评分比较差异无统计学意义(P>0.05);术后20 d和27 d,给药组神经病学分级评分〔(1.30±0.48)分和(0.60±0.52)分〕显著低于对照组〔(2.20±0.92)分和(1.70±0.68)分,P<0.05和P<0.01〕;术后27 d,给药组脑梗死容积与全脑容积比值显著小于对照组〔(12.99±3.55)%比(22.87±2.12)%,P<0.01〕。结论:脑梗死急性期1~10 d给予G-CSF可以有效减轻大鼠缺血性脑梗死程度,减少脑梗死体积,促进大脑神经功能的恢复。     

不同饲料联合维生素D3建立大鼠动脉粥样硬化模型的比较

目的探讨最佳的动脉粥样硬化大鼠模型的制作方法。方法采用单纯高脂饲料饲养、维生素D₃结合高脂饲料饲养、维生素D₃结合普通高脂饮食饲养3种方法诱导动脉粥样硬化大鼠模型,比较3种方法的模型建立情况。HE染色观察大鼠主动脉血管动脉粥样硬化斑块的组织病理学变化。结果动脉粥样硬化大鼠模型成功情况：单纯高脂饲料喂养大鼠主动脉内膜光滑,未见斑块形成;高脂饲料联合维生素D₃组仅2例主动脉内膜形成粟粒样斑块;普通高脂饮食喂养同时加维生素D₃灌胃后2个月后可见主动脉内膜明显钙化斑块,呈环状,斑块遍及整条动脉。结论高脂饲料建立动脉粥样硬化模型成模率低,普通高脂饮食饲养联合维生素D₃每周间隔灌胃方法诱导动脉粥样硬化大鼠模型成模率高、动物死亡率低,是较好的模型制作方法。     

高脂饲料喂养与动脉内膜球囊损伤结合建立兔腹主动脉粥样硬化模型

背景:以往研究多采用单纯饲喂高脂饲料、正常或高脂血症动物动脉内膜损伤致动脉粥样硬化狭窄模型.目的:拟采用喂养高脂饲料与动脉内膜球囊损伤相结合的方法建立腹主动脉粥样硬化的模型.设计、时间及地点:对比观察实验,于2007-01/03在解放军总医院动物实验中心完成.材料:新西兰白兔20只,随机分为单纯饲喂高脂饲料组、高脂饲料与动脉内膜损伤结合组,每组10只.高脂饲料由普通颗粒饲料+4%胆固醇+10%猪油组成+10%蛋黄粉组成.方法:单纯饲喂高脂饲料组单纯喂养高脂饲料,高脂饲料与动脉内膜损伤结合组喂养高脂饲料4周后,行腹丰动脉内膜球囊损伤术.主要观察指标:12周后取主动脉行病理检查,计算机计算脂纹脂斑厚度,内、中膜厚度,内膜厚度比值,并进行血清总胆固醇、三酰甘油和高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇的测定.结果:12周后,两组兔血脂血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蚩白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇均升高,高脂饲料与动脉内膜损伤结合组升高更明显(P<0 05).喂养高脂饲料的两组动物均出现动脉粥样硬化斑块,横段而纤维斑块切片出现钙化.与单纯饲喂高脂饲料组比较,高脂饲料与动脉内膜损伤术结合组内膜明显增厚,形成了明显的斑块及纤维帽结构,斑块厚度与内中膜厚度比值增加明显(P<0.01).结论:所诱导产生的斑块与人类斑块成分具有一定相似性,包括斑块的纤维帽、钙化、脂核等,提示采用动脉内膜损伤与高脂饮食结合方式来制作动脉粥样硬化斑块的模型是可行的、实用的.     

食源性肥胖大鼠2型糖尿病模型的建立

背景:高脂饮食加小剂量链脲佐菌素是目前国内最常用的2型糖尿病大鼠造模方式,但高脂饮食仅能诱导50%大鼠发生胰岛素抵抗,因此还需寻找更理想的2型糖尿病大鼠建模方法.目的:选择食源性肥胖大鼠进行小剂量链脲佐菌素腹腔注射,建立更理想的2型糖尿病动物模型.方法:将SD大鼠随机分成对照组和高脂饮食组.4周后,据大鼠体质量将高脂饮食组分为食源性肥胖组和食源性肥胖抵抗组.8周后,所有大鼠均给予小剂量链脲佐菌素(30 mg/kg)腹腔注射,将注射10d后空腹血糖>7.8 mmol/L 且稳定2周以上者纳为2型糖尿病大鼠模型.检测各组大鼠的空腹血糖、血脂、胰岛素;评价各组大鼠的胰岛素抵抗程度;比较各组大鼠的2型糖尿病成模率.结果与结论:与对照组及食源性肥胖抵抗组相比,食源性肥胖组大鼠出现明显的体质量增加、高血脂、高胰岛素血症及胰岛素抵抗(P<0.01).注射链脲佐菌素后食源性肥胖组2型糖尿病成模率高达100%,食源性肥胖抵抗组成模率仅为12.5%.由结果可知选择食源性肥胖组大鼠作为2型糖尿病造模对象,是2型糖尿病造模方法的成功改良.     

大鼠主动脉内膜损伤后新生内膜各种生长因子表达与表没食子儿茶素没食子酸酯的干预

目的:观察表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3 gallate,EGCG)对大鼠主动脉内膜损伤后再狭窄的影响,探讨其对新生内膜各种生长因子表达的干预效应。方法:实验于2006-03/10在汕头大学医学院细胞衰老实验室完成。实验分组:选用清洁级雄性健康SD大鼠72只,体质量(300±35)g,随机数字表法分为对照组、模型组、EGCG低剂量组和EGCG高剂量组,每组18只。实验方法:以球囊损伤方法建立大鼠主动脉内膜损伤模型。①对照组:结扎左颈总动脉,不插入球囊导管,不给药。②模型组:结扎左颈总动脉并球囊拉伤主动脉内膜,不给药。③EGCG低剂量组:拉伤主动脉内膜,给予20mg/(kg.d)EGCG灌胃。④EGCG高剂量组:拉伤主动脉内膜,给予50mg/(kg.d)EGCG灌胃,药物组术前3d给药。对照组及模型组予生理盐水灌胃,直至实验结束。实验评估:每组于术后14,28d分别随机选取9只大鼠,取其主动脉进行苏木精-伊红染色并作血管形态学检测;同时进行免疫组织化学染色检测增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子BB、碱性成纤维细胞生长因子、生长转化因子β1的表达水平。结果:纳入大鼠72只,其中模型组28d时1只鼠死于腹主动脉血栓;14d时1只鼠右后肢出现血栓性跛行;EGCG低剂量组14d时1只死于手术急性呼吸窘迫综合征,1只死于术后21d胸水形成,无血栓形成现象;EGCG高剂量组14,28d各有1只分别因感染、误灌入气管死亡,无血栓形成现象;对照组动物生长状况良好;最后67只大鼠进入结果分析。①模型组新生内膜显著增厚,新生内膜平均厚度、面积自胸主动脉到腹主动脉上段及下段逐渐增加、狭窄逐渐明显。②EGCG低剂量组新生内膜平均厚度及面积于术后14d下降,与模型组比较,无显著差异[(45.89±9.54),(60.75±17.70)μm;(1.10±0.29),(1.55±0.61)mm2;P>0.05],但两者于术后28d则显著降低(P<0.05);EGCG高剂量组术后14,28d的新生内膜平均厚度、面积均显著下降[14d:(20.21±5.55),(60.75±17.70)μm;(0.48±0.22),(1.55±0.61)mm2;28d:(35.08±12.39),(80.75±22.27)μm;(0.82±0.50),(2.35±1.03)mm2;P<0.01]。③模型组动脉增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子BB、碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子β1表达显著增加;低剂量EGCG对内膜损伤后增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子、碱性成纤维细胞生长因子表达无明显抑制作用;而高剂量在术后14,28d均显著抑制增殖细胞核抗原、血小板源性生长因子、碱性成纤维细胞生长因子表达。EGCG对转化生长因子β1表达无影响。结论:EGCG剂量依赖性地抑制动脉内膜损伤后再狭窄,其作用与抑制血小板源性生长因子、碱性成纤维细胞生长因子表达有关。     

血管回声跟踪技术评价兔腹主动脉早期动脉粥样硬化的实验研究

目的探讨血管回声跟踪技术评价兔高脂喂养不同阶段腹主动脉结构和弹性变化规律。方法把24只大耳白兔随机平均分成正常对照组(A组),高脂喂养4周组(B组)、8周组(C组)、12周组(D组),分别于高脂喂养4、8、12周末超声检测兔腹主动脉血管结构及弹性,各参数测值与对照组进行比较;超声检测和采静脉血后,将各组兔处死,取兔腹主动脉行病理学分析。结果B、C、D组总胆固醇、低密度胆固醇水平较对照组明显升高,高密度胆固醇较对照组明显降低(P<0.05)。C、D组腹主动脉弹性参数测值与A组比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。常规超声扫查显示,A、B、C组兔腹主动脉内膜光滑,内中膜厚度正常、均匀,未见斑块回声;D组兔腹主动脉内膜不光滑、毛糙、回声增强,内中膜不均匀增厚,局部可见呈偏心状小斑块。光镜下观察:A、B组兔腹主动脉内皮细胞连续完整,内弹力膜连续,无分层,无断裂;C组兔腹主动脉内膜及内皮细胞增生,可见多层泡沫细胞突入管腔,内弹力膜可见部分中断;D组兔腹主动脉内皮细胞不连续性缺失,内弹力膜中断,平滑肌细胞向内膜增生,可见斑块突向管腔。结论兔动脉粥样硬化早期光镜下仅出现泡沫细胞时,血管硬度已出现异常,粥样斑块出现时血管硬度进行性增高,提示诊断早期动脉粥样硬化血管硬度参数比形态学指标更敏感。     

烟酸对高脂血症兔主动脉斑块面积和MCP-1的影响

[目的]观察烟酸对动脉粥样硬化斑块形成及单核细胞趋化因子-1(MCP-1)的影响.[方法]将新西兰兔给予高胆固醇饮食8周后随机分为高脂组、烟酸组和对照组.第14周末处死动物进行主动脉病理学检测,酶联免疫吸附法测定MCP-1浓度和半定量逆转录聚合酶链反应测定MCP-1 mRNA的表达.[结果]高胆固醇饮食14周后,兔主动脉内膜较对照组显著增厚,并明显可见斑块形成.烟酸干预6周后胆固醇水平显著低于高脂组(P＜0.05);主动脉内膜厚度小于高脂组,斑块面积也显著小于高脂组(P＜0.01).正常饮食兔的MCP-1水平很低[(61.4±10.2)pg/mL],高胆固醇饮食后显著升高[(227.1±23.0) pg/mL],烟酸干预6周后则显著降低[(164.5±21.7) pg/mL,P＜0.01];血清MCP-1水平与动脉粥样硬化斑块的面积呈正相关(r=0.71,P＜0.01).[结论]烟酸延缓动脉粥样硬化斑块的形成作用可能与其降脂及降低MCP-1水平有关.     

阿托伐他汀对鼠动脉粥样硬化蛋白激酶C和C反应蛋白的影响

目的 为了阐明阿托伐他汀对动脉粥样硬化独立于其降脂效应的保护作用,研究了其对大鼠动脉粥样硬化模型中蛋白激酶C(PKC)和C反应蛋白(CRP)表达的影响.方法 将雌性SD大鼠50只随机分为正常饮食(n=10,对照组),维生素D3注射+高脂饮食组(n=40).8个星期后,维生素D3注射+高脂饮食组大鼠再随机的予以阿托伐他汀治疗(n=20,阿托伐他汀组,每天按5 mg·kg-1喂食阿托伐他汀)或予以正常饮食(n=20,模型组).8个星期后处死试验鼠并取主动脉做病理切片,进行光镜和电镜观察,其余的主动脉用于免疫印迹法检测蛋白激酶C.各组动物分别于实验前及实验结束时取血检测血脂及C反应蛋白水平.结果 阿托伐他汀能显著降低鼠血浆总胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白水平;阿托伐他汀组鼠的主动脉病理学改变比模型组显著改善;对照组未见明显的病理学改变;模型组中CRP水平[(18.64±0.94)mg/L]显著高于对照组水平[(9.21±0.21)mg/L](P<0.05),CRP水平在对照组和阿托伐他汀组[(12.52±0.65)mg/L]之间也存在显著性差异(P<0.05).PKC在模型组(7786.12±264.75)和阿托伐他汀组(4267.57±233.94)中的表达均显著性高于对照组(2468.75±145.53)(P<0.05),但和模型组相比较,阿托伐他汀组中PKC水平显著降低(P<0.01).结论 阿托伐他汀的益处不仅仅在于降低血脂,其抑制PKC和炎症反应在抗动脉粥样硬化的血管保护中可能起重要的作用.     

雷米普利对糖尿病心肌梗死大鼠葡萄糖转运体4的影响

目的 观察2型糖尿病合并心肌梗死大鼠室重构及葡萄糖转运体(GLUT4)表达及雷米普利对其影响.方法 46只雄性Wistar大鼠由哈尔滨医科大学第一临床医学院实验动物中心提供.高脂喂养加低剂量链脲佐菌素(STZ,30mg/kg)腹腔注射,血糖值≥16.7 mmol/L为2型糖尿病模型,结扎冠状动脉左前降支制备心肌梗死模型;糖尿病合并心肌梗死大鼠随机(随机数字法)分为安慰剂组(n,=9),雷米普利组(n=10),糖尿病假手术组(n=10);非糖尿病大鼠随机分为心肌梗死组(n=9)及非糖尿病假手术组(n=8).术后6周查心脏超声、测定心室重量指数、心肌梗死面积及左室非梗死区心肌胶原容积分数.取大鼠非梗死区心肌,采用实时定量RT-PCR技术测定GLUT4 mRNA.Western blot法测定GLUT4蛋白含量.用SPSS 13.0统计软件进行统计学分析;组间比较用方差分析,P<0.05为差异具有统计学意义.结果 与糖尿病假手术组和非糖尿病心肌梗死组相比,安慰剂组EF值显著降低[(32±3)%vs.(65±4)%,P<0.01;(32±3)%vs.(38±4)%,P<0.05];E/A比值(P<0.01)、左室非梗死区胶原容积分数(P<0.05)及心室重量指数(P<0.05)升高.与安慰剂组相比,雷米普利组盯值改善明显[(45±3)%vs.(32±3)%,P<0.01],且E/A比值显著降低(P<0.01),左室非梗死区胶原容积分数下降、心室重量指数减少[(3.1±0.2) vs.(4.2±0.4),P<0.01].安慰剂组GLUT4 mRNA及蛋白表达较非糖尿病心肌梗死组低,与糖尿病假手术组相比差异无统计学意义.与安慰剂组相比,雷米普利组GLUT4 rnRNA及蛋白表达升高.结论 雷米普利可防治心室重构并改善心脏收缩及舒张功能;2型糖尿病合并心肌梗死大鼠心肌GLUT4 mRNA和蛋白的表达下降,雷米普利可以改善糖尿病合并心肌梗死大鼠心肌GLUT4 mRNA和蛋白的表达.     

螺内酯对大鼠主动脉粥样硬化斑块内血管紧张肽转化酶2表达作用的实验研究

目的 研究螺内酯对Wistar大鼠主动脉粥样硬化斑块及斑块内血管紧张肽转化酶2(ACE2)表达的影响.方法 雄性Wistar大鼠30只随机分三组:螺内酯组、生理盐水组和空白对照组.采用高脂饮食加大剂量维生素D3腹腔注射法制备大鼠主动脉粥样硬化斑块模型.喂养50 mg/(kg·d)螺内酯42 d后取主动脉,苏丹Ⅳ染色确定主动脉粥样硬化斑块,病理切片观察动脉粥样硬化斑块,细胞原位杂交技术(ISH)观察斑块内ACE2 mRNA表达.结果 螺内酯组动脉粥样硬化斑块占主动脉内膜比率显著低于生理盐水组(螺内酯20.1%,生理盐水组33.8%,P<0.01).螺内酯组主动脉粥样硬化斑块纤维帽厚度显著大于生理盐水组(螺内酯组27.3 μm,生理盐水组6.3 μm,P<0.01),斑块内脂质池厚度小于生理盐水组(螺内酯组27.5 μm,生理盐水组38.8 μm,P<0.05).40倍视野下泡沫细胞数螺内酯组低于生理盐水组(螺内酯组16.5个/视野,[本文编辑:曹丽萍]生理盐水组43.2个/视野,P<0.01).螺内酯组斑块内ACE2表达高于对照组.结论 螺内酯能延缓大鼠主动脉粥样硬化斑块进展并增加斑块稳定性及主动脉粥样硬化斑块内ACE2表达.     

膳食钙对肥胖大鼠体质量的干预效应

目的:分析不同剂量膳食钙对高脂膳食导致SD大鼠体质量增加的预防作用及其机制。方法:实验于2004-08/2005-02在二级动物实验室及形态学实验室完成。成年SD雄性大鼠33只,随机数字表法分成5组,基础饲料中钙组6只[脂肪11%(产热比),钙1.2%],高脂中钙组7只[脂肪34%(产热比),钙1.2%],高脂高钙组7只[脂肪34%(产热比),钙2.4%],高脂高钙加奶粉组7只[脂肪34%(产热比)其中9%由奶粉提供,25%由猪油提供,钙2.4%],基础饲料组6只[基础饲料,脂肪11%(产热比),钙0.4%]。分别于每周一9:00和周四21:00测体质量。6周后,测各组大鼠血压,断头取血测血糖、血脂,放射免疫分析法测血清胰岛素含量和瘦素含量。结果:纳入动物33只,均进入结果分析。①高脂中钙组大鼠体质量与基础饲料中钙组比较显著降低(P<0.05);高脂高钙组和高脂高钙加奶粉组大鼠6周后的体质量与初始体质量相比分别增加了180.47%,173.53%。②高脂中钙组血清总胆固醇和三酰甘油含量明显高于基础饲料中钙组[分别为(1.97±0.74),(1.43±0.24)mmol/L;(1.61±0.79),(1.06±0.35)mmol/L,P<0.05],基础饲料中钙组高密度脂蛋白含量明显低于高脂高钙加奶粉组[分别为(1.50±0.26),(1.92±0.22)mmol/L,P<0.05]。③高脂中钙组胰岛素含量高于基础饲料中钙组,差异有显著性意义[分别为(55.68±21.59),(35.41±10.01)IU/mL,P<0.05]。基础饲料中钙组瘦素水平均低于高脂中钙组、高脂高钙组、高脂高钙加奶粉组,差异有显著性意义[分别为(1.22±0.27),(1.76±0.20),(1.75±0.33),(1.65±0.16)μg/L,P<0.05]。高脂中钙组和高脂高钙组血压较其他各组略有升高,但差异无显著性意义。结论:高膳食钙可以预防大鼠摄入高脂膳食导致的肥胖和血清总胆固醇、三酰甘油水平升高。其作用机制可能是钙影响大鼠脂质代谢,从而抑制了高脂膳食诱导的肥胖。     

高脂饮食联合不同类型球囊损伤制备兔腹主动脉粥样硬化斑块模型实验研究

目的探讨高脂饮食联合不同类型球囊损伤制备兔腹主动脉粥样硬化斑块模型的可行性。方法 24只新西兰大白兔随机分为顺应性损伤组、非顺应性损伤组、联合损伤组和对照组各6只。4组均给予高脂饮食,顺应性损伤组、非顺应性损伤组、联合损伤组均于超声引导下行经股动脉腹主动脉内皮球囊损伤术,分别置入2 Fogarty取栓顺应性球囊导管、经皮冠状动脉腔内血管成形(percutaneous transluminal coronary angioplasty,PTCA)非顺应性球囊导管、2 Fogarty取栓顺应性球囊导管+PTCA非顺应性球囊导管,对照组不作处理。术后24h、12周,4组行腹主动脉损伤段组织病理学HE染色,检测血脂水平,行超声检查观察腹主动脉内膜粥样硬化斑块形成情况。结果术后12周时,顺应性损伤组、非顺应性损伤组和联合损伤组造模成功率均为100%;术后24h、12周时,4组血清总胆固醇、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平比较差异均无统计学意义(P0.05);术后24h时,顺应性损伤组、非顺应性损伤组和联合损伤组动脉内膜明显损伤,损伤内膜下可见大量血小板、中性粒细胞、巨噬细胞聚集,非顺应性损伤组内皮脱落程度低于顺应性损伤组和联合损伤组,对照组内膜完整,平滑肌细胞排列整齐;术后12周时,顺应性损伤组最大内中膜厚度[(0.72±0.07)mm]大于非顺应性损伤组[(0.51±0.02)mm]、联合损伤组[(0.57±0.02)mm]和对照组[(0.37±0.04)mm](P0.05),联合损伤组大于非顺应性损伤组和对照组(P0.05),非顺应性损伤组大于对照组(P0.05)。结论高脂饮食联合顺应性球囊损伤为制备兔腹主动脉粥样硬化斑块模型的较好方法,造模时间短、成功率高、可重复性强。     

高同型半胱氨酸血症对大鼠颈动脉损伤后新内膜增生的影响

目的:研究饮食诱导高同型半胱氨酸血症对大鼠颈动脉球囊损伤后新内膜增生的影响。方法:将12周龄健康雄性SD大鼠30只,随机分为对照组(C)10只,给普通饲料;低蛋氨酸饮食组(LM)10只,给予1.2%蛋氨酸饮食;高蛋氨酸组(HM)10只,给2%蛋氨酸饮食。喂养4周后,采用球囊导管损伤左颈总动脉内皮的方法建立大鼠颈动脉球囊损伤模型,以右侧颈总动脉为对照(不行球囊损伤)。模型成功后继续喂养2周,心脏采血后处死动物;取左右颈总动脉,采用光镜、电镜定性观察和计算机图像分析定量方法来研究高同型半胱氨酸血症对大鼠颈动脉内皮损伤后新内膜增殖的影响。结果:低及高蛋氨酸组血浆同型半胱氨酸浓度(24.55±2.21μmol/L、55.52±4.78μmol/L)明显高于对照组(5.45±1.21μmol/L)(P<0.01),与对照组相比,低蛋氨酸组、高蛋氨酸组的新内膜增生明显,计算机图像定量分析表明血管损伤后14天,低和高蛋氨酸组内膜增生面积和内∕中膜面积比率分别增加87%(P<0.01)、98%(P<0.01)和97%(P<0.01)、109%(P<0.01)与对照组相比,管腔面积在低、高蛋氨酸组比对照组分别减少45%、55%(P<0.05)。结论:饮食诱导的高同型半胱氨酸血症能使球囊损伤后颈动脉新内膜增生恶化,预示高同型半胱氨酸血症可能是血管成形术后再狭窄的一个独立危险因素。     

化湿通瘀补气法对延缓家兔动脉粥样硬化斑块形成的实验研究

目的观察化湿通瘀补气法延缓高脂饮食兔动脉粥样硬化(AS)斑块形成的作用。方法纯种新西兰雄性大白兔(4个月月龄)18只作为实验对象,常规喂养1周后随机分为3组,每组6只。改为高脂饮食(1%胆固醇+6%蛋黄粉+8%猪油+85%基础饲料)喂养,对照组不用药,中药干预组用荷叶、泽泻、虎杖等中药,西药干预组用阿司匹林+阿托伐他汀+普罗布考。各组3个月后分别抽取耳缘静脉血,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、丙二醛(MDA)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)值,然后处死动物,取主动脉组织作苏木精-伊红染色切片及免疫组化染色,观察主动脉病理组织学变化,测定各组主动脉内膜及内膜/中膜厚度。结果中药干预组和西药干预组的TC、TG和LDL-C均比对照组明显降低(P<0.01),TC(2.39±0.15)mmol/L,(2.08±0.12)mmol/L vs(13.02±0.20)mmol/L;TG(2.58±0.16)mmol/L,(1.90±0.08)mmol/L vs(11.08±0.19)mmol/L;西药干预组还低于中药干预组(P<0.01),LDL-C(1.05±0.24)mmol/L,(0.85±0.09)mmol/L vs(10.13±0.20)mmol/L(P<0.01);MDA、ox-LDL、MMP-9水平较对照组均有不同程度降低(P<0.01)。中药干预组和西药干预组主动脉内膜厚度较对照组明显降低,分别为(12.28±1.28)μm、(5.20±0.81)μm vs(40.06±3.94)μm(P<0.01),而西药干预组比中药干预组降低明显。结论化湿通瘀补气法能延缓兔动脉内斑块形成,降低LDLC,为中医药治疗及动脉粥样硬化提供新的研究理论依据。     

可溶性鸟苷酸环化酶激活剂Cinaciguat对2型糖尿病大鼠血管并发症的作用

目的探讨可溶性鸟苷酸环化酶激活剂Cinaciguat对2型糖尿病大鼠血管并发症的干预作用。方法雄性SD大鼠28只,8只采用普通饲料喂养者为对照组,20只高脂饲料喂养4周后给予小剂量链脲佐菌素腹腔注射制备2型糖尿病大鼠模型,16只大鼠造模成功并随机分为模型组和干预组各8只。继续饲养12周,干预组给予Cinaciguat7μg/(kg·d)腹腔注射,模型组和对照组大鼠给予等量质量分数0.1%DMSO腹腔注射,疗程均为2周。测定各组大鼠血清空腹血糖、糖化血红蛋白、碱性磷酸酶、钙、磷、一氧化氮和一氧化氮合酶水平,并对胸主动脉行组织病理学检查。结果模型组大鼠血清碱性磷酸酶活性[(886.63±527.08)u/L]明显高于干预组[(564.17±475.89)u/L]和对照组[(139.00±32.29)u/L],干预组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);模型组一氧化氮水平[(43.20±7.49)μmol/L]、一氧化氮合酶活性(12.23±2.32)u/mL]明显低于干预组[(49.18±8.38)μmol/L、(17.43±4.27)u/mL]和对照组[(62.23±10.04)μmol/L、(24.90±5.39)u/mL](P<0.05),干预组低于对照组(P<0.05);干预组和模型组空腹血糖[(24.89±4.79)、(24.60±4.42)mmol/L]及糖化血红蛋白[(11.38±0.61)%、(12.13±0.78)%]水平明显高于对照组[(5.02±0.65)mmol/L、(4.60±0.51)%](P<0.01),模型组与干预组比较差异无统计学意义(P>0.05);对照组、模型组与干预组大鼠血清钙[(1.75±0.17)、(1.89±0.50)、(1.97±0.52)mmol/L]和磷[(2.48±0.12)、(2.85±0.19)、(2.62±0.09)mmol/L]水平比较差异均无统计学意义(P>0.05);组织病理检查结果显示对照组大鼠胸主动脉内膜连续、光滑,中膜平滑肌细胞走行清晰、无增生;模型组大鼠胸主动脉血管壁增厚,中膜平滑肌细胞增生且排列不规则;干预组大鼠胸主动脉壁较为完整、连续,中膜平滑肌细胞稍有增生,排列较规则,走行无明显异常。结论 Cinaciguat能有效改善2型糖尿病大鼠的抗氧化能力,为2型糖尿病血管并发症干预治疗提供了新思路和依据。     

营养性肥胖动物模型的建立

目的观察高脂饲料配方对制造营养性肥胖大鼠动物模型的影响。方法用改进的高脂饲料喂养大鼠6周,观察体重及Lees指数、身长、尾长、及肥胖指标,并与普食组进行比较。结果喂养6周后,高脂组大鼠体重为305·50±21·21g,普食组大鼠体重为235·00±17·86g,两者比较差异有显著性意义(P<0·05);另外,高脂组腹腔各部位脂肪重量及肝脏重量与普食组比较也有显著性差异(P<0·05)。结论高脂饮食可以引起大鼠营养性肥胖;总油脂含量18%,猪油含量12%配制的高脂饲料配方组成较为合理,致肥效果明显。