血必净注射液对内毒素诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞肺表面活性物质相关蛋白A表达的影响

目的 探讨预先给予血必净注射液对脂多糖(LPS)诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)的影响.方法 分离成年雄性SD大鼠的ATⅡ,随机分为空白对照组,LPS组,血必净5、15、45 g/L+LPS组以及单纯血必净5、15、45 g/L组8组,每组6孔.按相应浓度预先给予血必净注射液,10 min后加入LPS,培养24 h检测ATⅡ内SP-A mRNA及蛋白表达水平.结果 与空白对照组比较,LPS组、血必净5 g/L+LPS组SP-A mRNA及蛋白表达均下调(P<0.05或P<0.01);血必净15 g/L、45 g/L+LPS组与单纯血必净5、15、45 g/L组间比较差异无统计学意义(P均>0.05).与LPS组比较,血必净5、15、45 g/L+LPS组SP-A mRNA及蛋白表达上调(P<0.05或P<0.01),且呈剂量依赖性.结论 5～45 g/L血必净注射液预先给药可抑制LPS诱导的大鼠ATⅡ中SP-A mRNA及蛋白表达下调.     

血必净注射液对肾脏微血管内皮细胞发挥保护作用的机制探讨

目的 探讨血必净注射液对脂多糖(LPS)诱导大鼠肾脏微血管内皮细胞(RMECs)损伤发挥保护作用的可能机制.方法 采用胰酶消化法原代培养大鼠RMECs,用Ⅷ因子相关抗原免疫荧光法鉴定RMECs.取生长良好的第3、4代细胞,分为空白对照组、LPS(10 mg/L)刺激组和血必净(25 mg/ml预处理)治疗组.透射电镜下观察各组细胞形态变化;流式细胞仪检测内皮细胞活性氧(ROS)的表达;免疫荧光法检测核转录因子-B(NF-B)活化.结果 与空白对照组比较,电镜下LPS刺激组细胞线粒体和粗面内质网空泡变性明显,刺激 5 min 时ROS明显增加[(9.33±0.76)% 比(0.03±0.00)%,P＜0.05],刺激 30 min ROS表达至峰值(69.71±4.25)%,LPS刺激30 min时NF-B即完全移位至细胞核内,NF-B荧光强度在 120 min内呈平稳上升趋势;与LPS刺激组比较,血必净组细胞形态明显改善,ROS表达量降低[30 min:(23.86±2.04)% 比(69.71±4.25)%],NF-B活化减弱(30 min:38.59±2.62 比 58.71±4.33),差异有统计学意义(均 P＜0.05).结论 LPS可刺激细胞产生大量ROS,从而损伤内皮细胞形态,同时通过活化NF-B影响其功能.血必净注射液可以通过降低ROS表达、减弱NF-B活化起到保护内皮细胞的作用.     

血必净注射液对脂多糖刺激大鼠调节性T细胞凋亡及其介导效应T细胞免疫功能的影响

目的 探讨中药血必净注射液对体外脂多糖(LPS)刺激CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)凋亡及其介导效应T细胞(Teff)增殖反应、分泌白细胞介素-2(IL-2)功能的影响.方法 40只雄性清洁级Wistar大鼠,实验前禁食12 h.免疫磁珠法分选大鼠脾脏CD4+CD25+Treg,分为对照组(n=8)、抗CD3/CD28组(n=8)、抗CXB/CD28+LPS组(/1,=8)、抗CD3/CD28+血必净组(n=8)和抗CD3/CD28+LPS+血必净组(n=8).培养3 d后流式细胞术检测CD4+CD25+Treg凋亡率、叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)表达,酶联免疫吸附试验检测IL-10分泌.同时,CD4+CD25+Treg与CD4+CD25-T细胞1:1培养,刀豆素A刺激68 h后分析Treg对Teff增殖的抑制效应,并检测上清中IL-2/可溶性IL-2受体水平.结果 抗CD3/CD28诱导Treg凋亡率为(33.70±3.06%),显著高于对照组(12.84±0.84)%;抗CD3/CD28+LPS+血必净组(45.13±2.70)%凋亡率明显高于抗CD3/CD28+LPS组[(29.41±1.63)%,P＜0.01].同时,CD4+CLY25+Treg roxp3和CTLA-4表达及IL-10分泌随凋亡增加而降低.抗CD3/CD28+血必净组(31.26%)Teff增殖反应平均抑制率显著低于对照组(54.48%,P＜0.05),抗CD3/CD28+LPS+血必净组抑制率与抗CD3/CD28+LPS组比较亦明显下降(P＜0.01).此外,抗CD3/CD28+血必净组和抗CD3/CD28+LPS+血必净组IL-2分泌水平均显著高于抗CD3/CD28+LPS组(P＜0.01).结论 LPS刺激可明显上调大鼠Treg对Teff的抑制功能,血必净注射液能通过促进Treg凋亡而有效改善其对Teff的抑制效应.     

脂多糖诱导大鼠主动脉内皮细胞蛋白C受体和蛋白酶活化受体1的表达及血必净注射液的干预作用

目的 观察脂多糖(LPS)诱导的大鼠主动脉内皮细胞蛋白C受体(EPCR)和蛋白酶活化受体1(PAR1)的表达,并探讨血必净注射液对其的干预作用.方法 采用组织贴块法培养Wistar大鼠主动脉内皮细胞,培养1周后用流式细胞仪鉴定内皮细胞纯度.按1∶3传代至3～4代时,随机将细胞分为空白对照组、LPS刺激组(1 mg/L)、血必净干预组(LPS 1 mg/L,血必净注射液10 g/L),活化蛋白C(APC)干预组(LPS 1 mg/L,APC 0.1 mg/L).分别在12、24、48、72 h采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定内皮细胞EPCR和PAR1的mRNA表达;用流式细胞仪检测EPCR和PAR1的蛋白表达.结果 12 h时各组间EPCR和PAR1蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05);LPS刺激组EPCR和PAR1 mRNA表达则均降低,APC和血必净干预后两值均升高(P<0.05或P<0.01).24～72 h LPS刺激组EPCR的mRNA和蛋白表达水平均明显低于空白对照组(P<0.05或P<0.01),EPCR的表达随LPS作用时间延长而减少,呈明显的负相关;而血必净干预组EPCR表达明显高于LPS刺激组(P均<0.01).LPS刺激组PAR1的mRNA和蛋白表达水平较空白对照组有所降低(P<0.05或P<0.01),用血必净干预后,PAR1的mRNA和蛋白表达水平有所增加(P均<0.01).与APC干预组比较,血必净干预组EPCR和PAR1的蛋白表达增加更为明显.结论 血必净注射液能从基因和蛋白水平增加由LPS诱导大鼠主动脉EPCR和PAR1的表达作用,可能与其保护内皮细胞的功能抑制其凋亡有关.     

血必净注射液预先给药对内毒素诱导肺泡Ⅱ型上皮细胞分泌细胞因子的影响

目的 探讨血必净注射液对内毒素诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(ATⅡ)分泌细胞因子的影响.方法 原代培养ATⅡ,将细胞分为空白对照组(C组)、脂多糖(LPS)组、血必净5 mg/ml+LPS组(X1+LPS组)、血必净15 mg/ml+LPS组(X2+LPS组)、血必净45 mg/ml+LPS组(X3+LPS组)、血必净5 mg/ml组(X1组)、血必净15 mg/ml组(X2组)、血必净45 mg/ml组(X3组)8组进行实验,每组平行6孔.预先给予相应浓度血必净注射液,10 min后加入LPS,培养24 h后检测细胞培养液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-8(IL-8)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的浓度.结果 与C组比较,LPS组、X1+LPS组、X2+LPS组TNF-α、IL-8和MCP-1浓度增加(P<0.05或P<0.01);X3+LPS组、X1组、X2组和X3组差异无统计学意义(均P>0.05).与LPS组比较,X1+LPS组、X2+LPS组、X3+LPS组TNF-α、IL-8和MCP-1浓度随血必净剂量增加而进一步下降(P<0.05或P<0.01).结论 血必净注射液预先给予可使内毒素诱导ATⅡ分泌细胞因子TNF-α、IL-8和MCP-1明显下降,且呈剂量依赖性;而单纯使用血必净注射液无此作用.     

不同剂量血必净对内毒素诱导调节性T细胞凋亡的影响

目的 探讨血必净注射液对内毒素诱导CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)凋亡影响的剂量-效应关系.方法 体外培养免疫磁珠法分选大鼠脾脏CD4+CD25+Treg,分为对照组、抗CD3/CD28组、抗CD3/CD28+脂多糖(LPS)组、抗CD3/CD28+血必净组(1、5、25 mg/ml)和抗CD3/CD28+LPS+血必净组(1、5、25 mg/ml).以刺激第3日为观察时间点,采用流式细胞术分析Treg凋亡率、叉头翼状螺旋转录因子(Foxp3)和T淋巴细胞毒性相关抗原4(CTLA-4)表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-10(IL-10)分泌情况.结果 抗CD3/CD28+血必净各组CD4+CD25+Treg凋亡率高于对照组和抗CD3/CD28组,抗CD3/CD28+LPS+血必净各组凋亡率较对照组和抗CD3/CD28+LPS组明显升高(P<0.05或P<0.01);且凋亡率随血必净刺激剂量增加而升高,其中5 mg/ml血必净组凋亡率接近50%.Foxp3和CTLA-4的表达及IL-10分泌随凋亡率增加而逐渐降低,不同剂量血必净组间比较差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 血必净注射液能显著促进内毒素介导Treg的凋亡,并呈一定程度的剂量-效应关系.     

血必净注射液对脂多糖诱导大鼠肾脏微血管内皮细胞组织因子表达的影响及机制探讨

目的 观察血必净注射液对脂多糖(LPS)诱导大鼠肾脏微血管内皮细胞(RMECs)组织因子(TF)表达的影响,并探讨其可能机制.方法 采用胰酶消化法原代培养大鼠RMECs,用Ⅷ因子相关抗原免疫荧光法鉴定.取生长良好的3、4代细胞,分为对照组、LPS刺激组和血必净治疗组;采用透射电镜观察各组细胞形态,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内TF mRNA和内皮素(ET)mRNA表达,用免疫荧光法检测核转录因子-κB(NF-κB)活化程度.结果 与对照组比较,10 mg/L LPS刺激组电镜下可见细胞粗面内质网和高尔基体空泡变性明显)LPS(1～100 mg/L)刺激组TF mRNA和ET mRNA表达均随浓度增加显著上调(P<0.05或P<0.01),NF-κB核移位明显;血必净(12.5、25.0、50.0 g/L)治疗组较LPS刺激组细胞形态明显改善,TF mRNA和ET mRNA表达均明显减少,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),未观察到NF-κB核移位.结论 LPS可呈剂量依赖性诱导TF mRNA和ET mRNA表达;血必净注射液可通过降低TF mRNA表达来抑制LPS诱导的微血管内皮细胞凝血系统的启动,其保护作用的机制可能与降低ET mRNA表达并抑制NF-κB活化有关.     

血必净注射液对百草枯刺激的大鼠肺微血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 探讨血必净注射液对百草枯(PQ)刺激的大鼠肺微血管内皮细胞(rPMVECs)损伤的保护作用及其可能的机制.方法 将rPMVECs原代培养后,分为空白对照组、PQ组(加入PQ溶液)和血必净组(加入PQ溶液30 min后再加入三种浓度的血必净,分别为10、20、50 mg/mL).用分光光度比色法测定细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,ELISA法检测细胞培养上清液中血管假性血友病因子(vWF)和内皮素(ET)含量,观察各组不同时间点(3、12、24、48 h) SOD活性和MDA、vWF、ET含量.结果 PQ组四项检测指标在各时间点上与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.01).不同浓度的血必净在各时间点上均有不同程度减慢SOD活力下降和降低MDA、vWF、ET浓度的作用,并呈剂量依赖关系,以高剂量的血必净作用最为明显;与PQ组比较,高剂量血必净组在各时间点上差异均有统计学意义(P＜0.01或0.05).同时,三种浓度血必净组的SOD活力和MDA、vWF、ET浓度随时间的延长而变化,与PQ组比较,其变化速度相对较慢.结论 血必净注射液通过提高SOD活力和降低MDA、vWF、ET含量而对PQ刺激rPMVECs的损伤起到保护作用.     

血必净注射液与活化蛋白C对脂多糖诱导大鼠单核细胞组织因子干预效果的比较研究

目的 比较血必净注射液与活化蛋白C(APC)对脂多糖(LPS)刺激大鼠单核细胞表达组织因子(TF)及蛋白酶激活受体1(PAR-1)的影响.方法采用黏附法分离正常大鼠外周血单核细胞后,按随机数字表法分为正常对照组、LPS刺激组、LPS+APC组和LPS+血必净组.分别于LPS刺激后12、24、48、72 h收集细胞,用流式细胞仪检测PAR-1表达的荧光强度;同时留取细胞培养上清液,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测TF、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 LPS刺激组24 h后各时间点大鼠单核细胞PAR-1的荧光强度较正常对照组显著升高,各时间点上清液中TF、IL-6、TNF-α水平也明显高于正常对照组(P均<0.01).与LPS刺激组比较,LPS+APC组和LPS+血必净组PAR-1、TF、IL-6、TNF-α水平均显著降低(P<0.05或P<0.01);且LPS+血必净组24 h、48 h时PAR-1、TF、TNF-α水平均显著低于LPS+APC组(P<0.05或P<0.01).结论血必净注射液和APC均可显著降低LPS刺激大鼠单核细胞PAR-1表达,减少TF、IL-6、TNF-α分泌,血必净的作用较APC明显.     

血必净注射液对家兔大动脉病变所致缺血/再灌注损伤的作用研究

目的 探讨家兔缺血/再灌注(I/R)损伤模型建立后血液中丙二醛(MDA)、白细胞介素-1β(IL-1p)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、天冬氨酸转氨酶(AST)、肌酐(Cr)的变化,以及血必净注射液对急性I/R损伤的肝肾保护作用.方法 清洁级家兔60只,按随机数字表法分为6组:正常组,假手术组行同侧股动脉部位皮肤切开缝合,模型组以及血必净低、中、高剂量治疗组;建立I/R损伤模型(股动脉缺血4h后再通)后即刻及12、36、60h分别从耳缘静脉注射2ml/kg生理盐水或0.33、0.66、1.32 g/kg血必净注射液.各组于术后6、12、24及72h分别抽血检测血清中MDA、IL-1β、TNF-α、AST、Cr.结果 模型组术后各时问点MDA、IL-1 β、TNF-α及术后72 h AST、Cr均显著高于正常组和假手术组.与模型组比较,血必净各组随剂量增加各指标依次降低,血必净高剂量组6、12、24、72 h血清MDA( μmol/L)、IL-1 β(ng/L)和TNF-α(μg/L)均明显降低(MDA:9.74±3.71比12.35±4.64,11.26 ±4.14比12.82±3.85,9.72±2.25 比 13.30 ±2.83,9.12 ±2.72比13.10±2.72;IL-1β:83.49±12.79比100.09±17.53,85.10±11.75比102.64±19.64,75.97±11.29比99.24±14.62,81.96±14.81比99.59±12.05;TNF-α:8.95±1.13比9.94±1.29,8.79±1.80比9.56±0.89,8.27±1.83比9.51±1.32,7.23±1.39比9.23±1.05,P＜ 0.05或P＜0.01);24h、72 h时血必净低、中、高剂量组血清AST(U/L)和Cr( μmol/L)均显著降低(AST 24 h:24.00±1.27、23.80±1.11、22.90±1.65比39.50±1.73,72 h:32.15±1.95、32.90±1.77、32.25±2.25比52.86±2.43;Cr 24 h:273.78±17.04、267.07±19.59、265.25±15.59比347.60±18.83,72 h:437.38±18.48,343.77±16.79、351.48±20.22比437.50±19.86,均P＜0.01).结论 I/R损伤可导致明显的全身炎症反应和氧自由基损伤,高剂量血必净注射液可以显著减轻全身炎症反应,降低血清MDA水平,低、中、高剂最血必净注射液治疗均能减少肝肾损伤,具有保护肝肾功能的作用.     

韶关市农村留守儿童孤独感状况调查

目的了解广东省韶关市农村地区留守儿童孤独感现状及其影响因素。方法对韶关市某地区两所农村小学3～6年级学生中的489名留守儿童采用儿童孤独量表和自编调查表进行问卷调查。结果17．6％留守儿童存在孤独感，不同性别孤独感发生率无差异性，不同年龄及不同年级间孤独感发生率差异均有极显著性（P〈0.01）；随年级增加，孤独感发生率呈下降趋势（X^2趋势=5．970，P〈0.05）。留守儿童孤独感与健康状况、学习成绩、学习困难程度、父母教育方式、父母间关系和老师教育方式等因素显著相关（P〈0.01～0．05）。结论农村地区留守儿童中存在一定程度的孤独感问题，老师和家长应以正确的态度和方法对待留守儿童，以减少其孤独感的发生。     

产科新生儿不同部位经皮测黄报警预值的可靠性观察

目的对比观察产科新生儿不同部位经皮胆红素（TCB）报警预值的可靠性。方法132例产科新生儿采取随机数字分组法分为正常产组和剖宫产组各66例,新生儿均于产后第4天同一时间点应用KJ8000经皮测黄仪分别测量额、胸、腹、额胸、额胸腹TCB值,TCB〉12．9mg／dl者,取得亲属同意抽取静脉血检测血清胆红素（SB）,对比分析不同部位TCB及其与sB值的差异。结果两组分别有17例或21例达到TCB报警预值。两组TCB或sB相同方法及相同部位比较,差异无统计学意义（P〉0．05）;两组TCB不同部位对比,额部值最低、胸部值最高,且与其他部位同组对比差异均有统计学意义（P〈0．01）;两组sB值对比差异无统计学意义（t=1．53,P〉0．05）,与不同部位TCB对比均以胸部数值差异无统计学意义（P〉0．05）,而与其他部位TCB两组差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论正常产与剖宫产新生儿术后sB对比差异无意义;TCB动态监测以胸部结果更接近SB。     

Determination of loss of quality of life

Physiatrists are a valuable resource in legal settings, where assessment of functional capacity to perform work and of future medical needs must be determined. Physiatrists help determine what future medical care is needed to restore and maintain an individual at the maximum level of life function. This article focuses on the use of a quality of life (QOL) rehabilitation model, rather than a medical model, for enhancing functional performance, modifying environments, and facilitating patient coping. We discuss use of the QOL model to describe and influence a patient's physical, psychological, cognitive, vocational/economic, and social/leisure domains.     

护士选择性应用静脉留置针现状分析

[目的]了解护士选择性应用留置针的现状以及主要影响因素,为指导临床留置针合理应用提供理论依据。[方法]采用自设问卷对138名护士留置针选择性使用情况及其影响因素进行调查。[结果]约1／4的护士并不知道应选择性使用留置针,近60％的护士在实际工作中选择留置针的意识较差;护士选择性应用留置针的决策受多因素影响;不同科室、职称及是否具有带教资格选择性应用留置针的影响因素不尽相同;绝大部分护士希望参加选择性应用留置针相关内容的培训。[结论]临床护士操作前考虑留置针选择的意识有待加强。建议实施有针对性的培训以提高护士选择性应用留置针的能力。     

血液透析患者家庭护理提供者的生活质量调查

目的:了解江汉油田血液透析(血液透析)患者家庭护理提供者(护理者)的生活质量。方法:对60例血液透析患者的家庭护理提供者进行一般情况和生活质量综合评定问卷(QOLI-74)调查,并进行相关性和多因素回归分析。结果:家庭护理提供者各维度的主观生活满意度与其客观指标相关,但也与其需求、年龄、文化程度、与患者的关系有关。结论:客观状态是影响主观生活满意度的重要因素,同时应考虑护理者的需求、年龄、文化程度、与患者的关系对护理者主观生活满意度的影响。