百里醌联合吉西他滨对胰腺癌BxPC-3细胞体外生长的影响

目的 探讨百里醌联合吉西他滨对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法 采用CCK-8法检测细胞相对活性,Hoechst染色法及流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blot法检测凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、XI-AP）、半胱天冬酶（cleaved-caspase-3、cleaved-caspase-9）、PTEN、Akt及phospho-Akt蛋白的表达.结果 百里醌呈浓度依赖性地抑制胰腺癌BxPC-3细胞增殖,诱导细胞凋亡.吉西他滨组（GEM）、百里醌组（TQ）、百里醌联合吉西他滨组（TQ＋GEM）、百里醌与吉西他滨序贯给药组（TQ-GEM）相对细胞活性分别为83.7％±4.1％、51.8％±6.0％、48.25％±6.50％、33.3％±3.9％;早期凋亡率分别为12.2％±3.8％、30.4％±4.3％、43.5％±5.7％、58.3％±6.1％;各组相对细胞活性均明显低于对照组（P＜0.05）,而细胞凋亡率显著增高（P＜0.05）;与GEM组比较,TQ-GEM组与TQ＋ GEM组相对细胞活性明显下调（P ＜0.001）,凋亡率明显上调（P ＜0.001）;TQ-GEM组较TQ＋ GEM组出现更明显的增殖受抑（P ＜0.001）,更高的细胞凋亡率（P＜0.001）.百里醌-吉西他滨序贯给药作用于胰腺癌BxPC-3细胞后,BxPC-3细胞中Bax蛋白表达明显下调,而Bcl-2、XIAP、cleaved caspase-3、cleaved caspase-9蛋白表达明显上调.百里醌可显著上调BxPC-3细胞PTEN的表达,明显抑制Akt磷酸化.结论 百里醌可明显增强吉西他滨对体外胰腺癌细胞生长抑制作用,可能是通过上调PTEN,Akt去磷酸化,促使Bcl-2、XIAP表达上调及Bax表达下调,活化caspase-3、caspase-9诱导细胞凋亡而实现。     

吉西他滨联合槲皮素对胰腺癌细胞Panc-1凋亡的影响研究

目的研究吉西他滨联合槲皮素抑制胰腺癌细胞Panc-1增殖,促进其凋亡的效果.方法设立槲皮素(终浓度为50μM)、吉西他滨(50μg/ml)、吉西他滨联合槲皮素和对照组4组,MTS法检测药物对Panc-1细胞凋亡的影响,流式细胞仪检测联合药物处理对细胞凋亡和细胞周期的影响,最后应用荧光定量PCR法测定凋亡相关基因BCL-2家族蛋白的相对表达.结果吉西他滨联合槲皮素后,对胰腺癌促凋亡效果增强,同时改变细胞周期,使其S期减少,BCL-2家族促凋亡基因表达上调.结论槲皮素能够显著增强吉西他滨抑制胰腺癌恶性增殖的作用.     

Smac过表达对人胰腺癌MiaPaCa-2细胞凋亡及生长的影响

目的 探讨Smac基因过表达对人胰腺癌细胞MiaPaCa-2凋亡及细胞生长的影响.方法 从人白血病K562细胞中扩增Smac cDNA,构建含Smac cDNA的真核表达载体pEGFP-C1-Smac,并转染人胰腺癌细胞MiaPaCa-2.流式细胞仪检测分析细胞凋亡百分率,凋亡相关蛋白Survivin、Bcl-2的表达...     

羟喜树碱对人胰腺癌细胞增殖及凋亡的影响

目的：研究羟喜树碱（ＨＣＰＴ）体外抑制人胰腺癌细胞株ＳＷ－１９９０增殖并诱导其凋亡的作用。方法：体外培养的胰腺癌细胞经不同质量浓度（１．５６２．５,３．１２５,６．２５,１２．５,２５．５０,１００μｇ／ｍｌ）的ＨＣＰＴ处理２０￣２４ｈ后,用ＭＴＴ法测定细胞增殖情况,再分别以Ａｎｎｅｘｉｎ Ⅴ早期凋亡检测试剂盒、电子显微镜、流式细胞术和ＴＵＮＥＬ标记以及ｂｃｌ－２免疫细胞化学标记检测细胞凋亡情况。     

细梗香草皂苷联合吉西他滨对胰腺癌细胞BxPC-3抑制作用的研究

目的观察细梗香草皂苷（LC）和吉西他滨(GEM）单药及联合用药对人胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响,探究LC抗胰腺癌的作用机制。方法培养人胰腺癌BxPC-3细胞时加入不同浓度梯度的LC与GEM,采用MTS法检测细胞增殖抑制率,计算两种药物的半抑制浓度（IC50）和联合作用指数（CI）。将细胞分为4组,A组（对照空白）、B组（GEM1滋mol/L）、C组（LC15滋g/ml）和D组（GEM1滋mol/L+LC15滋g/ml联合用药）,培养后采用AnnexinⅤ-FITC/PI法观察LC与GEM对BxPC-3细胞的诱导凋亡作用;Westernblot法检测抗多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）、抗半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的表达。结果8~64滋g/ml的LC及1.25~20滋mol/L的GEM均对BxPC-3细胞的增殖有抑制作用,且呈浓度依赖性,其IC50分别为16.55滋g/ml和1.27滋mol/L。15滋g/ml的LC与各个浓度的的GEM协同作用最强,CI值为0.53~0.65。B、C、D组的早、晚期凋亡率与A组比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）,且D组与B、C组的早期凋亡率比较差异均有统计学意义（均P＜0.01）。C、D组与A组比较,PARP蛋白表达水平明显降低（均P＜0.05）;B、C、D组与A组比较,Caspase-3蛋白表达水平增加（均P＜0.05）。结论LC有抑制胰腺癌细胞生长的作用,与GEM联合作用效果更好;其作用机制可能是通过激活Caspase-3表达,分解PARP,从而诱导细胞凋亡。     

薏苡仁注射液联合吉西他滨对人肝癌细胞株Bel-7402增殖及凋亡的影响

目的 研究薏苡仁注射液(coix seed triglyceride)联合吉西他滨(gemcitabine)对人肝癌细胞株Bel-7402增殖及凋亡的影响及可能机制。 方法 本实验以体外培养的人肝癌细胞株Bel-7402为研究对象,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、克隆形成实验测定薏苡仁、吉西他滨及两药联合作用对人肝癌细胞株Bel-7402活性及增殖能力的影响,流式细胞仪测定凋亡率,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定Caspase-3、Bcl-2表达水平，Image-pro plus 6.0计数克隆形成细胞集落数。使用SPSS 17.0统计学软件对实验结果进行分析。 结果 薏苡仁及吉西他滨对人肝癌细胞株Bel-7402活性及增殖均有抑制作用，两者联合具有协同作用(F=509.677,P<0.01;F=562.100，P<0.01)。薏苡仁联合吉西他滨对人肝癌细胞株Bel-7402的凋亡率为(76.3±1.6)%，明显高于吉西他滨的单药作用[(53.2±2.0)%]及薏苡仁[(42.4±1.8)%]的单药作用(F=46.742，P<0.01)。两药联合组细胞Caspase-3表达增加(F=38.264，P<0.01)，Bcl-2表达量降低(F=4.817，P<0.05)。 结论 薏苡仁可能通过影响细胞凋亡相关因子如Caspase-3、Bcl-2抑制肝癌细胞活性及增殖，诱导细胞凋亡，起到对吉西他滨化疗增敏的作用。      

大黄素联合吉西他滨对胰腺癌细胞生长的影响

目的 探讨大黄素联合吉西他滨对体内胰腺癌生长的影响及其机制.方法 建立胰腺癌裸鼠原位移植瘤模型,分别给予0.9%氯化钠溶液（对照组）、大黄素（大黄素组）、吉西他滨（吉西他滨组）及大黄素联合吉西他滨（大黄素联合吉西他滨组）治疗,观察各组对裸鼠胰腺肿瘤生长的影响,同时采用免疫组织化学法检测各组裸鼠胰腺肿瘤组织中Ki-67和Survivin表达的情况.结果 与对照组比较,其他各组均可明显抑制裸鼠胰腺肿瘤生长;与单药组和对照组比较,大黄素联合吉西他滨组肿瘤生长显著被抑制;大黄素单独或联合吉西他滨可下调裸鼠胰腺肿瘤中Ki-67和Survivin的阳性表达.结论 大黄素可增强吉西他滨对体内胰腺癌生长的抑制作用,该作用可能通过下调Survivin而实现.     

丁酸钠对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡机制的影响

目的:探讨丁酸钠对胰腺癌BxPC-3细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:采用MTT法观察不同浓度丁酸钠对BxPC-3细胞增殖的抑制作用;应用流式细胞仪检测丁酸钠作用于BxPC-3细胞后的凋亡情况;TRAP-ELISA法检测细胞端粒酶活性的变化;RT-PCR技术分析人端粒酶逆转录酶(hTERT)、bcl-2 mRNA的表达水平。结果:丁酸钠作用BxPC-3细胞能明显抑制细胞增殖,其作用具有时间和剂量依赖性。丁酸钠处理72 h的BxPC-3细胞凋亡率明显提高(P<0.01),S期细胞比例显著下降(P<0.05),G0/G1期细胞比例显著升高(P<0.05)。经丁酸钠处理的实验组端粒酶活性为0.96±0.12,未经丁酸钠处理的对照组端粒酶活性为4.18±0.34,二者之间差异有显著性(P<0.05)。丁酸钠处理的实验组hTERT mRNA水平为0.168±0.045,与对照组0.685±0.141比较差异有统计学意义(P<0.01),bcl-2实验组水平为0.138±0.034,与对照组0.715±0.026比较有统计学差异。结论:丁酸钠具有强烈诱导胰腺癌BxPC-3细胞凋亡的作用,其发生机制与丁酸钠下调hTERT Bcl-2 mRNA表达水平直接相关。     

关于晚期胰腺癌的Meta分析:吉西他滨联合化疗与吉西他滨单药

目的通过Meta分析,探讨吉西他滨联合化疗和吉西他滨单药化疗在治疗晚期胰腺癌病人中的意义。方法通过MEDLINE、EMBASE、ASCO论文集等数据库检索国内外已发表和未发表的相关文献。选择治疗组为吉西他滨联合化疗,对照组为吉西他滨单药化疗的晚期胰腺癌的随机对照试验。由2位评价者分别收集资料,按纳入标准入选,主要对总生存率进行Meta分析,其次是客观缓解率、临床受益率、肿瘤进展时间/无进展生存、毒副反应。结果共纳入19个随机对照试验。在治疗晚期胰腺癌方面,吉西他滨联合化疗与吉西他滨单药化疗比较,半年生存率提高4%(P=0.02),1年生存率提高3%(P=0.05),客观缓解率提高5%(P=0.01),半年肿瘤进展时间/无进展生存提高10%(P<0.00001),临床受益率提高7%(P=0.06),但毒副反应增加(只统计WHO3～4度毒性),例如中性粒细胞减少症增加7%(P=0.04)、血小板减少症增加6%(P=0.002)、恶心/呕吐增加3%(P=0.04)。结论在晚期胰腺癌的治疗上,吉西他滨联合化疗与吉西他滨单药化疗对比,能提高总生存期(半年生存率)、客观缓解率和半年肿瘤进展时间/无进展生存,差异有统计学意义,但其副作用也增加。吉西他滨联合化疗在晚期胰腺癌治疗上有很好的前景。     

三氧化二砷诱导人胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的：研究三氧化二砷（As2O3)体外抑制人胰腺癌细胞株SW1990增殖及诱导其凋亡的作用。方法：以不同浓度的As2O3处理SW1990,用MTT法测定细胞增殖情况,并利用AnnexinⅤ早期凋亡检测试剂盒、电子显微镜、流式细胞仪以及免疫组化染色等检测细胞凋亡情况。结果：（1）As2O3抑制SW1990细胞增殖的作用与相同浓度的顺铂相似。（2）10ug/mlAs2O3作用12h后即观察到细胞凋亡明显增多,48h后凋亡率达24%;免疫组化染色证实As2O3作用后细胞Bcl-2表达阳性率较作用前及对照组减少,Bcl-2/Bax比值耳降。结论：As2O3体外可抑制SW1990增殖,其主要途径是诱导细胞凋亡。     

吉西他滨联合外照射诱导人乳腺癌MCF-7细胞凋亡

目的：研究吉西他滨联合外照射诱导人乳腺癌细胞系MCF-7细胞产生凋亡的作用。方法：采用MTT法检测吉西他滨（D）,外照射（R）,吉西他滨和外照射（R＋D）分别对MCF-7细胞的抑制作用,流式细胞仪检测各组细胞凋亡指数,电子显微镜观察MCF-7细胞凋亡的形态学特征,结果：细胞生长抑制率随吉西他滨作用浓度的增加而逐渐增大;（R＋D）组与D组及R组凋亡指数比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：吉西他滨能诱导人乳腺癌细胞产生凋亡,并能明显增强放疗对MCF-7细胞凋亡的诱导作用。     

姜黄素联合吉西他滨对肝癌细胞HepG2增殖、凋亡的影响

目的:观察姜黄素、吉西他滨单药及联合用药对肝癌细胞HepG2增殖和凋亡的影响。方法:使用不同浓度的姜黄素、吉西他滨以及两药联合分别作用肝癌细胞HepG2 24h、48h、72h。MTT法检测上述药物单用或联用对HepG2细胞的生长抑制作用;采用流式细胞仪检测其对HepG2细胞凋亡率的影响。结果:姜黄素、吉西他滨单药及联合用药对HepG2细胞有明显的生长抑制作用,存在时间剂量依赖关系,均可诱导HepG2细胞凋亡,联合用药有协同作用。结论:姜黄素、吉西他滨能够抑制HepG2细胞增殖,诱导细胞凋亡,两药联用有协同作用。     

吉西他滨联合奥沙利铂与吉西他滨单独化疗治疗晚期胰腺癌的近期疗效比较

目的观察吉西他滨联合奥沙利铂（GEMOX方案）与吉西他滨单独（GEM方案）治疗晚期胰腺癌的近期疗效、临床受益反应、生存率和严重不良反应的比较．方法经病理组织学或细胞学证实的60例胰腺癌患者。随机对照分为吉西他滨联合奥沙利铂组（GEMOX组）与吉西他滨单独组（GEM组）进行治疗，各30例．结果可评估病例54例，GEMOX组有效率（CR＋PR）为68．0％，GEM组有效率（CR＋PR）为37．9％，两组差异有统计学意义（P〈0．05）；GEMOX组和GEM组的临床受益反应（CBR）分别为84．0％和65．5％，两者差异无统计学意义（P〉0．05）；GEMOX组和GEM组的6月生存率分别为84．0％和62．1％（P〉0．05），12月生存率分别为64．0％和37．9％（P〉0．05），两组差异无统计学意义；GEMOX组和GEM组的严重不良事件总发生率分别为36．0％和44．8％，无统计学差异（P〉0．05）．结论在近期疗效方面，吉西他滨联合奥沙利铂优于吉西他滨单独治疗晚期胰腺癌．     

人胰腺癌细胞株HHIP基因甲基化状态检测和分析

目的:探讨人胰腺癌细胞株HHIP表达与其甲基化的关系,为胰腺癌发生机制的研究提供新的信息。方法:以人胰腺癌细胞株 BxPC-3、CFPAC-1、PANC-1、AsPC-1和PaTu8988s为研究对象,用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫细胞化学染色(S-P)法检测去甲基化制剂——DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR) 处理前后各胰腺癌细胞株HHIP mRNA/蛋白表达的变化,用甲基化特异性 PCR(MSP)结合测序检测HHIP基因CpG岛甲基化状态。结果:5-Aza-CdR处理前,胰腺癌细胞株BxPC-3、CFPAC-1、PANC-1、AsPC-1和PaTu8988s无HHIP mRNA/蛋白表达;经5-Aza-CdR处理后,HHIP mRNA/蛋白重新表达。MSP结合测序显示上述胰腺癌细胞株HHIP基因CpG岛存在高甲基化。结论:人胰腺癌细胞株HHIP表达抑制与其基因CpG岛高甲基化相关。HHIP 基因CpG岛高甲基化可能在胰腺癌的发生、发展中起一定作用。     

吉西他滨单药与吉西他滨和卡培他滨联合化疗对进展期胰腺癌患者疗效的随机Ⅲ期研究

1文献来源 David C randomized Gemcitabine , Ian C, Deborah DS, et al. Phase III comparison of Gemcitabine versus plus Capecitabine in patients with advanced pancreatic cancer [J]. J Clin Oncol,2009,27（33）：5513-5518.     

吉西他滨联合热疗对胰腺癌PANC-1细胞凋亡的影响及机制研究

目的:探索吉西他滨(GEM)联合热疗对胰腺癌PANC-1细胞凋亡的影响及机制。方法:将人胰腺癌PANC-1细胞随机分为对照组(无任何处理)、GEM组(给予GEM)和热化疗组(给予热疗联合GEM)。比较各组细胞增殖、凋亡、活性氧(ROS)、特异性蛋白1 (Sp1)及其下游蛋白表达情况。评估ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对各组细胞增殖及相关蛋白表达的影响。结果:GEM对PANC-1细胞增殖的抑制作用呈剂量和时间依赖性。30μmol/L GEM对PANC-1细胞增殖的抑制作用高于其他剂量(均P<0.05)。在GEM治疗前热疗1 h细胞存活率显著低于GEM与热疗同时1 h和GEM治疗后热疗1 h(均P<0.05)。与对照组比较,GEM组和热化疗组细胞凋亡率增加,且热化疗组高于GEM组(均P<0.05)。与对照组比较,GEM组和热化疗组ROS升高,且热化疗组高于GEM组(均P<0.05)。与对照组比较,GEM组和热化疗组Sp1、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)蛋白表达水平降低,且热化疗组低于GEM组(均P<0.05)。与GEM组比较,热化疗组环氧合酶-2(Co...     

吉西他滨联合立体定向放疗对局部晚期胰腺癌效果

目的 评价吉西他滨联合立体定向放射治疗局部晚期胰腺癌的效果及安全性。方法 局部晚期胰腺癌病人37例,其中接受吉西他滨化疗联合立体定向放疗(联合组)18例,仅接受吉西他滨化疗(化疗组)19例。所有病人随访4~24个月,观察近期疗效、远期疗效及不良反应发生情况。结果 联合组和化疗组近期有效率分别为77.8%、36.8%,两组疗效比较差异有显著性(uc=2.542,P<0.05)。联合组病人中位总生存时间为13.8个月,化疗组为9.5个月。两组不良反应发生率差异无显著性(P>0.05)。结论 吉西他滨联合立体定向放射治疗局部中晚期胰腺癌能提高局部控制率,延长总生存时间,且具有很高安全性。     

姜黄素对人QBC939细胞生长抑制与凋亡的影响

目的 :研究姜黄素 (Curcumin)对人胆管癌细胞系QBC939的生长抑制与促凋亡作用。方法 :采用MTT法检测姜黄素对胆管癌细胞的抑制作用 ;相差显微镜 ,电镜下观察细胞形态变化 ;琼脂糖凝胶电泳测定DNALadder ;流式细胞术分析DNA含量。结果 :1,2 ,4 ,8,和 16mg·L-1姜黄素均能抑制人胆管癌细胞QBC939的生长 ,且抑制率具有浓度和时间依赖性 ,IC50 为 5 6mg·L-1。 8mg·L-1姜黄素作用后 ,QBC939细胞出现典型的凋亡形态特征 ,DNALadder出现 ,并检测到亚二倍体凋亡峰。结论 :Curcumin能有效地抑制QBC939细胞生长并促进其凋亡。