化学致剂马桑内酯导致大鼠海马神经细胞内Ca~(2 )升高

于培养的新生大鼠海马神经细胞,应用ｆｕｒａ２ 荧光检测技术,观察了致疒间剂马桑内酯对单个海马神经细胞内钙离子浓度（［Ｃａ２＋ ］ｉ）的影响。培养液内马桑内酯浓度达１０－ ８ｍ ｏｌ／Ｌ时可引起［Ｃａ２＋ ］ｉ增加,［Ｃａ２＋ ］ｉ随给药浓度的提高而升高。马桑内酯浓度达５×１０－ ８ｍ ｏｌ／Ｌ时,［Ｃａ２＋ ］ｉ维持于稳定的高水平上。当胞外无Ｃａ２＋时,马桑内酯仍可引起［Ｃａ２＋ ］ｉ的升高;Ｌ型钙通道阻断剂ｖｅｒａｐａｍ ｉｌ不能阻断马桑内酯的上述作用。结果提示,海马神经细胞在致疒间剂作用下,发生Ｃａ２＋ 内流及胞内钙池释放现象。     

马桑内酯对神经元内游离钙作用的研究

目的研究致癫痫剂马桑内酯对大脑皮质神经元内游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ）的作用及其作用途径，以探讨马桑内酯的致癫痫机制。方法利用培养１４天的大鼠大脑皮层神经元和ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子检测系统，观察不同浓度的马桑内酯对［Ｃａ２＋］ｉ的作用，并分别用钙通道阻滞剂维拉帕米和２－氨基膦酸基戊酸（ＡＰ５）及钙螯合剂ＥＧＴＡ，观察马桑内酯作用的可能途径。结果马桑内酯使［Ｃａ２＋］ｉ水平升高，在（２５～５００）×１０－６ｍｏｌ／Ｌ范围内，呈明显的剂量效应关系；加入５×１０－３ｍｏｌ／ＬＥＧＴＡ至介质中后，马桑内酯作用消失，补充１０－３ｍｏｌ／Ｌ氯化钙后作用又出现；预先加入５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ维拉帕米可明显拮抗其升钙作用，而加入１０－５ｍｏｌ／ＬＡＰ５则阻断作用不明显。结论致癫痫剂马桑内酯可使神经元内［Ｃａ２＋］ｉ升高，其升高［Ｃａ２＋］ｉ的作用依赖于细胞外钙，电压依赖性钙通道可能是其升高［Ｃａ２＋］ｉ的主要途径。     

白细胞介素1β对谷氨酸诱导的培养海马神经元单细胞游离钙离子？…

目的 研究白细胞介素１β（ＩＬ－１β）促进癫痫发作和神经细胞损伤的细胞内机制。方法 应用ＥＰＣ－９光电联合检测系统检测ＩＬ－１β对培养海马神经元单个细胞内游离钙离子（［Ｃａ＾２＋］ｉ）浓度的影响,以及ＩＬ－１β与谷氨（Ｇｌｕ）共同作用对神经元［Ｃａ＾２＋］ｉ浓度的影响。结果 不同浓度的ＩＬ－１β（５、１０、２０、３０、５０及１００Ｕ／ｍｌ）均不能引起神经元［Ｃａ＾２＋］ｉ浓度的显著变化,而ＩＬ－１     

血小板活化因子对神经细胞内游离钙离子作用的研究

目的观察脑损害时病理活性介质血小板活化因子（ｐｌａｔｅｌｅｔａｃｔｉｖａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＰＡＦ）及其拮抗剂对神经细胞内游离钙离子（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度的影响,探讨ＰＡＦ致使神经细胞内［Ｃａ２＋］ｉ超载的途径及其作用机制。方法采用ＡＲＣＭＭＩＣ阳离子检测系统,观察不同浓度的ＰＡＦ以及其特异性受体拮抗剂ＢＮ５２０２１和非特异性拮抗剂ＭＫ８０１对体外培养１４天的大鼠皮层神经元［Ｃａ２＋］ｉ浓度的影响。结果５×１０－６ｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＦ可使培养神经细胞［Ｃａ２＋］ｉ浓度明显增高,与对照组比较差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）;ＢＮ５２０２１可明显阻止ＰＡＦ所致的神经细胞内［Ｃａ２＋］ｉ超载,在此基础上加用ＭＫ８０１可使神经细胞内［Ｃａ２＋］ｉ水平下降的更为明显。结论ＰＡＦ可通过多种渠道致使神经细胞内钙离子超载。     

NO—cGMP—Glu—[Ca^2＋]i途径在隔—海马通路损伤的…

为探讨海马中一氧化氮影响大鼠学习能力的机制，观察海马中一氧化氨（ＮＯ）降低后海马ｃＧＭＰ、谷氨酸（Ｇｌｕ）、胞内游离钙离子（［Ｃａ＾２＋］ｉ含量的变化。结果表明海马中ＮＯ降低的同时ｃＧＭＰ、Ｇｌｕ和［Ｃａ＾２＋］ｉ也降低。提示海马中ＮＯ可能是通过ＮＯ－ｃＧＭＰ－Ｇｌｕ－［Ｃａ＾２＋］ｉ途径影响大鼠的学习能力。     

改良Fura—2双波长荧光法测定兔脑缺血脑片[Ca^2＋]i

采用新型Ｃａ２＋荧光指示剂Ｆｕｒａ－２建立双波长法测定兔ＭＣＡＯ局灶脑缺血脑片游离钙（［Ｃａ２＋］ｉ），结果显示脑缺血后神经细胞内［Ｃａ２＋］ｉ明显升高。     

白细胞介素1β对谷氨酸诱导的培养海马神经元单细胞游离钙离子浓度的影响

目的研究白细胞介素１β（ＩＬ１β）促进癫痫发作和神经细胞损伤的细胞内机制。方法应用ＥＰＣ９光电联合检测系统检测ＩＬ１β对培养海马神经元单个细胞内游离钙离子（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度的影响,以及ＩＬ１β与谷氨酸（Ｇｌｕ）共同作用对神经元［Ｃａ２＋］ｉ浓度的影响。结果不同浓度的ＩＬ１β（５、１０、２０、３０、５０及１００Ｕ／ｍｌ）均不能引起神经元［Ｃａ２＋］ｉ浓度的显著变化,而ＩＬ１β却能剂量依赖性地促进Ｇｌｕ对神经元［Ｃａ２＋］ｉ浓度的升高作用。ＭＫ８０１抑制了Ｇｌｕ的升钙作用,也抑制了ＩＬ１β对Ｇｌｕ升钙的促进作用,而ｖｅｒａｐａｍｉｌ对Ｇｌｕ和ＩＬ１β的作用均无明显影响。结论ＩＬ１β作为一种神经调质,促进Ｇｌｕ激活Ｎ甲基Ｄ天门冬氨酸（ＮＭＤＡ）受体,并介导细胞内游离钙离子浓度增高,提高神经细胞的兴奋性。     

脑缺血再灌注[^3H]——三磷酸肌醇放射活性及突触体游离C …

本文研究了大鼠脑缺血再灌流时［＾３Ｈ］－三磷酸肌醇［＾３Ｈ］－ＩＰ３）放射活性及突触体游离Ｃａ＾２＋（［Ｃａ＾２＋］ｉ）的变化，并用苯甲基磺酰氟化物（ＰＭＳＦ）治疗，观察其对［＾３Ｈ］－ＩＰ３放射活性及突触体［Ｃａ＾２＋］ｉ的影响。结果：脑缺血１ｍｉｎ［＾３Ｈ］－ＩＰ３放射活性非常显著地增高。缺血２０ｍｉｎ、缺血２０ｍｉｎ再灌注１ｈ、６ｈ、２ｄ［＾３Ｈ］－ＩＰ３放射活性非常显著地降低。缺血２０ｍ，     

全脑缺血后PAF和细胞内钙离子的变化及相关机制研究

目的 探讨血小板活化因子（ＰＡＦ）在缺血性脑损伤中的作用机制。方法 大鼠全脑缺血再灌注后,分别应用放免法和Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光法测定海马组织中ＰＡＦ、突触体游离钙（「Ｃａ＾２＋」ｉ）浓度。结果 缺血２０ｍｉｎ后,ＰＡＦ含量显著高于对照组,再灌注２４０ｍｉｎ时已降至对照组水平,再灌注４８０ｍｉｎ后出现迟发性升高。对应「Ｃａ＾２＋」ｉ值随所观察的再灌注时间延长而增加。Ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ（钙拮抗剂）能明显降低再灌注４８０ｍｉｎ时ＰＡＦ和「Ｃａ＾２＋」ｉ水平。结论 全脑缺血再灌主后,ＰＡＦ的异常代谢与「Ｃａ＾２＋」ｉ水平密切关联,协同参与了神经细胞损伤的发生及发展。     

脑缺血病人血小板肌球蛋白轻链激酶和Ca2+、Mg2+-ATP酶活性及其与[Ca2+]i关系的研究

目的探讨急性缺血性脑血管病血小板肌球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）和Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性的变化及与血小板胞浆游离钙浓度［Ｃａ２＋］ｉ的关系。方法用３２Ｐ同位素掺入法和比色法分别测定５８例脑缺血病人，及３５名健康对照者血小板ＭＬＣＫ和Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性。用荧光钙指示剂Ｆｕｒａ－２负载血小板扫描的方法，测定脑缺血病人血小板［Ｃａ２＋］ｉ浓度。结果ＴＩＡ组和脑梗死组ＭＬＣＫ活性与对照组相比均有明显增加（Ｐ＜０．０１），而Ｃａ２＋Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性均低于对照组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）。ＴＩＡ组和脑梗死组血小板静息［Ｃａ２＋］ｉ；均高于对照组；血小板静息［Ｃａ２＋］ｉ与血小板ＭＬＣＫ活性呈显著正相关（Ｐ＜０．０１），而与血小板Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性呈负相关（Ｐ＜０．０５）。结论血小板ＭＬＣＫ和Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋－ＡＴＰ酶活性与急性缺血性脑血管病的发生有密切关系，ＭＬＣＫ活性的变化可能是脑缺血病人血小板活化的分子基础。     

丁咯地尔抑制NE和GIu引起的单个脑细胞游离钙增高

目的：研究丁咯地尔对去甲肾上腺素（ＮＥ）和谷氨酸（Ｇｌｕ）引起大鼠单个脑细胞内游离钙增高的影响。方法：应用ＡＲ－ＣＭ－ＭＩＣ阳离子测定系统测量细胞内游离钙（［Ｃａ２＋］１）．结果：细胞外钙为 １．３ ｍｍｏｌ·Ｌ－１,丁咯地尔 ０．ｌ,ｌ．０,１０．０μｍｏｌ·Ｌ－１对细胞静息［Ｃａ２＋］．无明显影响,对ＮＥ诱导的［Ｃａ２＋］增高明显抑制,对Ｇｌｕ 诱导的［Ｃａ２＋］ 增高具有一定的抑制作用。结论：丁咯地尔能抑制ＮＥ和Ｇｌｕ 引起的单个脑细胞游离钙增高。     

脑缺血再灌流［~3H］—三磷酸肌醇放射活性及突触体游离Ca~（2＋）的变化

本文研究了大鼠脑缺血再灌流时［３Ｈ］—三磷酸肌醇（［３Ｈ］－ＩＰ３）放射活性及突触体游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）的变化，并用苯甲基磺酰氟化物（ＰＭＳＦ）治疗，观察其对［３Ｈ］－ＩＰ３放射活性及突触体［Ｃａ２＋］ｉ的影响。结果：脑缺血１ｍｉｎ［３Ｈ］－ＩＰ３放射活性非常显著地增高。缺血２０ｍｉｎ、缺血２０ｍｉｎ再灌流１ｈ、６ｈ、２ｄ［３Ｈ］－ＩＰ３放射活性非常显著地降低。缺血２０ｍｉｎ突触体［Ｃａ２＋］ｉ非常显著地增高，至再灌流６ｈ达到最高水平。应用ＰＭＳＦ治疗能显著地抑制突触体［Ｃａ２＋］ｉ的升高。     

脑缺血病人血小板肌球蛋白轻链激酶和Ca^2＋,Mg^2＋—ATP？…

目的 探讨急性缺血性脑血管病血小板球蛋白轻链激酶（ＭＬＣＫ）和Ｃａ＾２＋Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性的变化及与血小板胞浆游离钙浓度（Ｃａ＾２＋）ｉ浓度,结果 ＴＩＡ组和脑梗死组ＭＬＣＫ活性与对照组相比均有明显增加（Ｐ〈０．０１）,而Ｃａ＾２＋,Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性均低于对照组（Ｐ〈０．０５,Ｐ〈０．０１）,ＴＩＡ组和脑梗死组血小板静息（Ｃａ＾２＋）ｉ均高于对照组;血小板静息（Ｃａ＾２＋）ｉ与血小板     

糖皮质激素对大鼠肾上腺嗜铬细胞受激动所致儿茶酚胺分泌及细胞内钙的快速

为研究糖皮质激素对原代培养大鼠肾上腺嗜铬细胞（ＡＭＣＣ）受激动所致儿茶酚胺的快速作用，用ＨＰＬＣ－ＥＤ方法检测了乙酰胆碱（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）烟碱（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）毒蕈碱（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）及５５ｍｍｏｌ／Ｌ的ＫＣｌ在２０ｍｉｎ内所引起的儿茶酚胺量，地塞米松（Ｄｅｘ，１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ及１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）及皮质酮（１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ）可以抑制ＡＭＣＣ的儿茶酚分泌，１０＾－７ｍｏ     

脑梗塞急性期血小板胞浆游离钙离子浓度,钙调素含量的研究

应用Ｆｕｒａ－２荧光标记示踪法测定了 ３１例脑梗塞（ＣＩ）急性期患者及２３名健康人血小板静息及激活状态的胞浆游离钙离子浓度（［Ｃａ２＋］ｉ、［Ｃａ２＋］ｉｃ）。应用ＥＬＩＳＡ方法测定了其中１８名患者及１６名健康人血小板钙调素（ＣａＭ）含量。结果显示：ＣＩ急性期血小板［Ｃａ２＋］Ｉ、［Ｃａ２＋］ｉｃ、ＣａＭ含量均高于健康对照组。本文初步探讨了ＣＩ患者血小板活化的机制。     

热休克预处理对感染性脑水肿时神经细胞内钙的影响及机制探讨

目的 探讨热休克预处理对感染性脑水肿时神经细胞内钙的影响及机制。方法 雄性ＳＤ大鼠随机分为（１）正常对照组;（２）感染性脑水肿组;（３）生理盐水预处理组;（４）热休克预处理组。制备百日咳菌液脑水肿模型,Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光检测法测定突触体内游离钙浓度（［Ｃａ＾２＋］）,同时测定脑含水量、伊文思蓝和Ｎａ＾＋含量;原位杂交和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析检测ＨＳＰ７０的表达。结果 热休克预处理组和内毒素预处     

氟桂嗪对实验性脑缺血的保护作用

目的研究氟桂嗪（ＦＮＺ）对实验性脑缺血的保护作用。方法应用Ｆｕｒａ－２荧光比值法测兔大脑中动脉阻断后不同时期血小板胞浆游离［Ｃａ２＋］ｉ浓度变化，观察ＦＮＺ对其变化的影响及对缺血脑水肿的保护作用。结果血小板［Ｃａ２＋］ｉ随缺血时间延长而递增。ＦＮＺ能明显降低脑缺血后的血小板［Ｃａ２＋］ｉ及脑水含量（Ｐ＜０．０１）。结论ＦＮＺ对脑缺血有保护作用     

胞外无钙时电刺激诱发海马脑片释放去甲肾上腺素

大鼠海马脑片用［３Ｈ］去甲肾上腺素（［３Ｈ］ＮＡ）孵育后，用无钙含２ｍｍｏｌ／ＬＥＧＴＡ任氏液灌流，用电刺激或高Ｋ＋诱发［３Ｈ］ＮＡ释放。电刺激诱发的［３Ｈ］ＮＡ释放被ＴＴＸ有力地抑制，被ＢＡＰＴＡ—ＡＭ显著地减弱，但ＴＴＸ和ＢＡＰＴＡ—ＡＭ对高Ｋ＋诱发的［３Ｈ］ＮＡ释放无作用。电刺激和高Ｋ＋诱发的［３Ｈ］ＮＡ释放均被蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）的激活剂佛波醇脂加强，并被α２－自身受体激动剂ｃｌｏｎｉｄｉｎｅ所削弱。结果提示：在胞外无钙时，电刺激诱发海马脑片释放［３Ｈ］ＮＡ是来自囊泡的胞吐；Ｎａ＋进入神经末梢和内Ｃａ２＋释放参与这一诱发释放过程，但不参与高Ｋ＋诱发［３Ｈ］ＮＡ释放机制。     

垂体腺苷酸环化酶激活肽在大鼠缺血性脑水肿中的作用

采用大鼠四动脉结扎脑缺血模型，应用于湿质量法测定脑组织含水量，观察脑缺血损伤后脑组织量的变化及ＰＡＣＡＰ对其影响，结果显示，脑缺血３０ｍｉｎ，再灌流１ｈ，脑组织含水量明显增加，再灌流６和２４ｈ，脑组织含水量逐渐降低，再灌流４８ｈ脑组织含水量已恢复到对照组水平，侧脑室给予５μｌ的浓度为２×１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ，２×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ及２×１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＣＡＰ均能使脑组织含水量减少，其中     

兔大脑中动脉阻断后脑片细胞内游离钙的观察

兔大脑中动脉阻断后脑片细胞内游离钙的观察☆孙青芳赵卫国张天锡田恒力△张学新※目前，细胞内游离Ｃａ２＋（［Ｃａ２＋］ｉ）浓度变化是脑缺血研究领域的热点。由于成年动物神经元很难分离，因而给在体脑缺血动物模型［Ｃａ２＋］ｉ的研究带来困难。有关在体脑...