大鼠肾冷缺血再灌注损伤对肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠肾冷缺血再灌注损伤对肾小管上皮细胞凋亡的影响。方法封闭群SD大鼠24随机分为对照组与实验组,每组12只。2组均切除右肾,实验组左肾实施冷缺血再灌注。2组大鼠均在术后24h再次手术切除左肾进行检测。透射电镜检查肾组织形态学,原位末端标记法（TUNEL）检测细胞凋亡。结果①超微结构检查（透射电镜）：对照组肾脏组织形态结构正常,实验组呈现损伤,部分细胞核可见凋亡迹象。②细胞凋亡检测：对照组偶见肾小管上皮细胞凋亡,实验组显著增多,细胞凋亡指数实验组均显著大于对照组（P〈0.05）。结论大鼠肾脏冷缺血再灌注后肾小管上皮细胞凋亡明显增加。     

大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡及七氟醚对细胞凋亡及 NF-κBp65的影响

目的：探讨七氟醚预处理对大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡的影响。方法24只Wister大鼠随机分为3组（n＝8）：假手术组,缺血再灌注组,七氟醚组,阻断肝门30 min后建立大鼠70％肝缺血再灌注模型。假手术组（ S组）仅游离肝门,但不阻断;肝缺血再灌注组（ IR组）采用阻断肝门30 min,再灌注1 h的方法制备大鼠肝缺血再灌注损伤模型;七氟醚预处理组（ SP组）吸入2．1％七氟醚30 min,停止吸入10 min后制备肝缺血再灌注模型。于再灌注1 h时处死动物,留取肺组织,测定湿／干重比（ W／D比）,采用比色法检测超氧化物歧化酶（ SOD）活性及丙二醛（ MDA）含量,采用原位末端转移酶法（ TUNEL）检测细胞凋亡,计算细胞凋亡指数（ AI）,采用Western blot法测定核蛋白NF-κBp65表达,光镜下观察肺组织病理学结果。结果与S组比较,IR组和SP组再灌注各时点肺组织W／D比值、细胞凋亡指数（ AI）和NF-κB 活性水平及MDA含量均显著增高（均P＜0．05）;SOD活性显著降低（P＜0．05）;与IR组比较,SP组W／D比值、细胞凋亡指数（AI）、NF-κB表达水平与MDA含量显著降低（均P＜0．05）;而SOD活性显著增加（P＜0．05）;SP组肺组织损伤较IR组减轻。结论细胞凋亡可能在肝缺血再灌注肺损伤发生过程中具有重要意义;七氟醚对大鼠肝缺血再灌注后肺细胞凋亡具有抑制作用,其作用机制可能通过降低肺组织NF-κB的活性,从而清除自由基、抑制脂质过氧化有关。     

金纳多对肾缺血/再灌注诱导的肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的研究银杏叶提取物金纳多(Ginaton)注射液对大鼠肾脏缺血/再灌注(I/R)诱导的肾小管上皮细胞凋亡的保护作用及机制。方法采用双侧夹闭大鼠肾蒂缺血45min后再灌注20min、3、24h的方法制备动物模型。在预定时间点采用免疫印迹分析JNK及其底物c-Jun的激活和表达。TUNEL(原位末端标记法)及流式细胞术检测肾小管上皮细胞凋亡情况。结果肾脏缺血45min再灌注24h后肾小管上皮细胞凋亡明显增多,肾脏病理改变明显。肾脏缺血/再灌注20min时,JNK的磷酸化水平明显增加,缺血/再灌注3h,c-Jun的磷酸化水平明显增加。金纳多明显抑制了肾I/R诱导的JNK(vsI/R20min,P<0·05)和c-Jun(vsI/R3h,P<0·05)的磷酸化水平的增加。同时,金纳多明显减轻肾I/R诱导的肾小管上皮细胞凋亡(vsI/R24h,P<0·05),改善肾脏组织病理学改变。结论金纳多抑制肾I/R诱导的肾小管上皮细胞凋亡,保护缺血性肾损伤的作用,至少部分是通过抑制JNK通路的激活实现的。     

异丙酚、羟丁酸钠及咪达唑仑对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响

为从细胞凋亡角度探讨羟丁酸钠、咪达唑仑和异丙酚对心肌缺血／再灌注损伤的防护作用，将72只Wistar大鼠随机分为对照组、羟丁酸钠组、咪达唑仑组和异丙酚组各18只；每组再分为缺血前、缺血30min和复灌30min3个亚组各6只。分别用透射电镜观察超微结构和用TUNEL法和琼脂糖凝胶电泳测定细胞凋亡。结果表明，与缺血前相比，各组缺血30min及再灌注30min亚组的凋亡指数(AI)均显著增加(P&;lt;0．01)；与对照组相比，异丙酚缺血30min及再灌注30min亚组的AI显著降低(P&;lt;0．01)。结论：缺血与再灌注组均发生了细胞凋亡，AI均较其缺血前显著增加，且以再灌注组更为明显。从细胞凋亡角度观察，仅异丙酚具有拮抗心肌缺血再灌注损伤的作用。     

人参皂甙对兔缺血再灌注肾NO含量及细胞凋亡的影响

目的：研究人参皂甙对兔肾缺血再灌注损伤的保护作用。方法：建立原位肾缺血再灌注损伤模型,分别测定正常组、缺血组、缺血再灌注组和不同剂量的人参皂甙组（15,30,60mg/kg)的下列指标：血清肌酐值、肾皮髓质病理改变和NO含量、流式细胞仪检测肾细胞周期、TUNEL法原位标记肾细胞凋亡并经Mias图象分析仪检测阳性目标数和积分光密度。结果：30mg/kg体重人参皂甙组血清肌酐值明显低于再灌注组;人参皂甙各组肾组织病理损害均轻于再灌组;正常组肾皮髓质NO含量比值为1．73,缺血组肾髓质NO含量明显升高,皮髓质NO含量比值下降至0．57,再灌注组皮髓质NO含量较快缺血组低,以髓质下降为明显,其皮髓质NO含量比值为0．94,人参皂甙组皮质NO含量均增高,髓质NO含量均下降,皮髓质NO含是比值上升,其中以30mg/kg组的比值（1．57）最接近正常值（1．73）;细胞凋亡参与缺血再灌注损伤,凋亡细胞主要集中在肾皮质区。30mg/kg和60mg/kg的人参皂甙可明显抑制肾皮质细胞凋亡。缺血再灌注组肾细胞群的主体在G0／G1期,部分样品可见亚二倍体峰（亚Go峰或Ap峰）,人参皂甙各组大多处在M期。结论：合适剂量（30mg/kg体重）的人参皂甙具有保护缺血再灌注肾功能、减轻肾组织病理损害、提高肾皮质NO含量与髓质NO含量的比值、抑制、肾皮质细胞凋亡等作用,未见明显的量效关系。     

单核细胞趋化蛋白-1与大鼠肾脏缺血再灌注损伤的实验研究

目的 研究肾脏缺血再灌注损伤的发病机制。方法 雄性Wisrar大鼠50只，随机分为5组，即假手术组（n=10）、肾缺血再灌注0h组（n=10）、再灌注4h组（n=10）、再灌注12h组（n=10）、再灌注24h组（n=10）。夹闭肾动脉建立大鼠肾缺血再灌注模型，在再灌注不同时点检测肾组织单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的含量（ELISA方法）；肾功能指标：血肌酐（Cr）、血尿素氮（BUN）；光镜下观察肾脏的病理改变并进行肾小管评分。结果 正常情况下，肾脏组织中MCP-1蛋白含量很少．缺血再灌注0h（单纯缺血）即可观察到肾脏组织中MCP-1含量升高，至4h达到峰值．随后其水平逐渐下降；缺血再灌注各时段组大鼠血Cr、BUN与假手术组相比明显升高（均P〈0．01），且随再灌注时间延长．血Cr、BUN的水平逐渐增高；光镜下观察见缺血再灌注组肾小管和肾间质有不同程度的损伤，肾小球无明显变化。结论 单核细胞趋化蛋白．1在肾脏缺血再灌注损伤中含量升高且呈动态变化，说明MCP-1参与了肾脏缺血再灌注损伤。     

生长激素预处理对大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡与能量代谢的影响

目的研究生长激素预处理对大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡及能量代谢的影响。方法42只大鼠采用完全随机设计方法分为3组，假手术组14只（假手术24h）、心肌缺血再灌注组14只、生长激素组14只，后2组均缺血30min，再灌注24h，其中生长激素组的每只大鼠术前皮下肌肉注射生长激素1 U／kg，连续7d，其中第7次皮下注射于手术前进行。前2组每只大鼠相应皮下肌肉注射生理盐水0．5ml／d。每组中均抽取8只大鼠，以TUNEL法检测缺血区心肌细胞凋亡情况，每组中剩余的抽取5只大鼠，以高效液相色谱法测定缺血区心肌三磷酸腺苷（ATP）并进行心肌组织病理、电镜超微结构观察。结果与假手术组比较，心肌缺血再灌注组再灌注24h后缺血区心肌细胞凋亡率和ATP消耗程度均明显上升（P〈0．05），心肌组织病理和超微结构改变明显；与心肌缺血再灌注组比较，生长激素组再灌注24h后缺血区心肌细胞凋亡率和ATP消耗程度均明显改善（P〈0．05），心肌组织病理和超微结构改变明显减轻。结论生长激素能减少心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡和ATP的消耗，说明生长激素对心肌缺血再灌注后的心肌具有保护作用。     

Omi/HtrA2在大鼠肾缺血-再灌注损伤诱导的细胞凋亡中的作用

目的探讨促凋亡因子Omi/HtrA2在大鼠肾缺血-再灌注损伤诱导的细胞凋亡中的作用。方法雄性Wistar大鼠随机分为假手术组[给空溶剂二甲基亚砜(DMSO)]、模型1组和模型2组(分别于再灌注1h时及再灌注前10min给予空溶剂DMSO)、阻断剂1组和阻断剂2组(分别于再灌注1h时和再灌注前10min给予Omi/HtrA2特异性阻断剂Ucf-101)。双侧肾动脉夹闭45min再灌注24h制作动物模型。原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;Western印迹法检测肾组织匀浆中Omi/HtrA2蛋白质表达;比色法检测肾组织匀浆中caspase-3活性。结果肾缺血45min再灌注24h后,肾小管上皮细胞凋亡数目明显增加,同时肾组织中Omi/HtrA2表达及caspase-3活性显著增高。再灌注前10min给予Ucf-101,抑制Omi/HtrA2的表达,caspase-3活性显著降低,细胞凋亡明显减轻。再灌注1h时给予Ucf-101阻断Omi/HtrA2的表达,caspase-3活性及细胞凋亡的变化不明显。结论促凋亡因子Omi/HtrA2在肾缺血-再灌注损伤诱导的细胞凋亡中发挥重要作用,在再灌注前10min阻断Omi/HtrA2的表达,可减轻肾缺血-再灌注损伤引起的细胞凋亡。     

SB203580对大鼠再灌注损伤肺细胞凋亡的干预

目的：探讨P38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）特异性抑制剂SB203580对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响。方法：30只SD大鼠随机分为3组：假手术对照（control,C）组,肺缺血／再灌注（I／R）组,肺缺血／再灌注＋SB203580（S组）;TUNEL法检测肺组织细胞凋亡的改变：免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达;电镜观察肺组织形态学改变。结果：I／R组与C组比较,Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达均明显上调（均P〈0．01）,Bcl-2／Bax比值显著下降（P〈0．01）,凋亡指数（AI）显著增高（P〈0．01）,肺组织超微结构明显异常;使用SB203580后,Bcl-2蛋白表达上调（P〈0．01）,Bax蛋白表达下调（P〈0．01）,Bel-2／Bax比值上升（P〈0．01）,AI显著下降（P〈0．01）,肺组织超微结构异常改变不同程度减轻。结论：SB203580可通过上调Bcl-2蛋白的表达、下调Bax蛋白的表达、调控Bcl-2／Bax蛋白之间的平衡而减轻细胞凋亡,对肺缺血／再灌注损伤发挥积极的防治作用。     

SB203580对大鼠再灌注损伤肺细胞凋亡的干预

目的：探讨P38丝裂原活化蛋白激酶（p38MAPK）特异性抑制剂SB203580对再灌注损伤肺细胞凋亡的影响。方法：30只SD大鼠随机分为3组：假手术对照（control,C）组,肺缺血／再灌注（I／R）组,肺缺血／再灌注＋SB203580（S组）;TUNEL法检测肺组织细胞凋亡的改变：免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达;电镜观察肺组织形态学改变。结果：I／R组与C组比较,Bcl-2蛋白和Bax蛋白表达均明显上调（均P〈0．01）,Bcl-2／Bax比值显著下降（P〈0．01）,凋亡指数（AI）显著增高（P〈0．01）,肺组织超微结构明显异常;使用SB203580后,Bcl-2蛋白表达上调（P〈0．01）,Bax蛋白表达下调（P〈0．01）,Bcl-2／Bax比值上升（P〈0．01）,AI显著下降（P〈0．01）,肺组织超微结构异常改变不同程度减轻。结论：SB203580可通过上调Bcl-2蛋白的表达、下调Bax蛋白的表达、调控Bcl-2／Bax蛋白之间的平衡而减轻细胞凋亡,对肺缺血／再灌注损伤发挥积极的防治作用。     

慢性肾损害肾血流动力学改变的观察

对９２例健康人及慢性肾损害肾功不全各期５１例患者，进行肾内各分级动脉血流测定。结果显示肾功代偿期肾血流各参数与正常对照组差异无显著性，而肾功不全氮质血症期和尿毒症期，与正常对照组及二组之间血流各参数均有显著性差异。而随着肾损害肾功不全的加重，Ｖｍａｘ，Ｖｍｉｎ、ＴＡＭＸ渐近下降，ＰＩ，ＲＩ、Ｓ／Ｄ逐渐增高，因此通过肾内血流的测定，观察血流动力学的改变，可反映肾损害的程度和肾功能状况。     

Renal Excretion of Vancomycin in Rats with Acute Renal Failure

We have investigated the renal excretion of vancomycin in rats with acute renal failure (ARF) induced by uranyl nitrate or cisplatin. The renal clearance of the antibiotic after uranyl nitrate or cisplatin injection was separately evaluated by calculating the glomerular filtration rate (GFR) and secretory clearance. The reduced renal clearance of vancomycin in these ARF rats was a result of a decrease in both GFR and secretory clearance. The extents of the decreases in GFR and in secretory clearance were not, however, proportional, the extent of the decrease in secretory clearance being more pronounced. These results suggest that the renal tubular secretion of vancomycin was reduced more predominantly than glomerular filtration in these ARF models.