IL-6对大鼠急性髓系白血病R2细胞的增殖抑制及分化诱导作用

重组人白细胞介素６（ｒｈＩＬ－６）可抑制大鼠急性髓系白血病（ＡＭＬ）Ｒ２细胞的体外生长（ＩＣ５０１００ｎｇ／Ｌ），并在１０ｎｇ／Ｌ～１μｇ／Ｌ的剂量范围内诱导Ｒ２细胞向终末方向分化。诱导后的Ｒ２细胞具有单核巨噬细胞的形态特征；且非特异性酯酶（ＮＳＥ）及酸性醋酸酯酶（ＡＮＡＥ）的活性增强，而过氧化物酶（ＰＯＸ）的活性却一直很低。经典型的ＤＮＡ梯状条带及凋亡小体证实，≥１μｇ／ＬｒｈＩＬ－６亦可诱导Ｒ２细胞凋亡。我们认为，Ｒ２细胞是研究ＩＬ－６信号转导通路及ＡＭＬ细胞分化机制的一个很好模型。     

低密度脂蛋白诱导肾小管上皮细胞增殖的信号通路

为观察低密度脂蛋白（ＬＤＬ）对肾上管上皮细胞的影响及涉及的相关信号传导机制，以人近曲行小管上皮细胞系（ＨＫ－２）为对象，采用３Ｈ－ＴｄＲ掺入与细胞计数测定增殖；特异性底物磷酸化法测定细胞外信号调节激酶（Ｅｎｇ）活性；凝胶迁移率法检测转录活化因于（ＡＰ－１）ＤＮＡ结合活性。发现ＬＤＬ１００～５００ｕｇ／ｍＬ刺激ＨＫ－２细胞７２ｈ可促进其增殖：加入ＬＤＬ２５０ｕｇ／ｍＬ后２～６０ｍｉｎ内可使该细胞ＥＲＫ活性明显增加，１０ｍｉｎ时达高峰；不同剂量（５０～５００ｕｇ／ｍＬ）刺激时，ＥＲＫ活性分别较对照组增加１．５６～２．１９倍。ＬＤＬ促使核内转录因子ＡＰ－１结合活性增加。ＥＩＵＬ特异性阻断剂ＰＤ（５０ｕｍｏｌ／Ｌ）可以分别阻断ＬＤＬ刺激的ＨＫ－２细胞ＥＲＫ活性和ＤＮＡ合成。ＲＭＡ阻断ＰＫＣ信号途径后，ＬＤＬ对于ＥＲＫ的活化效应明显减弱。     

肝细胞癌患者血清IL-6、IL-2系统的变化和意义

采用ＡＢＳ－ＥＬＩＳＡ法、双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法对２０例肝癌患者进行了ＩＬ－６、ＩＬ－２、ｓＩＬ－２Ｒ的测定，并与２６例肝炎肝硬化和６６例健康献血员进行了对照。结果：正常对照组（ＮＣ）ＩＬ－６（ｎｇ／Ｌ）为９．１０±２．５１，ＩＬ－２（ｎｇ／Ｌ）为５...     

一氧化氮对脊髓和背根神经节神经元的体外存活及活性作用研究

本文应用免疫细胞化学及ＮＳＥ－ＥＬＩＳＡ方法观察了一氧化氮对体外培养脊髓和背根神经节神经元的存活及对活性的影响。结果表明：一氧化氮合酶抑制剂Ｎ－Ａｒｇ组（１００、２００μｍｏｌ／Ｌ）ＮＳＥ免疫反应阳性神经元数目、面积（ＡＦ值）及活性（ＯＤ值）明显大于空白对照组（Ｐ＜０．０１）。而一氧化氮合酶底物Ｌ－Ａｒｇ组（１ｍｍｏｌ／Ｌ）神经元面积积分和活性则小于对照组（Ｐ＜０．０１）。Ｌ－Ａｒｇ的细胞毒性作用可为Ｎ－Ａｒｇ逆转。     

rhIL-15和rhIL-2诱生的LAK细胞特性比较

目的：研究ｒｈＩＬ－１５激活的ＬＡＫ细胞的增殖、细胞毒作用及相关表型的变化。方法：通过用不同浓度的ｒｈＩＬ－１５和ｒｈＩＬ－２分别诱生 ＬＡＫ细胞，研究二者诱生的 ＬＡＫ细胞的增殖状况；当 ｒｈＩＬ－２和 ｒｈＩＬ－１５为 １５００ Ｕ／ｍｌ时，ＭＴＴ法检测 ＬＡＫ细胞的细胞毒作用，利用流式细胞仪检测细胞表面ＣＤ分子表达情况。结果：ＬＡＫ细胞的增殖对ｒｈＩＬ－２和ｒｈＩＬ－１５均具有时间和剂量依赖性，且无明显差异；终浓度为 １５００ Ｕ／ｍｌ时，ｒｈＩＬ－１５诱生的 ＬＡＫ细胞杀伤 Ｋ５６２细胞的能力强于 ｒｈＩＬ－２诱生的 ＬＡＫ细胞，而对Ｒａｊｉ细胞的杀伤活性，ｒｈＩＬ－２诱生的ＬＡＫ细胞却明显高于 ｒｈＩＬ－１５诱生的 ＩＡＫ细胞，且二者杀伤活性均具有时间依赖性；同时ｒｈＩＬ－１５诱生的ＬＡＫ细胞的ＣＤ３－ＣＤ５６＋细胞、Ｃｄ９４＋细胞百分率均高于ｒｈＩＬ－２诱生的ＬＡＫ细胞。结论：ｒｈＩＬ－１５在体内对ＮＫ细胞功能可能具有较强的调节作用。     

地塞米松对SUNE-1和B95-8细胞株中EB病毒BHRF1基因转录水平的影响

目的：以Ｋ５６２细胞为阴性对照,观察ＳＵＮＥ－１和Ｂ９５８两种含ＥＢＶ－ＢＨＲＦ１基因的肿瘤细胞株在２×１０６ｍｏｌ／Ｌ地塞米松（ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ,ＤＥＸ）作用１８ｈ后,细胞内ＥＢＶ－ＢＨＲＦ１基因转录水平的改变。方法：细胞ＲＮＡ的提取、ＲＮＡ的点杂交（Ｄｏｔｂｌｏｔ）及反转录ＰＣＲ（ＲＴ－ＰＣＲ）。结果：上述两种肿瘤细胞在２×１０６ｍｏｌ／Ｌ地塞米松作用１８ｈ等诱导细胞凋亡的条件下,细胞内ＥＢＶ－ＢＨＲＦ１基因的转录水平（ｍＲＮＡ）明显提高。结论：本结果初步显示ＥＢＶ－ＢＨＲＦ１基因的转录与宿主细胞抵抗凋亡的关系密切。     

一氧化氮在培养的大鼠心肌细胞缺氧—复氧损伤中的作用

目的：观察一氧化氮（ＮＯ）对心肌细胞缺氧－复氧损伤（ＨＲＩ）的作用。方法：培养的大鼠心肌细胞，培养液中分别预先加入ＮＯ前体Ｌ－精氨酸（Ｌ－Ａｒｇ）、ＮＯ供体ＳＩＮ－１或硝普钠（ＳＮＰ）、ＮＯＳ抑制剂Ｌ－ＮＮＡ或ＮＯＳ诱导剂脂多糖（ＬＰＳ），经缺氧１２０ｍｉｎ，复氧６０ｍｉｎ处理后，检测细胞存活率，乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出量，亚硝酸盐（ＮＯ２）含量及细胞诱导型ＮＯ合酶（ｉＮＯＳ）活性等指标的改变。结果：①与常氧组比较，缺氧－复氧ＨＲ降低细胞存活率（２３％，Ｐ＜０．０１），增加ＬＤＨ漏出（６２倍，Ｐ＜０．０１），ｉＮＯＳ活性（７７％，Ｐ＜０．０１），ＮＯ２含量（６１７％，Ｐ＜０．０１）。②ＨＲ前预先加入ＳＩＮ－１、ＳＮＰ或Ｌ－Ａｒｇ，均引起ＬＤＨ漏出进一步增高（Ｐ＜０．０１），细胞存活率进一步降低（Ｐ＜０．０１或Ｐ＜０．０５）。③Ｌ－ＮＮＡ２ｍｍｏｌ／Ｌ，单独应用对细胞损伤的影响无统计学意义，与Ｌ－Ａｒｇ联合应用，则减弱Ｌ－Ａｒｇ的细胞损伤作用。④ＬＰＳ１μｇ／ｍＬ，增加ｉＮＯＳ活性（２６倍，Ｐ＜０．０１）和ＬＤＨ漏出（５６％，Ｐ＜０．０１）。结论：ＮＯ加重心肌细胞ＨＲＩ，是心肌细胞ＨＲＩ的损伤因子     

转染B7—1基因至鼻咽癌细胞株及其诱导的细胞免疫应答

通过包装细胞把逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ／Ｂ７－１导入鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１，利用ＲＴ－ＰＣＲ及ＦＡＣｓ等技术证实Ｂ７－１的表达情况，同时检测了ＣＮＥ１细胞表面ＭＨＣＩ抗原。在此基础之上，观察了表达Ｂ７－１的ＣＮＥ１细胞（ＣＮＥ１／Ｂ７－１）对健康个体ＰＢＬ（外周血淋巴细胞）的增殖及细胞因子分泌的影响，结果表明：ＣＮＥ１／Ｂ７－１可以促进ＰＢＬ的增殖及细胞因子的分泌，且增高水平的细胞因子主要是ＩＬ－２和ＩＦＮ－γ。提示：ＣＮＥ１／Β７－１诱导的免疫应答以细胞免疫为主。     

去甲肾上腺素对大鼠体外抗体生成的影响

目的 观察不同浓度甲肾上腺素（ＮＡ，１０＾－１～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）对大鼠体外抗体生成的影响，并初步探讨其作用机制。方法 在体外用百红细胞（ＳＲＢＣ）刺激大鼠肠系结Ｂ细胞转化成形成细胞（ＡＦＣ），然后检测其抗体生成量。结果 （１）１０＾－１０、１０＾－６、１０＾－８和１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ ＮＡ都能显著高于外抗体生成，其中１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ ＮＡ的作用最强。（２）γ受体激动剂异丙肾上腺素亦能明显     

甲基硝基亚硝基胍诱发的遗传不稳定细胞DNA聚合酶βmRNA？…

目的和方法：本曾报道，低浓度０．２μｍｏｌ／Ｌ烷化剂甲基硝基亚硝基胍（Ｎ－ｍｅｔｈｙｌ－Ｎ‘－ｎｉｔｒｏ－Ｎ－ｎｉｔｒｏｓｏｇｕａｎｉｄｉｎｅ，ＭＮＮＧ）可以诱导哺乳灰细胞遗传不稳定状态。为明确其发生机制，本文利用定量ＲＴ－ＰＣＲ方法，研究了该低浓芳，ＨｅＬａ细胞ｐｏｌ βｍＲＮＡ水平在６－２４ｈ内升高约１倍；而ｖｅｒｏ细胞ｐｌ βｍＲＮＡ水平在１２－３０ｈ内亦升高１倍左右。     

分化诱导剂对人单核样白血病J6—2细胞凝集素结合及[^125I…

将Ｊ６－２细胞分别分化诱导剂ＧＭ３（５０μｍｏｌ／Ｌ、ＤＭＳＯ８１．２％）处理６天、ＴＰＡ（１００ｎｇ／ｍｌ）处理３天，观察它们对１１种凝集素结合反应的影响。结果表明，经ＧＭ３处理后，Ｊ６－２细胞对凝集素结全反应增强的只有ＵＥＡ（－至＋，变弱的只有ＢＡＳ（＋＋至－），其余的都无变化。     

分化诱导剂对人单核样白血病J6－2细胞凝集素结合及［~（125）I］UdR掺入的影响

将Ｊ６－２细胞分别用分化诱导剂ＧＭ＿３（５０μｍｏｌ／Ｌ）、ＤＭＳＯ（１．２％）处理６天、ＴＰＡ（１０ｎｇ／ｍｌ）处理３天，观察它们对１１种凝集素结合反应的影响。结果表明，经ＧＭ＿３处理后，Ｊ６－２细胞对凝集素结合反应增强的只有ＵＥＡ（－至＋），变弱的只有ＢＳＡ（＋＋至－），其余的都无变化。经ＤＭＳＯ处理后，结合反应变强的有ＵＥＡ（－至＋）及ＰＮＡ（－至＋＋），变弱的有ＢＳＡ（＋＋至－）及ＰＳＡ（＋＋至＋）。经ＴＰＡ处理后，结合反应变弱的有ＢＳＡ（＋＋至＋）、ＷＧＡ（＋＋至－）及ＲＣＡ（＋＋至＋），变强的有ＵＥＡ（－至＋）、ＳＢＡ（－至＋）及ＳＪＡ（－至＋＋）。对３种分化诱导剂处理后都无变化的有ＤＢＡ（－）、ＬＣＡ（＋＋）及ＣｏｎＡ（＋＋）。本文还观察到３种分化诱导剂都能抑制［￣１２５Ｉ］ＵｄＲ向Ｊ６－２细胞的掺入。     

细胞因子对乙肝病毒基因疫苗诱导产生抗体的影响

将构建的三套乙肝病毒基因疫苗（分别编码Ｓ蛋白、ｐｒｅＳ１＋ｐｒｅＳ２＋Ｓ蛋白及ｐｒｅＳ２＋Ｓ蛋白）注射于Ｃ５７ＢＬ／６小鼠胫前肌内。基因疫苗接种３天后，以同样部位注射ｒｈＩＬ－２、ｒｈＩＬ－４、ｒｈＩＬ－６、ｒｈＩＦＮ－γ。运用ＥＬＩＳＡ检测不同时间小鼠血清中乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）及抗－ＨＢｓ。结果显示：注射基因疫苗３天内，小鼠体内即可表达ＨＢｓＡｇ；两周后，血清中可测到抗－ＨＢｓ，两月后抗体水平达到高峰，并保持高水平至少两月以上；肌内注射的几种细胞因子均可提高血清中抗－ＨＢｓ水平，与对照组相比差异有极显著性（Ｐ＜０．０１），其中，ｒｈＩＬ－４、ｒｈＩＬ－６、ｒｈＩＦＮ－γ较ｒｈＩＬ－２作用强。提示，细胞因子可作为基因疫苗的佐剂。该研究为增强基因疫苗免疫效果提供了新途径。     

抗核心脂域McAb对LPS体外诱导细胞释放IL-1及其mRNA表达的影响

采用细胞因子活性检测，Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ等方法，在体外研究了抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ（ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４）对ＬＰＳ诱导人外周血单核细胞（ｈＰＢＭＣ）释放ＩＬ－１及其ｍＲ－ＮＡ表达水平的影响。结果表明，ＥＬ１、ＥＬ３和３Ｈ４在体外有抑制ＬＰＳ诱导细胞释放ＩＬ－１的作用；Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ及ＲＴ－ＰＣＲ结果证实，这３株ＭｃＡｂ能降低ＩＬ－１ｍＲＮＡ表达的水平；提示抗细菌核心糖脂域ＭｃＡｂ可通过与ＬＰＳ的结合而中和ＬＰＳ作用于效应细胞，从而降低或阻碍了效应细胞中ＩＬ－１ｍＲＮＡ的表达，达到抑制细胞释放ＩＬ－１的作用。     

OKT3＋rhIL－2激活胎儿脾细胞的研究

观察了１８～２８周龄胎儿脾单个核细胞（ＦＳＭＣ）在体外对ＯＫＴ３＋ｒｈＩＬ－２联合刺激的反应性，结果发现：ＯＫＴ３单独能活化ＦＳＭＣ，最适浓度ＯＫＴ３与ｒｈＩＬ－２联合对ＦＳＭＣ有强协同刺激作用。ＯＫＴ３刺激ＦＳＭＣ后明显促进ＩＬ－２Ｒ表达，表明ＯＫＴ３对ＦＳＭＣ的括化作用与ＩＬ－２／ＩＬ－２Ｒ途径相关。ＯＫＴ３＋ｒｈＩＬ－２协同诱导的ＦＳＭｃ能产生ＮＫ和ＬＡＫ活性，且ＬＭ活住较单用ｒｈＩＬ－２诱导者强，间接免疫荧光染色ＦＡＣＳ分析显示，ＯＫＴ３＋ｒｈｌＬ－２协同激活的ＦＳＭＣ主要是ＣＤ８￣＋Ｔ细胞。结果表明ＦＳＭＣ与成人ＰＢＭＣ－样能被ＯＫＴ３活化。     

人白细胞介素4诱导杀伤细胞的研究

人重组白细胞介素４（ｒｈＩＬ－４）在ＰＨＡ协同下，从人外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）诱导出明显的ＬＡＫ活性，其对Ｋ５６２、Ｒａｊｉ细胞的杀伤力低于ＩＬ－２诱导者，对ＴＢＬ－Ｅ，ＰＨＡ活化的淋巴母细胞（ＰＨＡ－ｂｌａｓｔｓ）的杀伤力和ＩＬ－２诱导者相似。在ＰＨＡ介导的４小时５１Ｃｒ杀伤试验中，加入ＰＨＡ后，ＩＬ－４－ＬＡＫ对ＰＨＡ－ｂｌａｓｔｓ的杀伤力提高２．３倍，而ＩＬ－２－ＬＡＫ对ＰＨＡ－ｂｌａｓｔｓ的杀伤力无变化，提示ＩＬ－４主要诱导ＣＴＬ样活性，而ＩＬ－２主要诱导ＮＫ样活性，ＩＬ－４诱导效应ＣＴＬ的能力强于ＩＬ－２。我们的实验同时证实，在淋巴细胞活化的早期，ＩＬ－４抑制ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ活性，淋巴细胞活化后，ＩＬ－４与ＩＬ－２有协同作用，增强ＩＬ－２诱导的ＬＡＫ活性。     

高压氧抗小鼠同种皮肤移植排斥反应的实验研究

目的：探讨高压氧抗移植排斥反应机理。方法：Ｃ５７ＢＬ／６小鼠接受ＢＡＬＢ／ｃ小鼠移植皮片后，在９９２％Ｏ２，０２５ｍＰａ条件下每天１ｈ直至皮片排斥。动态观察移植局部Ｔ细胞及亚群，ＩＬ－２Ｒ（α）阳性细胞浸润情况以及混合淋巴细胞培养（ＭＬＣ）、细胞杀伤活性（ＬＭＣ）等。结果：高压氧组小鼠移植皮片存活时间明显延长；移植局部Ｔｈｙ－１，Ｌ３Ｔ４，Ｌｙｔ－２及ＩＬ－２Ｒ（α）阳性细胞浸润明显减少，ＭＬＣ及ＬＭＣ均降低。结论：高压氧可通过抑制移植局部Ｔ淋巴细胞浸润及ＩＬ－２Ｒ表达以及Ｈ－２诱导的增殖反应及杀伤活性，从而抑制移植排斥反应。     

白介素2和血小板活化因子对嗜酸性粒细胞的趋化作用比较

用改良Ｂｏｙｄｅｎ法，测定重组人白介素２（ｒｈＩＬ－２）和血小板活化因子（ＰＡＦ）对豚鼠嗜酸性粒细胞（Ｅｏｓ）和中性粒细胞（Ｎｅｕ）的趋化和化学激动作用，ｒｈＩＬ－２对Ｅｏｓ的最大趋化作用浓度为１０￣（－１２）ｍｏｌ／Ｌ，较ＰＡＦ的作用强约１００００倍，１０￣（－５）～１０￣（－９）ｍｏｌ／Ｌ范围内，ＰＡＦ对Ｅｏｓ和Ｎｅｕ有相似的趋化作用．但在对Ｅｏｓ呈趋化作用的１０￣－９～１０￣－１３ｍｏ１／Ｌ范围内。ｒｈＩＬ－２对Ｎｅｕ无明显作用．另外，１０￣（－１２）ｍｏｌ／Ｌ的ｒｈＩＬ－２对Ｅｏｓ的趋化和化学激动作用无显著差异（Ｐ＞０．０５），而１０￣（－８）ｍｏｌ／Ｌ的ＰＡＦ对Ｅｏｓ的趋化作用则显著大于化学激动作用（Ｐ＜０．０５）。以上结果表明，ＩＬ－２是一种极强的选择性Ｅｏｓ趋化介质．     

涎腺良恶性淋巴上皮病变中EB病毒DNA及其产物检测的意义

目的了解良恶性淋巴上皮性病变与埃泼斯坦－巴尔（ＥＢ）病毒的关系。方法采用原位杂交、聚合酶链反应（ＰＣＲ）及免疫组化ＬＳＡＢ法对涎腺１８例恶性淋巴上皮病变（ＭＬＥＬ）、１４例良性淋巴上皮病变（ＢＬＥＬ）进行ＥＢＶ编码的ＲＮＡ（ＥＢＥＲ１）、ＥＢＶＢａｍＨ１Ｗ片段及ＥＢＶ潜在膜蛋白（ＬＭＰ１）和潜在膜抗原（ＥＢＮＡ２）检测。结果（１）本组１８例ＭＬＥＬＥＢＥＲ１和ＥＢＶＢａｍＨ１Ｗ片段均为阳性，１４例ＢＬＥＬ则为阴性。（２）１８例ＭＬＥＬＬＭＰ１检出率７７．８％（１４／１８），ＥＢＮＡ２未检出（０／９）。（３）ＭＬＥＬ间质淋巴细胞多数为Ｔ细胞，ＢＬＥＬ间质多为Ｂ细胞。（４）本组统计２１６例涎腺癌中有３７例ＭＬＥＬ，发生率为１７．１％。结论本结果表明ＥＢＶ与ＭＬＥＬ存在密切关系，很可能在其发病中起着重要作用。文中还对ＢＬＥＬ与ＥＢＶ的关系、ＢＬＥＬ与ＭＬＥＬ的关系进行了讨论。     

中和抗体识别短肽对IFN-α生物学活性的影响

目的研究合成肽ＷＬＤＰＲＨ的免疫反应性和对干扰素（ＩＦＮ）诱导的生物学活性的影响。方法根据我们早先的研究，已用中和抗体从噬菌体展示６肽库中筛选出了两个与ＩＦＮ－α有同源性的肽片段，将其中之一进行了人工合成（ＷＬＤＰＲＨ），并进行了同源性比较分析，体外竞争酶联免疫吸附实验（ＥＬＩＳＡ），体外ＩＦＮ诱导抗病毒和抗增殖分析。结果计算机分析表明，人工合成肽ＷＬＤＰＲＨ与推理的Ｉ型ＩＦＮ受体结合区ＬｏｏｐＡＢ（２９－３５位）有相当的同源性。体外竞争ＥＬＩＳＡ实验表明，合成肽在２５μｇ／ｍｌ浓度时能特异性抑制ＩＦＮ－α与中和抗体４Ｃ１结合。体外抗病毒结果显示，干扰素在亚保护剂量时（２０～７０ｐｇ／ｍｌ）时，合成肽能提高ＩＦＮ－α作用细胞后的抗病毒活性，并且合成肽ＷＬＤＰＲＨ在１．４μｇ／ｍｌ时，ＩＦＮ－α抗病毒保护率从４０％提高到８６％，为最高保护率的最低剂量，但合成肽为１．４μｇ／ｍｌ，ＩＦＮ浓度为５～５５ｎｇ／ｍｌ时，对ＩＦＮ－α诱导的抗增殖作用不明显。结论用中和抗体筛选的短肽ＷＬＤＰＲＨ能影响ＩＦＮ分子作用模式，并且有可能模拟ＩＦＮ分子ＬｏｏｐＡＢ的结构和功能，这为免疫治疗及ＩＦＮ的小分子模拟设计奠定基础。