微小RNA-98-5p靶向Kruppel样转录因子9对大鼠心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的 探讨微小RNA（miR)-98-5p靶向Kruppel样转录因子9(KLF9)对大鼠心肌缺血/再灌注（MI/R）损伤的保护作用。 方法 50只大鼠随机分为假手术组、模型组、miR-98-5p agomir组、agomir-NC组及miR-98-5p agomir+pcDNA-3. 1-KLF9组,每组10只。通过冠状动脉结扎法建立MI/R注模型。HE染色观察心肌组织病理情况;TUNEL检测心肌组织细胞凋亡情况;ELISA检测血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量;Real-time PCR检测心肌组织miR-98-5p、KLF9 mRNA表达水平;Western blotting检测心肌组织KLF9、Bax和JAK2/STAT3信号通路相关蛋白表达;双荧光素酶报告实验验证miR-98-5p与KLF9的关系。 结果 与假手术组相比,模型组大鼠心肌细胞排列较乱,出现坏死;心肌组织细胞凋亡率、血清CK、CK-MB、LDH含量均升高,心肌组织miR-98-5p表达水平下降,KLF9 mRNA和蛋白及p-JAK2和p-STAT3蛋白表达均升高（P<0.05）。过表达miR-98-5p后,大鼠心肌细胞排列较为整齐,心肌细胞坏死减少;心肌组织细胞凋亡率、血清CK、CK-MB、LDH含量及心肌组织p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均下降（P＜0.05）。双荧光素酶报告实验结果验证KLF9是miR-98-5p的靶基因。过表达KLF9逆转了miR-98-5p agomir对心肌损伤大鼠产生的作用。 结论 MiR-98-5p靶向KLF9改善MI/R大鼠心肌损伤,其机制可能与miR-98-5p调控JAK2/STAT3信号通路抑制心肌细胞凋亡相关。     

阿魏酸钠抑制大鼠缺血坏死模型中TGF-β1表达

目的 探讨转化生长因子（TGF-β1）在大鼠心肌缺血坏死模型中的作用及阿魏酸钠（SF）的干预效应。方法 注射盐酸异丙肾上腺素(Iso,15mg/kg)复制大鼠心肌缺血性坏死模型。稳定2d后注射SF（110mg/kg）进行干预。用免疫组化及RT-PCR法测定心肌组织中TGF-β1蛋白及mRNA表达。结果 注射Iso后 24 h,TGF-β1 mRNA表达较对照组明显增加（P <0.05）;自48 h后mRNA表达逐渐下降,TGF-β1蛋白的表达随病变加重而增加。SF干预后TGF-β1mRNA表达显著减轻,其蛋白表达亦有改善。结论SF可抑制TGF-β1在大鼠缺血坏死模型心肌中的表达。     

传统心肌酶谱联合损伤相关蛋白IMA、TnI-Ultra检测对急性心肌梗死早期诊断的价值分析

目的 探讨肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)、同型半胱氨酸(HCY)和乳酸脱氢酶(LDH)等心肌酶,联合血清缺血修饰清蛋白(IMA)和超敏肌钙蛋白I(TnI-Ultra)等心肌损伤相关蛋白检测在急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)早期诊断中的应用.方法 选取我院于2014年1月至2017年1月期间收治的AMI患者150例,病发后6h内采集静脉血,检测患者心肌酶谱(CK、CK-MB、HCY和LDH)及IMA和TnI-Ultra等生化指标.同期选取100例非AMI患者血液样本作为对照组.结果 150例AMI患者血清CK、CK-MB、LDH(U/L)和HCY(μmol/L)水平分别为:688.5±68.7、86.4±9.2、364.7±55.2和34.5±9.4.与对照组相比,CK和CK-MB水平明显升高(P<0.01),而LDH和HCY与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),但IMA(65.5±11.7 U/L)和TnI-Ultra(10.6±3.5μg/L)水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 CK、CK-MB、HCY和LDH等心肌酶指标在AMI患者中有较高的阳性率,但某些非AMI类疾病也可能导致以上指标异常升高;IMA和TnI-Ultra等心肌损伤相关蛋白对AMI诊断有较高的特异性.心肌酶联合心肌损伤相关蛋白检测有助于AMI的早期诊断,对降低AMI风险具有重要意义.     

小儿肺炎患者治疗前后心肌酶学指标的检测分析

目的:观察小儿肺炎患者心肌酶水平变化并分析其临床意义。方法:选择2009年8月～2011年8月住院治疗的小儿肺炎患者112例,其中重症组32例,轻症组80例,对照组为体检正常小儿68例。采用全自动生化分析仪检测各肺炎组治疗前后及对照组天冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)及其同工酶(CK-MB)活性水平,并进行组间比较。结果:与对照组相比,轻症组及重症组治疗前AST、LDH、CK、CK-MB水平均明显升高,其差异有统计学意义(P均<0.05),且重症组水平明显高于轻症组(P<0.05);治疗后,重症组及轻症组心肌酶水平均明显低于治疗前水平(P<0.05),且与对照组接近(P>0.05)。结论:小儿肺炎患者病情越重,心肌酶升高越明显,针对性治疗可使其恢复正常。     

地塞米松对异丙肾上腺素所致小鼠急性心肌损伤及脾脏T细胞亚群的影响

目的:观察地塞米松(DEX)对异丙肾上腺素(ISO)致小鼠急性心肌缺血损伤的影响,并探讨其作用机制。方法:16只昆明种小鼠随机分成正常对照组(CON组)、ISO组、DEX预处理组(DEX+ISO组)、DEX后处理组(ISO+DEX组),每组各4例。ISO组腹腔注射ISO(5mg/kg),1次/天,连续3天;DEX+ISO组于ISO注射前30min腹腔注射DEX(1.25mg/kg),连续3天;ISO+DEX组于实验第2天和第3天腹腔注射ISO后30min,再腹腔注射DEX(1.25mg/kg);CON组腹腔注射等量生理盐水,连续3天。实验第4天,各组小鼠心脏采血检测血清谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK-MB);摘取心脏进行HE染色,观察各组心肌组织形态学改变;摘取脾脏,流式细胞术检测脾组织匀浆T细胞亚群分布。结果:(1)与CON组比较,ISO组AST、LDH、CK均显著升高(P0.01);心肌组织损害明显加重(P0.01);脾组织CD8~+、CD4~+CD69~+T细胞表达上升(P0.05,P0.01)。(2)与ISO组比较,DEX+ISO组AST、CK、LDH、CK-MB均下降(P0.05或P0.01);心肌组织损害明显改善(P0.01);脾组织CD4~+、CD8~+T细胞表达显著下降(P0.01),CD4~+CD69~+T细胞表达显著上升(P0.01)。(3)与ISO组比较,ISO+DEX组CD8~+T细胞表达下降(P0.05),其余均无明显变化(P0.05)。结论:DEX预处理可以明显改善ISO致小鼠急性心肌缺血损伤,其作用机制可能与DEX介导的T细胞亚群免疫应答功能改变有关。     

荜茇酰胺通过抗炎作用缓解糖尿病心肌病小鼠的心肌病变

目的:探究荜茇酰胺(PL)对糖尿病心肌病模型中心肌损伤和纤维化的作用。方法:高糖刺激心肌H9C2细胞模拟高糖环境建立细胞模型,随后分为对照组、高糖组、低剂量(2.5μmol/L)PL组及高剂量(5μmol/L)PL组,qPCR检测炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的mRNA表达水平,Western blot检测纤维化指标转化生长因子β(TGF-β)和Ⅳ型胶原蛋白(collagen IV)的蛋白表达水平。将C57BL/6小鼠随机分为对照组、1型糖尿病模型组、低剂量(2.5 mg/kg)PL组及高剂量(5 mg/kg)PL组,每组6只。除对照组外,其余各组每日腹腔注射链脲佐菌素(STZ) 50 mg/kg,连续5日,1周后检测空腹血糖≥12 mmol/L认为造模成功。造模成功后,按不同分组给予不同剂量PL,腹腔注射给药13周,每隔2周尾静脉取血检测空腹血糖,第13周检测超声心动图,第13周末麻醉后处死小鼠,取血清检测肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)和乳酸脱氢酶(LDH)水平;取心脏固定包埋切片,HE染色和天狼星红染色观察病理变化。结果:(1)高糖诱导下的H9C2细胞TNF-α和IL-6的mRNA表达水平以及TGF-β和collagen IV的蛋白表达水平较对照组明显升高,PL处理后上述指标均有所下降(P0.05);(2) STZ造模成功后,腹腔注射PL可逆转糖尿病心肌病小鼠心肌组织结构排列紊乱及纤维化等病理改变,并降低心肌损伤血清学指标CK-MB及LDH水平(P0.05)。结论:PL可以减轻糖尿病心肌病模型的炎症反应和心肌组织损伤,延缓纤维化进程。     

柚皮素减轻重症急性胰腺炎小鼠心肌损伤

目的探讨小鼠重症急性胰腺炎(SAP)相关性心肌损害的发生机制和柚皮素的保护作用。方法将小鼠随机分为:对照组(control组)、模型组(SAP组)和柚皮素干预组(Nar组),每组12只。应用L-精氨酸(8%,4 mg/kg,p H=7. 0,间隔1h腹腔注射2次)制备小鼠SAP模型,Nar(200 mg/kg)溶于0. 5%CMC-Na中制备混悬液,在首次注射L-精氨酸后0、24和48 h腹腔注射。试剂盒检测血浆c Tn I、CK-MB及LDH浓度。实时荧光定量PCR和Western blot检测心脏组织NLRP3、caspase-1、ASC、IL-1βmRNA及蛋白表达。结果与对照组比较,SAP组小鼠胰腺组织水肿、腺泡细胞坏死、大量炎性反应细胞浸润。心肌细胞肿胀、部分细胞崩解、心肌纤维结构消失,并有较多炎性反应细胞浸润。血浆CK-MB、LDH及c Tn I水平明显升高(P0. 05),心肌NLRP3、caspase-1、ASC及IL-1βmRNA和蛋白表达显著增高(P0. 05)。柚皮素干预可以降低SAP小鼠血浆淀粉酶和脂肪酶水平、减轻胰腺组织损伤和心肌组织损伤,降低血浆CK-MB、LDH及CTn I水平(P0. 01),下调心肌组织NLRP3、caspase-1、ASC及IL-1βmRNA (P0. 01)和蛋白表达(P0. 05)。结论柚皮素可能通过抑制心脏中NLRP3炎性小体激活保护SAP相关的心肌损伤。     

新生儿窒息后心肌酶检测的临床价值探讨

目的探讨心肌酶在新生儿窒息后引起的缺氧性心肌损伤中的变化及临床价值。方法选择新生儿科86例窒息新生儿,按窒息程度分为轻度窒息、重度窒息两组,于24h内及治疗七天后抽血检测天冬氨酸氨基移换酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶MB（CK-MB）、α-羟丁酸脱氢酶（α-HBDH）,并选择同期出生的正常新生儿30例作为对照组进行分析比较。结果新生儿轻、重度窒息组血清AST、LDH、CK、CK-MB、HBDH明显高于对照组,而重度窒息组又明显高于轻度窒息组,经统计学处理有非常显著意义（P〈0.01）。结论新生儿窒息早期即有心肌酶活性升高,升高水平与新生儿窒息程度呈正相关;心肌酶谱检测可作为新生儿窒息后提示心肌损害的早期、灵敏的重要指标,临床上有重要实用价值。     

热毒宁联合阿奇霉素对支原体感染患儿血清炎性因子及心肌酶水平的影响

目的 探讨热毒宁联合阿奇霉素对支原体感染患儿血清炎性因子及心肌酶水平的影响.方法 收集2013年5月至2016年5月我院收治的85例肺炎支原体感染患儿,随机分为对照组43例和观察组42例.两组患儿均给予常规治疗,对照组给予患儿阿奇霉素治疗,观察组给予患儿热毒宁联合阿奇霉素治疗.观察比较治疗前后两组患儿的血清炎性因子,包括白细胞介素-2、-6、-8(IL-2、6、8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及C反应蛋白(CRP),以及心肌酶指标,包括乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)以及肌酸激酶(CK)的水平变化,并比较两组临床疗效和不良反应发生情况.结果 治疗后,观察组的临床总有效率为95.2%,显著高于对照组的81.4%(P<0.05).两组的炎性因子水平均较治疗前有显著改善(P<0.05),且观察组的IL-2、TNF-α及CRP的改善幅度大于对照组(P<0.05),而IL-6、IL-8组间比较无明显差异(P>0.05).两组LDH、AST、CK-MB及CK水平较治疗前均明显降低(P<0.05),且观察组的LDH、CK-MB及CK显著低于对照组(P<0.05),但AST水平组间比较差异无统计学意义(P>0.05).此外,两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05).结论 相较于阿奇霉素单独用药,热毒宁联合阿奇霉素治疗肺炎支原体感染疗效显著,可有效抑制患儿的血清炎性因子和心肌酶水平,且安全性好.     

缺血后适应减轻大鼠肢体缺血再灌注后的心肌损伤

目的: 探讨肢体缺血后适应(LIPostC)对大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后心肌的保护作用。方法: Wistar大鼠随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)和缺血再灌注+缺血后适应组(IR+IPostC组)。制作大鼠LIR模型,IR+IPostC组在缺血后,实施肢体松解-结扎各5 min,反复5次,即缺血后适应,然后再进入持续的血流再灌注阶段。生物化学方法测定血清肌酸激酶(CK)及其MB同工酶(CK-MB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)及心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平,测定血清及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)水平。电镜下观察心肌组织超微结构变化。结果: 与对照组比较,IR组及IR+IPostC组血清CK、CK-MB、AST、LDH、α-HBDH及cTnI水平均升高,心肌组织及血清MDA及XOD水平升高(P<0.05),而SOD活性降低(P<0.05)。与IR组比较,IR+IPostC组血清CK、CK-MB、AST、LDH、a-HBDH及cTnI水平均降低(P<0.05),血浆及心肌组织的MDA及XOD有所降低而SOD水平升高(P<0.05)。电镜下可见C组心肌肌原纤维排列整齐,明暗带清晰,线粒体基质致密,嵴排列紧密整齐。IR组可见肌丝排列紊乱或消失,基质明显水肿,线粒体大部分或全部的嵴和膜融合或消失,空泡化明显,糖原数量明显减少。IR+IPostC组心肌上述病理改变有所减轻。结论: LIPostC可减轻LIR对心肌的损伤作用。     

血清心肌酶及心肌肌钙蛋白测定在新生儿HIE中的应用

目的探讨血清心肌酶活性及心肌肌钙蛋白在新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)中的意义,观察心肌肌钙蛋白与心肌酶之间的关系.方法设对照组(32例)和新生儿缺氧缺血性脑病组(60例),分别测定血清乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同功酶(CK-MB)活性及心肌肌钙蛋白(CTn-I),并作对比分析.结果 HIE组心肌酶的活性及心肌肌钙蛋白较对照组明显升高(P<0.05),且重度HIE组与轻度HIE组也有显著差异(P<0.01).结论血清中CK-MB及CTn-I可作为HIE脑损害程度的敏感指标,且CTn-I比CK-MB特异性更高.     

新生儿感染性肺炎血清心肌酶学测定及临床意义

目的检测新生儿感染性肺炎不同时期心肌酶,以探讨其临床意义。方法将50例肺炎类分为病毒组(15例),细菌组(20例),其它组(15例),对3组肺炎患儿和正常对照组(20例)健康新生儿进行病原学和AST、LDH、LDH1、CK、CK-MB检测。结果①50例新生儿肺炎病原学检测阳性率为70%,以病毒和细菌感染为主。②新生儿感染性肺炎细菌组和其它组与正常对照组比较,LDH1、CK、CK-MB差异有显著意义(P<0.05),病毒组与正常对照组比较,LDH1、CK、CK-MB有显著性差异(P<0.01),病毒组与细菌组和其它组比较,CK、CK-MB有显著性差异(P<0.01)。结论新生儿感染性肺炎时部分患儿有不同程度的心肌损害,检测心肌酶,尤其是CK-MB能早期诊断心肌受损的发生,从而可以早期治疗,以预防心肌炎及心衰的发生。     

PPARα和其配体在急性心肌缺血性损伤中的作用及机制初探

目的： 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）和其配体非诺贝特在急性心肌缺血性损伤中的作用及其机制。方法: 30只雄性纯系Wistar大鼠随机分为3组，每组10只：①正常对照组（control）；②异丙肾上腺素损伤组（Iso）采用腹腔内注射异丙基肾上腺素复制急性心肌缺血损伤的动物模型；③非诺贝特组（FF）在预先给予非诺贝特的基础上复制异丙基肾上腺素致急性心肌缺血损伤的动物模型。生化酶学方法测定大鼠血清心肌酶学(CK,LDH)；紫外分光光度法测定心肌组织中髓过氧化物酶（MPO）的酶活力；酶联免疫吸附实验（ELISA）测定血清中TNF-α的浓度； RT-PCR方法测定PPARα mRNA的表达水平。结果: Iso组血清心肌酶CK和LDH的含量和心肌组织中髓过氧化物酶（MPO）的酶活力显著高于对照组，心肌炎症反应较重，血清TNF-α浓度也增高，同时心肌组织中PPARα mRNA表达水平明显低于对照组； FF组与Iso组比较，前者血清心肌酶CK和LDH的释放受到抑制低于后者，心肌组织中髓过氧化物酶MPO的酶活力和血清TNF-α浓度均低于Iso组，但心肌组织中PPARα mRNA表达水平高于Iso组 （P＜0.01）。结论: PPARα参与急性心肌缺血性损伤中的炎症反应； PPARα配体非诺贝特可能是通过激活PPARα，减轻炎症反应，对缺血心肌具有保护作用。     

超敏肌钙蛋白Ⅰ在基层医院急性心肌梗塞诊断的应用分析

目的探讨超敏肌钙蛋白Ⅰ(hs-CTnI)在基层医院急性心肌梗塞诊断的应用和推广价值。方法选取本院2017年1月～2019年2月诊断的48例急性心肌梗死(AMI)患者作为观察组;另选取医院体检正常的80例健康人群作为对照组。回顾性收集两组研究者临床资料,对比分析两组研究者hs-CTnI及心肌酶谱差异性,并比较hs-CTnI与心肌酶谱诊断效能。结果观察组患者hs-CTnI及心肌酶谱指标[肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、天冬氨酸脱氢酶(AST)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)]均明显高于对照组(P0.05);hs-CTnI诊断AMI灵敏度及准确性均显著高于CK、LDH、AST、CK-MB(P0.05)。结论 hs-CTnI对于AMI具有较高的诊断价值,其灵敏度和特异度均高于心肌酶谱,值得临床推广应用。     

比索洛尔激活Nrf2/HO-1通路抑制氧化应激缓解急性心肌梗死大鼠心肌损伤

目的 探索比索洛尔对急性心肌梗死大鼠氧化应激损伤的影响及可能机制.方法 大鼠随机分为假手术组(Sham)、急性心肌梗死大鼠模型组(AMI)、比索洛尔治疗组(Bis)和比索洛尔+锌原卟啉9组(Bis+ZnPP),每组10只.造模后第8天,超声检测各组大鼠心功能;TTC染色后计算心肌梗死面积;HE和MASSON染色观察心肌损伤和纤维化程度;ELISA检测各组大鼠血清中磷酸肌酸激酶(CK)、磷酸肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)含量、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽(GSH-Px)含量;Western blot检测各组大鼠心肌中核因子E2相关因子2(Nrf2)及HO-1蛋白表达情况.结果 比索洛尔显著提升心肌梗死大鼠缩短分数(FS％)及射血分数(EF％),降低左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVEDs)及左室舒张末期后壁厚度(LVPWd),减少心肌梗死面积,减轻心肌损伤,抑制纤维化,降低血清中CK、CK-MB、LDH含量,降低心肌组织中MDA含量,并升高SOD、GSH-Px活性,上调心肌中Nrf2与HO-1蛋白的表达(P＜0.05).而给予HO-1抑制剂ZnPP后,Bis的上述作用均被减弱或抑制.结论 比索洛尔减轻急性心肌梗死大鼠氧化应激,与激活Nrf2/HO-1信号通路有关.     

外周血cTnI联合心肌酶谱检测在老年急性心肌梗死诊断中的应用研究

目的:分析外周血cTnI联合心肌酶谱检测在老年急性心肌梗死诊断中的应用价值.方法:回顾性分析我院2019年4月至2020年8月收治的62例老年急性心肌梗死(研究组)患者临床资料;另选取同期于本院进行健康体检者62例(对照组).比较两组肌钙蛋白I(Cardiac troponin I,cTnI),心肌酶四项[包括乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)、谷草转氨酶(Aspartate transaminase,AST)、肌酸激酶(Creatine Kinase,CK)以及肌酸激酶同工酶(creatine kinase-MB,CK-MB)]的水平,并分析cTnI、心肌酶谱四项检测及两者联合检测诊断急性心肌梗死的敏感性与特异性.结果:研究组血清cTnI、LDH、AST、CK、CK-MB水平均高于对照组(P<0.05).cTnI联合心肌酶谱四项检测敏感性及特异性均高于单一cTnI、心肌酶谱检测(P<0.05).结论:心肌酶谱与cTnI联合诊断急性心肌梗死敏感性、特异性更高,可有效降低漏诊和误诊的风险.     

去甲肾上腺素预处理对大鼠缺血再灌注心肌的延迟性保护作用

目的观察去甲肾上腺素预处理后热休克蛋白(HSP70)在心肌细胞的表达以研究去甲肾上腺素预处理对大鼠离体缺血再灌注损伤心肌的延迟性保护作用.方法24只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组(n=8)及实验组(E112h及E24h组),实验组按腹腔注射去甲肾上腺素到建立Langendorff灌注模型的时间分为E12h及E24h组,每组各8只.分别检测LDH及CK的漏出量、心肌ATP含量及心功能指标(LVSP及±dp/dt max),用Westem Blot法测量心肌组织中HSP70的含量.结果E12h组HSP70表达较对照组增高,E24hHSP70表达最高.E24h组LDH与CK含量较其它两组低,而ATP较其它两组高(P＜0.01),心功能改善.E12h与对照组相应各指标(LDH、CK、ATP、LVSP及±dp/dt max)间差异无显著性.结论去甲肾上腺素预处理24h后HSP70高表达对大鼠离体缺血再灌注心肌有延迟性保护作用.     

抗衰老Klotho蛋白减轻大鼠乳鼠心肌细胞缺氧/复氧损伤

目的:观察抗衰老Klotho蛋白对大鼠乳鼠原代心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的作用并探讨其作用机制。方法:建立大鼠乳鼠心肌细胞H/R模型,并将心肌细胞分为正常对照组、H/R模型组和不同浓度(0.1μmol/L、1μmol/L和10μmol/L)Klotho作用H/R组。观察各组心肌细胞H/R前后搏动频率变化,利用MTT方法检测细胞存活率;测定各组心肌细胞H/R后LDH、CK、AST的漏出量及MDA含量、SOD活性;流式细胞术检测各组心肌细胞的凋亡率;real-time PCR检测各组心肌细胞中内质网应激标记及凋亡相关分子GRP78、CRT和CHOP和caspase-12 mRNA的表达情况;Western blot法检测心肌细胞内内质网应激凋亡蛋白CHOP和caspase-12蛋白表达及Akt磷酸化水平。结果:与正常对照组相比,H/R模型组中心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著下降,细胞凋亡率显著升高(P0.05);LDH、CK、AST和MDA含量升高而SOD活性显著降低(P0.05);GRP78、CRT、CHOP和caspase-12 mRNA表达显著增高(P0.05);CHOP和caspase-12蛋白表达随之增高而Akt的磷酸化水平显著降低(P0.05)。与H/R模型组相比,抗衰老Klotho蛋白作用H/R心肌细胞后,心肌细胞搏动频率和细胞存活率显著升高,细胞凋亡率逐渐降低(P0.05),LDH、CK、AST和MDA含量下降而SOD活性显著增高(P0.05),GRP78、CRT、CHOP和caspase-12 mRNA的表达逐渐降低(P0.05),CHOP和caspase-12蛋白表达也随之降低,而Akt磷酸化水平显著增加(P0.05)。结论:抗衰老Klotho蛋白能够提升H/R损伤后心肌细胞的存活率,抑制细胞凋亡,通过抵抗氧化应激和过度内质网应激反应发挥作用,并与激活Akt磷酸化有关。     

大蒜素对病毒性心肌炎小鼠的治疗作用

目的:观察大蒜素(garlicin,Gal)注射液对病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠的作用并探讨其可能的作用机制。方法:将40只BALB/c健康小鼠随机分为4组:正常组(control组)、VMC模型组以及大蒜素低剂量组(Gal-L组)与高剂量组(Gal-H组);经相应处理后,HE染色观察心肌组织形态;比色法检测血清中乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和肌酸激酶(CK)的水平;Western blot检测心肌组织中Bcl-2、Bax、cleavedcaspase-9、cleaved-caspase-3、cleaved-PARP与cleaved-caspase-8的蛋白水平。结果:HE染色结果显示大蒜素能减少病毒性心肌炎小鼠心肌组织的坏死与炎性细胞的浸润;与VMC组相比,大蒜素呈浓度依赖性降低血清中LDH、AST和CK的水平,同时,降低心肌组织中Bax、cleaved-caspase-9、cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的蛋白表达水平,升高Bcl-2的蛋白表达水平,而cleaved-caspase-8的蛋白水平不变。结论:大蒜素能有效改善病毒性心肌炎小鼠的心肌损伤,降低血清中LDH、AST和CK的水平,其可能的作用机制可能与内源性细胞凋亡通路有关。     

血红素氧合酶-内源性一氧化碳系统对脂多糖性休克大鼠心脏的影响

目的:探讨血红素氧合酶-内源性一氧化碳系统是否对脂多糖性休克大鼠的心脏有保护作用。方法:40只健康清洁级Sprague-Dawley大鼠随机分为4组:①对照(C)组,n=10;②脂多糖性休克(S)组,n=10,10mg/kgE.coli脂多糖(LPS)稀释至0.5mL静脉注射,待其MAP下降至给予LPS前75%时,腹腔内注射1mL50mmol/L碳酸氢钠溶液;③LPS性休克 ZnPP-IX(LZ)组,n=10,休克模型的复制同②,成功后,将10μmol/kgZnPP-IX用50mmol/L碳酸氢钠溶液稀释至1mL腹腔内注射;④ZnPP-IX组(Z)组,n=10,0.5mL0.9%氯化钠溶液静脉内注射,2h后将10μmol/kgZnPP-IX稀释至1mL腹腔内注射。测定各组腹腔内注射碳酸氢钠溶液或ZnPP-IX前及后30min、60min、90min时的LVSP及±dp/dtmax;C组和Z组在静脉内注射氯化钠溶液后6h,S组和LZ组则在静脉内注射LPS6h,检测血中LDH和CK的含量,COHb的浓度及左心室心肌组织内HO-1mRNA、HO-2mRNA及HO-1、HO-2蛋白水平。结果:①LZ组大鼠的LVSP和±dp/dtmax均分别低于S组(P<0.05),其血浆中LDH、CK的含量均分别高于S组(P<0.05);S组大鼠血中COHb水平明显高于LZ组(P<0.05)。②LZ组大鼠其左心室心肌组织内HO-1mRNA表达水平及HO-1蛋白水平明显低于S组(P<0.05);而各组间左心室心肌组织内HO-2mRNA表达水平及HO-2蛋白水平均无显著差异(P>0.05)。结论:脂多糖性休克大鼠其心肌组织内HO-1的上调及随后的CO增加可能对心脏发挥着保护作用。