穿透性角膜移植术180例临床研究

目的 观察光学性及治疗性穿透性角膜移植术的疗效及并发症.方法 对分别用新鲜角膜和甘油保存角膜做穿透性角膜移植的180例(180眼)进行回顾性总结.结果 用新鲜角膜行光学性角膜移植76例,植片透明者65例,占85.53%;用甘油保存角膜行治疗性角膜移植104例,植片全部浑浊.术后主要并发症:免疫排斥反应光学性穿透性角膜移植组8例(10.53%),治疗性穿透性角膜移植组48例(46.15%);继发性青光眼光学性穿透性角膜移植组3例(3.95%),治疗性穿透性角膜移植组20例(19.23%).结论 光学性穿透移植可使角膜盲患者复明,但防治并发症是成功的关键.治疗性穿透移植可有效去除病灶,控制原发病,为二期光学性角膜移植创造条件.     

雷帕霉素抑制大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的实验研究

目的：研究雷帕霉素对大鼠高危角膜移植免疫排斥反应的抑制作用。方法：建立大鼠高危穿透性角膜移植动物模型，以角膜新生血管化sD大鼠为受体。Wistar大鼠为供体，分别腹腔注射0．5％羧甲基纤维素（对照组）、雷帕霉素、环孢霉素A、雷帕霉素＋环孢霉素A，共12d。用裂隙灯显微镜对角膜植片进行临床观察，记录角膜植片存活时间，并进行组织学检查。结果：用药组角膜植片的存活时间显著增加（P〈0．01）；组织学发现联合用药组的角膜炎性细胞浸润、新生血管形成度水肿程度均明显好于其他各组。结论：雷帕霉素能显著延长角膜植片的存活时间，对大鼠高危穿透性角膜移植排斥反应具有抑削作用，与环孢霉素A联合用药具有协同作用，优于各单药物治疗组。     

穿透性角膜移植术后免疫排斥反应高危因素分析

目的 分析穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的高危因素。寻找角膜移植术后免疫排斥反应的有效防治方法。方法 对穿透性角膜移植术后发生免疲排斥反应的31例，从角膜盲原因、植床新生血管程度、合并症、移植片直径、联合手术等5大高危因素进行回顾性分析。结果 血管化角膜、大植片移植、植床术前的活动性炎症、偏中心移植、多次移植、联合手术等应视为穿透性角膜移植术后免疲排斥反应的高危因素，而移植片上皮反复脱落、眼压高、旧病复发、术眼再次手术、缝线松解与拆线等可能是诱导排斥反应发生的促发因素。结论 尽量减轻角膜血管化，掌握适当的手术时机，强调病人的及时复诊和治疗，术后坚持局部使用免疲抑制剂半年，排斥发生时及时足量地全身及局部使用激素和免疲抑制剂，均可以在一定程度上帮助控制免疲排斥反应。     

细胞凋亡及相关基因bcl-2在大鼠角膜移植物的表达及其意义

目的 探讨细胞凋亡及其相关基因bcl-2与角膜移植急性免疫排斥反应的关系。方法 建立大鼠穿透性角膜移植模型。实验分为3组。A组：非手术基本对照组（Wistar）；B组：同基因角膜移植组（Wistar→Wistar）；C组：同种异体角膜移植组（Wistar→SD）。B、C组分别于术后不同时间（7、10和14d）取角膜植片。细胞凋亡原住末端标记（TUNEL法）检测各组角膜植片细胞凋亡情况，免疫组织化学方法（SABC法）检测植片bcl-2蛋白表达。并以A组正常大鼠角膜做对照。对染色结果采用全自动图像分析系统处理，计算阳性单位PU值。结果 正常角膜上皮细胞层仅有极少量凋亡细胞，基质层及内皮细胞层几乎无凋亡细胞；术后1周各移植组（B组，C组）角膜植片各层均可见散在细胞凋亡，与A组相比差异有显著性（P〈0．01），B组与C组差异无显著意义（P〉0．05）；与A组相比，急性排斥期B、C组角膜植片细胞凋亡均增高，且C组增高曼明显。正常角膜可见bcl-2蛋白表达，主要存在于上皮层；术后1周各移植组（B组，C组）角膜植片bcl～2蛋白表达轻度减低，与A组相比差异有显著意义（P〈0．01）；与B组同一时间点相比，急性排斥期C组角膜植片bcl-2蛋白表达明显减低（P〈0．01）。结论 细胞凋亡在角膜移植急性免疫排斥反应中发挥重要作用，调控基因bcl-2可作为判断急性免疫排斥反应的重要指标。     

桥式角膜植片在治疗性穿透性角膜移植术中的应用

应用桥式角膜植片行穿透性角膜移植术共33只眼,随访观察了2.2年,植片的透明率为76％;免疫排斥率为18.1％;继发性青光眼发生率为9.1％,取得了满意的疗效。该手术主要适用于角膜严重性感染和穿孔,对术后预防并发症和增加植片透明率都有重要作用,是值得推广应用的一种手术方法。     

IL-1ra抑制大鼠角膜移植免疫排斥反应的研究

目的　观察白细胞介素 - 1受体拮抗剂 (IL 1ra)对大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的影响。方法　建立大鼠同种异体穿透性角膜移植动物模型 ,受者随机分为生理盐水对照组 ,CsA治疗组 ,IL - 1ra治疗组。术后连续观察 2周 ,对各组大鼠角膜植片存活情况进行评分比较 ,评价药效。结果　IL - 1ra组与CsA组角膜植片存活时间分别为 (19.5 83± 0 .2 88)d和 (16.667± 0 .43 2 )d ,与对照组 (11.0 0 0± 0 .3 2 6)d相比 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;IL - 1ra组和CsA组排斥反应指数 (RI)均明显低于对照组 (P <0 .0 1) ;IL - 1ra组新生血管评分明显低于对照组和CsA组 (P <0 .0 1)。结论　IL - 1ra可明显抑制角膜移植术后免疫排斥反应 ,减轻炎性反应 ,减少新生血管生成 ,延长角膜植片的存活时间     

穿透性角膜移植83眼的临床观察

目的探讨穿透性角膜移植术治疗严重角膜疾病的疗效。方法对8l例患者（83眼）进行穿透性角膜移植,记录所有手术眼角膜移植术前、后视力并观察角膜移植术中、术后并发症情况。结果本组83眼穿透性角膜移植,术后视力较术前有所提高（P〈0．01）。随访期内83眼手术中79眼角膜植片透明。术后17眼出现移植排斥反应,8眼复发感染,4眼继发性青光眼。结论穿透性角膜移植是治疗严重角膜疾病的主要方法,其疗效确定。     

深板层角膜移植术治疗坏死性角膜基质炎

目的：评价深板层角膜移植治疗坏死性角膜基质炎的临床效果及影响因素。方法：采用深板层角膜移植治疗坏死性角膜基质炎21例（21眼），临床观察3～23个月。结果：术后矫正视力≥0．3者19眼（90．48％），发生排斥反应3眼（14．29％），复发1例（4．76％）。植片透明21眼，透明率为100％。结论：深板层角膜移植术具有清除病灶彻底、排斥反应发生率低、无内眼手术并发症等优点，是治疗坏死性角膜基质炎的理想方法。     

大植片穿透角膜移植术

目的　探讨穿透性大植片角膜移植治疗角膜大病灶的手术的安全性和有效性。　方法　采用 >9mm直径的角膜移植片行角膜移植术治疗角膜病 1 1例 ( 1 1只眼 ) ,并与 6～ 7mm直径角膜移植组 1 5例( 1 5眼 )进行对照。　结果　两组角膜透明率均为 1 0 0 % ;裸眼视力≥ 0 .5者大植片组有 8眼 (占72 .7% ) ,小植片组有 5眼 (占 3 3 .3 % ) ,大植片组视力恢复优于小植片组 (P <0 .0 5)。术后 1 2个月角膜散光的发生率大植片组较小植片组低 (P <0 .0 5)。大角膜植片并不增加排斥反应的治疗难度。　结论　治疗角膜病变范围较大的角膜病患者 ,采用 >9mm直径的角膜植片行角膜移植的手术方法是安全可行的。     

穿透性角膜移植术41例临床分析

目的研究穿透性角膜移植术的病因构成、疗效及术后并发症。方法对近年来施行的41例（41眼）穿透性角膜移植术（PKP）患者的临床资料进行回顾性研究,记录病因、术前及术后视力,并观察术后植片透明度及并发症。结果术后第1天所有患眼植片基本透明,随访05～30年,植片透明34例,发生排斥反应后影响角膜透明度4例,单疱病毒性角膜炎复发致角膜云翳2例,角膜新生血管1例。术后第1天所有术眼视力好转,其中39眼较术前显著提高（P〈0．01）;随访至3年,术后视力〈005者3例,005～010者9例,0．2～05者25例,〉05者4例,较之术前均有显著改善（均P〈0．01）。术后发生并发症13例,其中继发性青光眼3例,排斥反应8例,原有疾病（单疱病毒性角膜炎）复发2例。结论穿透性角膜移植术是治疗严重角膜疾病的有效手段。     

环孢素A联合地塞米松长期滴眼对高危角膜移植术后免疫排斥反应的影响

目的探讨长期应用环孢素A(Cyclosporin A,CsA)联合地塞米松滴眼液对高危穿透性角膜移植术后免疫排斥反应的防治效果及其安全性..方法42例(42眼)高危穿透性角膜移植术后患者,术后3个月随机分为二组:Ⅰ组为实验组23例23眼,应用1%CsA和0.1%地塞米松溶液滴眼,每日各2～3次,交替用药,术后6个月后地塞米松浓度改为0.05%,每日各2次,交替用药,直至术后1年;Ⅱ组为对照组19例19眼在术后3月改为单纯1%CsA滴眼,每日3次,直至术后1年.所有病例随访观察1年以上.结果42眼PKP术后发生角膜植片免疫排斥反应11眼(26.19%),其中I组4眼(17.39%),Ⅱ组7眼(36.84%),差异具有显著性(P＜0.05).其它并发症的发生率两组间无显著性差异.术后患者视力均较术前明显提高,差异具有显著性(P＜0.05).结论较长期应用1%CsA联合地塞米松滴眼,可以安全、有效地降低高危PKP术后植片免疫排斥反应发生率,从而提高穿透性角膜移植的成功率.     

TLR2在大鼠穿透性角膜移植术后免疫排斥反应中的作用

目的 通过采用实时荧光定量PCR技术(RT-PCR)动态检测大鼠角膜组织TLR2 mRNA的表达,研究TLR2在穿透性角膜移植术后免疫排斥反应中的作用.方法 实验分四组:正常对照组(N)、同种同体角膜移植组(A)、同种异体角膜移植组03)和同种异体角膜移植激素抗排斥组(C),A、B、C三组大鼠给予穿透性角膜移植术,术后裂隙灯下观察角膜透明度、新生血管并用排斥反应指数评分;分别于术后第5、7、9天取材,行组织病理学检查和荧光实时定量PCR检测,动态观察角膜组织TLR2 mRNA的表达.结果 术后随时间变化角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊、新生血管生长.B组大鼠角膜排斥反应指数平均在术后第7天符合排斥反应的诊断并获病理学支持:A组和C组大鼠角膜的排斥反应指数计分未达到诊断标准.正常的角膜组织可见TLR2 mRNA表达;三个手术干预组TLR2 mRNA表达差异倍数均明显高于正常对照组,同种异体角膜移植组角膜TLR2 mRNA的表达较同种同体角膜移植组显著增加,激素抗排斥组角膜TLR2 mRNA表达较同种异体角膜移植组显著降低(P<0.05).结论 TLR2可能作为天然免疫识别受体识别移植抗原,参与角膜移植术后免疫排斥反应.

Abstract：

Objective To gain insight into the role of Toll-like receptor 2 (TLR2) in graft rejection following penetrating keratoplasty, and investigate the expression of TLR2 mRNA in the corneal graft. Methods Penetrating keratoplasty was performed in 3 groups of rats for orthotopic autologous corneal transplantation (group A), allograft corneal transplantation (group B), or allograft corneal transplantation with hormone treatment (C). The transparency and neovascularization of the cornea were observed using a slit-lamp microscope and scored according to the rejection index, with normal cornea serving as the control. The corneal tissues were sampled at 5, 7, and 9 days after the transplantation for histopathological examination and detection of TLR2 mRNA expression using RT-PCR. Results With the passage of time, edema, opacities and neovascularization of the comeal graft occurred after the operation in all the groups. Seven days after the operation, the rejection index of group B, but not that of groups A and C, met the diagnostic criteria for graft rejection with also support by histopathological evidence. The expression of TLR2 mRNA was detected in normal corneas and augmented in the corneal grafts in the 3 transplantation groups. TLR2 mRNA expression in group B was significantly higher than that of group A, and the expression in group C decreased significantly in comparison with that in group B (P<0.05). Conclusion As the recognition receptors of native immune system, TLR2 in the rejected corneal grafts may recognize the allograft antigen and play a role in acute graft rejection after penetrating keratoplasty.     

CD86在大鼠角膜移植排斥反应中的表达及意义

目的 观察大鼠角膜组织中共刺激分子CD86(B7-2)的原位表达，以了解共刺激分子在大鼠角膜移植排斥反应中的作用和意义。方法 制作大鼠角膜移植模型，观察角膜透明度、新生血管。采用免疫组化法检测CD86在角膜、脾脏组织中的表达。结果 术后角膜植片均出现不同程度的新生血管，角膜水肿、混浊，基质增厚。CD86在正常的角膜组织中无阳性表达；在移植后出现急性排斥反应的角膜上皮层中有大量阳性细胞表达。在脾脏的阳性细胞表达与文献报道的一致。结论 共刺激分子CD86在移植后发生排斥的角膜组织中的阳性表达，可能与免疫排斥反应有关。     

Effects of 1alpha, 25-dihydroxyvitamin D3 on the acute immune rejection and corneal neovascularization in high-risk penetrating keratoplasty in rats]

OBJECTIVE: To investigate the effects of 1,25-dihydroxyvitamin D(3) (1,25(OH)(2)D(3)), a hormone that has immunosuppressive properties, on acute rejection and corneal neovascularization in rat keratoplasty model, so as to assess the therapeutic effects and explore the mechanism of 1,25(OH)(2)D(3) as an immunosuppressant in corneal transplantation. METHODS: High risk corneal transplantation was performed orthotopically in SD rat models of high risk penetrating keratoplasty established by placing three 10-0 nylon sutures in the central corneas for two weeks, with the Wistar rats as the donors. The SD rat models were randomly assigned into 5 groups and treated with 1,25(OH)(2)D(3) at varied concentrations and cyclosporine A (CsA). The expressions of interleukin (IL)-1alpha, tumor necrosis factor (TNF)-alpha, and vascular endothelial growth factor (VEGF) mRNA were detected by in situ hybridization (ISH). RESULTS: 1,25(OH)(2)D(3) significantly suppressed acute graft rejection and inhibited corneal neovascularization as compared with saline. 1,25(OH)(2)D(3) showed better immunomodulatory effects when administered along with CsA in rat corneal allotransplants. ISH study demonstrated that 1,25(OH)(2)D(3) strongly suppressed mRNA and protein expressions of the cytokines IL-1alpha and TNF-but not those of VEGF. CONCLUSION: Topical administration of 1,25(OH)(2)D(3) can be effective in suppressing acute corneal graft rejection by inhibiting the expression of proinflammatory cytokines (IL-1alpha and TNF-alpha).     

环孢霉素A和地塞米松防治穿透性角膜移植术后排斥反应的临床观察

OBJECTIVE: To evaluate the efficacy of topical 1% cyclosporin A (CsA), 0.1% dexamethasone or 1% CsA combined with 0.1% dexamethasone in preventing and treating immune rejection after penetrating keratoplasty (PKP). METHODS: Eighty-six eyes from 86 PKP patients were randomly divided into 3 groups: (1) Thirty-one eyes were treated with 1% CsA and dexamethasone for 3 months. (2) Twenty-nine eyes were treated with 1% CsA for 3 months; (3) Twenty-six eyes were treated with 0.1% dexamethasone for 3 months. The rejected eyes of postoperation were given with the dexamethasone injection under conjunctiva and increased the frequency of CsA and dexamethasone eye drops. All patients were followed up for 1 to approximately 2 years. RESULTS: There was a statistical difference in the 3 groups in the postoperative immune rejection which occurred in 5 out of 29 (17.3% ) eyes treated with 1% CsA, 7 out of 26 (26.9%) treated with 0.1% dexamathasone, and 3 out of 31 (9.7%) with 1% CsA and dexamethasone. The immune rejection after PKP occurred in 15 eyes and 13 eyes were cured by sub-conjunctiva injection of dexamethasone combined with eye drops of 1% CsA and 0. 1% dexamethasone. CONCLUSION: The efficacy of CsA combined with dexamethasone topically is better than that of 1% CsA or 0.1% dexamethasone alone in preventing rejection episodes. It is effective to cure the graft rejection after PKP with sub-conjunctiva injection of dexamethasone combined with the eye drop of 1% CsA and 0.1% dexamethasone.     

CD86在大鼠角膜移植排斥反应中的表达及意义

目的 观察大鼠角膜组织中共刺激分子CD86(B7-2)的原位表达,以了解共刺激分子在大鼠角膜移植排斥反应中的作用和意义。方法 制作大鼠角膜移植模型,观察角膜透明度、新生血管。采用免疫组化法检测CD86在角膜、脾脏组织中的表达。结果 术后角膜植片均出现不同程度的新生血管,角膜水肿、混浊,基质增厚。CD86在正常的角膜组织中无阳性表达;在移植后出现急性排斥反应的角膜上皮层中有大量阳性细胞表达。在脾脏的阳性细胞表达与文献报道的一致。结论 共刺激分子CD86在移植后发生排斥的角膜组织中的阳性表达,可能与免疫排斥反应有关。     

146例穿透性角膜移植的临床研究

目的探讨穿透性角膜移植的主要病因、疗效及并发症.方法对146例(158眼)穿透性角膜移植(PKP)进行回顾性研究,随访0.5～7.5年.结果病因:单纯疱疹病毒性角膜炎112眼(70.9%),角膜白斑18眼(11.4%),细菌性角膜炎11眼(7.0%),圆锥角膜8眼(5.0%),其他9眼(5.7%).疗效:植片透明140眼;视力:0.05以下6眼(4.0%),0.05～0.2,30眼(19%),0.25～0.5,82眼(52%),0.6以上40眼(25%);并发症:主要并发症是免疫排斥反应6例(4.0%),12例单纯疱疹病毒性角膜炎复发.结论穿透性角膜移植是治疗角膜疾病的有效方法.     

树突状细胞在大鼠穿透性角膜移植排斥反应中的作用

目的 观察大鼠角膜组织中树突状细胞的分布,以了解树突状细胞在穿透性角膜移植排斥反应中的作用.方法 制作大鼠穿透性角膜移植模型,观察角膜透明度、新生血管.采用免疫组织化学方法检测OX-62 树突状细胞在角膜的分布.结果 术后角膜植片均出现不同程度的新生血管、角膜水肿、混浊、基质增厚.排斥反应发生率100%.正常角膜组织中未见OX-62 树突状细胞分布,在发生急性排斥反应的角膜上皮层中有阳性细胞表达.脾脏阳性细胞表达与文献报道一致.结论 OX-62 树突状细胞出现在移植后发生排斥的角膜组织中,角膜组织中的树突状细胞可能参与角膜移植后的免疫反应.