IGF-Ⅱ和IGF-Ⅱ-mRNA异常表达对肝癌诊断的价值

目的:探讨胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅱ及IGF-Ⅱ-mRNA在肝癌组织中的表达特点及游离IGF-Ⅱ的临床价值。方法:以免疫组化法分析肝癌癌灶、癌周和远癌组织中IGF-Ⅱ的表达与胞内定位。从肝组织中制备总RNA,经随机引物和逆转录酶合成IGF-Ⅱ-cDNA,巢式聚合酶链反应扩增及DNA测序证实,分析IGF-Ⅱ-mR-NA的表达,并分析血清游离IGF-II水平。结果:肝癌组织IGF-Ⅱ表达呈强阳性,明显高于癌旁和远癌肝组织,分布呈胞浆包涵体样、全胞浆和核内三种形态。癌灶总RNA水平显著低于癌周与远癌组织;其IGF-Ⅱ灵敏度为2ng/L,扩增基因片段为170bp,癌灶和癌周组织中IGF-Ⅱ基因检出率,分别为100%和53.2%,远癌组织未见扩增片段。肝癌患者血游离IGF-II水平明显高于肝硬化和慢性肝炎患者。结论:IGF-Ⅱ及IGF-Ⅱ-mRNA的过度表达与肝癌形成有关,并有助于肝癌早期诊断。     

Glypican-3及胰岛素样生长因子Ⅱ在肝癌中的表达及意义

目的:研究人肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)组织中G1ypican-3及胰岛素样生长因子Ⅱ (IGF-Ⅱ)的表达,并探讨其与肿瘤发生发展的关系.方法:采用免疫组化法检测80例肝癌组织及癌旁肝组织中Glypican-3和IGF-Ⅱ的表达情况.结果:Glypican-3、IGF-Ⅱ在癌组织中的阳性率分别为73.75%和76.25%,而在癌旁组织中的阳性率分别为53.75%和48.75%,癌组织与癌旁组织比较差异有统计学意义(P<0.05).Glypican-3在人肝癌组织中的表达与肿瘤分化程度、肝外转移及肿瘤大小相关(P<0.05),而与临床分期、门静脉癌栓、肿瘤个数、血清AFP水平及术后复发无明显关系(P>0.05).IGF-Ⅱ在人肝癌组织中的表达与肿瘤分化程度、肝外转移及肿瘤大小相关(P<0.05),而与临床分期、门静脉癌栓、肿瘤个数、血清AFP水平及术后复发无明显关系(P>0.05).在癌组织中Glypican-3与IGF-Ⅱ的表达呈正相关(γ=0.6253,P<0.01).结论:肝癌组织中Glypican-3及IGF-Ⅱ高表达,可能可促使肝癌细胞增殖,与肝癌的发生发展密切相关.     

肝癌组织IGF-Ⅱ启动子P4甲基化分析及意义

目的探讨人胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因启动子P4的甲基化状态与肝细胞癌的关系。方法提取手术切除的原发性肝癌及相应癌旁肝组织各12例、慢性乙型肝炎肝穿刺活检组织10例、正常肝组织7例以及三株肝癌细胞系(BEL7402,SMMC7721,HepG2)的基因组DNA,分析肝癌组织IGF-Ⅱ启动子P4序列,检测各组织、细胞的IGF-Ⅱ启动子P4的甲基化状态。结果肝癌组织IGF-Ⅱ启动子P4序列与MEDLINE提供的正常序列(NT-009308)一致;肝癌、癌旁、慢性乙型肝炎以及正常肝组织IGF-Ⅱ基因启动子P4甲基化率的差别有统计学意义(χ2=26.207,P=0.000)。结论本组原发性肝癌组织IGF-Ⅱ基因启动子P4无序列缺失、突变;IGF-Ⅱ基因胚胎型启动子P4的去甲基化与肝癌发生相关。     

IGF-Ⅰ IGF-Ⅱ在胃癌中的表达及临床意义

目的：探讨IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ在胃癌中的表达与胃癌的发生、发展、分期、浸润和转移等生物学行为的关系。方法：应用免疫组化S-P法检测40例胃癌（GC）中IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的表达,并结合临床资料进行研究,以胃镜活检经病理证实的20例正常胃组织作为对照组。采用X2检验。结果：胃癌、癌旁组织IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的表达率较正常胃组织明显增高（P〈0.01）,且IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ的表达与胃癌的分化程度、浸润深度、肿瘤大小、淋巴结转移、及TNM分期密切相关（P〈0.05）,而与性别及年龄无关。结论：IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ在胃癌中的过表达与胃癌发生发展及浸润转移有关,是胃癌发生过程中一个重要事件,对胃癌的发生发展有促进作用。     

子宫肌瘤中IGF-Ⅱ、PCNA的表达及意义

目的研究胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)、增殖细胞核抗原(PCNA)在子宫肌瘤中的表达,探讨IGF-Ⅱ、PCNA在子宫肌瘤发生中的作用。方法用免疫组织化学方法,检测IGF-Ⅱ在子宫肌瘤组织、肌瘤旁平滑肌组织及正常子宫平滑肌组织中的表达,并用同法检测组织中PCNA的表达。结果①IGF-Ⅱ在子宫肌瘤组织、子宫肌瘤旁平滑肌组织及正常平滑肌组织中表达的阳性率分别为60%、16.67%、10%,三组表达率差异有显著性(P=0.000)。②PCNA在子宫肌瘤组织、子宫肌瘤旁平滑肌组织及正常平滑肌组织中表达的阳性率分别为83.3%、26.7%、20%,三组表达率差异有显著性(P=0.000)。③子宫肌瘤组IGF-Ⅱ的表达与PCNA的表达相关性研究rs=0.55,呈正相关,P<0.05,有统计学意义。结论①IGF-Ⅱ及PCNA在子宫肌瘤细胞中高表达,提示IGF-Ⅱ及PCNA可能参与子宫肌瘤的发生。②IGF-Ⅱ与PCNA在子宫肌瘤中的表达呈正相关,提示IGF-Ⅱ通过其促进细胞增殖的作用参与了子宫肌瘤的发病。     

人原发性肝细胞癌和癌旁组织HBV X基因产物表达和ets-2、IGF-Ⅱ、C-myc及N-ras表达的对比研究

本文采用RNA杂交和免疫印迹法检测了7对原发性肝癌(PHC)和癌旁组织及血清中HBxAg、ets-2、IGF-Ⅱ、C-myc和N-ras的表达。结果表明,在肝组织内HBxAg表达为17和28Kd的特异性条带。在3例血清中,可见到17Kd HBxAg。在有HBxAg表达的肝组织内,常有多种痛基因如ets-2,IGF-Ⅱ、C-myc和/或N-ras同时表达增加的现象,提示HBxAg的非特异性反式激活作用。在部分癌旁组织有癌基因表达高于癌组织的现象。文内讨论了HBxAg与癌基因表达相互关系及在PHC发生中的可能作用。     

肝癌及癌旁组织IGF-Ⅰ受体表达及临床病理学特征

目的:观察肝癌及其癌旁组织中胰岛素样生长因子-Ⅰ受体(IGF-ⅠR)的表达及其临床病理学特征。方法:采用免疫组织化学方法,分别检测30例肝癌癌灶组及其自身对照的癌周组织中IGF-ⅠR的表达,并分析与其临床病理学特征及IGF-Ⅱ表达的关系。结果:肝癌IGF-ⅠR均呈较高表达,在肝癌癌灶为80.0%(24/30)及癌周组织表达43.3%(13/30),差异有统计学意义(2χ=8.53,P<0.01)。肝癌癌灶组中IGF-ⅠR阳性表达与肿瘤分化程度显著相关(P<0.05),而与肿瘤数目、大小、HBsAg阳性等无明显相关(P>0.05)。中、低分化程度肝癌组织中IGF-ⅠR表达率显著高于高分化组肝癌(P<0.05),且与IGF-Ⅱ表达具有正相关关系。结论:IGF-ⅠR在肝癌中过度表达,且与肝癌的形成和发展有关。     

肝癌组织IGF-Ⅱ启动子甲基化状态及病理学特征分析

目的:分析人肝细胞癌(HCC)组织中胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因启动子甲基化状态及其临床病理学特征。方法:以甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)分析人HCC癌灶、癌旁及正常肝脏组织IGF-Ⅱ基因P3甲基化状态及其病理学特征。结果:人癌灶、癌旁以及正常肝组织P3甲基化率分别为0%、47.5%和100%,各组之间的甲基化状态差异均有统计学意义。癌旁组织P3甲基化率在低分化组显著低于高中分化组(P=0.000);HBsAg阳性组显著低于HBsAg阴性组(P=0.040),但与性别、年龄、肿瘤大小及AFP之间差异未见显著统计学意义。结论:IGF-Ⅱ基因启动子甲基化程度降低在HCC形成过程中起重要作用。     

原发性肝癌中转化生长因子β1及其Ⅱ型受体表达与病理学意义

目的：研究原发性肝癌中TGF－β1及其Ⅱ型受体（TGF－β1RⅡ，TβRⅡ）表达及其与病理学特征的关系。方法：运用免疫组化方法（SABC法）检测67例肝癌和癌旁组织中TGF－β1及TβRⅡ的表达。结果：TGF－β1癌旁组织中表达高于癌组织，实质细胞，间质细胞均有不同程度的表达；在肝外转移组，包膜浸润组其表达显著增高。TβRⅡ在肝癌细胞中多为阴性，但部分癌细胞胞浆中有表达；癌旁肝细胞中其表达较正常对照减少；在门脉癌栓组，包膜浸润组，Edmondson分级Ⅲ-Ⅳ级的肝癌组织中TβRⅡ的表达显著降低。结论：肝癌中TGF－β信号途径发生障碍。TGF－β1表达增高，通过自分泌和旁分泌方式发挥作用。肝癌组织中TβRⅡ表达降低，并可能存在转运障碍。TGF－β1的上调及TβRⅡ的缺失，转运障碍是肝癌发生，演进中的重要步骤。     

原发性肝癌HBV存在状态,HBxAg表达和癌基因ets-2、IGF-Ⅱ、c-myc、N-ras表达的实验研究

我们与上海肿瘤所合作,用DNA分子杂交和免疫印迹等方法,研究了12对肝癌/癌旁组织癌基因表达、HBxAg表达和HBV DNA的存在状态及相互关系。结果表明,癌和癌旁组织,至少有一种以上的癌基因表达,有的癌组织可表达3～4种癌基因。IGF-Ⅱ表达为胚胎型的转录     

survivin基因在人原发性肝癌组织中的表达及其意义

目的： 探讨survivin基因在人原发性肝癌发生发展中的作用及可能的机制。方法：应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测15例原发性肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织及肝正常组survivin基因及相关基因c-myc、p53、STAT3和VEGF的mRNA表达水平，应用Western blotting法及免疫组织化学染色法检测上述组织中survivin基因的蛋白表达水平及其定位。结果： 肝癌组织及癌旁组织中survivin基因mRNA的表达量均显著高于正常肝组织（P<0.01）, 肝癌组织中survivin基因mRNA的表达量明显高于癌旁组织（P<0.01），肝癌及癌旁组织中c-myc、 STAT3、VEGF基因mRNA的表达量均显著高于正常肝组织（P<0.01），而p53基因mRNA的表达量显著低于正常肝组织（P<0.01）。肝癌组织及癌旁组织中survivin基因的蛋白表达水平均显著高于正常肝组织（P<0.01），且肝癌组织中survivin基因的表达水平显著高于癌旁组织（P<0.01）。结论:survivin基因的异常表达在肝癌的发生发展中起促进作用，可作为治疗的理想靶点。     

IGF-Ⅱ在肝硬变和肝癌组织的表达及其与LCD的相关性研究

目的 :探讨 IGF- 在肝硬变及肝细胞癌 (HCC)发生发展中的作用及其与不典型增生肝细胞 (L CD)的关系。方法 :运用免疫组织化学 S- P法对 5 7例肝硬变 ,2 9例 HCC癌旁肝组织及 2 1例 HCC进行实验研究。结果 :L CD在肝硬变及癌旁肝组织的发生率分别为 5 6 .1% (32 / 5 7例 )及 6 5 .5 % (19/ 2 9例 )。 IGF- 在 5 7例肝硬变组织、 2 9例癌旁肝组织及 2 1例 HCC中的阳性率分别为 71.9% (41/ 5 7例 ) ,72 .4% (2 1/ 2 9例 )和 47.6 % (10 / 2 1例 ) ,其中伴有 L CD肝组织中 IGF- 阳性率为90 .2 % (46 / 5 1例 ) ,不伴 L CD的肝组织中 IGF- 的阳性率为 45 .7% (16 / 35例 )。结论 :IGF- 的过度表达可能在肝细胞恶性转化早期进程中发挥重要作用 ;L CD可能是肝硬变向 HCC发展过程中的重要中间阶段。     

肾癌IGF-ⅠmRNA表达及与浸润转移的关系

目的探讨IGF-Ⅰ在肾癌组织中的表达状况.方法采用RTPCR方法检测25例肾癌及其癌周组织IGF-ⅠmRNA的表达.结果25例肾癌组织中,IGF-ⅠmRNA无表达2例,低表达13例,中等表达10例;癌旁组织无表达8例,低表达13例,中等表达4例.癌组织表达强度明显高于癌周组织(P＜0.05).16例Ⅰ、Ⅱ期癌,IGF-ⅠmRNA无表达2例,低表达11例,中等表达3例;9例Ⅲ、Ⅳ期癌,低表达2例,中等表达7例.Ⅲ、Ⅳ期癌表达强度明显高于Ⅰ、Ⅱ期癌(P＜0.05).结论IGF-Ⅰ能够促进肾癌细胞的转移.     

IGF-1、IGF-1R在大肠癌中的表达及意义

目的：探讨胰岛素样生长因子-l（IGF-l）及其受体（IGF-lR）在大肠癌发病机制中的作用及临床意义。方法：应用免疫组化染色法检测50例大肠癌组织、20例大肠腺瘤和20例正常大肠黏膜中IGF-1和IGF-lR蛋白的表达水平。结果：大肠正常黏膜、腺瘤及癌组织IGF-1、IGF-1R的表达水平逐渐升高,组间比较差异具有统计学意义（P＜0.01）。大肠癌组织中,IGF-1和IGF-1R的表达呈正相关（r=0.585,P＜0.01）。结论：IGF-1R和IGF-1在大肠癌的发生发展中具有重要作用。     

人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体反义基因对肝癌细胞恶性表型的影响

目的 研究人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体（IGF-ⅡR）反义基因对SMMC-7721人肝癌细胞恶性表型的逆转作用。方法 构建IGF-ⅡR正、反义基因真核表达质粒,用磷酸钙-DNA共沉淀的方法,导入SMMC-7721人肝癌细胞株,经G418培养基筛选稳定的抗性细胞。采用Northern杂交检测对转染细胞内源性IGF-ⅡR基因转录的抑制,观察转染细胞克隆形成率,细胞生长曲线,软琼脂生长及裸鼠致瘤能力的变化。结果 IGF-ⅡR反义基因转染肝癌细胞的内源性IGF-ⅡR基因转录受到有效抑制,转染细胞克隆形成率明显降低,并失去在软琼脂上生长的能力,裸鼠致瘤性明显降低,但细胞生长曲线无明显变化。结论 IGF-ⅡR反义基因可以有效阻断IGF-Ⅱ至IGF-ⅡR的自泌/旁泌生长刺激信号环路,一定程度地抑制肝癌细胞的恶性表型。     

非小细胞肺癌组织中HIF-1α、EGFR、IGF-1的表达及临床意义

目的 探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、胰岛素样生长因子（IGF-1）、表皮生长因子受体（EGFR）的表达水平及临床意义。方法 采用蛋白免疫印迹法检测NSCLC组织及癌旁非肿瘤组织中HIF-1α、EGFR、IGF-1的表达情况,并与临床病理特征及预后做相关分析。结果 NSCLC组织中HIF-1α、IGF-1、EGFR的蛋白表达均显著高于癌旁非肿瘤组织（P<0.05）。HIF-1α与IGF-1表达在鳞癌和腺癌中的差异均无统计学意义（P>0.05）,EGFR在鳞癌中的表达显著高于腺癌（P<0.05）。低分化癌组织中HIF-1α、IGF-1、EGFR的表达水平均显著高于中、高分化癌组织（P<0.05）,Ⅰ、Ⅱ期肿瘤组织中HIF-1α、IGF-1、EGFR的表达水平显著低于Ⅲ、Ⅳ期肿瘤组织（P<0.05）,且有淋巴结转移组织中的HIF-1α、IGF-1、EGFR表达水平显著高于无淋巴结转移组织（P<0.05）。HIF-1α与EGFR表达水平呈显著正相关（r²=0.301,P<0.05）,且与IGF-1表达水平呈显著正相关（r²=0.611,P<0.05）。HIF-1α、EGFR及IGF-1的表达水平与患者预后无明显相关性（P>0.05）。结论 HIF-1、EGFR、IGF-1在NSCLC组织中表达均显著增加,HIF-1与EGFR及EGF-1均呈正相关,且HIF-1α、IGF-1、EGFR的表达水平与分化程度、TNM分期、淋巴结转移密切相关,且EGFR与病理类型密切相关,在NSCLC的发生、发展过程中起重要作用。     

肝细胞生长因子及其受体基因在人肝癌和癌旁肝组织中的表达

目的：了解肝细胞生长因子（ＨＧＦ）及其受体基因在人肝癌和癌旁肝组织中的表达的变化规律，以及这种变化与肿瘤生物学行为的关系。方法：采用地高辛标记的ＨＧＦ及其受体ＤＮＡ探针，检测２６例人原发性肝癌及其癌旁肝组织中ＨＧＦ及其受体基因的表达。结果：ＨＧＦ在人肝部和癌旁肝组织中虽都有表达，但阳性率不及其受体基因表达，ＨＧＦ受体在肝癌和癌旁肝组织中均呈过度表达，且肝癌组织中杂交信号明显高于癌旁肝组织，有肝内外     

子宫肌瘤中ER、PR和IGF-1受体表达的研究

目的：探讨人子宫肌瘤及周围正常子宫平滑肌细胞中胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）的变化及其与雌、孕激素受体的关系。方法：免疫组织化学SABC法检测雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、IGF-1R的表达,并对其进行图像分析。结果：子宫肌瘤细胞中ER、PR、IGF-1R的表达明显高于子宫肌层细胞的表达。结论：子宫肌瘤的生长与子宫肌瘤组织ER、PR、IGF-1R的表达增强有关。     

人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ基因P3,P4启动子表达及其与p53基因突变的关系

目的 探讨人肝癌组织胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)基因P3,P4启动子表达及其与p53基因突变的关系.方法 应用半定量RT-PCR、PCR、直接测序分别检测7例正常成人肝组织、23例乙型肝炎病毒阳性肝癌组织IGF-Ⅱ基因P3,P4启动子特异的转录子表达及p53基因突变状况.结果 ①绝大多数肝癌组织P3和P4 mRNA表达量显著上调,平均值均明显高于正常成人肝组织(P＜0.01);②肝癌组织p53基因的突变率为30.4%(7/23).③23例肝癌组织中,具有p53基因突变的标本P3,P4 mRNA表达水平分别明显高于无p53基因突变的肝癌组织(P＜0.05).结论 ①IGF-Ⅱ基因P3和P4再激活是大多数乙型肝炎病毒阳性肝癌的重要特征;②肝癌组织P3,P4 mRNA显著上调与p53基因突变密切相关,后者可能是P3,P4再激活的转录调控机制之一.     

RIP1在肝癌组织中的表达意义及其对细胞侵袭、迁移的影响

探讨受体相互作用蛋白激酶-1(RIP1)在肝癌组织及癌旁组织中的表达情况,并探索其对肝癌细胞侵袭和迁移的分子调控机制。收集肝癌和癌旁组织,免疫组化检测RIP1蛋白的表达,筛选高表达RIP1的肝癌细胞系。对肝癌细胞系进行RIP1沉默处理并设置阴性对照。采用western blot及RT-PCR法检测RIP1的表达量;Tranwell观察细胞侵袭能力;细胞划痕观察细胞迁移能力。结果显示, 48例肝癌组织中,22例存在RIP1蛋白阳性表达,阳性率为45.83%,其中,强阳性患者为15例,中等及弱阳性7例,该研究中有6例复发患者。RIP1在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P＜0.05),高表达RIP1患者的总生存率和无复发生存率显著低于低表达RIP1的患者(均P＜0.05)。抑制RIP1基因后其相对表达量、细胞侵袭、迁移能力均下降(P＜0.05)。RIP1在肝癌中存在高表达,可能参与肝癌细胞侵袭与迁移过程。