SOCS超甲基化与经典型慢性骨髓增殖性肿瘤的研究

目的 探讨细胞因子信号转导抑制蛋白(suppressor of cytokine signaling,SOCS)基因超甲基化在经典型骨髓增殖性肿瘤(MPD)中的临床作用及其机制.方法 采用甲基化特异性PCR方法检测SOCS1、2、3基因CpG岛甲基化发生情况,直接测序法检测100例MPD患者JAK2V617F突变情况,用实时定量PCR方法检测SOCS1、2、3的mRNA表达情况.结果 100例MPD患者中有27例(27％)存在SOCS1基因超甲基化,9例(9％)存在SOCS2基因超甲基化,34例(34％)存在SOCS3基因超甲基化.在100例MPN患者中,64例(64％) JAK2V617F突变阳性.MPD患者中SOCS1和SOCS3基因超甲基化组与未甲基化组相比,其SOCSl和SOCS3基因mRNA表达量明显减少(P＜0.05);SOCS1和SOCS3基因JAK2V617F突变组与野生型组相比,其SOCS1和SOCS3基因mRNA表达量明显减少(P＜0.05).结论 MPD患者中存在JAK2V617F突变及SOCS基因超甲基化,且JAK2V617F突变和SOCS基因甲基化导致SOCS mRNA表达水平降低,SOCS超甲基化和JAK2V617F突变可改变JAK-STAT信号通路等的转录活性而最终影响疾病的发展,这些改变可能代表了一种潜在的治疗方向.     

细胞因子信号转导抑制蛋白3与骨髓增殖性肿瘤关系的研究进展

细胞因子信号转导抑制蛋白（suppressor of cytokine signaling,SOCS）是一类对细胞因子和生长相关因子信号转导通路起负性调节的蛋白家族,目前已发现20多个成员,其中SOCS3是该家族中研究最热、最为清楚的成员之一。近年来研究发现,骨髓增殖性肿瘤（myeloproliferative neoplasms,MPN）患者中存在SOCS3基因异常,提示其可能在MPN的发生、发展、转移过程中扮演重要角色。本文就SOCS3与MPN关系的研究进展进行综述,讨论的问题主要包括有：SOCS蛋白家族概况,SOCS3的结构,功能,表达与调控,以及COCS3与MPN的关系等。     

骨髓增殖性肿瘤发病机制及治疗的最新研究

经典的断裂点簇集区/Abelson白血病病毒(BCR-ABL)融合基因呈阴性的骨髓增殖性肿瘤(MPN)包括真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)及原发性骨髓纤维化(PMF)等,该类疾病均为造血干细胞异常克隆性增殖所致,并且都存在Janus激酶(JAK)2 V617F、JAK2基因第12号外显子、血小板生成素受体MPL W515L/K、钙网蛋白(CALR)等基因突变,这些遗传学改变与MPN发病机制的关系尚未完全明确.2008年,世界卫生组织(WHO)重新修订了MPN的诊断标准,JAK2等基因突变亦被纳入其中.MPN药物治疗主要包括,α干扰素和/或羟基脲及沙利度胺,而近年来一些新药尤其是靶向制剂的疗效颇具前景,已有部分药物应用于MPN的临床治疗.为了更好地指导MPN的早期诊断及有效治疗,笔者着重介绍MPN的发病机制及治疗的最新研究进展.     

LNK基因突变在骨髓增殖性肿瘤中的作用

骨髓增殖性肿瘤（MPN）是一类造血干细胞克隆性疾病.研究显示,JAK-STAT信号通路与MPN的发病密切相关,对JAK-STAT信号传导具有负调控作用的LNK基因在MPN发生发展中可能扮演了重要角色.在JAK2突变阴性的MPN中,LNK基因的特异性突变可能是导致MPN向不同亚型分化的关键.LNK基因的某些SNP可调控造血细胞向不同方向分化可能也是MPN表现为不同亚型的重要影响因素.LNK基因功能性改变导致JAK-STAT信号通路的异常活化可能是导致MPN发生新的机制.本文就LNK基因在MPN中的作用做一简单综述.     

单核苷酸多态性与肿瘤转移的研究进展

单核苷酸多态性（SNP）是基因组变异最丰富的一种DNA序列变化形式，其与现有的遗传标记物结合，与现有的基因诊断体系接轨，将加速检验医学从表型诊断向基因型诊断的过渡。肿瘤是一种多基因遗传病，其侵袭转移与致病基因的SNP密切相关，现就近几年这方面的研究新进展作一综述。     

XRCC1基因单核苷酸多态性与肿瘤易感性

肿瘤的发生是一复杂的生物学过程,其中及时、有效的DNA损伤修复在一定程度上抑制了肿瘤的发生。X射线修复交叉互补基因(XRCC)是参与DNA修复的基因之一,DNA修复基因单核苷酸多态性导致个体DNA修复能力的差异,是肿瘤易感因素之一。本文对目前研究热点的XRCC1基因的单核苷酸多态性与肿瘤的易感性进行了综述。     

单核苷酸多态性与血液学肿瘤的研究进展

单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)是第3代分子遗传标志,SNP决定基因的功能单位和人群遗传变异的内在特征。它反映了个体表型、疾病易感性和对药物、环境因子反应的差异。血液肿瘤是一种多基因遗传病,涉及到多个遗传易感基因的作用。本文就近年来单核苷酸多态性与其在血液肿瘤研究领域(致癌物质代谢酶基因的SNP、DNA修复基因的SNP、癌基因与抑癌基因的SNP、药物代谢相关酶基因的SNP等)的相关进展作一综述。     

单核苷酸多态性与高脂血症

单核苷酸多态性 (SNPs)是新一代的基因分子标记 ,随着人类基因组图谱的绘制成功 ,SNPs被应用于寻找各种致病基因。本文简要介绍了SNPs以及其应用前景和识别与检测的方法 ,并介绍了其与高脂血症的关系。     

巯嘌呤甲基转移酶基因多态性分析方法探讨

建立以PCR为基础的位点特异性PCR、限制性内切酶消化、变性高效液相色谱分析和SNaPshot定点的序列分析等方法。并结合DNA直接测序检测巯嘌呤甲基转移酶(TPMT)基因的5个单核苷酸多态性(SNP)位点的多态性频率。在实验过程中还探讨基因多态性检测的方法学，比较几种方法的可信度、可行性及其优劣。研究结果显示。限制性内切酶消化法能准确地检测TPMT基因外显子区的SNP，变性高效液相色谱分析技术能快速筛选出TPMT第5和第10外显子区的SNP，但不能检测出第7外显子的SNP；位点特异性PCR不能检测出TPMT基因外显子区的SNP，SNaPshot定点的序列分析检测TPMT基因外显子和启动子区的SNP准确率高。通过比较几种SNP检测方法后获得的结论是。TPMT基因SNP位点的检测应根据标本量和实验条件首选限制性酶切消化法、DNA测序或SNaPshot定点序列分析，有时一种技术不能完全满足检测的需要，必须几种方法的相互补充。     

RELN基因单核甘酸多态性与儿童孤独症临床特征的相关分析

目的 探讨RELN基因exon 6 SNP基因型与儿童孤独症临床特征的相关性.方法 应用限制性片段长度多态性聚合酶链式反应(PCR-RFLP)测定30例孤独症患儿及30例正常儿童的基因型和等位基因频率.采用孤独症行为检查表(ABC)对患儿行为进行评定.结果 孤独症组与对照组exon 6 SNP基因型和等位基因频率存在显著性差异(P<0.05);基因型为A/A和A/G之间、A/A和G/G之间的孤独症儿童交往因子存在显著性差异(p<0.05),基因型为A/G和G/G的孤独症儿童ABC总分存在显著性差异(P<0.05).结论 exon 6 SNP与儿童孤独症相关,携带基因型G/G、A/G的患儿比携带基因型A/A的患儿有更严重的人际交往障碍.     

门冬酰胺合成酶启动子区单核苷酸多态性与基因表达量的相关性研究

细胞内门冬酰胺合成酶（asparagines synthetase,AS）的表达水平与白血病细胞对左旋门冬酰胺酶（L-asp）耐药有关。本研究旨在通过筛查发现AS启动子区的单核苷酸多态性（SNP）位点,研究它们对AS基因表达量的影响及寻找对L-asp治疗反应具有影响的个体遗传因素。对82份白血病标本和45份非白血病标本直接测序,筛查AS启动子区的SNP;用实时定量PCR法测定相应标本中的ASmRNA水平。通过对被筛SNP位点不同基因型个体的AS表达水平的统计分析,判断被筛SNP是否对基因表达产生影响。结果发现：被测AS启动子片段内共发现3个SNP位点。分别是-239C/T,-92G/A和-62A/T。其中-92A等位基因在白血病患儿中的发生频率高于非白血病（P〈0.05）。AS表达在该SNP的各种基因型个体间存在差异,基因表达水平由高到底依次为GA杂合子型〉AA纯合子型〉GG纯合子型（P〈0.01）。结论：-92A等位基因变异可能与白血病的某些特征相关,并且这个等位基因变异的存在与AS基因的高表达相关。     

温州籍轻型β珠蛋白合成障碍性贫血患者的基因多态性

本研究旨在对14例临床诊断的温州籍轻型β珠蛋白合成障碍性贫血患者的血液学及分子生物学进行分析，测定其PCR产物序列，找出引起该病的致病突变位点并进行单核苷酸多态性分析。对临床诊断的患者抽取静脉血，EDTA-K2抗凝，及时提取模板，设计相关引物，进行PCR扩增后测序，最后经过序列比对和分析，找出引起β珠蛋白合成障碍性贫血的致病突变位点。结果表明：14例标本的DNA扩增产物测序分析中发现4例在IVS-2-654位点发生了C→T的杂合突变；1例为CD41／42位-TTCT缺失；2个位点存在单核苷酸多态性，分别是外显子1第59位的T／C多态性、IVS-2 nt665，T／C多态性。结论：温州籍轻型β珠蛋白合成障碍性贫血患者单核苷酸多态性具有一定的特殊性；发现了两种基因突变类型，分别为IVS-2-654 C→T的杂合突变和CD41／42位-TTCT缺失。     

单核苷酸多态性及其在异基因造血干细胞移植中的应用

单核苷酸多态性是继限制性片段长度多态性，短串连重复序列多态性之后的第三代遗传标记，是基因组中变异最多的一种，被广泛应用于基因定位、克隆和遗传多样性研究以及法医学亲子鉴定等方面。作为一种稳定的遗传多态性，单核苷酸多态性成为异基因造血干细胞移植中嵌合体检测的新方法。本文就单核苷酸多态性的遗传特性，分析技术，在造血干细胞移植和其它方面的应用进行了综述。     

再生障碍性贫血IFN-γ基因＋874位点的单核苷酸多态性

本研究采用扩增不应突变系统（amplification refractory mutation system，ARMS）-PCR对51名健康者和54例再生障性贫血患者IFN-γ基因＋874位点单核苷酸多态性进行检测，旨在探讨再生障碍性贫血患者的遗传易感因素。结果表明，再生障碍性贫血患者IFN-γ＋874位点TT基因型及T等位基因分布频率分别为42．6％与65．7％，显著高于健康对照组中的17．6％与39．2％（Χ^2=13．780，P=0．01；Χ^2=14．811，P〈0．001）。结论：IFN-γ＋874A／T基因多态性可能与再生障碍性贫血患者的遗传易感性相关。IFN-γ4-874位点单核苷酸多态性与再生障碍性贫血的病情严重程度没有相关性。     

3种常用单核苷酸多态性检测方法的应用比较

目的：通过比较变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis．DGGE)、单链构像多态性(single—stranded conformational polymorphism，SSCP)、限制性酶切检测单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)的优缺点。为不同条件下选择最适合的SNP检测方法提供借鉴。方法：DGGE、限制性酶切检测150例大肠癌APEX基因第3外显子，SSCP检测第5外显子，最后结果经直接测序验证。结果：DGGE检测出17例异常泳动条带；测序结果证实该17例均存在1247A→G的SNP；SSCP检测到57例异常条带；经直接测序证实38例有2197T→G的SNP；PCR-限制性酶切结果与DGGE所测结果完全吻合。结论：DGGE检测结果无假阳性，重复性好，准确率高。而且可判断基因型；SSCP简便易行．但存在假阳性与假阴性，而且不能判断基因型；限制性酶切对SNP位点检测及基因分型均能进行较准确的判断。     

载脂蛋白A5单核苷酸多态性与冠心病的相关性研究

[目的]探讨栽脂蛋白A5单核苷酸多态性与冠心病的相关性及与血脂的关系.[方法]用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析-12238T＞C单核苷酸多态.[结果]T/C单核苷酸多态位点等位基因T、C频率在冠心痛组和正常对照组分别为0.599/0.401、0.424/0.576,两组间差异有显著性(P＜0.005),且基因型TT的冠心病患者其血浆甘油三酯水平明显高于其他基因型患者(P＜0.05).[结论]T/C单核苷酸多态性与冠心痛存在相关性(P＜0.005),患者组TT基因型与血浆甘油三酯水平密切相关(P＜0.05).     

IRF5 rs10954213基因多态性与系统性红斑狼疮的相关性研究

目的研究山东地区汉族人群干扰素调节因子5（IRF5）基因rs10954213单核苷酸多态性,探讨其与系统性红斑狼疮易感性之间的关系。方法采用聚合酶链反应和限制性片段长度多态性等方法对92例系统性红斑狼疮患者和88名健康对照IRF5基因rs10954213G/A多态性进行分析,计算基因型和等位基因频率。结果SLE患者IRF5rs10954213GG、GA、AA基因型频率分别是0.318、0.409和0.273,与对照组间有显著差异（χ2=6.36,P〈0.05）;SLE患者IRF5rs10954213A、G等位基因的频率分别为0.609、0.391,与对照组有显著差异（χ2=6.26,P〈0.05）。结论山东汉族人群IRF5基因位点rs10954213的多态性,可能与山东地区汉族人群SLE的易感性有关。