椎间盘软骨细胞凋亡相关因子的表达研究

押目的探讨椎间盘软骨细胞凋亡状态下Bax、Bcl-2等凋亡相关因子的表达变化情况。方法使用酶消化法获取雄性SD大鼠椎间盘软骨细胞,抗Fas抗体诱导凋亡,免疫组化法检测大鼠正常与凋亡椎间盘软骨细胞的Bax、Bcl-2的表达,CMIAS-99B型医学图像系统进行体视学分析,进而比较分析大鼠正常与凋亡椎间盘软骨细胞的凋亡相关因子的表达变化情况。结果使用免疫组化法,发现正常组的Bax轻度表达,凋亡模型组的Bax表达明显,二者有非常显著差异;正常组的Bcl-2高度表达,凋亡模型组的Bcl-2轻度表达,二者有非常显著差异(P<0.01)。结论凋亡的大鼠椎间盘软骨细胞内Bax、Bcl-2的表达与正常状态相比有明显变化。     

益气化瘀方对椎间盘软骨细胞凋亡相关因子的作用

目的：探讨益气化瘀方对椎间盘软骨细胞凋亡状态下Bax、Bcl-2及Caspase-8表达的调控作用。方法：清洁级雄性1月龄SD大鼠20只，酶消化法获取椎间盘软骨细胞，用抗Fas抗体诱导其发生凋亡，通过益气化瘀方及其拆方益气方、化瘀方药理血清干预，免疫组化法（SP）检测分析大鼠椎间盘软骨细胞不同状态下Bax、Bcl-2及Caspase-8的表达。结果：相对正常组，凋亡模型组的Bax和Caspase-8表达明显，而Bcl-2轻度表达，有显著差异（P〈0．01）。益气化瘀方、益气方和化瘀方均能降低椎间盘软骨细胞的Bax、Caspase-8的表达，而上调Bcl-2的表达，3种中药组与诱导凋亡组相比有显著差异（P〈0．01）。结论：中药益气化瘀方、益气方和化瘀方都可以调控凋亡的大鼠椎间盘软骨细胞内Bax、Bcl-2、Caspase-8的表达，其治疗颈椎病的机制与其对凋亡相关因子的调控有关。     

益气化瘀方对椎间盘软骨细胞凋亡相关因子的作用

目的:探讨益气化瘀方对椎间盘软骨细胞凋亡状态下Bax、Bcl-2及Caspase-8表达的调控作用。方法:清洁级雄性1月龄SD大鼠20只,酶消化法获取椎间盘软骨细胞,用抗Fas抗体诱导其发生凋亡,通过益气化瘀方及其拆方益气方、化瘀方药理血清干预,免疫组化法(SP)检测分析大鼠椎间盘软骨细胞不同状态下Bax、Bcl-2及Caspase-8的表达。结果:相对正常组,凋亡模型组的Bax和Caspase-8表达明显,而Bcl-2轻度表达,有显著差异(P<0·01)。益气化瘀方、益气方和化瘀方均能降低椎间盘软骨细胞的Bax、Caspase-8的表达,而上调Bcl-2的表达,3种中药组与诱导凋亡组相比有显著差异(P<0·01)。结论:中药益气化瘀方、益气方和化瘀方都可以调控凋亡的大鼠椎间盘软骨细胞内Bax、Bcl-2、Caspase-8的表达,其治疗颈椎病的机制与其对凋亡相关因子的调控有关。     

生长因子对软骨细胞的作用

近年来,随着现代创伤修复概念的建立,在影响创伤修复的局部因素中,细胞因子的作用越来越受到人们的关注。目前已发现的细胞因子有几十种,大致可分为五大类：生长因子（ｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ＧＦ）、白细胞介素（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ,ＩＬ）、肿瘤坏死因子（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦ）干扰素（ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ,ＩＦ）、集落刺激因子（ｃｏｌｏｎｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇｆａｃｔｏｒ,ＣＳＦ）。其中生长因子与软骨细胞生长、分化的关系最为密切,随着分子生物学的建立,生长因子对软骨细胞影响…     

间充质干细胞治疗椎间盘退变基础和应用研究

通过生物学治疗逆转椎间盘退变是目前研究的热点。近年时应用间充质干细胞(MSC)治疗椎间盘退变进行了众多研究,体内外研究结果均表明MSC促进退变椎间盘内细胞再生,使髓核细胞分泌的蛋白聚糖、Ⅱ型胶原等细胞外基质表达增加。如何调节MSC向髓核细胞或类软骨细胞分化,目前认为低氧、生长因子刺激和三维培养是其主要影响因素。MSC治疗椎间盘退变的研究还不成熟,真正应用于临床治疗仍需更深入的研究。     

椎间盘软骨终板细胞的形态及表型特征研究

目的　观察研究大鼠椎间盘软骨终板的细胞形态及表型特征 ,建立椎间盘细胞培养的体外模型。方法　酶消化法培养大鼠椎间盘的软骨终板细胞 ,HE和甲苯胺蓝染色 ,进行光镜及电镜观察 ;使用免疫组化法 (SP)检测椎间盘软骨细胞的特征性II型胶原表达情况 ,与同种动物不同部位的软骨细胞做对照。结果　HE染色见细胞呈多角形 ,核为圆形或椭圆形 ,有时见有双核 ,胞浆内可见空泡。甲苯胺蓝染色可见胞浆及细胞周围有紫红色或红色异染出现。电镜观察见细胞胞浆内有丰富的粗面内质网系统及线粒体 ,核呈圆形或椭圆形 ,核膜明显 ,细胞膜下及胞浆中有较多的无界膜空泡。原代细胞与传代细胞之间形态和结构无明显差别。软骨终板和关节软骨细胞形态相似。大鼠椎间盘软骨终板细胞表达II型胶原。结论　本研究提示软骨终板细胞表达软骨细胞的特征性胶原 ,为椎间盘的退变机理研究提供了细胞学基础     

力学刺激对软骨细胞整合素亚单位的调控

骨关节炎（osteoarthritis,OA）是以关节软骨退变、关节缘骨质增生为主要改变的疾病。机械应力可以调节细胞的多种功能,而整合素作为细胞表面应力受体之一,主要介导细胞与细胞外基质（extracellularmatrix,ECM）间的黏附,在传导力学信号从而调节细胞的生理功能方面起着重要作用。因此,在软骨病变早中期选择适当的良性刺激（如推拿手法）作用于软骨,调控整合素的表达影响软骨细胞的功能,修复损伤的软骨细胞,延缓关节软骨退变,这对于骨关节炎的治疗有重要意义。     

软骨细胞周基质对软骨细胞作用的研究进展

软骨细胞周基质(pericellular matrix,PCM)是软骨细胞周围的狭窄基质条带, 与其包绕的软骨细胞共同组成软骨单位。大量研究表明PCM富含蛋白多糖、胶原蛋白和纤维蛋白, 且在调节软骨细胞代谢微环境方面发挥着重要作用。用微管吮吸技术直接检测软骨单位发现, PCM与软骨细胞和软骨细胞外基质的力学特性明显不同。然而, 关于PCM的功能还不是十分明确, 仍需进一步研究。     

软骨细胞线粒体功能异常对骨关节炎发病机制的研究

骨关节炎(osteoarthritis, OA)主要是关节软骨退变导致的慢性炎症性关节疾病,病因及发病机制复杂,最新研究发现,软骨细胞中的线粒体功能异常与OA发病机制密切相关。线粒体通过调控软骨细胞衰老、凋亡、氧化应激、炎症抑制,参与OA发病进程。此外,线粒体相关信号通路AMPK/SIRT3对于调节软骨细胞的代谢过程很重要,表明这些可能是OA治疗的目标。因此,该文论述软骨细胞线粒体功能异常与OA的发病机制的相关性。     

大鼠终板软骨细胞体外自然退变过程中Asporin基因的表达及意义

目的通过大鼠终板软骨细胞体外自然传代的退变模型,探讨大鼠终板软骨细胞体外自然退变过程中Asporin基因的表达及意义。方法取大鼠腰椎终板软骨细胞,酶消化法及自然传代法分离培养大鼠终板软骨细胞,选取P1代及P5代,体外培养6d,在倒置显微镜下观察细胞形态,利用HE染色及甲苯胺蓝染色对软骨细胞进行观察及鉴定。用RT-PCR及Westernblot检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖及Asporin基因变化。结果随着细胞传至P5代,细胞形态上有梭形变趋势,Ⅱ型胶原（P5/P1=0.111767,P=0.009842）及蛋白多糖表达（P5/P1=0.328965,P=0.002371）明显下调,Asporin蛋白表达明显上调。结论终板软骨细胞传至P5代,细胞发生自然退变,Asporin基因表达明显上调,提示Asporin基因表达与终板软骨的退变具有重要联系。     

角度人工椎间盘置换后对相邻下位椎间隙应力的影响

目的：探讨带角度人工颈椎间盘置换后椎间隙及相邻椎间隙应力变化。方法：根据已有的测量结果,设计角度人工椎间盘。对已建立的C4,5两节段带椎间盘的正常颈椎有限元模型、C4,5置换0°椎间盘假体和置换10°椎间盘假体后的颈椎模型进行轴向加压、前屈/后伸、侧弯、扭转加载,对比观察C4,5椎间隙应力变化;对已建立的C4-C63节段带椎间盘的正常颈椎有限元模型、C4,5置换0°椎间盘假体和置换10°椎间盘假体后的颈椎模型同样方式进行加载,对比置换节段及相邻节段的椎间隙应力变化。结果：C4,5两节模型加载中,轴向加载、前屈/后伸时80 MPa/0°假体与80 MPa/10°假体等效剪应力（Se）大小近似,较正常颈椎增大,侧弯时80 MPa/0°假体Se与正常颈椎接近,80 MPa/10°假体Se较正常颈椎增大。扭转时加载时扭转切应力（Szx/Szy）80 MPa/0°假体和80 MPa/10°假体接近正常颈椎。在C4-C63节段模型加载时,C4,5椎间隙置换80 MPa/10°假体后,轴向加载、前屈后伸、侧弯时,相邻下位节段（C5,6）的椎间隙Se均减小,扭转加载时Szx/Szy接近正常颈椎模型。结论：10°椎间盘假体植入椎间隙对颈椎相邻节段的椎间隙应力影响小,接近正常颈椎间盘力学性能。     

椎间盘细胞培养及调控

现代科学对椎问盘退变疾病虽然做了大量的研究，但关于体外培养的椎问盘细胞的研究及认识却相对较少。由于细胞与组织培养技术具有较好的重复性、费用低、结果分析较简单，无伦理问题等特点，使其在椎问盘退变研究中引起重视并不断得到应用。     

腰椎间盘突出症的临床治疗进展

腰椎间盘突出症是因椎间盘退变、破裂、突出,压迫或刺激相邻组织所出现的综合征,系骨科常见疾病,也是患者产生腰腿痛的主要原因之一.     

椎间盘破裂对前角运动神经元及神经节细胞影响的研究

目的观察椎间盘破裂后相应节段前角运动神经元及神经节细胞超微结构与功能状态的变化。方法家兔30只,在腰(L)     

侧隐窝与前路椎间孔入路注射胶原酶治疗颈椎间盘突出症效果的比较

目的 比较侧隐窝与前路椎间孔入路注射胶原酶治疗颈椎间盘突出症的效果.方法 颈椎间盘突出症病人63例,年龄41～52岁,体重60～75 kg,随机分为侧隐窝组(A组,n=31)和前路椎间孔组(B组,n=32).分别以数字检影机定位,碘海醇显示导管的靶点位置.穿刺成功后确认麻醉平面,观察20 min后注射胶原酶600～1 200 U.分别于术前、术后1、3、7、30、90 d时采用视觉模拟评分法(VAS评分)评价疼痛程度,参照中华医学会骨科分会脊柱外科组手术疗效标准评价近期疗效.结果 与B组比较,A组穿刺成功率升高(P＜0.05),各时点VAS评分差异无统计学意义(P＞0.05);与术前比较,两组术后1 d时.VAS评分差异无统计学意义(P＞0.05),其余时点VAS评分降低(P＜0.05);两组术后近期疗效差异无统计学意义(P＞0.05).结论 侧隐窝入路注射胶原酶600～1 200 U溶盘效果良好,且穿刺成功率较前路椎间孔入路高.     

椎间盘退变生物学治疗的研究进展

椎间盘退变所致的颈肩腰腿痛严重影响许多患者的生活及工作,目前的治疗方法主要侧重于缓解疼痛症状或神经受压症状,而无法阻止椎间盘退变的进程,导致疾病具有高复发率。近年来学者们开始广泛研究椎间盘退变的生物学治疗方法,即通过生物分子治疗、基因治疗、细胞治疗和组织工程等方法来修复和重塑椎间盘,以期从根本上解决椎间盘退变的问题,而上述方法大多处于动物实验或体外实验阶段,临床应用尚存在诸多挑战。     

无症状腰椎间盘突出再认识

腰椎间盘突出症确切致痛机制尚未完全明了，脊神经根的机械性压迫被认为与疼痛和特定节段神经功能障碍有关，然而无症状腰椎间盘突出的现象对此提出不同的解释。该文对近年来有关无症状腰椎间盘突出的机制进行了系统的研究，认为其与椎间盘突出物可代偿的椎管储备容量、受累神经根对机械压迫的逃逸避让与弹性延长功能，以及受累神经根低氧消耗与抗缺血性损伤代偿作用等因素有关。这将深化对下腰痛的理解并有助于相关领域的继续研究。     

胶原酶溶盘术治疗腰椎间盘突出症的现状分析

美国人Susman将胶原酶用于腰椎间盘突出症的治疗获得成功。目前全国各级医院已累积此类病例十几万。作者就此项技术的现状作一分析。     

推拿治疗腰椎间盘突出症机制研究进展

推拿治疗腰椎间盘突出症(简称PLD)的机制从开始的简单推拿到进行实验及临床的研究探索，取得了卓有成效的进展，本文就有关这方面的研究进展，综述如下。     

腰椎间盘突出症的经络辨证

从病位与临床表现可见,腰推间盘突出症的证候归属于督脉、足少阳胆经、足太阳膀胱经、足少阴肾经病变,经络辨证分别为属督脉血瘀证、胆经湿热证、膀胱经风寒湿阻证、肾阳亏虚证,临床中可使用经络辨证指导推拿、针灸、内服中药等治疗方法,提高疗效。