IVF周期中MⅡ末期卵子形态与胚胎发育潜能的关系

目的:探讨IVF周期中MⅡ末期卵子形态与胚胎发育潜能的关系。方法:收集IVF周期中受精后5～6h脱颗粒细胞MⅡ末期卵子,依据透明带、卵泡浆及两极体形态在光镜下对排出两个极体的卵子进行形态评分分级(Ⅰ～Ⅲ级),统计不同分级组间的高评分原核形成率、卵裂率、优质胚胎率及临床妊娠率和种植率,分析卵子形态与受精及胚胎发育潜能的关系。结果:形态评分较高的卵子与形态评分较低的卵子间受精率和卵裂率均无显著差异(P>0.05),但优质胚胎率显著增高(P<0.05);随着移植胚胎中由高形态评分卵子发育而来的胚胎数目增多,周期临床妊娠率、种植率显著增高(P<0.05)。结论:IVF周期中,早期脱颗粒细胞后MⅡ末期卵子形态对受精率及卵裂率没有影响,但可预测早期胚胎质量及妊娠结局。     

多囊卵巢患者行未成熟卵母细胞体外成熟、受精和胚胎发育观察

目的:探索在不用或小剂量使用促性腺激素条件下对多囊卵巢患者的未成熟卵母细胞体外培养至成熟、受精、卵裂和妊娠的可行性。方法:阴道B超引导下穿刺取卵后将卵子分别培养于3种不同培养基:基本培养基(f-HTF+75 mIU/mL rFSH+500 mIU/mL rhCG)+10%SPS(SPS组), 基本培养基+20% hFF(FF组)和基本培养基+20% hFF+2 ng/mL rEGF(FF+EGF组),共培养25-48 h,然后行体外受精和胚胎培养。结果:体外培养卵丘-卵母细胞复合体102个,成熟率65.69%,受精率83.58%,2PN率71.43%,卵裂率51.72%,优质胚胎率40.00%。FF组较SPS组有更高的成熟、受精、卵裂和优质胚胎率,再添加EGF后卵子的成熟、受精和优质胚胎率增加。刺激组和未刺激组在卵子成熟、受精、卵裂和优质胚胎率方面均无显著差异。PCO患者卵子的成熟、受精、卵裂和优质胚胎率均高于PCOS患者,ICSI组优质胚胎率增加,但均无统计学差异。随培养时间延长,卵子的成熟、受精、卵裂和优质胚胎率均升高,其中正常受精率和卵裂率有显著差异(P<0.05)。结论:PCO和PCOS患者行IVM可行,二者无明显差异。培养液中添加激素、FF、EGF以及延长培养时间至48 h,可促进卵子成熟。但有关临床用药、培养条件仍有待改善,进一步提高卵子和胚胎质量以获得妊娠。     

人卵丘颗粒细胞凋亡与卵子发育潜能关系的研究

目的:探讨人卵子周围卵丘颗粒细胞的凋亡状态与卵子发育潜能的关系。方法:收集130例接受体外受精(IVF)患者卵子周围的卵丘颗粒细胞,包埋后切片进行透射电镜观察,研究其凋亡状态与不孕原因、取卵数、受精数、优质胚胎数及治疗结局的关系。结果:子宫内膜异位症导致的不孕症患者卵丘颗粒细胞的凋亡率高于其他原因导致的不孕,差异有显著性(P<0.05)。卵丘颗粒细胞的凋亡率与取卵数有关,取卵数≤5个的患者与取卵数>5个的比较,卵丘颗粒细胞的凋亡率高,差异有显著性(P<0.05);卵丘颗粒细胞的凋亡与卵子受精密切相关,无或受精卵≤2个与受精卵>2个的患者两两比较,前者卵丘颗粒细胞凋亡率增高,差异有显著性(P<0.01);卵丘颗粒细胞的凋亡与胚胎质量有关,无或优质胚胎≤2个与优质胚胎>2个的患者两两相比,前者卵丘颗粒细胞凋亡率增高,差异有显著性(P<0.01);卵丘颗粒细胞的凋亡与移植结局有关,妊娠组卵丘颗粒细胞凋亡率与未妊娠组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:卵丘颗粒细胞的生长状态与卵子的发育潜能密切相关,卵丘颗粒细胞的凋亡影响卵子的成熟、受精和卵裂。卵丘颗粒细胞凋亡的检测可以作为预测IVF结果的指标。     

不同浓度促性腺激素对促排卵周期中人类未成熟卵子体外成熟的影响

目的:研究体外成熟培养基中添加不同浓度促性腺激素(卵泡刺激激素和黄体生成激素)对卵子体外成熟培养以及其受精和后续的早期胚胎发育的影响。方法:收集生殖助孕治疗中废弃的人类未成熟卵子,将生发泡(GV)期未成熟卵子随机分为3组,添加终浓度分别为75 U/L的低浓度促性腺激素(低浓度组)和750 U/L的高浓度促性腺激素(高浓度组),以及不添加促性腺激素(空白对照组)进行体外成熟培养20小时,每组入组的卵子数分别为80、83和82枚。将成熟卵子进行卵胞质内单精子显微注射,研究卵子的体外成熟率、受精率以及卵裂率、可用胚胎率和优质胚胎率。结果:低浓度组的卵子体外成熟率最高(80.00%),空白对照组最低(76.83%),但差异无统计学意义(P0.05);低浓度组的受精率最高(67.19%),空白对照组最低(65.08%),但差异无统计学意义(P0.05);高浓度组的卵裂率最高(70.45%),空白对照组最低(63.41%),但差异无统计学意义(P0.05);低浓度组的可用胚胎率最高(28.57%),空白对照组最低(19.23%),但差异无统计学意义(P0.05);高浓度组的优质胚胎率最高(16.13%),空白对照组最低(3.85%),但差异无统计学意义(P0.05)。结论:不同浓度促性腺激素对促排卵周期中人类未成熟卵子的体外成熟和受精,及其后续的早期胚胎发育没有发现显著的影响。     

获卵数目对有效胚胎形成率的影响:2578个体外受精周期分析

目的探讨体外受精/卵胞质内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)中影响可用胚胎率的主要因素。方法回顾性分析行IVF/ICSI-ET治疗的2 578个周期共24 772枚卵母细胞。按获卵数将其分为A组(1~5)、B组(6~10)、C组(11~15)、D组(16~20)、E组(20),比较各组的受精率、卵裂率、MⅡ卵率、有效胚胎形成数(率)、妊娠率及胚胎种植率等。采用多因素线性回归分析筛选出影响受精率、卵裂率、卵子成熟率以及可用胚胎数(率)的独立相关因素,同时排除单因素分析中出现的混杂。结果单因素分析各组卵子成熟卵率有差异,但没有看到趋势性变化;IVF受精率在各组间有统计学差异,而ICSI受精率各组间无统计学差异。卵裂率各组间无统计学差异,可用胚胎数以及冷冻胚胎数A~E组依次增加,而可用胚胎率随着获卵数的增加却逐渐降低(44.6%、36.0%、33.5%、29.4%、28.8%,P=0.00)。多因素分析提示取卵数的标准化回归系数的绝对值最大(B=-0.205,P=0.00),t的绝对值也最大(t=-8.299),表明取卵数对可用胚胎率的影响最大,提示取卵数越多,可用胚胎率越低。而卵子数目对卵子成熟率、受精率以及卵裂率没有影响。结论随着取卵数的增多,虽然可用胚胎数是增加的,但可用胚胎的转化率却降低了。今后的促排卵目标不是产生的卵子越多越好,而是采用合适的方案尽量减少对卵巢的过度刺激,获得一定数量的正常卵子并形成优质的可供移植的胚胎。     

自体颗粒细胞线粒体移植对胚胎发育质量的影响

目的　探讨自体颗粒细胞线粒体移植 (线粒体移植 )对改善胚胎发育质量的影响。方法　对 3次行体外受精 胚胎移植 (IVF ET)治疗未获妊娠或年龄大于 37岁的 18例患者 ,采用长周期超促排卵方案促排卵。当患者取出的成熟卵子多于 4个时 ,采用常规方法 ,进行卵母细胞浆内单精子注射 (ICSI) ;或进行线粒体移植。线粒体移植的方法为收集卵丘复合体上和卵泡液中的颗粒细胞 ,经匀浆离心提取线粒体 ,应用显微操作技术将线粒体和精子一并注入卵母细胞浆内。观察、比较两种方法获得卵子的受精和胚胎发育情况。　结果　 18例行超促排卵方案后 ,获得成熟卵子 16 8个 ,其中行线粒体移植卵子 86个 ,受精 6 4个 ,受精率为 74 4 % ;行ICSI卵子 82个 ,受精 6 3个 ,受精率为 76 8%。两种方法比较 ,差异无显著意义 (P >0 0 5 ) ;行线粒体移植的良好胚胎形成率为 5 9 4% ,行ICSI的良好胚胎形成率为 34 9% ,两种方法比较 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 )。 18例中 7例临床妊娠 ,妊娠率为 38 9%。　结论　自体颗粒细胞线粒体移植可明显改善胚胎发育质量 ,提高妊娠率。     

HCG日雌激素自然降低与促排卵结局的关系

目的:探讨HCG日雌激素(E_2)降低对促排卵结局的影响。方法:回顾分析2010年1月至2016年4月在福建省妇幼保健院生殖中心因注射HCG日E_2上升者791例(上升组)和E_2自然下降者485例(下降组)。将E_2下降组(B组)分为三个亚组:0△E_2≤10%,10%△E_2≤20%,△E_220%。比较各组的卵子回收率、受精率、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率及流产率。结果:下降组的卵子回收率、卵裂率、优质胚胎率均低于上升组(P0.05),两组的临床妊娠率和流产率比较,差异无统计学意义。HCG日雌激素下降大于20%与低卵子回收率、低卵裂率、低优质胚胎率相关(P0.05),但不影响临床妊娠率和流产率。结论:HCG日E_2自发下降大于20%影响控制性超排卵的结局。     

短时受精与长时受精对体外受精及临床妊娠结局的影响

目的:探讨短时受精与长时受精对体外受精及临床妊娠结局的影响。方法:2008年1月至2010年12月因女性输卵管因素或盆腔炎症在本中心接受短时IVF与长时IVF。短时IVF共1095周期,长时IVF共1008周期,比较短时受精与长时受精两组患者的基本情况、受精、胚胎及临床妊娠情况。结果:两组患者正常受精(2PN)率的差异无统计学意义(P>0.05)。长时受精的0PN率(18.1%vs 13.5%)、1PN率(3.8%vs1.6%)明显高于短时受精组,3PN率比较,结果相反(4.5%vs 7.8%)。短时受精的卵子利用率(58.4%vs 53.7%)、优质胚胎率(70.6%vs 65.5%)、胚胎利用率(85.2%vs80.1%)明显高于长时受精组,两组临床妊娠率无统计学差异(44.6%vs 41.5%,P>0.05)。结论:短时IVF的多PN率比长时IVF高,但是0PN、1PN率显著降低,卵子利用率提高。短时IVF的优质胚胎率、胚胎利用率明显高于长时IVF。短时受精在一定程度上能提高卵子利用率,改善胚胎质量从而提高胚胎利用率。     

影响冷冻胚胎移植妊娠率相关因素分析

目的: 探讨影响冷冻胚胎移植妊娠率的相关因素。 方法: 对129个接受冷冻胚胎移植患者的临床资料进行回顾性分析。结果: 129个冷冻胚胎移植周期,临床妊娠率27.1%,胚胎种植率12.8%;三种不同移植方案、常规体外受精(IVF)、单精子卵母细胞浆内注射(ICSI)所冻存的胚胎移植临床妊娠率无显著性差异(P>0.05)。<30、30~34、35~44岁三个年龄组胚胎种植率有显著差异(P<0.05);临床妊娠率以30~34岁组为最高(38.6%),35~44岁组明显下降(13.6%),三年龄组比较有显著性差异(P<0.05)。移植≥2个胚胎的子宫内膜厚度、平均移植胚胎数、累积胚胎评分、累积胚胎评分/胚胎移植数以及至少移植有1个4-细胞I级胚胎者,妊娠组与非妊娠组均有显著性差异(P<0.01)。 结论:患者的年龄、子宫内膜厚度、移植胚胎数目、胚胎形态及生长速率是影响冷冻胚胎移植妊娠率的重要因素。     

人类卵子体外培养成熟后冻存研究

目的探讨体外培养成熟的人类卵子冻存的可行性。方法中山大学附属第一医院从2003年3月至2003年9月在ICSI治疗周期中共收集到101个GV期卵子和53个MI期卵子,根据卵子发育阶段不同将不成熟卵子分为GV期组和MI期组,体外培养成熟后应用慢速冷冻方法进行卵子冷冻,解冻后用ICSI受精并进行胚胎体外培养,分别比较GV期组和MI期组卵子的复苏率、受精率、优质胚胎率和囊胚发育情况。结果经体外培养后GV期组和MI期组分别有64个和44个卵子成熟,GV期组卵子体外成熟率为634%(64/101),显著低于MI期组的830%(44/53)(P<005),冷冻后复苏率分别为719%(46/64)和818%(36/44),受精率分别为609%(28/46)和639%(23/36),优质胚胎率分别为536%(15/28)和652%(15/23),在统计学上差异均无显著性意义。结论在ICSI治疗周期中的GV期和MI期的卵子经体外成熟后可以成功地进行冷冻保存。