六味补气方对慢性阻塞性肺疾病细胞焦亡的 干预作用及机制研究

目的 研究六味补气方对慢性阻塞性肺疾病（COPD）细胞焦亡的影响。方法 按照随机数字表法将大鼠分为正常对照组、模型组、桂龙咳喘宁组和六味补气方低、中、高剂量组,每组10只。采用烟熏加脂多糖（LPS）气管滴入的方法建立COPD大鼠模型。药物干预后,检测大鼠肺功能;支气管肺组织形态学改变;同时检测肺组织NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NLRP3）和Gasdermin D-N端（GSDMD-N）的改变;肺泡灌洗液（BALF）中炎症因子白介素18（IL-18）、白介素1β（IL-1β）水平;肺组织活性氧（ROS）水平;肺组织NLRP3、半胱天冬酶-1（Caspase-1）、Gasdermin D（GSDMD）、凋亡相关斑点样蛋白（ASC）蛋白表达以及mRNA水平。结果 与正常对照组比较,模型组大鼠肺功能降低（P<0.01）,肺组织损伤,细胞膜破裂,IL-18、IL-1β和ROS水平升高（P<0.01）,肺组织 NLRP3、Caspase-1、GSDMD、和ASC蛋白表达和mRNA水平显著升高（P<0.01,P<0.05）。与模型组比较,各用药组肺功能改善,肺组织损伤和细胞焦亡减轻,IL-18、IL-1β和ROS水平下降（P<0.01）,肺组织 NLRP3、Caspase-1、GSDMD和ASC蛋白表达和mRNA水平降低（P<0.01）,其中以六味补气方高剂量组改变最为显著。结论 六味补气方可降低COPD大鼠IL-18、IL-1β和ROS水平,减轻气道炎症和氧化应激,阻抑肺组织损伤和细胞的焦亡,增加肺功能,其机制可能是通过调控ROS/NLRP3/Caspase-1信号通路实现的。     

芩百清肺浓缩丸含药血清对肺炎支原体感染RAW264.7细胞NLRP3炎性体表达的影响

目的:观察芩百清肺浓缩丸含药血清对肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)感染RAW264.7细胞NLRP3炎性体及IL-1β的影响。方法:试验分为空白对照组、模型组和芩百清肺浓缩丸含药血清组。常规培养RAW264.7细胞、肺炎支原体菌株,制备芩百清肺浓缩丸含药血清,用10 MOI MP感染RAW264.7细胞,分别于8、16、24 h收集细胞。FQ-PCR检测NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达;Western-blot检测NLRP3、ASC、Caspase-1 p20蛋白表达;ELISA检测细胞上清液IL-1β含量。结果:与空白对照组比较,MP感染RAW264.7细胞后8、16、24 h NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA表达显著上调(P0.05或P0.01);感染后16、24 h NLRP3、ASC、Caspase-1 p20蛋白表达显著上调(P0.05或P0.01);感染后24 h细胞上清液IL-1β含量显著升高(P0.01)。与模型组比较,芩百清肺浓缩丸含药血清可显著下调MP感染RAW264.7细胞16、24 h NLRP3、ASC、Caspase-1 mRNA的表达(P0.05或P0.01);显著降低感染后24 h NLRP3、ASC、Caspase-1p20蛋白表达和细胞上清液IL-1β的分泌(P0.05或P0.01)。结论:芩百清肺浓缩丸抗肺炎支原体作用的机制可能与下调NLRP3炎性体表达有关。     

艾灸预处理对急性胃黏膜损伤大鼠NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路的影响

目的:观察艾灸预处理对急性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜细胞焦亡NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路的影响。方法:将30只健康SPF级SD大鼠雌雄各半,分为正常组、模型组和艾灸预处理组。选取足三里(双侧)和中脘穴进行艾灸预处理7 d,再用无水乙醇灌胃法进行造模,观察胃黏膜组织形态,评估UI指数,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)和白介素18(IL-18)3种细胞因子的表达量; Western blot检测大鼠胃组织炎性小体核苷酸寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)及胱天蛋白酶-1(Caspase-1)、消皮素(GSDMD)的表达水平。结果:艾灸预处理后,机体在应对致病因素刺激时可抑制IL-1β、IL-18及TNF-α的分泌,对比正常组和模型组均有明显下降(P<0.01),NLRP3、Caspase-1和GSDMD蛋白的表达量均低于正常组和模型组(P<0.01)。结论:艾灸预处理通过NLRP3/Caspase-1/GSDMD经典通路途径抑制细胞焦亡,降低炎症发生的程度,达到保护胃黏膜的作用。     

犀角地黄汤加减方抑制焦亡相关蛋白减轻脓毒症致急性肺损伤机制研究

目的 探讨犀角地黄汤加减方通过抑制焦亡相关蛋白减轻脓毒症小鼠肺损伤的机制。方法 将小鼠分为假手术组、模型组、抑制剂组、中药低剂量组和中药高剂量组。采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症小鼠模型,于造模后12 h处死小鼠,双抗体夹心酶联免疫吸附法测定小鼠血清白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)水平,留取完整左肺组织行病理切片,评估肺损伤情况,留取右肺组织提取RNA和蛋白,RT-PCR、Western blotting定量检测肺组织中NF-κB、NLRP3和Caspase-1、GSDMD的表达。结果 与模型组比较,抑制剂组小鼠血清中IL-1β、IL-18水平显著降低（P <0.01）,肺组织中Caspase-1、GSDMD基因和蛋白的表达下调,差异均具有显著统计学意义（P <0.01）;与模型组相比,中药组小鼠血清中IL-1β、IL-18水平显著降低（P <0.01）,肺损伤减轻,肺组织中NF-κB、NLRP3和Caspase-1、GSDMD基因和蛋白的表达下调,差异均具有统计学意义（P <0.01）,且中药高、低剂量组间的差异有统计学意义（P &l...     

黄芩素调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导的焦亡减轻小鼠急性肺损伤作用

目的 探究黄芩素对急性肺损伤（acute lung injure,ALI）小鼠的治疗作用以及对NOD样受体热蛋白结构域3（NOD-like receptor family pyrin domain containing 3,NLRP3）/半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1（cystein-asparate protease-1,Caspase-1）/消皮素D（gasdermin D,GSDMD）焦亡通路的调控作用。方法 60只雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、Caspase-1抑制剂VX-765（30 mg/kg）组和黄芩素低、中、高剂量（10、20、40 mg/kg）组,每组10只。除对照组外,其余各组ip脂多糖（lipopolysaccharide,LPS,15 mg/kg）,分别于造模前24 h和造模0.5 h后给予黄芩素或VX-765（30 mg/kg）干预。造模24 h后,检测小鼠肺湿干质量比以评价肺肿胀;苏木素-伊红（HE）染色法检测肺组织病理变化;透射电子显微镜观察肺组织中巨噬细胞损伤情况;ELISA法检测小鼠血清和肺泡灌洗液中白细胞介素-1β（interleukin-1β,IL-1β）、IL-6、IL-18、IL-1α和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）水平;采用Western blotting检测肺组织NLRP3、凋亡相关的斑点样蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC）、cleaved Caspase-1、pro Caspase-1、GSDMD-N以及GSDMD蛋白表达。人源单核细胞白血病THP-1细胞加入100 nmol/L佛波酯诱导24 h,贴壁后随机分为对照组、模型组、VX-765（500 nmol/L）组和黄芩素低、中、高剂量（3、10、30 μmol/L）组,除对照组外,采用1 μg/mL LPS联合5 mmol/L三磷酸腺苷（adenosine triphosphate,ATP）刺激THP-1细胞建立细胞炎症模型,给予黄芩素或VX-765干预,采用CCK-8法检测细胞活力;ELISA法检测上清液中IL-1β、IL-18和IL-1α水平;LDH试剂盒检测上清液中乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）活力;免疫荧光评估NLRP3炎症小体组装情况;采用膜联蛋白-V-PE（Annexin-V-PE）/7-氨基放线菌素（7-aminoactinomycin,7-AAD）试剂盒评价细胞焦亡情况;Western blotting检测细胞NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路相关蛋白表达。结果 在ALI小鼠模型中,与模型组比较,VX-765组和黄芩素组小鼠肺肿胀程度明显减轻（P<0.01）,肺组织损伤评分显著降低（P<0.01）,肺组织中巨噬细胞炎性病变得到缓解,血清及肺泡灌洗液中IL-6、IL-1β、TNF-α、IL-18、IL-1α水平明显降低（P<0.05、0.01）,肺组织NLRP3、ASC、cleaved Caspase-1、pro Caspase-1、GSDMD-N以及GSDMD蛋白表达水平均显著降低（P<0.05、0.01）。在细胞炎症模型中,与模型组比较,VX-765组和黄芩素组THP-1细胞IL-1β、IL-18、IL-1α分泌量显著降低（P<0.01）,NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路相关蛋白表达水平明显降低（P<0.05、0.01）,NLRP3炎症小体组装明显被抑制（P<0.05、0.01）,LDH释放量及细胞焦亡率显著降低（P<0.01）。结论 黄芩素通过抑制NLRP3/Caspase-1/GSDMD通路介导的细胞焦亡,从而改善LPS诱导的小鼠ALI。     

电针“百会”“人中”对脑缺血再灌注损伤模型大鼠脑脊液炎症因子及皮质缺血区脑组织GSDMD表达的影响

目的探讨电针"百会""人中"穴治疗脑缺血再灌注损伤(CIRI)的疗效及可能作用机制。方法36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组12只。除假手术组外其余大鼠采用大脑中动脉线栓阻断法制备CIRI大鼠模型。造模24 h后对电针组大鼠行电针干预,穴取"百会""人中",频率15 Hz、强度为1 mA的连续波,每天1次,每次20 min,共5天。用Longa法评定各组大鼠神经功能损伤程度;TTC染色法测定大鼠脑梗死体积,HE染色观察脑组织病理形态改变;ELISA法检测脑脊液白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6 (IL-6)、白细胞介素18 (IL-18)水平;逆转录聚合酶链反应和Western blotting法分别检测皮质缺血区脑组织Gasdermin D (GSDMD) mRNA和Gasdermin D蛋白的氮端(GSDMD-N)蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分明显上升、脑梗死体积明显增加,脑脊液IL-1β、IL-6和IL-18含量明显增加,皮质缺血区脑组织GSDMD mRNA及GSDMD-N蛋白表达水平明显增高(P<0.05或P<0.01);HE染色结果显示,模型组大鼠脑组织神经元排列紊乱,部分神经细胞消失,胞核固缩,结构不完整。与模型组比较,电针组大鼠神经功能评分下降、脑梗死体积减小,脑脊液IL-6和IL-18含量明显减少,GSDMD mRNA及GSDMD-N蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01);大鼠大脑皮质神经元变性及神经细胞数量丢失程度均较模型组有所减轻。结论电针"百会""人中"穴能使CIRI模型大鼠脑梗死体积减小,改善大鼠神经功能,其机制可能与下调脑脊液炎症因子和皮质缺血区脑组织细胞焦亡底物蛋白GSDMD表达有关。     

张明昊，张童，郭申，赵绅，杜婧雯，俎兆轩，丁妍妍

目的基于NOD 样受体蛋白3（NLRP3）/半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-1（Caspase-1）/Gasdermin D （GSDMD）通路探讨左归降糖舒心方含药血浆对氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）诱导J774A.1 巨噬细胞焦亡的调控 机制。方法将分化完全的J774A.1 巨噬细胞分为空白血浆组、模型组、左归降糖舒心方含药血浆组、 MCC950（NLRP3 特异性抑制剂）组,每组6 个复孔。除空白血浆组外,其余各组以100 mg·L-1 ox-LDL 诱导细 胞,构建细胞焦亡模型。空白血浆组、模型组、MCC950（50 μmol·L-1）组以含10%空白血浆进行培养,左归降 糖舒心方含药血浆组用10%含药血浆培养细胞24 h。采用CCK-8 法测定各组细胞增殖情况,计算细胞增殖抑 制率;采用LDH 释放实验检测细胞膜完整性及细胞焦亡水平;采用ELISA 法及免疫荧光法检测细胞白细胞介 素（IL）1β、IL-18 含量及蛋白表达情况;采用Western Blot 法检测NLRP3、Caspase-1 及GSDMD 蛋白表达。 结果与空白血浆组比较,模型组细胞的IL-18、IL-1β 含量及LDH 释放率明显增高（P＜0.01）,IL-1β、IL-18 及NLRP3、Caspase-1、GSDMD 蛋白表达明显上调（P＜0.01）。与模型组比较,左归降糖舒心方含药血浆组细 胞的IL-18、IL-1β 含量及LDH 释放率明显下降（P＜0.01）,IL-1β、IL-18 及NLRP3、Caspase-1、GSDMD 蛋 白表达明显下调（P＜0.01）。结论左归降糖舒心方含药血浆能够抑制ox-LDL 诱导的J774A.1 巨噬细胞焦亡状 态及炎性反应,其作用机制可能与调控NLRP3/Caspase-1/GSDMD 通路,下调细胞炎性因子IL-18、IL-1β 表达 有关。     

黄芩汤调控TLR2/NF-κB/NLRP3通路对溃疡性结肠炎细胞焦亡的影响

目的 基于TLR2/NF-κB/NLRP3通路探讨黄芩汤对溃疡性结肠炎细胞焦亡的影响。方法 实验分为空白组、模型组、低中高中药血清组。LPS+ATP构建焦亡模型,cck-8法检测生长情况,流式细胞术检测凋亡,Elisa检测IL-18、IL-1β、TNF-α水平,qRT-PCR检测IL-1β、NLRP3、Caspase-1、IL-18、ASC、GSDMD mRNA表达情况,WB检测TLR2、p-NF-κB-p65、GSDMD蛋白水平。结果 与模型组相比,三组中药血清细胞活力均明显上升(P<0.05)、凋亡率均显著降低(P<0.01)。与模型组相比,三组中药血清IL-18、IL-1β、TNF-α水平均明显降低(P<0.05)。与模型组相比,中剂量组Caspase-1、NLRP3、ASC、IL-18的mRNA表达明显降低(P<0.05),高剂量组IL-1β、NLRP3、Caspase-1、IL-18、ASC、GSDMD的mRNA表达均显著降低(P<0.01)。与模型组相比,中、高剂量组TLR2、p-NF-κB-p65及高剂量组GSDMD蛋白表达显著降低(P<...     

电针预处理对心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌Gasdermin D、半胱氨酸蛋白酶-1及白细胞介素-1β表达的影响

目的:观察电针预处理对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)大鼠心肌细胞焦亡相关蛋白半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)、Gasdermin D(GSDMD)、白细胞介素-1β(IL-1β)的影响,探讨电针预处理减轻MIRI损伤的可能机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、假手术组、模型组、电针组,每组10只。电针组电针大鼠双侧“内关”,每次20 min,每日1次,连续3 d。采用冠状动脉左前降支结扎法复制MIRI大鼠模型。采用超声心动图观察造模4 h后大鼠左心室射血分数(LVEF)以评估心功能;TTC染色法观察大鼠心肌梗死面积;免疫组织化学法观察大鼠心肌组织中GSDMD表达情况;Western blot法检测心肌组织GSDMD、Caspase-1、IL-1β蛋白表达水平。结果:与空白组相比,假手术组心肌组织GSDMD表达升高(P<0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠术后4 h时LVEF明显下降(P<0.000 1),梗死面积增大(P<0.000 1),心肌组织GSDMD表达显著升高(P<0.000 1),心肌GSDMD、Caspase-1、IL-1β蛋白表达升高(P...     

电针对膝骨关节炎大鼠膝关节滑膜组织细胞焦亡的影响

目的:观察电针对膝骨关节炎(KOA)大鼠膝关节滑膜组织中细胞焦亡相关蛋白的影响，探究电针治疗KOA的作用机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、模型组、电针组和药物组，每组10只。用4%木瓜蛋白酶0.2 mL关节腔注射建立KOA大鼠模型。电针组予右膝关节“内膝眼”“犊鼻”电针治疗，15 min/次，1次/d, 6 d/周，连续4周。药物组予塞来昔布24 mg/kg灌胃，1次/d, 6 d/周，连续4周。干预前后采用Lequesne评分评估大鼠KOA功能障碍程度；ELISA法检测血清白细胞介素(IL)-1β和IL-18的含量；HE染色法观察右膝关节滑膜组织的形态学变化并进行滑膜炎病理评分；免疫组织化学法观察右膝关节滑膜组织中NOD样受体蛋白3(NLRP3)的表达；实时荧光定量PCR法检测右膝关节滑膜组织中NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、Gasdermin D(GSDMD)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、IL-1β、 IL-18 mRNA的表达；Western blot法检测右膝关节滑膜组织中NLRP3、ASC、Caspase-1、GSDMD、GSDMD-N、...     

益阴通络胶囊对缺血性脑卒中大鼠脑组织病理改变及神经保护作用的研究

目的:观察益阴通络胶囊对缺血性脑卒中大鼠血清NOS、SOD、脑匀浆中Na⁺-K⁺-ATP酶及脑组织病理改变的影响。方法:采用线栓法造模,将造模成功大鼠随机分为模型组、血塞通阳性对照组及益阴通络胶囊小、中、大剂量组。灌胃给药后,心脏采血,检测血清一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)以及脑匀浆Na⁺-K⁺-ATP酶活性变化,并观察各组大鼠神经功能缺损症状及脑组织病理学改变。结果:益阴通络胶囊大、中剂量组能升高血清NOS、SOD活性以及脑匀浆中Na⁺-K⁺-ATP酶活性。益阴通络胶囊大、中、小剂量组及血塞通阳性对照组神经功能缺损症状均改善,与模型组比较,大、中剂量组脑组织病理改变明显减轻。结论:益阴通络胶囊具有治疗脑缺血大鼠脑组织损伤的作用。益阴通络胶囊对脑缺血损伤的治疗作用可能与升高血清NOS、SOD活性、及脑匀浆Na⁺-K⁺-ATP酶活性相关。     

霍山石斛不同提取物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠抗疲劳作用及物质基础研究

目的:研究霍山石斛水提物、醇提物对肾阴虚证、肾阳虚证小鼠抗疲劳作用及其物质基础。方法:180只健康昆明雄性小鼠适应性喂养7d后随机分为空白组、肾阴虚模型组、肾阳虚模型组、西洋参组、人参组、肾阴虚各给药组、肾阳虚各给药组,分别每日灌服甲状腺素溶液和氢化可的松溶液制备肾阴虚证、肾阳虚证动物模型,给药14d,检测各组小鼠的力竭游泳时间、肝糖原、肌糖原、血乳酸(BLA)、游离脂肪酸(FFA)、血尿素氮(BUN)、甘油三酯(TG)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、Na⁺-K⁺-ATP酶和Ca²⁺-ATP酶的变化。结果:与肾阴虚模型组比较,霍山石斛水提物各剂量组、醇提物高剂量组能升高模型小鼠的力竭游泳时间,升高肝糖原和肌糖原含量,降低血清FFA、BUN和TG,提高LDH值,降低肝脏CK、Na⁺-K⁺-ATP酶及Ca²⁺-ATP酶值(P<0.05,P<0.01)。与肾阳虚模型组比较,霍山石斛水提物高剂量组能升高模型小鼠的力竭游泳时间,升高肝糖原和肌糖原含量,降低BLA水平,升高血清FFA、BUN、TG、CK及肝脏LDH、Na⁺-K⁺-ATP酶值(P<0.05,P<0.01),霍山石斛醇提物高剂量能升高模型小鼠的力竭游泳时间和肌糖原含量(P<0.05)。结论:霍山石斛水提物能提高肾阴虚证、肾阳虚证小鼠的抗疲劳作用,具有双向调节作用,可能是霍山石斛补虚作用的主要物质基础,霍山石斛醇提物仅能提高肾阴虚证小鼠的抗疲劳作用,可能是霍山石斛滋阴清热功效的主要物质基础。     

丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶信号通路在穿心莲内酯治疗心肌缺血/再灌注损伤大鼠中的分子机制

目的:从丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶(MAPK/ERK1/2)信号通路研究穿心莲内酯(AG)对心肌缺血/再灌注损伤(MI/RI)大鼠的分子机制,为AG能够安全地用于MI/RI的预防提供参考.方法:雄性SPF级SD大鼠60只,购入后先全部予适应性喂养2周,后将其随机分为假手术组、模型组、银杏内酯B干预组,AG治...     

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??OBJECTIVE To study the preventing effects of p-coumaric acid(p-CA) on acute hypoxia-induced pulmonary edema by mice experiments. METHODS Acute-hypoxia model was established using a normobaric hypoxia chamber in vivo. Salidroside was set as a positive control drug. And the test period was 7 d using a method of intragastric administration. The measurements including pulmonary water content, HE staining, inflammatory factors, anti-oxidative indexes and Na⁺, K⁺-ATPase were performed to determine the efficacies and mechanisms of p-CA on preventive against acute hypoxia-induced pulmonary edema. RESULTS As compared with the normal group, pulmonary water contents increased significantly by 3.56% in the mice treated with acute hypoxia (9.5% O₂) for 6 h (control group) (P<0.01), and administration with p-CA (25, 100 mg??kg^-1??d^-1) for 7 d could significantly reduce this index (P<0.05), which was as effective as the positive group. The action mechanisms of p-CA could be due to its abilities of improving the activity of Na⁺, K⁺-ATPase, enhancing antioxidant capacity (SOD??, CAT?? and MDA??) and inhibiting inflammatory factors (IL-1?? and IL-6). CONCLUSION p-CA has greater preventive effects on acute hypoxia-induced pulmonary edema in mice.     

基于能量代谢对3味山姜属中药黄酮类成分药性归属的初步研究

目的:通过检测胃溃疡寒证模型大鼠体内能量代谢、物质代谢、脂代谢相关酶的含量,考察高良姜、大高良姜、红豆蔻的黄酮类成分对其表达的影响,以阐述其寒热属性及对胃溃疡寒证模型大鼠能量代谢的影响及作用机制.方法:采用知母水煎液和15％冰乙酸灌胃造胃溃疡寒证模型.以干姜姜辣素为阳性对照,分为空白对照组、阳性对照组、模型组、高良姜高...     

柴胡加龙骨牡蛎汤对心肌梗死合并焦虑大鼠海马区NLRP3/GSDMD炎性信号通路的影响

目的探讨心肌梗死合并焦虑大鼠海马区NLRP3/GSDMD炎性信号通路变化及柴胡加龙骨牡蛎汤对大鼠海马区炎性损伤的作用效应。方法将60只SD大鼠随机分为假手术组9只、心梗并焦虑组17只、心梗组17只、心梗并焦虑+中药组17只。心梗组采用结扎冠状动脉左前降支方法进行造模;假手术组穿线不结扎;心梗并焦虑组和心梗并焦虑+中药组先采用空瓶刺激方法进行焦虑造模(周期21 d),于造模第15天采用结扎冠状动脉左前降支方法进行心肌梗死造模。心肌梗死造模后第2天,心梗合并焦虑+中药组给予柴胡加龙骨牡蛎汤10 mL/kg灌胃,其余组灌胃等量蒸馏水,均1次/d,连续7 d。灌胃结束后进行心脏超声检查,采用高架十字迷宫实验、旷场实验评价各组大鼠行为学,大脑海马区HE、尼氏染色观察脑神经元病理改变,免疫组化检测大鼠海马区NLRP3、Caspase-1、GSDMD表达情况,Western blot法检测大鼠海马组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达水平。结果与心梗并焦虑组比较,心梗并焦虑+中药组左室射血分数(LVEF)、左室短轴缩短率(LVFS)均明显升高(P均<0.05),左心室舒张末期内径(LVIDd)和左心室收缩末期内径(LVIDs)均明显缩短(P均<0.05),大鼠进入开放臂次数所占比和开放臂停留时间所占比、大鼠水平运动得分和垂直运动得分均明显升高(P均<0.05)。心梗并焦虑组和心梗组大鼠海马区尼氏阳性面积均明显低于假手术组(P均<0.05),心梗并焦虑+中药组明显高于心梗并焦虑组和心梗组(P均<0.05)。心梗并焦虑组和心梗组大鼠海马区NLRP3、Caspase-1、GSDMD表达IOD值和海马组织中NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达水平均明显高于假手术组(P均<0.05),且心梗并焦虑组GSDMD表达IOD值和NLRP3、Caspase-1、IL-18蛋白表达水平均明显高于心梗组(P均<0.05),而心梗并焦虑+中药组NLRP3、Caspase-1、GSDMD表达IOD值和NLRP3、Caspase-1、GSDMD、IL-1β、IL-18蛋白表达水平均明显低于心梗并焦虑组(P均<0.05)。结论柴胡加龙骨牡蛎汤可能通过调控海马区NLRP3/GSDMD炎性信号通路,抑制心肌梗死合并焦虑大鼠海马区的炎性反应,缓解大鼠焦虑状态。     

基于网络药理学探讨清肺通络方治疗儿童肺炎支原体肺炎的作用机制＊

目的 基于网络药理学方法探讨清肺通络方治疗儿童肺炎支原体肺炎（Mycoplasma pneumoniae pneumonia， MPP）的潜在作用机制。方法 运用中药系统药理学数据库与分析平台（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform， TCMSP）结合手动文献检索筛选出清肺通络方的活性成分，并通过该平台对清肺通络方活性成分靶点进行预测，并使用蛋白质数据库（The Universal Protein Resource， UniProt）统一规范预测靶点名称；利用人类孟德尔遗传数据库（Online Mendelian Inheritance in Man， OMIM）、药物数据库（DurgBank）、疾病基因数据库（DisGeNET）、人类基因数据库（Gene Cards?：The Human Gene Database，GeneCards）检索儿童MPP的相关靶点；利用Biogenet分别对药物与疾病靶点进行蛋白互作网络（Protein-Protein Interaction Networks， PPI）进行构建，并提取交集网络以获得清肺通络方治疗儿童MPP的核心靶点；利用基因富集分析在线工具（Metascape）对核心靶点进行基因进行基因本体（Gene ontology， GO）富集分析和京都基因与基因组百科全书（Kyoto encyclopedia of genes and genomes， KEGG）通路富集分析。结果 得到药效成分162个、药物靶点276个、儿童MPP靶点589个，最终获得关键靶点120个。清肺通路方主要成分为槲皮素（quercetin）、β-谷固醇（beta-sitosterol）、山奈酚（kaempferol）、常春藤皂苷元（hederagenin）、豆甾醇（Stigmasterol）、异鼠李素（isorhamnetin）、丁子香萜（Mairin）等；核心靶标为微型染色体维持蛋白2（MCM2）、异核核糖核蛋白A1（HNRNPA1）、异核核糖核蛋白K（HNRNPK）、异核核糖核蛋白U（HNRNPU）、雌激素受体1（ESR1）、肿瘤蛋白P53（TP53）、白介素增强子结合因子3（ILF3）等；GO功能富集分析提示清肺通络方通过生物合成、氧化应激、细胞凋亡、转录因子结合等方面发挥作用；KEGG信号通路分析表明主要与癌症中的转录失调通路、细胞凋亡通路、泛素介导的蛋白水解通路、PI3K-Akt信号通路、剪接体通路、MAPK信号通路、Notch信号通路、EB病毒感染、小细胞肺癌通络等相关。结论 清肺通络方通过多成分、多靶点、多途径的作用方式，从细胞凋亡、免疫调节、炎症反应等方面发挥其治疗儿童MPP的作用。     

调冲消癥方联合米非司酮治疗子宫肌瘤50例

目的：观察清肺通络合剂治疗儿童肺炎支原体肺炎的临床疗效及其对心肌酶谱的影响。方法：通过将72例符合研究纳入标准的肺炎支原体肺炎患儿随机分为治疗组和对照组,两组患者均给予阿奇霉素、磷酸肌酸钠静脉输液治疗5 d、吉他霉素静脉输液治疗2 d,治疗组加用清肺通络合剂口服7 d,分别对两组的综合疗效、治疗前后心肌酶谱的变化进行比较,进行清肺通络法治疗儿童肺炎支原体肺炎疗效和对心肌酶谱影响的评价。结果：治疗组36例,痊愈24例,显效10例,有效1例,无效1例,愈显率94.44%,总有效率97.22%;对照组36例,痊愈17例,显效8例,有效9例,无效2例,愈显率69.44%,总有效率97.22%,治疗组临床疗效优于对照组（P<0.05）。治疗组在治疗后心肌酶谱的改善上显著优于对照组（P<0.05）。结论：清肺通络法治疗儿童肺炎支原体肺炎的疗效显著并能够显著改善心肌酶,具有重要的临床价值,值得进一步深入研究。     

羟基红花黄色素A对非酒精性脂肪肝炎细胞的作用

目的:探讨羟基红花黄色素A对非酒精性脂肪肝炎(NASH)的影响及其作用机制.方法:实验分为对照组、模型组和羟基红花黄色素A组,模型组用500 μmol/L的游离脂肪酸(FFA)处理细胞24h,对照组为不做处理的人正常肝脏细胞L-02,羟基红花黄色素A组在模型组基础上用0.2 mg/mL的羟基红花黄色素A处理细胞24 h...     

清肺通络汤对儿童肺炎支原体肺炎血液流变学影响的研究

[目的]观察清肺通络汤对儿童肺炎支原体肺炎血液流变学的影响。[方法]对40例支原体肺炎患儿随机分成两组,各20例,对照组采用基础治疗,治疗组在基础治疗上加用清肺通络汤,观察治疗组、对照组两组治疗前后组内、组间血液流变学-全血低切黏度、血浆黏度、聚集指数、红细胞压积的变化。[结果]两组全血低切黏度、血浆黏度、聚集指数、红细胞压积组内、组间治疗前后数据比较,差异均有统计学意义(P<0.001或P<0.05)。[结论]清肺通络汤有降低调节儿童肺炎支原体肺炎全血低切黏度、血浆黏度、聚集指数、红细胞压积的作用。