甲状腺激素受体β基因突变致甲状腺激素抵抗综合征家系分析

目的：对1例甲状腺激素抵抗综合征（RTH）先证者及其家系成员进行甲状腺激素受体β（TRβ）基因突变检测,并分析误诊情况。方法：取得先证者及家系成员知情同意后,收集RTH先证者及家系成员的临床资料,抽取先证者及其余10名家系成员的外周血抽提基因组DNA,应用PCR扩增TRβ基因的3-10号外显子编码区并直接测序,分析家系成员误诊情况。结果：11名家族成员中共发现3名患者,DNA测序结果显示先证者及其儿子、母亲TRβ第9外显子存在c.1234 A＞G（p.A317T）错义突变,为杂合突变。先证者表现为心悸消瘦,先证者儿子表现为多动,先证者母亲症状不明显。先证者和其儿子因在外院被误诊甲状腺功能亢进症已行放射性碘治疗,需终身甲状腺激素替代,先证者母亲因症状隐匿未被误诊误治。结论：TRβ基因第9外显子c.1234 A＞G突变是引起本家系RTH的原因,提高对该病的认识有助于避免不适当的治疗。     

甲状腺激素抵抗综合征家系基因突变情况分析

目的观察一例甲状腺激素抵抗综合征(RTH)家系甲状腺激素β受体(TRβ)基因突变情况。方法收集该家系4名家庭成员及10名健康对照者外周血,提取基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)扩增纯化后直接测序。结果未发现该家系TRβ基因突变。结论 TRβ基因突变并非导致RTH的惟一因素。     

一甲状腺激素抵抗综合征伴桥本甲状腺炎家系TRβ基因突变分析

目的:分析1例甲状腺激素抵抗综合征伴桥本甲状腺炎患者及家系的甲状腺激素β受体(thyroid hormone receptor-β,TRβ)基因的突变情况。方法:收集患者、9例家系成员及随机抽取的9名健康对照者的外周血标本,检测甲状腺功能并提取基因组DNA,PCR扩增TRβ基因的第1～10个外显子,PCR产物纯化后直接测序检测TRβ基因是否发生突变。结果:TRβ基因的10个外显子未发现碱基替换、插入、缺失等突变情况。结论:TRβ基因突变不是RTH致病的唯一原因。     

甲状腺激素抵抗综合征患儿及其家庭的基因研究并文献回顾

目的研究甲状腺激素抵抗综合征（THRS）患儿的临床表现及其家庭甲状腺激素受体β（TRβ）的基因型。方法采集THRS患儿及其父母外周血标本,用PCR技术和直接测序法测定TRβ基因。结果患儿和其父亲检测到TRβ基因有突变,在第3号染色体第3外显子剪切点有一碱基插入,其母亲TRβ基因正常。结论 THRS是甲状腺受体基因突变相关性疾病,基因检测是诊断该病的根本手段。     

甲状腺激素抵抗综合征相关基因突变的研究进展

甲状腺激素抵抗综合征是机体组织器官对甲状腺激素反应性降低的一类综合征,以血清游离甲状腺素、三碘甲腺原氨酸升高和促甲状腺素升高或正常为基本特征,常表现为常染色体显性或隐形遗传,绝大多数是由甲状腺激素β受体基因突变所造成的。突变发生在甲状腺激素β受体基因的60多个密码子上,目前已发现突变位点将近130个,涉及340多个家系。现对其病因、发病机制、临床表现、诊断与治疗,尤其是相关基因突变的研究进展予以综述。     

β型甲状腺激素抵抗综合征患者临床特点分析

背景　β型甲状腺激素抵抗综合征（RTHβ）属于罕见内分泌疾病,临床极易误诊、误治。目的　总结RTHβ患者的临床特点,为临床医师了解本病提供帮助。方法　选取2013-2016年于中国医科大学附属第一医院内分泌与代谢病科诊断为RTHβ的患者6例。回顾性分析6例RTHβ患者的临床资料,包括性别、诊断年龄、发病年龄、家族史、主诉、心电图检查结果、甲状腺触诊结果、甲状腺超声检查结果、甲状腺核素静态显像结果、甲状腺功能指标〔游离三碘甲腺原氨酸（FT3）、游离甲状腺素（FT4）、促甲状腺激素（TSH）〕、促甲状腺素受体抗体（TRAb）、性激素结合蛋白（SHBG）、血清铁蛋白、脂代谢指标、骨代谢指标、骨密度、基因测序情况等。结果　6例RTHβ患者的诊断年龄均高于发病年龄,患者在确诊RTHβ之前均被误诊为甲状腺功能亢进症,长期服用抗甲状腺药物治疗。患者主诉均存在心悸、多汗,3例伴心房颤动。6例患者甲状腺核素静态显像均显示甲状腺双叶摄取率增高。5例RTHβ患者甲状腺超声显示有甲状腺肿大,4例显示多发结节。6例RTHβ患者血清FT3、FT4水平升高,TSH水平在参考范围,且TRAb均为阴性;血清SHBG和血清铁蛋白均在参考范围;甲状腺激素受体（TR）β基因测序均存在点突变。结论　RTHβ的临床表现存在高度异质性,临床诊断时需注意与甲状腺功能亢进症和甲状腺功能减退症区分,同时注意并非所有的RTHβ患者能检测出TRβ基因突变。对于高度怀疑为RTHβ的患者,可以采用促甲状腺素释放激素（TRH）兴奋试验、左旋-三碘甲腺原氨酸（L-T3）抑制试验或TRH兴奋试验联合L-T3抑制试验进行临床诊断。     

苯丙氨酸羟化酶基因c.158G>A(p.Arg53His)突变患儿随访及突变位点功能评估

目的：评价苯丙氨酸羟化酶（PAH）基因c.158G>A（p.Arg53His）突变的临床意义。方法：持续监测2例携带PAH基因p.Arg53His突变的疑似高苯丙氨酸血症患儿血液中苯丙氨酸（Phe）浓度,分析患儿的临床生化特征,应用T-Coffee系统分析PAH蛋白的跨种属保守性,应用Swiss-Model对正常结构及变异结构的PAH进行蛋白质三维结构建模及比对分析突变所致蛋白质空间结构的改变。检索现有数据库及文献统计p.Arg53His突变的人群携带率,应用等位基因表型值（APV）与基因型表型值（GPV）预测系统对该突变相关表型进行预测。结果：2例新生儿在PAH基因上分别检出两个突变：c.611A>G（p.Tyr204Cys）、c.158G>A（p.Arg53His）和c.1238G>C（p.Arg413Pro）、c.158G>A（p.Arg53His）。2例新生儿能耐受正常饮食,在随访期间血Phe水平在正常范围内。例2的母亲为p.Arg53His纯合突变,长期未进行低蛋白质、低Phe饮食干预,血Phe浓度、Phe/酪氨酸比值均在正常范围。突变的氨基酸在13个不同物种间并非高度保守。三维结构建模结果显示,p.Arg53His突变使得PAH第53位和第49位氨基酸之间的氢键由2个减少为1个,降低了二聚体的稳定性。p.Arg53His在高苯丙氨酸血症患者中的等位基因频率为0.015?08,在健康人群中的等位基因频率为0.001?621,其中东亚人群中的携带率最高,为0.013?73。APV与GPV系统预测结果显示,该突变与轻度高苯丙氨酸血症型别相关。结论：PAH基因p.Arg53His突变与不同突变组合为复合杂合状态可引起临床表型差异。p.Arg53His突变引起体内酶活性的降低不足以出现苯丙酮尿症临床症状,分类为“可能良性”。     

Notch3基因c.1630C>T突变致CADASIL家系的临床特征

目的研究伴皮质下梗死和白质脑病的常染色体显性遗传性脑动脉病(CADASIL)家系的基因突变情况及临床特征。方法收集同一家系中2例疑似CADASIL患者的临床资料,并对2例患者及先证者子女的Notch3基因突变热点区进行基因检测。结果2例患者均为中年起病,临床表现不同,分别以认知障碍及卒中为主要表现,但2例患者头颅磁共振均显示双侧基底节区、皮质下及脑干多发缺血梗死灶,并在基底节区和脑干可见多发微出血;2例患者均检测出Notch3基因11号外显子区c.1630C>T突变。结论Notch3基因c.1630C>T突变所致的该CADASIL家系的临床特征无明显特异性,但同一家系不同成员的临床表现可以不同。     

甲状腺激素抵抗综合征伴高泌乳素血症1例

<正>甲状腺激素抵抗综合征(resistance to thyroid horm one,RT H)是一种罕见的内分泌系统疾病,由Refetoff等^[1]于1967年首次报道,主要特点是血清游离甲状腺素(free thyroxin,FT4)、游离三碘甲状腺原氨酸(free triiodothyronine,FT3)水平升高伴促甲状腺激素(thyroid stimulating horm one,T SH)正常或略有升高^[2]。本文报道1例T HRβ基因(A317T)突变致垂体型甲状腺激素抵抗综合征伴高泌乳素血症,旨在为其诊断治疗提供思路。     

KCNH2基因c.358G>T突变导致家族性长QT综合征的实验研究

目的 寻找并验证导致家族性长 QT综合征(LQTS)的遗传因素。方法 从临床LQTS病例中筛选出具有家系背景的病患,收集相关临床资料,提取先证者血标本全基因组 DNA 后进行基因检测,并对先证者直系及旁系亲属血样进行测序验证,同时设计了相关细胞实验。首先构建 KCNH2-G120W 点突变质粒,然后将突变质粒及野生 KCNH2通过表达质粒分别转染细胞,通 过 膜 片 钳 检 测 不 同 组 全 细 胞 膜 电 位。结 果 通 过 高 通 量 测 序 找 到 了 KCNH2 基 因c.358G>T这一突变位点,同时证实了在家系中该位点杂合突变与 LQTS密切相关。实验结果显示 KCNH2-G120W 突变质粒组的尾电流显著下降,提示突变体不能正常地运送至细胞膜表面而导致电流下降。结论 通过临床家系研究和细胞水平实验发现了导致家族性 LQTS的新突变位点,为 LQTS的筛查、检测乃至临床治疗提供了新的路径。     

A new mutation in the thyroid hormone receptor gene of a Chinese family with resistance to thyroid hormone

Background  Resistance to thyroid hormone (RTH) is a dominant inherited syndrome of reduced tissue responsiveness to thyroid hormone. It is usually due to mutations located at the ligand-binding domain and adjacent hinge region of the thyroid hormone receptor β (TRβ). We report the clinical and laboratory characteristics and the genetic analysis of a patient with this rare disorder and his family members.

Methods  The clinical presentations and changes of thyroid function tests (TFTs) including magnetic resonance imaging (MRI) of pituitary and other laboratory tests were analysed. TFTs of his family’s members were detected as well. Direct DNA sequencing of the TRβ gene was done for those with abnormal TFTs.

Results  The RTH child had goiter, irritability, aggressiveness, and sudoresis. His TFTs showed high levels of circulating free thyroid hormones (FT₄ and FT₃) and normal thyroid-stimulating hormone (TSH) concentrations. He felt worse when treated as hyperthyroidism (Grave disease) with thiamazole and his clinical presentations got improved obviously when treated as RTH with bromocriptine without obvious advert effect. We identified a novel missense mutation, A317D, located in exon 9 of the gene of this boy and his mother. His mother had not any clinical presentation, but having abnormal TFTs results.

Conclusions  This patient reported here was concordant with the criteria of RTH. The feature is dysfunction of hypothalamus-pituitary-thyroid axis. A novel mutation was found in the TRβ, A317D, of this family. This research verified the phenomena that there is a clinical heterogeneity within the same mutation of different RTH patients.

     

儿童甲状腺激素抵抗综合征临床和遗传特点分析及文献复习

目的 分析儿童甲状腺激素抵抗综合征的临床特点及随访资料,并检测患儿及其父母甲状腺激素受体β(TRβ)基因突变情况,对其遗传特点进行分析.方法 回顾性分析我院2000-2014年确诊为甲状腺激素抵抗综合征患儿的临床资料,并在获得知情同意书的前提下对部分患儿、父母及其部分家系进行外周血DNA的TRβ基因突变位点检测.结果 患儿均于院外诊断为Grave's病或先天性甲状腺功能减退症,存在误诊误治.该病临床症状主要集中在神经系统、心脏症状和听力功能受损.4例患儿学习成绩不良,处于中等以下水平,其中1例患儿智力筛查为中度发育迟滞落后,1例智力发育临界.8例患儿均有心动过速.听力检测提示1例存在听力障碍.6例患儿以发现甲状腺肿大、心率增快就诊.实验室检查以异常的血清游离甲状腺激素升高和不受抑制的促甲状腺激素水平正常或升高为特点.心电图检查3例患儿发现异常,1例表现为加速性房性逸搏心律,2例表现为显著窦性心律不齐,其中1例伴预激综合征.共获得4例患儿及父母TRβ基因检测结果.1例患儿及其母亲TRβ基因第9外显子突变,第1235位碱基由胞嘧啶变为腺嘌呤,导致该位点编码的氨基酸由丙氨酸变为天冬氨酸,但患儿母亲没有相应的临床表现.1例患儿TRβ基因编码区出现第949位点突变,导致第3171位碱基由丙氨酸变为苏氨酸,余2例患儿及父母未发现TRβ基因突变.5例患儿应用溴隐亭治疗,随诊1-5年,5例患儿均心率下降明显,至90-92次/min,甲肿及突眼情况较前好转.结论 甲状腺激素抵抗综合征临床变异较多,临床表现主要为心律失常和智能发育问题,误诊率高.该综合征TRβ基因突变检出率不高,即使基因突变位点相同,表型也不尽相同,是否存在其他基因位点突变尚有待进一步证实.经长期随访观察溴隐亭治疗效果满意,为临床治疗提供可能.     

空卵泡综合征患者家系的LHCGR基因突变检测及系谱分析

目的 探究促黄体生成素/绒毛膜促性腺激素受体(LHCGR)基因突变与空卵泡综合征(EFS)的关系,指导相关生殖疾病的诊治。方法 通过基因测序对一例EFS的不孕症患者进行LHCGR基因突变和家系分析。结果 该患者LHCGR 基因第11 外显子处存在纯合突变:chr2:48915113A>G,c.1823T>C,p.Leu608Pro,突变使LHCGR 蛋白在第 608 位由亮氨酸(Leucine, Leu)突变为脯氨酸(Proline ,Pro)。对该患者进行家系分析并对其家庭成员测序发现,父母在此位点属于杂合突变,先证者弟弟(46,XY。未育)属于纯合突变,先证者妹妹(育有一女孩、一男孩)属于杂合突变。结论 LHCGR基因突变可导致EFS,进而导致相关生殖疾病的发生。     

A new mutation of PTCH gene in a Chinese family with nevoid basal cell carcinoma syndrome

Background Nevoid basal cell carcinoma syndrome （NBCCS） is a rare autosomal dominant disease characterized by a combination of development anomalies and a predisposition to tumour formation. Mutation of patched gene （PTCH）, considered the molecular defect of NBCCS, in a Chinese NBCCS family was investigated in this study.
Methods Genomic DNA was isolated from blood samples of all 12 members of this family. The mutated PTCH gene was screened by polymerase chain reaction amplification and direct sequencing. Results A new mutation of 3 bp （GAT deletion） was found in all seven affected members of this family. This mutation caused one aspartate deletion in the fourth transmembrane domain of the PTCH protein located within the sterol sensing domain （SSD）. This deletion was not found in any unaffected members of this family nor in 200 control samples.
Conclusions Our findings suggest that one 3-bp deletion in PTCH gene was the cause of nevoid basal cell carcinoma in a Chinese family through affecting the conformation and function of PTCH protein.     

MELAS综合征无创性基因突变分析方法研究

目的 研究携带A3243G突变的线粒体脑病-乳酸酸中毒-卒中样发作(MELAS)综合征患者及其母系亲属的外周血、尿、毛囊、唾液和部分患者的肌肉组织A3243G基因突变率,找到用于检测突变率更敏感的组织,建立更佳的、无创性的检查手段.方法 收集25例MELAS患者及其母系亲属33例的外周血、尿、毛囊、唾液和部分患者的肌肉组织提取DNA,利用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测各组织中A3243G突变,根据酶切产物电泳条带密度值问的比例计算突变型线粒体DNA的含量,比较各组织A3243G突变率的差异.结果 25例患者外周血、尿、毛囊、唾液均榆测到A3243G突变,尿液中A3243G突变率(62%±9%)明显高于外周血巾的突变率(36%±10%)(t=-11.13,P<0.01).5例患者进行了肌活检,肌肉突变率44.9%～75.1%,尿液中A3243G突变率和肌肉中A3243G突变率存在正相关,(r=0.900,P=0.037).33例母系亲属中有28例在至少一种组织中检测到A3243G突变,尿液中A3243G突变率33.0%(5.O%-70.4%)明显高于外周血中的突变率8.0%(0-33.3%)(z=-4.197,P<0.01).患者及其母系亲属唾液和毛囊组织中A3243G突变率与外周血相比筹别均不大.结论 在MELAS患者及其母系亲属巾,尿液中A3243G突变率均明显高于外周血,尿液A3243G突变率分析可能是优于外周血线粒体分析的一种无创性方法.     

720例甲基丙二酸血症MMACHC基因c.609G>A突变患者临床特征及随访分析

目的：分析携带MMACHC基因c.609G>A（p.W203X）突变的cblC型甲基丙二酸血症（MMA）患者的临床表现、治疗效果、预后及影响因素。方法：回顾性分析2007至2020年在上海交通大学医学院附属新华医院就诊的720例携带c.609G>A突变的cblC型MMA患者的临床及实验室检查资料。根据基因突变位点不同将患者分为三组,携带c.609G>A纯合突变的患者为A组（172例）;携带c.609G>A与c.482G>A（p.R161Q）、c.80A>G（p.Q27R）及c.394C>T（p.R132X）中任一突变形成的复合杂合突变患者为B组（169例）;携带c.609G>A与上述突变位点以外突变[如c.658_660delAAG（p.K220del）、c.315A>T（p.Y105X）、c.567dupT（p.I190fs^*13）]的复合杂合突变患者为C组（379例）。对不同基因突变位点患者的临床表现,血酰基肉碱、血同型半胱氨酸、尿有机酸水平以及治疗效果进行比较,根据随访结果采用logistic回归分析患者预后的影响因素。结果：720例患者中306例（42.5%）来自新生儿筛查,其中156例发病;414例未进行新生儿筛查的患者中10例因同胞确诊后诊断（临床未发病）,其余404例均为临床发病病例。560例发病患者中,发病年龄中位数为1.2个月（3?d~20岁）。B组发病年龄晚于A组和C组,三组间发病年龄差异有统计学意义（P<0.01）。患者临床症状各异,1岁以内发病患者多表现为呕吐、腹泻、喂养困难及抽搐,1岁以后发病患者多以运动障碍及智力落后为主要表现。肾脏疾病起病的患者均携带c.80A>G或c.482G>A突变,伴有肺动脉高压的患者均携带c.80A>G突变。长期随访患者621例,其中预后正常156例（25.1%）,落后433例（69.7%）,死亡32例（5.2%）。剔除失访、死亡及资料缺失的患者,对559例患者的预后影响因素进行logistic回归分析,结果显示新生儿筛查与否、发病与否、发病年龄及基因突变位点对预后的影响有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论：MMACHC基因c.609G>A突变与早发型MMA相关,患者多于出生后1个月内起病。维生素B12肌内注射对携带不同突变的患者均有效。新生儿筛查对患者预后有益,而临床发病则不利于患者预后,携带c.609G>A纯合突变患者较携带c.609G>A与其他突变位点形成的复合杂合突变患者预后差。     

A novel deletion-frameshift mutation in the S1 region of HERG gene in a Chinese family with long QT syndrome

Background The congenital Long QT syndrome (LQTS) is a hereditary cardiac channelopathy that is characterized by a prolonged QT interval,syncope,ventricular arrhythmias,and sudden death.The chromosome ...     

未成年肾病综合征患者血清甲状腺激素表达谱变化研究

目的 分析未成年肾病综合征(NS)患者血清甲状腺功能表达谱的变化情况。方法 收集2012年7月～2019年7月在我院就诊的小于18周岁NS患者55例临床及实验室信息,其中首次发病患者28例,复发患者27例,以59例健康体检未成年人作为健康对照组。分析NS患者及健康对照者甲状腺功能表达谱的差异,用相关性分析分析甲状腺功能表达与各个指标的相关性。结果 首次发病NS患者血清FT3、TT3、TT4、rT3、TGAb、TPO水平显著低于健康对照组,血清TSH水平显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05);复发NS患者血清FT3、TT3、TT4、TGAb、TPO水平显著低于健康对照组,血清TSH水平显著高于健康对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。首次发病NS患者与复发NS患者各指标之间均无差异(均P0.05)。首次发病NS患者中TT3与ALB(r=0.744,P0.001)、PA(r=0.658,P0.001)呈强正相关,TT3与Scr(r=-0.678,P0.001)呈强负相关。TT4与ALB(r=0.604,P0.001)、PA(r=0.646,P0.001)呈强正相关。复发NS患者中,TT3与APOA1(r=0.648,P0.001)呈强正相关。结论 未成年NS患者存在甲状腺激素水平低下的情况,但首次发病和复发NS患者甲状腺激素水平与血清蛋白及肾功能指标相关性有差异。