紫杉醇与白藜芦醇联合应用对人胃癌MGC803细胞作用的研究

目的 研究紫杉醇(PA)联合白藜芦醇(RES)对人胃癌MGC803细胞株的影响.方法 采用MTT法检测两种药物单用和联合应用对细胞的作用,光镜观察细胞结构的变化,联合应用判断两药合用效果,流式细胞仪检测MGC803细胞周期分布,并且检测端粒酶的活性.结果 PA可抑制MGC803细胞的生长,且呈剂量及时间依赖性(P<0.05);光学显微镜下可见经PA和RES培养的胃癌细胞质内存在异常物质;PA对人胚肺成纤维细胞(HPF)生长起促进作用,且呈剂量依赖性(P<0.05);PA与RES联合应用对MGC803细胞生长的抑制具有协同作用(P<0.05);PA对G0/G1期有阻滞作用,RES有明显的S期阻滞作用,两者可从不同环节抑制细胞增殖,同时端粒酶活性受到抑制.结论 PA对胃癌MGC803细胞有抑制作用,相同剂量对正常细胞无抑制作用,PA与RES对胃癌细胞的抑制具有协同作用,与单用RES相比,PA与RES联合应用可减少RES的用药剂量.     

白藜芦醇对人胃癌耐药细胞SGC7901/DDP及亲代细胞作用的研究

目的探讨白藜芦醇（Res）对人胃癌耐药细胞系SGC7901/DDP及亲代细胞作用机制的研究。方法采用MTT法和集落形成试验等方法观察SGC7901/DDP及亲代细胞在Res作用后,细胞生长曲线、生长抑制等方面的变化。结果MTT法结果表明,Res对SGC7901/DDP及亲代细胞具有明显的抑制作用,SGC7901/DDP细胞在Res作用0.5~1d内较亲代细胞敏感,在2d后开始表现出耐药性,3d后则与亲代细胞没有差别。结论Res对人胃癌耐药细胞SGC7901/DDP及亲代细胞具有明显的抑制作用,可能是通过诱导肿瘤细胞发生坏死和凋王引起的。     

白藜芦醇对人胃癌MGC803细胞形态影响和相关增生因素的变化

目的 研究白藜芦醇对人胃癌MGC803细胞形态的影响和相关增生因素的变化.方法 用MTT法测定药物敏感性;光镜、电镜、MTT法活细胞计数、流式细胞仪观察其生物学特征.结果 0.1g/L、0.2g/L白藜芦醇可以抑制MGCS03细胞于S期,白藜芦醇能抑制MGC803细胞生长增生,并呈浓度依赖性.结论 0.1g/L、0.2g/L白藜芦醇能明显地抑制MGC803细胞增生.     

顺铂与白藜芦醇联合对胃癌细胞影响的研究

胃癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,并且容易发生转移,其中人胃癌MGC803 细胞对多种化疗药物敏感.虽然我国在胃癌综合治疗方面做了大量研究,并取得一定效果,但胃癌术后5年生存率仍不足40%[1-3].顺铂(Cisplatin,CDDP)具有独特的抗癌机理和神奇的抗癌功效,CDDP是近年来常用的抗肿瘤药物.本研究以人胃癌SGC7901细胞株为研究对象,观察了CDDP对胃癌细胞及正常人体细胞的作用,并进一步研究CDDP与常规化疗药物白藜芦醇(Resverat rol,RES)联合应用对胃癌细胞作用的影响.为指导临床治疗提出一些新的化疗方法.     

热疗联合顺铂诱导人胃癌MKN45细胞凋亡作用的研究

为研究顺铂及同时合并43℃30min热疗作用下胃癌细胞的凋亡过程,采用细胞培养的方法,通过AO染色、DNA微电泳及电镜观察,发现人胃癌MKN 45细胞在25mg/L浓度的顺铂作用2h、43℃30min热疗作用及两者同时作用下,呈现不同程度的凋亡。电镜观察到凋亡的细胞表;现DNA微电泳呈拖尾现象,提示凋亡细胞内DNA片断化;凋亡细胞AO染色呈阳性反应,且顺铂与热疗共同作用时AO阳性率高于两者单独作用时,有显著性差异(P<0.05),但两者单独作用时AO染色比较无显著性差异。提示热疗与顺铂合用时对人胃癌细胞的凋亡具有协同作用。     

顺铂与5-氟尿嘧啶对体外人胃癌细胞影响的研究

[目的]研究顺铂（DDP）与5-氟尿嘧啶（5-FU ）在合并用药前后对体外培养的人胃癌细胞的影响.[方法]采用MTT法观察体外培养的人胃癌细胞系SGC-7901在DDP与5-FU合并用药前后细胞存活率的差异,并通过流式细胞仪检测细胞周期变化, 透射电镜观察细胞超微结构变化.[结果]DDP与5-FU合用与单独应用化疗药相比细胞存活率明显下降,其增效倍数为单独用药的2.73～4.48倍（P＜0.01）, 细胞生长停止在S期,S期数分数为0.51,有效抑制了细胞有丝分裂及DNA合成, 细胞超微结构显示：联合用药后,细胞核固缩、空泡形成、微绒毛减少、线粒体及内质网肿胀.[结论]结果表明顺铂与小剂量化疗药合用,可获得强于化疗药单独用药的疗效,5-氟尿嘧啶增加了化疗药物对肿瘤细胞的毒性,增加了细胞对药物的敏感性,降低了药物的副作用.     

生长激素联合顺铂、丝裂霉素诱导前胃癌细胞凋亡的实验研究

目的 :研究重组人生长激素 (rhGH)联合顺铂、丝裂霉素诱导前胃癌细胞 (MFC)凋亡的作用及其可行性 .方法 :通过MTT法检测rhGH联合顺铂、丝裂霉素和单独使用顺铂、丝裂霉素对MFC的体外杀伤作用 ,以IC50 和杀伤率表示 ;采用流式细胞技术、DNA凝胶电泳、透射电镜等技术检测细胞凋亡情况 .结果 :体外杀伤实验结果显示 ,rhGH联合顺铂组、rhGH联合丝裂霉素组抑制率分别为 86 6 5 % ,6 9 33% ;单独应用顺铂组和单独应用丝裂霉素组抑制率分别为 4 6 7% ,4 2 6 8% ;rhGH联合顺铂组、rhGH联合丝裂霉素组IC50 分别为 10 0ng/mL ,12 5 μg/mL .rhGH联合顺铂比单独使用顺铂时 ,对前胃癌细胞具有更强的杀伤作用 ,P <0 0 1,有极显著差异 ;rhGH联合顺铂组、rhGH联合丝裂霉素组用流式细胞技术检测有明显凋亡峰 ;DNA凝胶电泳呈明显的凋亡梯形条带 ;电镜观察有细胞凋亡形态学特征性改变 .结论 :根据本实验结果可推测胃癌围手术期应用rhGH联合化疗药物顺铂、丝裂霉素治疗 ,有良好的协同作用 ,可有效地诱导胃癌细胞凋亡 ,提高抗癌效果     

希罗达联合顺铂与紫杉醇联合顺铂治疗晚期胃癌的临床疗效

目的探讨希罗达联合顺铂与紫杉醇联合顺铂方案治疗晚期胃癌的临床疗效差异。方法回顾性分析我院近年来收治的60例晚期胃癌患者的临床资料。结果紫杉醇联合顺铂治疗晚期胃癌效果优于希罗达联合顺铂,但经统计学分析,无明显差异性,P〉0.05。结论希罗达联合顺铂与紫杉醇联合顺铂治疗晚期胃癌临床疗效相近,且不良反应均可耐受,可根据不同患者的实际情况进行选择。     

紫杉醇诱导人胃癌MGC803细胞凋亡作用研究

目的:研究胃癌发生过程中原位细胞凋亡活动以及紫杉醇对人胃癌细胞系MGC803诱导细胞凋亡的作用。方法:用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的缺口末端标记法检测了胃癌MGC803细胞凋亡,用紫杉醇处理培养胃癌细胞MGC803、显微镜下进行观察并且进行琼脂糖电泳,流式细胞仪检测细胞周期分布和端粒体酶活性检测。结果:癌旁对照组原位凋亡细胞增多,紫杉醇处理胃癌细胞可以诱导细胞产生典型的细胞凋亡变化。DNA发生断裂,琼脂糖电泳产生梯形条带,细胞阻滞于G2/M期,端粒体酶活性下降。结论:在体内肿瘤细胞凋亡降低,细胞分裂可加快,癌旁对照中细胞凋亡增多,体外紫杉醇可以诱导胃癌细胞系MGC803凋亡。     

黄芪多糖与顺铂联合对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制作用的研究

目的：研究黄芪多糖和顺铂联合应用对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法：采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法观察黄芪多糖和顺铂对胃癌SGC-7901细胞的抑制作用。结果：黄芪多糖能抑制人胃癌SGC-7901细胞株的增殖,并呈浓度及时间依赖性,黄芪多糖和顺铂联合应用应用对胃癌细胞的抑制作用显著高于单用黄芪多糖、顺铂组。结论：黄芪多糖在体外对胃癌细胞株SGC-7901细胞的增殖有明显的抑制作用,黄芪多糖和顺铂联合应用效果强于单独用药组。     

白藜芦醇纳米微粒对体外人胃肿瘤MGC803细胞增殖和凋亡的影响

目的观察不同浓度白藜芦醇（RES）纳米微粒在不同时间段对人胃肿瘤MGC803细胞生长和凋亡的影响。方法应用MTT法测定不同浓度的RES纳米微粒、RES、5-FU对MGC803细胞分别在0、6、12、24、48、60 h的细胞生长抑制率。流式细胞仪分析MGC803细胞周期的改变,细胞免疫组化检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白的表达,检测端粒酶活性。结果MTT法显示不同浓度的RES纳米微粒可抑制MGC803细胞增殖（60μg/ml作用60h的抑制率达64%）,并且与浓度和时间均呈正相关,流式细胞仪细胞周期分析提示RES纳米微粒可将MGC803细胞阻滞于S期,细胞免疫组化法显示凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达下调,端粒酶活性水平下降。结论RES纳米微粒可诱导人胃肿瘤细胞MGC803发生凋亡,延长药物对胃肿瘤细胞的有效作用时间,载药纳米微球没有改变RES成分的生物学活性。     

姜黄素纳米微粒对体外胃癌MGC803细胞凋亡机制的影响

目的观察姜黄素纳米微粒对人胃癌MGC803细胞凋亡机制的影响。方法 MTT法建立细胞剂量效应曲线,光镜和电镜下观察细胞形态变化,流式细胞仪分析MGC803细胞周期改变,免疫组化法检测凋亡相关Bcl-2蛋白表达。结果 MTT法显示,姜黄素纳米微粒抑制胃癌MGC803细胞增殖,呈现剂量-时间依赖性;光镜观察姜黄素纳米微粒组细胞损伤较轻,电镜下核周隙清晰,突触小泡较多;流式细胞仪法显示,姜黄素纳米微粒使胃癌MGC803细胞阻滞于G2/M期;免疫组织化学法显示,姜黄素纳米微粒使凋亡相关Bcl-2蛋白表达下调。结论姜黄素纳米微粒诱导人胃癌细胞MGC803凋亡并且延长药物对胃癌MGC803细胞作用时间。     

二十碳五烯酸与表阿霉素联合应用对人胃癌细胞株MGC-803的作用

目的 评估二十碳五烯酸（EPA）联合表阿霉素（EPI）对人胃癌细胞株MGC-803的作用。方法 采用MTT法检测各种药物单用和联合应用对细胞的作用,电镜观察细胞超微结构的变化,等效线图解法判断两药合用效果,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果 EPA可抑制MGC-803细胞的生长,且呈剂量及时间依赖性（P〈0．01）;倒置相差显微镜下可见经EPA培养的胃癌细胞核周存在大量异常颗粒,电镜下在核周及胞浆内可见异常电子致密物;EPA对人胚肺成纤维细胞（HPF）生长起促进作用,且呈剂量依赖性（P〈0．01）;EPA与EPI联合应用对MGC-803细胞生长的抑制具有协同作用（P〈0．05）;EPA有一定的G0／G1期阻滞作用,EPI有明显的S期阻滞作用,两者可从不同环节抑制细胞增殖。结论 EPA对胃癌细胞株MGC-803有抑制作用,相同剂量对正常细胞无抑制作用。EPA与EPI对胃癌细胞的抑制具有协同作用,与单用EPI相比,联合应用可减少EPI的用药剂量。     

谷氨酰胺联合丝裂霉素C对人胃癌细胞株MGC-803的作用

目的评估谷氨酰胺（GLN）联合丝裂霉素C（MMC）对人胃癌细胞株MGC-803的作用。方法采用MTT法检测药物对细胞的作用,应用中效原理判断两药合用效果,流式细胞仪检测细胞周期分布。结果GLN无明显刺激肿瘤生长作用,但随药物浓度升高和作用时间延长,可抑制肿瘤细胞生长,并呈剂量及时间依赖性。MMC具有良好的抗肿瘤作用,呈明显的时间依赖性。GLN与MMC联用时呈较弱的拮抗作用（1〈CI〈1．2703）。MMC有明显的S期阻滞作用,小剂量GLN对此阻滞作用影响较小,但大剂量GLN可显著减弱S期阻滞,降低细胞增殖指数。结论GLN与MMC对胃癌细胞的疗效呈剂量相关的拮抗作用。较大剂量MMC与小剂量GLN联用效果较好。     

siRNA介导的E2F-1基因沉默对胃癌细胞MGC803中Rb蛋白表达水平的影响

目的 应用RNA干扰技术研究E2F-1基因沉默在人胃癌MGC803细胞中对Rb蛋白表达的影响.方法 将重组质粒E2F-1-siRNA转染MGC803细胞,筛选稳定株,利用RT-PCR检测转染前后细胞E2F-1 mRNA表达水平,并通过蛋白免疫印记法（Western blot）检测各组细胞E2F-1蛋白的表达水平来验证质粒转入胃癌细胞的情况.采用Western blot检测三组细胞中总Rb蛋白和磷酸化Rb蛋白的表达情况,计算出非磷酸化Rb蛋白表达情况,统计各组间的差异.结果 重组质粒E2F-1-siRNA成功转入胃癌细胞中;有效抑制了E2F-1 mRNA的表达,E2F-1蛋白水平显著下降,与阴性对照组及未转染组相比分别降低了83.2%和84.6%,去磷酸化Rb蛋白分别增加了61.22%（P〈0.05）和66.60%（P〈0.05）,差异有统计学意义.结论 沉默表达E2F-1基因后,可以有效降低Rb蛋白的水平,促进其活化形式去磷酸化Rb蛋白的产生.     

二烯丙基二硫对人胃癌MGC803细胞作用的研究

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人胃癌MGC803细胞的作用机制。方法采用MTT法和流式细胞仪检测不同浓度的DADS对MGC803细胞的生长抑制作用和细胞周期分布影响。结果随着DADS浓度的增加,MGC803细胞的生长抑制率逐渐上升;细胞的G0/G1期比率下降,G2/M期比率逐渐上升。结论抑制癌细胞生长和诱导癌细胞周期阻滞于G2/M期是DADS的抗肿瘤机制之一。     

顺铂或奥沙力铂联合热疗对人胃癌细胞系BGC-823抑制作用的比较

目的：比较顺铂或奥沙力铂联合热疗对人未分化胃腺癌细胞系BGC-823增殖的抑制作用。方法：使用MTY法检测细胞增殖，确定顺铂和奥沙力铂对BGC-823抑制的工作浓度，并以该浓度进行化疗或与热疗联合应用，根据Veleriote法判断热、化疗联合应用后24h或48h的作用效果，并将顺铂和奥沙力铂联合热疗的作用进行比较。结果：以20％～30％抑制率的药物浓度作为试验的工作浓度，确定顺铂和奥沙力铂的工作浓度分别为1μg／ml和5μg／ml。单纯43℃热疗1h后，在24h时和48h时对BGC-823的抑制作用无统计学意义（P〉0．05）；应用顺铂1μg／ml和奥沙力铂5μg／ml后24h对BGC-823无显著的抑制作用（P〉0．05），48h时呈现显著的抑制作用（P〈0．01）。应用两药联合43℃热疗1h，在24h和48h对BGC-823均有显著的抑制作用（P〈0．05），随着时间的延长，对BGC-823的抑制作用增强（P〈0．05）。单药化疗在24h或48h时，两药的抑制作用无统计学差异（P〉0．05），顺铂联合热疗对BGC-823的抑制作用在24h和48h时均比奥沙力铂联合热疗的抑制作用强（P〈0．05）。根据Veleriote法判断：顺铂1μg／ml联合热疗在24h和48h时均呈明显的协同作用；奥沙力铂5μg／ml联合热疗在24h时产生次加作用，在48h产生协同作用。结论：顺铂或奥沙力铂联合热疗在24h和48h时呈现次加或协同作用，两种药物相比，顺铂比奥沙力铂作用更强。