益肾蠲痹丸对Ⅱ型胶原致关节炎大鼠踝关节组织病理改变的影响及其机制研究

目的观察益肾蠲痹丸对II型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠的治疗作用及对踝关节组织病理改变的影响,并探讨益肾蠲痹丸治疗类风湿性关节炎(RA)与血管内皮生长因子(VEGF)的相关性。方法通过建立CIA大鼠模型,观察益肾蠲痹丸对CIA大鼠足肿胀的治疗作用,对踝关节局部组织病理形态损伤的治疗作用,用免疫组化方法检测滑膜组织中VEGF的表达水平,利用基因芯片技术测定外周血淋巴细胞、肝组织中的VEGF的基因表达情况。结果益肾蠲痹丸高、中、低剂量组大鼠踝关节肿胀程度明显减轻,与模型组比较差异显著(P0.05、0.01、0.001)。益肾蠲痹丸高、中、低剂量组与模型组比较,滑膜细胞增生减轻,滑膜组织充血水肿明显减轻,血管增生和浸润炎细胞数量减少,血管翳形成显著减少,纤维组织形成减少,软骨与骨组织破坏程度减轻。益肾蠲痹丸高、中剂量组与模型组比较滑膜组织中VEGF表达明显降低(P0.05、0.01),低剂量组滑膜组织中VEGF表达亦有下降趋势。益肾蠲痹丸高、中剂量组能显著下调肝组织中VEGF-B基因的表达(fold change1.5)。结论益肾蠲痹丸对CIA大鼠有显著治疗作用,能明显减轻大鼠踝关节肿胀程度,显著抑制CIA大鼠组织病理改变,能显著下调滑膜组织中VEGF的表达和肝组织中VEGF-B基因的表达,从而减少肝组织、滑膜组织中VEGF的量,抑制滑膜组织中血管翳的形成,减少对关节软骨和骨组织的破坏。     

温化蠲痹方对胶原诱导性大鼠滑膜血管内皮生长因子表达的影响

目的:研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠滑膜血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗CIA的作用机制。方法:选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为造模组、正常对照组(10只,简称正常组),造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。再选取造模成功大鼠30只随机分为模型组(10只)、MTX组(10只)、温化蠲痹方组(10只,简称中药组)。中药组给予温化蠲痹方22.9 g/(kg·d)灌胃,模型组灌胃生理盐水,均每天1次,MTX组按0.78mg/kg剂量灌胃MTX混悬液,每周1次,连续30天。给药结束后,运用免疫组化法检测大鼠滑膜VEGF水平。结果:与模型组比较,治疗后中药组和MTX组大鼠关节炎指数(AI)评分明显降低(P<0.01);与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠AI评分均明显降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠滑膜VEGF表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,中药组和MTX组大鼠滑膜VEGF表达水平明显降低(P<0.01),中药组和MTX组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:中药温化蠲痹方可能通过下调CIA大鼠滑膜VEGF水平,抑制血管翳形成而治疗CIA。     

三虎丸对佐剂性关节炎大鼠血清IL-1、TNF-α和PGE2的影响

目的:探讨三虎丸对佐剂性关节炎大鼠模型白细胞介素IL-1、肿瘤坏死因子(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)活性的影响。方法:建立佐剂性关节炎大鼠模型,用放射免疫法检测血清TNF-α和IL-1活性和PGE2的含量。结果:与正常组比较,模型组、益肾蠲痹丸组、三虎丸组TNF-α、IL-1和PGE2的含量均有增高,差异有统计学意义(P<0.01),与模型组比较,益肾蠲痹丸组、三虎丸组TNF-α、IL-1和PGE2的含量均有下降,差异有统计学意义(P<0.01或P<0.05),益肾蠲痹丸组与三虎丸组比较,TNF-α、IL-1和PGE2的含量均有不同程度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:三虎丸能控制佐剂性关节炎大鼠血清中的IL-1、TNF-α、PGE2等炎症介质的活性,对类风湿关节炎具有治疗作用。     

温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠成纤维样滑膜细胞 miRNA-146a、TRAF6、IRAK1 基因表达的影响

目的 研究温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠成纤维样滑膜细胞（FLS）微小 RNA-146a（miRNA-146a）、肿瘤坏死因子受体相关因子 6（TRAF6）、白细胞介素-1 受体相关激酶 1（IRAK1）基因表达的影响。 方法 选用雌性 Wistar 大鼠 70 只，按随机数字表法分为正常组（10 只，生理盐水每天 1次）和造模组（60 只）。 造模组采用尾部皮内多点注射牛II型胶原乳剂的方法进行免疫，建立 CIA 模型。 造模成功后（40 只）用随机数字表法分为温化蠲痹方组（中药组，温化蠲痹方每天 22.9 g/kg，每天 1 次灌胃）、模型组（生理盐水 2 mL 每天 1 次灌胃）、甲氨蝶呤组（MTX 组，MTX 混悬液每周 0.78 mg/kg，每周 1 次灌胃）和温化蠲痹方加 MTX 组（中药加西药组，灌胃药物同中药组及 MTX 组），每组 10 只。 采用容积法（排水体积）和计分法分别评价足趾肿胀度和关节炎症程度。 治疗 30 天后处死大鼠，取各组膝关节滑膜，运用 HE染色，光镜下观察大鼠滑膜病理；采用 5 级评分法评定滑膜炎细胞浸润和滑膜细胞增生的程度；运用实时荧光定量 PCR 检测滑膜中 miRNA-146a、TRAF6、IRAK1 基因表达水平。 结果 与正常组比较，模型组大鼠足趾肿胀明显，滑膜炎性细胞浸润和增生程度明显（P<0.05）；模型组 miRNA-146a、TRAF6、IRAK1 基因表达明显升高（P<0.01）。 与模型组比较，中药组、MTX 组、中药加西药组足趾肿胀明显减轻，关节滑膜炎性细胞浸润和增生程度显著减轻，miRNA-146a、TRAF6、IRAK1 基因表达明显降低（P<0.05）。 与 MTX 组比较，中药加西药组 miRNA-146a、TRAF6、IRAK1 基因表达更低（P<0.05）。 结论 中药温化蠲痹方可能通过抑制成纤维样滑膜细胞 miRNA-146a、TRAF6、IRAK1 基因表达从而抑制 CIA 大鼠成纤维样滑膜细胞增生，发挥其抗炎作用。 MTX 加用温化蠲痹方比单纯 MTX 治疗效果更好。     

益肾蠲痹丸对CIA大鼠辅助性T细胞相关细胞因子的影响

目的:探究益肾蠲痹丸对胶原诱导关节炎大鼠模型(CIA)辅助性T细胞分泌的细胞因子作用。方法:CIA模型大鼠按随机数字表法分为正常对照组、CIA模型组、阳性药组(甲氨喋呤)和益肾蠲痹丸治疗组4组各10只。治疗结束后采用Procarta PlexTM多因子免疫检测技术定量分析各组大鼠血清中IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IL-17A的含量。结果:益肾蠲痹丸能下调CIA大鼠机体IL-2、IL-6、IL-17A的表达,同时上调IL-10表达。讨论:益肾蠲痹丸可在一定程度上调节促炎细胞因子及抗炎细胞因子的平衡,其作用靶点可能与IL-2、IL-6、IL-17A及IL-10有关。     

益肾蠲痹丸对大鼠胶原性关节炎继发病变治疗作用的实验研究

目的:评价益肾蠲痹丸对大鼠胶原性关节炎(collegen induced arthritis,CIA)继发病变的治疗作用,并探讨其可能的作用机制。方法:于大鼠左后足底皮内注射胶原乳剂制备CIA模型,造模两周后灌胃给药14天,每4天测量1次右后足跖容积。处死后取右后足作病理切片。Western blot法测定踝关节滑膜组织中NF-κBp65亚基和环氧化酶-2蛋白表达。结果:益肾蠲痹丸可抑制CIA大鼠的足趾肿胀,与模型相比有显著或极显著差异;显著降低NF-κBp65亚基和COX-2的水平。结论:益肾蠲痹丸对CIA大鼠具有较强的抗炎作用,机制可能与抑制NF-κBp65亚基和COX-2的表达有关。     

痹宁胶囊对急性痛风性关节炎大鼠模型IL-1及MMP-9的研究

目的：观察痹宁胶囊对急性痛风性关节炎大鼠模型滑膜组织的抗炎作用。方法：将Wistar大鼠60只,雌雄各半,造模成功后,随机分为空白组、模型组、西药组、中药高剂量组、中药中剂量组、中药低剂量组,药物干预7d。于造模前、造模后、治疗结束处死前测定大鼠右侧足踝关节容积及血白细胞介素-1（Interleukin-1,IL-1）,并在处死后将右侧踝关节滑膜组织做常规HE染色,光镜下观察病理滑膜组织并评分。结果：痹宁胶囊有利于大鼠受损的滑膜组织炎症修复,优于西药组,以中药高剂量组为佳。结论：痹宁胶囊对急性痛风性关节炎大鼠模型滑膜组织有明显的抗炎作用。     

益肾通痹方对肾虚型大鼠膝骨性关节炎血清MDA、NO、T-SOD、E2的影响

目的:观察益肾通痹方对肾虚型大鼠膝骨性关节炎血清MDA、NO、T-SOD、E2的影响。方法:制备肾虚型膝骨性关节炎大鼠模型,随机分为模型组、假手术组和益肾通痹方低、中、高剂量组和盐酸氨基葡萄糖片组,待模型成功后模型组和假手术组灌服生理盐水,给药组灌服相应的药物,灌胃1个月后腹主动脉采血,检测各组大鼠血清MDA、NO、T-SOD及E2的水平。结果:与模型组、假手术组比较,益肾通痹方各组、盐酸氨基葡萄糖片组大鼠血清MDA、NO均降低、T-SOD、E2均增高,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05),以中剂量组较为显著(P<0.01,P<0.05)。结论:益肾通痹方可以降低肾虚型膝骨性关节炎大鼠血清中MDA、NO的含量,增加T-SOD、E2的含量,清除氧自由基,降低脂质过氧化程度,从而达到保护关节软骨、防治骨关节炎的目的。     

温化蠲痹方诱导胶原诱导性关节炎大鼠滑膜细胞凋亡的研究

目的：研究中药温化蠲痹方诱导胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠滑膜细胞凋亡作用。方法：选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为正常对照组（n=10,简称正常组）、造模组,造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。造模成功后随机分为模型组（n=10）、温化蠲痹方组（n=10,简称中药组）、MTX组（n=10）。正常组、模型组、中药组按22.9g·kg-1·d-1剂量分别灌胃生理盐水、温化蠲痹方,均每日1次,MTX组按0.78mg·kg-1·w-1剂量灌胃MTX混悬液,每周1次。给药30天后,运用透射电镜和流式细胞术检测大鼠滑膜细胞凋亡。结果：与模型组比较,治疗后中药组和MTX组大鼠关节炎指数（AI）评分明显降低（P〈0.01）;与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠AI评分均明显降低（P〈0.01）。透射电镜显示,中药组大鼠滑膜细胞凋亡较模型组大鼠滑膜细胞凋亡明显。流式细胞术检测显示,与正常组比较,模型组大鼠滑膜细胞凋亡率明显降低（P〈0.05）;与模型组大鼠比较,中药组和MTX组大鼠滑膜细胞凋亡率明显升高（P〈0.01）。结论：CIA大鼠滑膜细胞凋亡减少,诱导滑膜细胞凋亡可能是中药温化蠲痹方治疗CIA的作用机制之一。     

温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎大鼠VEGF表达的影响

目的:研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗胶原诱导性关节炎(CIA)的作用机制。方法:健康雄性大鼠随机分为造模组(60只)、正常对照组(简称正常组,10只),造模组采用牛Ⅱ型胶原(BCⅡ)乳剂于大鼠尾根部及颈背部多点注射,建立CIA模型。造模成功后,选取30只造模成功大鼠随机分为模型组(10只)、甲氨喋呤(MTX)组(10只)、温化蠲痹方组(简称中药组,10只)。给药30天后,运用免疫组化法检测大鼠滑膜VEGF水平,观察各组大鼠足趾肿胀度。结果:与正常组比较,模型组、中药组和MTX组大鼠足趾肿胀明显,差异均有非常显著性意义(P0.01);与模型组比较,中药组和MTX组大鼠足趾肿胀明显减轻,差异均有显著性意义(P0.01);中药组与MTX组比较,差异无显著性意义(P0.05);与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠足趾肿胀明显减轻,差异有非常显著性意义(P0.01)。与正常组比较,模型组大鼠滑膜VEGF表达水平明显升高(P0.01);与模型组比较,中药组和MTX组大鼠滑膜VEGF表达水平明显降低(P0.01),中药组与MTX组比较,差异无显著性意义(P0.05)。结论:降低CIA大鼠滑膜VEGF水平可能是中药温化蠲痹方治疗CIA的作用机制之一。     

温化蠲痹方对胶原诱导性大鼠滑膜IL-1β、IL-8表达的影响

目的：研究中药温化蠲痹方对胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠滑膜白细胞介素-1β（IL-1β）、膜白细胞介素-8（IL–8）表达的影响,探讨温化蠲痹方治疗CIA的作用机制。方法：选用健康雄性Wistar大鼠,随机分为造模组、正常对照组（10只,简称正常组）,造模组采用牛Ⅱ型胶原乳剂于大鼠尾根部注射,建立CIA模型。再选取造模成功大鼠30只随机分为模型组（10只）、MTX组（10只）、温化蠲痹方组（10只,简称中药组）。中药组给予温化蠲痹方22.9 g/kg·d灌胃,模型组灌胃生理盐水,均每天1次,MTX组按0.78 mg/kg剂量灌胃MTX混悬液,每周1次,连续30 d。给药结束后,运用免疫组化法检测大鼠滑膜IL-1β、IL–8表达水平。结果：与模型组比较,治疗后中药组和MTX组大鼠关节炎指数（AI）评分明显降低（P〈0.01）;与治疗前比较,中药组和MTX组大鼠AI评分均明显降低（P〈0.01）。与正常组比较,模型组大鼠滑膜IL-1β、IL–8表达水平明显升高（P〈0.01）;与模型组比较,中药组和MTX组大鼠滑膜IL-1β、IL–8表达水平明显降低（P〈0.01）,中药组和MTX组之间比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：中药温化蠲痹方可能通过下调CIA大鼠滑膜IL-1β、IL–8水平达到而治疗CIA目的。     

益肾蠲痹丸对类风湿性关节炎的药效学研究

目的：使用弗氏完全佐剂制作大鼠关节炎模型,评价益’肾蠲痹丸对类风湿性关节炎的药效。方法：使用弗氏完全佐剂造模后,测量益肾蠲痹丸对对侧足爪肿胀和脏器指数的影响：ELISA法检测其对血清肿瘤坏死因子Ⅱ（TNF-Ⅱ）,白介素1β（IL—1β）,白介素-6（IL-6）的影响;分光光度法测量总一氧化氮合酶（tNOS）和诱导型一氧化氮合酶（iNOS）活性：并用Westernblot法检测益肾蠲痹丸对凋亡蛋白Bcl-2表达的影响。结果：益肾蠲痹丸可有效抑制大鼠佐剂性关节炎所引起的足跖肿胀,且对胸腺脾脏指数无明显影响。益肾蠲痹丸可有效抑制血清中TNF-Ⅱ,IL-1β,IL-6含量：抑制血清中iNOS活性;下调Bcl-2在滑膜组织中的表达。结论：益肾蠲痹丸的抗类风湿关节炎的作用与其调节主要炎症因子,下调炎症部位Bcl-2蛋白表达有关。     

益肾活血蠲痹汤治疗类风湿性关系炎36例临床观察

目的：探讨益肾活血蠲痹汤治疗类风湿性关节炎的临床疗效。方法：将６６例类风湿性关节炎患者随机分为中药治疗组３６例与西医对照组３０例,中药治疗组采用益肾活血蠲痹汤治疗,西药对照组采用扶他林片口服。结果：经统计学分析。两组疗效差别有统计学意义。     

益肾蠲痹丸治疗骨性关节炎的临床疗效及安全性研究

目的评价益肾蠲痹丸治疗骨性关节炎的临床疗效与安全性评价。方法采用方法,选用新癀片作为对照。两组共治疗70例,其中益肾蠲痹丸40例,新癀片30例,疗程均为40d。结果经治疗40d后,益肾蠲痹丸治疗组和新癀片对照组均能改善患者的休息痛、活动痛、关节压痛及关节肿胀指数。其中益肾蠲痹丸治疗组较新癀片对照组更为明显（P〈0.05）。结论益肾蠲痹丸能更有效的缓解骨性关节炎患者的临床症状,控制病情的急性发展,不良反应少,安全性较高,是治疗骨性关节炎的一种有效且安全的药物。     

活络止痛丸对炎症模型大鼠消炎镇痛作用的实验研究

目的:观察活络止痛丸的消炎镇痛作用。方法:将SD大鼠随机分成5组,观察药物对角叉菜所致炎性足肿胀程度和炎症局部组织中组胺含量的影响。结果:活络止痛丸大剂量组与活络止痛丸小剂量组、益肾蠲痹丸组相比,组胺含量具有显著性差异(P<0.01),活络止痛丸大、小剂量组和益肾蠲痹丸组与模型组相比具有显著性差异(P<0.01或P<0.05);抑制模型大鼠炎症作用活络止痛丸各剂量组和益肾蠲痹丸组明显优于模型组。结论:活络止痛丸对炎症组织中组胺含量有明显降低作用,对于实验性炎症有明显抑制作用。     

蠲痹合剂治疗骨性关节炎的实验研究

为进一步探讨蠲痹合剂治疗膝关节骨性关节炎的作用机理,采用Hulth法将新西兰兔造成骨性关节炎模型,并随机分为正常组、模型组、中药(蠲痹合剂)组和西药(维骨力)组,6周后通过检测血清及心肝肾组织匀浆中SOD、NO含量,X线摄片,大体标本观察,及关节软骨、滑膜光镜和/或电镜观察其病理变化.结果显示,中药组动物SOD活性显著高于模型组及西药组,而关节软骨破坏程度及滑膜组织损伤程度明显低于模型组、西药组,NO检测无差异.表明蠲痹合剂能提高SOD含量,抑制氧自由基对软骨细胞及基质的损害,从而起到防止并延缓关节软骨的退行性改变,抑制滑膜炎症的作用.     

益肾蠲痹丸治疗孕前类风湿关节炎12例

目的:观察益肾蠲痹丸治疗孕前类风湿关节炎的临床疗效。方法:将22例孕前类风湿关节炎患者采用随机数字表法随机分为治疗组12例和对照组10例。对照组给予甲氨蝶呤10 mg/次,1次/周,口服;来氟米特10 mg/次,1次/d,口服;治疗组在对照组用药基础上加服益肾蠲痹丸,8 g/次,3次/d。两组均以12周为1个疗程,共治疗2个疗程。结果:治疗组显效5例,有效6例,无效1例,有效率占91.7%;对照组显效2例,有效2例,无效6例,有效率40.0%。两组对比,差别有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾蠲痹丸治疗孕前类风湿关节炎是临床有效、安全的方案。     

益肾蠲痹丸结合针灸理疗治疗骨性关节炎的临床研究

目的：探讨益肾蠲痹丸结合针灸理疗治疗骨性关节炎的临床疗效。方法：选取骨关节炎患者60例,其中行益肾蠲痹丸结合针灸理疗治疗患者30例作为观察组,行益肾蠲痹丸药物治疗患者30例作为对照组,观察两组患者疗效。结果：观察组患者静息痛指数、关节压痛指数及关节肿胀指数明显低于对照组（P<0.05）;活动痛指数两组间差异无统计学意义。观察组患者治疗有效率明显高于对照组（P<0.05）。结论：益肾蠲痹丸结合针灸理疗治疗骨性关节炎效果更佳,值得在临床上大力推广使用。     

痹合剂治疗骨性关节炎的实验研究

为进一步探讨蠲痹合剂治疗膝关节骨性关节炎的作用机理，采用Hulth法将新西兰兔造成骨性关节炎模型，并随机分为正常组、模型组、中药(蠲痹舍剂)组和西药(维骨力)组，6周后通过检测血清及心肝肾组织匀浆中SOD、NO含量，X线摄片，大体标本观察，及关节软骨、滑膜光镜和／或电镜观察其病理变化。结果显示，中药组动物SOD活性显著高于模型组及西药组，而关节软骨破坏程度及滑膜组织损伤程度明显低于模型组、西药组，NO检测无差异。表明蠲痹合荆能提高SOD含量，抑制氧自由基对软骨细胞及基质的损害，从而起到防止并延缓关节软骨的退行性改变，抑制滑膜炎症的作用。     

益肾蠲痹丸治疗类风湿关节炎临床观察

目的:记录益肾蠲痹丸治疗类风湿关节炎的疗效,指导临床诊治。方法:将前来我院诊治的116例类风湿关节炎患者,按随机对照原则分成两组,包括观察组和对照组各58例。观察组患者接受西药和益肾蠲痹丸联合治疗,对照组患者只接受西药治疗。待两组治疗完成后,比较临床疗效,RF、ESR、CRP水平,VAS、DAS评分。结果:两组患者经过诊疗后,观察组所取得的临床疗效,RF、ESR、CRP水平,VAS、DAS评分均好于对照组。结论:采取益肾蠲痹丸治疗类风湿关节炎,能够有效降低RF、ESR、CRP水平,改善VAS、DAS评分,是一种较好的治疗方案。