血管紧张素Ⅱ对培养的血管平滑肌细胞增殖的影响

在原发性高血压中,心血管结构的病理学变化包括肥大和(或)构型重建,其中血管平滑肌细胞(SMC)异常生长起着重要作用。近年来,大量研究发现血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)不仅可调节心血管局部的机能活动,而且亦调节心血管细胞增殖。本文旨在研究AngⅡ对大鼠动脉SMC增生和肥大的影响,以进一步寻求肥大的原因,以期探讨高血压的发病机制。 1 材料与方法 1.1 主要材料及试剂:Wistar大鼠由本校实验动物学部提供,199培养基(M199)、胎牛血清(FBS)、AngⅡ均为美国Sigma公司产品。H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)、~3H-亮氨酸(~3H-leueine)由上海中科院原子能研究所提供。     

普伐他汀对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：观察普伐他汀对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖的影响,以探讨他汀类药可能的非调脂抗动脉粥样硬化作用。方法：组织贴块法培养的大鼠VSMCs随机分为对照（正常VSMCs）组、AngⅡ（10^-6moL／L）模型组、普伐他汀高剂量（10^-5mol／L＋AngⅡ10^-6mol／L）、中剂量（10^-6mol／L＋AxeⅡ10^-6mol／L）、低剂量（10^-7mol／L＋AngⅡ10-6mol／L）组、溶剂（体积分数0．1％的DMSO＋AngⅡ10^-6moL／L）组,分别测定活细胞数量和细胞周期中各期细胞构成比。观察普伐他汀对VSMCs增殖和迁移的影响。结果：AngⅡ（10^-6mol／L）作用24h能使活细胞数量明显增加,并使VSMCs的G0／G1期细胞减少。细胞增殖指数增大。与AngⅡ模型组比,普伐他汀组活细胞数减少,G0／G1期的细胞构成比增加,细胞增殖指数减少。结论：AngⅡ对VSMCs有促增殖作用,能被普伐他汀所拮抗。     

大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的 观察大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞增殖的抑制作用。方法 采用培养的兔血管平滑肌细胞，应用^3H～TdR掺入法，观察在血管紧张素Ⅱ促进VSMC增殖过程中，大蒜素对血管平滑肌细胞DNA合成的影响及其时间效应。结果 血管紧张素Ⅱ可促进处于静止状态的兔血管平滑肌细胞DNA的合成，36h时细胞DNA的合成达到高峰。大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖有明显的抑制作用，并呈现出明显的浓度依赖关系，随着大蒜素表度的升高其对血管平滑肌细胞增殖的抑制作用也逐渐增加，在24h时，10．00g／L的大蒜素对血管平滑肌细胞增殖的抑制率为13．46％。结论 大蒜素可抑制血管紧张素Ⅱ诱导兔血管平滑肌细胞的增殖，并存在一定的量效依赖关系及时间反应性。     

牛磺酸对高血压和血管活性物质的影响

本文在原发性高血压（ＥＨ）患者，大鼠腹主动脉狭窄的高盐摄入引起高血压模型上，观察到口服牛磺酸治疗４周后均明显降低平均动脉压和收缩压，４２．２％的患者血压恢复正常，并能抑制ＥＨ患者和高血压大鼠血浆内皮素（ＥＴ）和血管紧张素Ⅱ水平的升高，增加高血压大鼠血浆降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）和主动脉组织中的牛磺酸含量，以上结果表明牛磺酸在降压作用同时伴有缩血管物质的降低和舒血管物质的增加，为牛磺酸抗高血压辅助     

Mfn2介导缬沙坦抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

目的 研究缬沙坦对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)诱导的大鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)增殖的影响,并探讨其新的作用机制.方法 体外培养VSMCs,采用AngⅡ诱导其增殖,用不同浓度的缬沙坦(10-5、10-6、10-7mol/L)进行干预,细胞计数及四氮唑盐试验(MTT)检测VSMCs增殖情况,Western blot检测各组线粒体融合素基因-2(mitofusin-2,Mfn2)、Raf、细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signalregulated kinase 1/2,ERK1/2)表达水平的变化.结果 AngⅡ能够明显促进VSMCs的增殖,下调Mfn2的表达、增强Raf和ERK1/2的表达;缬沙坦10-5、10-6mol/L可以拮抗AngⅡ的上述作用,而缬沙坦10-7mol/L无此作用;缬沙坦对无AngⅡ刺激的VSMCs增殖无明显影响.结论缬沙坦能有效抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖,其机制与调节Mfn2的表达、抑制Ras-Raf-ERK/MAPK信号通路有关.     

活血潜阳胶囊对血管平滑肌细胞增殖的影响

为研究活血潜阳胶囊对血管紧张素Ⅱ（ATⅡ）诱导的血管平滑肌细胞（VSMC0增殖的影响。以贴块法行SD大鼠胸主动脉VSMC分离培养，以血清药理学方法进行实验，10^-6MATⅡ为刺激因子，Captopril为对照，活血潜阳胶囊药物血清分为10%，7.5%,5%,2.5%4个浓度，绘制细胞生长曲线，并测定DNA的合成，结果：经活血潜阳胶囊处理后，细胞增殖速度明显下降，生长曲线下移，^3H-TdR掺入量减少，DNA合成明显受到抑制，且在一定范围内有剂量依赖性，提示；活血潜阳胶囊能抑制ATⅡ引起的VSMC增生，揭示了活血潜阳胶囊治疗高血压的机理之一。     

清达颗粒对血管紧张素Ⅱ诱导大鼠血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响

目的探讨清达颗粒（QDG）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导大鼠血管平滑肌细胞（VSMCs）增殖和迁移的影响。方法采用组织贴块法培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞,用表型标志蛋白α-SM-actin对VSMCs进行免疫荧光染色鉴定,取3～6代的VSMCs用于实验。将VSMCs分为对照组、AngⅡ组、AngⅡ+QDG 0.125 mg/m L组、AngⅡ+QDG 0.25 mg/m L组、AngⅡ+QDG 0.5 mg/m L组,共5组。以10-6 mol/L AngⅡ作为诱导剂,干预建立VSMCs增殖、迁移的模型。采用CCK-8法检测VSMCs的细胞活力,计算AngⅡ对VSMCs的增殖率以及QDG对AngⅡ诱导VSMCs增殖的抑制率;采用划痕实验检测VSMCs划痕损伤修复情况;transwell法检测VSMCs迁移情况。结果与对照组比较,AngⅡ能显著促进VSMCs的增殖和迁移;不同浓度QDG可在一定程度上抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖和迁移,且随着浓度的升高,抑制作用越明显。结论 QDG具有抑制AngⅡ诱导的VSMCs增殖与迁移的作用。     

内皮剥脱后血管平滑肌增生的时相特征

观察了内皮损伤后血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增生的时相变化。结果表明，内皮损伤可导致ＶＳＭＣ增生，内膜增厚。ＶＳＭＣ在术后２４小时就进入细胞周期，开始合成ＤＮＡ；ＤＮＡ复制高峰是在术后４８～７２小时，１０天之后主要是细胞体积增大，细胞外基质堆积，提示细胞的大量复制是在内皮损伤后的早期阶段，这可能是防治的关键时期。     

猪十二指肠类肝素对血管平滑肌细胞增殖的抑制

猪十二指肠类肝素（冠心舒）是一种富含硫酸基的硫酸多糖，对培养的兔主动脉平滑肌细胞增殖以结晶紫、ＭＴＴ染色和３Ｈ－ΤｄＲ掺入等方法测定显示明显抑制作用，作用强度与肝素相仿。同浓度的右旋糖酐对此无抑制作用，说明猪十二指肠类肝素抑制血管平滑肌增生与分子中所含硫酸基有关。猪十二指肠类肝素口服有效，抗凝效价又低于肝素，提示本品有可能用于防治动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄。     

黄色素对血管平滑肌细胞增殖的影响

目的 研究黄色素（ＳＹ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及其作用机制。方法 以培养的家兔ＶＳＭＣ为材料，采用细胞计数和＾３２Ｐ掺入法，研究了ＳＹ对ＶＳＭＣ的增殖及ＶＳＭＣ中酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）活性的影响。结果 ＳＹ对血清刺激的ＶＳＭＣ的增殖具有抑制作用，且呈剂量和时间依赖性。１．０ｇ／Ｌ达到最大抑制，抑制率为５４．６％，４ｄ（１．０ｇ／Ｌ ＳＹ）达到最大抑制，抑制率为５２．０％，超过４ｄ     

机械性血管损伤对血管平滑肌细胞增殖的影响

进行了粥样硬化血管段、球囊拉伤血管段以及球囊扩张后再狭窄血管段的组织细胞培养，以３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定血管平滑肌细胞血管平滑肌细胞（ＤＮＡ）合成速率。观察损伤血管段培养液对培养的血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖过程的影响，结果显示：球囊成形术组的血管组织培养液对ＶＳＭＣ增殖有明显的刺激作用。单纯血管损伤组次之。本研究中的粥样硬化血管段培养液对培养的ＶＳＭＣ增殖无明显影响。     

雌二醇对血管平滑肌细胞增殖的影响

观察雌二醇对血管平滑肌增殖的影响，探讨雌激素抑制动脉粥样硬化的可能机制。方法：采用去卵巢大鼠模型，使用鼠氚标记胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入技术，在体观察不同雌激素水平对大鼠胸主动脉中膜组织3H－TdR掺入量的影响。结果：切除卵巢后血管组织中膜3H－TdR掺入量极显著增加，补充大剂量E2后掺入量极显著下降，并已低于假手术组水平（Sham180．4±106.26cpm/mgOVX612.90±262.22cpm/mg，OVZX＋E241．22＋14．45cpm/mg，P＜0.05）。结论：雌二醇对血管平滑肌增殖有明显抑制作用，这可能是其抗AS和减少绝经后冠心病的机制之一。     

三七总皂甙、大鼠高胆固醇血清对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的：为观察tPNS对HCS刺激的VSMC增殖的影响。方法：通过MTT法和电镜观察法，观察了tPNS对VSMC的保护作用。结果：HCS可明显刺激VSMC增殖并导致其表型的改变，tPNS可呈浓度依赖性抑制VSMC的增殖（r=-0.972)，与对照组相比具显著差异；tPNS还可明显抑制HCS对VSMC的刺激增殖作用，与HCS组相比具有显著差异。结论:tPNS可抑制VSMC增殖而抗动脉粥样硬化，这种抑制作用没有种属差异性。     

G蛋白反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的影响

使用硫代修饰的Ｇ蛋白（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白）反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ）作用于含２０％胎牛血清ＤＭＥ培养液培养基的血管平滑肌细胞（ｖＳＭＣ）。通过细胞计数和免疫细胞化学方法，观察了Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ对ｖＳＭＣ增殖和ＰＣＮＡ表达的影响。结果表明，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ联合应用能明显抑制ｖＳＭＣ增殖；免疫细胞化学分析亦显示ｖＳＭＣ中ＰＣＮＡ蛋白表达显著减少。而相同浓度的正义ＯＤＮｓ只有微小抑制作用。结果提示，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能应用于防治临床血管活性物质依赖性细胞增生性疾病的研究。     

莲心碱对内皮素促血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。用＾３Ｈ胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）参入法,流式细胞术,免疫细胞化学及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法,观察了莲心碱对血管平 肌细胞增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。结果发现：Ｌｉｅｎ能逆转内皮素所致的「＾３Ｈ」ＴｄＲ参入量增多,阻止血管平滑肌细胞由静止期进入ＤＮＡ合成期和有丝分裂期,并能逆转内皮素引起的ｃ－ｆｃｓ,ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｓｉｓ原癌基因相