大肠埃希菌ESBLs、AmpC酶的检测及耐药特性

目的 分析大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）、头孢菌素（AmpC）酶的情况及耐药特性,指导临床合理用药.方法 收集2011年1月至2012年6月我院临床分离的大肠埃希菌287株.用双纸片确诊法检测ESBLs,三维试验检测AmpC酶,KB法进行药敏试验.结果 287株大肠埃希菌中,产ESBLs 119株（41.5％）,产AmpC酶47株（16.4％）,同时检出产ESBLs和AmpC酶16株（5.6％）.单一产ESBLs或AmpC酶的菌株有较高的耐药性,同时检出ESBLs和AmpC酶的菌株对多种抗菌药耐药,所有菌株对亚胺培南均敏感.结论 大肠埃希菌ESBLs和AmpC酶的分离率及耐药率都较高,同时检出ESBLs和AmpC酶的菌株具多重耐药性;亚胺培南具有良好的抗菌活性.临床应加强ESBLs和AmpC酶的检测及耐药监测,采取有效措施防止耐药菌株产生.     

大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中AmpC酶的检测

目的了解我院大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌中AmpC酶产生情况.方法按NCCLS推荐的超广谱β内酰胺酶（ESBLs）确证试验,对大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌进行ESBLs检测,并用三维试验法、三维试验抑制试验进行AmpC酶检测.结果236株大肠埃希菌和135株肺炎克雷伯菌中,检到产ESBLs大肠埃希菌104株和产ESBLs肺炎克雷伯菌29株,其中106株耐头孢西丁菌株检到3株产AmpC酶.结论我院这两种细菌主要耐药机制仍是产生ESBLs,耐头孢西丁可能是膜孔蛋白缺失所致.     

大肠埃希菌质粒介导AmpC酶基因检测及耐药性分析

目的 了解深圳市人民医院质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的基因型特点和耐药特性,为临床抗菌药物的合理使用提供依据.方法 收集深圳市人民医院头孢西丁耐药的大肠埃希菌临床分离株110株.提取菌株的质粒DNA,采用多重PCR法检测AmpC酶基因,并应用DNA测序确定AmpC酶的基因型;用K-B法对其进行药物敏感试验.结果 110株对头孢西丁耐药的大肠埃希菌中,13株(11.8%)AmpC酶基因扩增阳性,测序结果显示12株为DHA-1,1株为CMY-2.AmpC酶基因阳性株对亚胺培南和美罗培南100%敏感,对其它大多数药物敏感性较低.结论 该院大肠埃希菌临床分离株中质粒介导AmpC酶基因型主要为DHA-1型,对多种抗生素的耐药性高.     

大肠埃希菌AmpC酶及ESBLs检测与耐药性分析

目的了解重庆医科大学第二临床学院2003年1～12月分离191株大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）及对常用抗生素的耐药情况，揭示其主要耐药机制，指导临床合理用药。方法采用头孢西丁和头孢曲松改良酶提取物三维试验法，对191株大肠埃希菌分别进行AmpC和ESBLs测定。结果大肠埃希菌单产AmpC酶、ESBLs、同时产AmpC酶＋ESBLs检出率分别为1．1％、23．0％、2．6％。产酶菌株（单产AmpC酶、ESBLs及同时产AmpC酶＋ESBLs）对18种抗生素，除亚胺培南全部敏感外耐药率均高于平均水平。结论大肠埃希菌对头孢菌素类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs，对产酶菌株临床经验用药只可选用碳青霉烯类抗生素。     

尿路感染大肠埃希菌耐药性及产酶检测

目的：分析探讨尿路感染大肠埃希菌的耐药性及产头孢菌素酶（AmpC酶）和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的情况。方法：采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验法检测AmpC酶。并检测60株大肠埃希菌对18种抗菌药的耐药率。结果：60株大肠埃希菌中检出产酶菌株38株（63．3％）,其中单产ESBLs27株（45．0％）,单产AmpC酶8株（13．3％）,同时产AmpC酶和ESBLs3株（5．0％）。大肠埃希菌产酶菌株对18种抗菌药的耐药率均高于平均水平（除亚胺培南）。结论：我院尿路感染中段尿标本中分离的大肠埃希菌对抗菌药耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株重症感染临床经验用药首选碳青霉烯娄抗生素．     

产ESBLs大肠埃希氏菌临床株EC98A7表型和基因型研究

目的 研究大肠埃希氏菌多重耐药临床菌株EC98A7对超广谱β—内酰胺类抗生素的耐药机制。方法 采用K—B法、双纸片协同试验、接合传递试验、质粒谱分析、PCR、PCR—RFLP和DNA序列分析等方法分析BC98A7的表型及基因型。结果 EC98A7对头孢他啶等第三代头孢菌素和庆大霉素等抗生素高度耐药，并能将全部耐药表型通过一个大小约80kb的质粒传递给受体株。双纸片协同试验证明EC98A7产ESBLs。PCR等证实EC98A7含有TEM型和CTX-M型ESBLs。PCR-RFLP显示TEM型ESBL含有E104K突变，无R164H突变。同源性分析表明503bp的blaCTX-M DNA片段与CTX-M亚组1同一性最高，与blaCTX-M3相比仅有1个核苷酸改变即A787G，对应氨基酸改变为D239G。结论 大肠埃希氏菌多重耐药临床株EC98A7同时产TEM型CTX-M型两种ESBLs，推测这与对超广谱β-内酰胺类抗生素的高度耐药有关。     

尿路感染大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的:了解尿路感染患者中大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药性分析。方法:采用纸片扩散确证法检测ESBLs,酶提取物三维试验方法检测AmpC酶。结果:130株大肠埃希菌中检出单产ESBLs45株,AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs共5株,检出率分别为34.6%、6.2%和3.8%;产酶菌株对抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株。结论:大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

生物被膜大肠埃希菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶的检测

目的探讨大肠埃希菌生物被膜(biofilm,BF)的耐药情况,为临床合理应用抗生素提供理论依据。方法应用改进的平板培养法建立大肠埃希菌BF模型,用银染法和扫描电镜观察鉴定。采用改良三维试验法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)及AmpC酶。结果浮游大肠埃希菌(A组)单产AmpC,单产ESBLs酶及同时产ESBLs和AmpC酶的菌株分别为5.0%(2/40)、30.0%(12/40)和12.5%(5/40);BF大肠埃希菌(B组)单产AmpC酶,单产ESBLs及同时产ESBLs和AmpC酶的菌株分别为10.0%(4/40)、45.0%(18/40)和22.5%(9/40)。对A组和B组的检出率两两分别进行χ2检验,结果均为P<0.05。产酶有BF大肠埃希菌对10种抗生素(除亚胺培南全部敏感外)的耐药率均较高。结论BF的形成和产生ESBLs及AmpC酶的协同作用是大肠埃希菌耐药的主要原因之一。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中AmpC酶的检测及药物敏感率分析

目的探讨大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌AmpC酶的产生情况及对临床常用抗生素的耐药特征,为临床治疗提供选药参考。方法应用VITEK-60型全自动细菌鉴定仪鉴定细菌,按NCCLS推荐的确证试验测定ESBLs和K-B纸片法测定药敏结果;采用头孢西丁纸片扩散法筛选疑产AmpC酶阳性菌株,并用酶粗提物进行三维试验确证产AmpC酶菌株。结果 299株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌ESBLs检出率为19.73%,经三维试验确证产AmpC酶15株,阳性率5.02%,15株产AmpC酶阳性菌株均为ESBLs阳性菌株。产AmpC酶阳性菌株与AmpC酶阴性菌株药敏结果显示：前者大多对头孢西丁、头孢曲松、头孢噻肟、头孢哌酮、头孢他啶、哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶/棒酸、头孢噻肟/棒酸耐药,而后者大多对上述药物敏感,两者有显著性差异（均P〈0.05）。两者大多对亚胺培南、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星及阿米卡星敏感。结论台州地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产AmpC酶菌株检出率较高。产AmpC酶细菌呈多重耐药,亚胺培南、头孢吡肟、头孢哌酮/舒巴坦、左氧氟沙星等是治疗产AmpC酶细菌感染的较可靠药物。     

山西省阳泉地区产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌基因分布与耐药性的研究

目的了解山西省阳泉地区产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌的耐药性及基因型分布特点。方法采用BD Phoenix 100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,聚合酶链反应检测β-内酰胺类耐药相关基因,包括TEM、SHV、CTX-M-1群、CTX-M-9群、OXA-1和MOXF-Amp C酶。结果 54株产ESBLs大肠埃希菌呈现多重耐药,在23种抗生素中,对亚胺培南、美洛培南、阿米卡星、哌拉西林-他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率分别为3.7%、3.7%、9.26%、12.96%和14.81%,其余18种抗生素的耐药率为22.2%~100.0%。54株产ESBLs大肠埃希菌携带的β-内酰胺酶基因TEM、CTX-M-1群、CTX-M-9群和OXA-1的检出率分别为100.0%、37.0%、98.1%和14.9%,仅有1株检出产SHV型ESBLs;检出MOXF-Amp C酶基因15株,阳性率为27.8%。菌株同时产2种以上基因达98.1%。结论阳泉地区产ESBLs大肠埃希菌多重耐药严重,携带的β-内酰胺酶基因以TEM+CTX-M-9为主,且大多菌株同时产两种以上基因。     

产AmpC酶大肠埃希菌中整合子的研究

目的:观察25株产AmpC酶大肠埃希菌中整合子的分类、结构及其在介导AmpC酶基因转移中的作用。方法:采用微量稀释法测定20种抗生素对试验菌株的敏感性。利用多重聚合酶链反应(PCR)方法检测整合酶基因(intI)及其定位,对其阳性菌株可变区(Int)扩增产物进行测序分析。结果:这25株菌对多种抗生素耐药。20株Ⅰ类整合酶基因阳性(80%);所携带的耐药基因盒绝大多数为aadA5和dfr17;未发现携带AmpC基因盒的整合子。结论:Ⅰ类整合子广泛地存在于产AmpC酶的大肠杆菌中;耐药基因盒是整合子阳性菌株对氨基糖苷类、磺胺类药物及氯霉素耐药的主要原因,但对介导AmpC酶基因转移,不起主要作用。     

安徽省产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的耐药性及基因型分析

目的 了解2007年安徽地区产质粒介导AmpC酶的大肠埃希菌枪出率及产酶株基因型.方法 三维实验进行AmpC酶筛选;并行转移接合实验,PCR检测AmpC酶基因,琼脂稀释法进行药物敏感试验.结果 21株大肠埃希菌三维实验阳性,占所有临床分离菌株的5.9%(21/355),19株经PCR检测携带ampC基因,16株转移接合成功,经序列分析表明,9株CIT阳性结果,6株DHA阳性结果,3株EBC阳性结果;1株同时携带EBC及DHA基因.其中有1株EBC型新基因被枪出(序列号为FJ237369);药敏结果显示临床分离菌株及接合子对多种抗菌药物耐药,对头孢吡肟,亚胺培南,美罗培南相对较敏感.结论 安徽地区大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶以CIT型和DHA型为主,同时存在变异型,临床可选用第四代头孢菌素类抗菌药物,碳青霉烯类抗菌药物抗感染治疗.     

产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的流行病学调查及其酶的表达调控

目的研究产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的流行病学状况及其酶的表达调控。方法选择临床中分离到的疑似产质粒介导AmpC酶的大肠埃希菌30株,对产质粒介导AmpC酶大肠埃希菌的流行病学特征进行调查分析,并行转移接合试验。用6组引物对提取的细菌质粒DNA进行多重PCR扩增,从而对质粒介导的AmpC酶的表达调控进行分析。结果流行病学调查,共检出20株产p-内酰胺酶菌株,其中有5株菌株同时产AmpCp-内酰胺酶和超广谱p-内酰胺酶,12株只产超广谱p-内酰胺酶,3株只产AmpCp-内酰胺酶,5株转移接合成功。PCR扩增试验后,与Genbank数据库进行序列比对分析,发现有6株扩增产生质粒介导的AmpC基因,其中CIT型4株,DHA型2株。结论产质粒AmpC酶大肠埃希菌在临床上广泛传播,把握其持续高表达的调控机制,有助于指导临床合理使用抗牛素。     

腹腔与胆道感染产酶大肠埃希菌的耐药性分析

目的探讨腹腔与胆道感染产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）大肠埃希菌的耐药性。方法采用改良三维试验法检测80株大肠埃希菌产ESBLs和AmpC酶的情况,并采用纸片扩散（K-B）法检测大肠埃希菌对16种抗生素的耐药率。结果从80株临床分离的大肠埃希菌中检出单产ESBLs25株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs4株,检出率分别为31.25%,10.00%,5.00%。产酶菌株对抗生素的耐药率均高于不产酶菌株（除哌拉西林他巴唑外）。结论腹腔与胆道感染大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药应首选碳青霉烯类抗生素。     

宁波地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌质粒AmpC酶基因检测

目的 了解近年宁波地区大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分离株中质粒AmpC酶基因流行状态.方法 用K-B法对临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌作耐药表型分析,通过聚合酶链反应(PCR)检测AmpC酶基因,然后用三维试验予以证实.结果 140株大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中,质粒AmpC醇基因阳性率2009、2010、2011年分别为4.4％(2/45)、8.6％(3/35)、13.3％(8/60);其中2009和2010年所检出的均为DHA基因型,2011年分别从2株大肠埃希菌和1株肺炎克雷伯菌中检出ACT-1基因.结论 宁波地区临床分离的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中质粒AmpC酶基因的流行率有增长趋势.     

胆道感染大肠埃希菌的耐药性分析及产超广谱β-内酰胺酶和头孢菌素酶检测

目的探讨胆道感染大肠埃希菌的耐药性分析及产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和头孢菌素酶（AmpC酶）检测。方法采用标准纸片扩散法检测ESBLs和改良三维试验检测AmpC酶,并采用K-B琼脂扩散法检测大肠埃希菌对18种抗生素的耐药率。结果从130株分离的大肠埃希菌中检出单产ESBLs35株,单产AmpC酶10株,同时产AmpC酶和ESBLs共6株,检出率分别为26.9%、7.7%和4.6%。产酶菌株对18种抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株（除亚胺培南）。结论胆道感染大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生ES-BLs和AmpC酶,对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

临床分离大肠埃希菌ESBLs的检出率与耐药性分析

目的 了解临床分离大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶的检出率和耐药情况,为临床合理选用抗生素提供依据.方法 根据NCCLS推荐的琼脂稀释法进行药敏试验;用双纸片协同试验检测产ESBLs菌.结果 108株临床分离大肠埃希菌检出产ESBLs菌62株,检出率为57.4%.ESBLs菌株对15种常用抗菌药物耐药率,对亚胺培南的耐药率低于2%,对哌拉西林/他唑巴坦耐药率为35.5%,对头孢哌酮/舒巴坦的耐药率为45.2%,对头孢他啶的耐药率为46.8%,对其他药物的耐药率均较高.结论 应加强对临床分离大肠埃希菌耐药性监测,指导临床合理使用抗生素,减少新的ESBLs的产生.     

肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌耐药性变迁分析

目的了解临床分离肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌对抗生素耐药性变迁。方法采用VITEK-32微生物全自动分析系统进行细菌鉴定和药敏检测。结果4年中肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的发生率呈逐年上升的趋势。2005年至2008年肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌ESBLs菌发生率分别为36．6％、40．6％、41．5％、41．0％;产ESBLs菌对三代头孢、氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类交叉耐药,且呈逐年上升趋势。结论肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌的发生率呈逐年上升趋势,耐药率升高,临床应及时了解它们的耐药特点和变化,合理使用抗生素,有效控制ESBLs的传播。     

临床分离产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌及其耐药性检测

目的了解临床分离大肠埃希菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株的分布及耐药性。方法采用纸片法增强法进行产ESBLs菌株的检测,琼脂稀释法测定大肠埃希菌对10种抗菌药物的敏感性。结果产ESBLs菌株的检出率为45.45%(35/77);产ESBLs大肠埃希菌对美罗培南、头孢美唑、头孢他啶的耐药率均为0%、对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢吡肟、环丙沙星、左氧氟沙星、阿米卡星、舒普深的耐药率分别为100%、100%、100%、80%、65.71%、97.14%、94.28%、28.57%、25.71%。产ESBLs组的耐药率明显高于非产ESBLs组(P<0.05)。结论产ESBLs大肠埃希菌的发生率较高,对大多数抗菌药物耐药显著。     

2003～2007年大肠埃希菌耐药性监测分析

目的:探讨本院2003～2007年大肠埃希菌临床分离株对21种抗菌药物的耐药性变化,为临床合理使用抗生素提供实验依据。方法:收集5年住院临床标本分离的大肠埃希菌,采用K-B纸片扩散法进行药敏试验和产ESBLs细菌的检测分析。结果:5年共收集大肠埃希菌1 083株,痰、尿液和生殖分泌物等是大肠埃希菌临床分离株的主要标本来源;2003～2007年ESBL大肠埃希菌的检出率分别为15.3%、11.6%、33.2%、42.0%、26.8%。2003～2007年大肠埃希菌对21种抗生素的耐药性为:每种抗生素耐药性没有连续性升高,只是不同程度的耐药。亚胺培南的耐药率为零,是治疗大肠埃希菌引起感染的强有力抗生素,青霉素类耐药率为72%～90%,头孢菌素类耐药为18%～60%,喹诺酮类耐药率为45%～70%,氨基糖甙类耐药率为8%～63%,磺胺类耐药率为62%～73%,呋喃妥因耐药率为10%～13%,加酶抑制剂复方抗生素(哌拉西林/他唑舒坦、舒普深)耐药率为10%左右。结论:大肠埃希菌是引起各类临床感染的重要病原菌之一,临床应结合药敏结果合理使用抗生素,并采取有效措施控制耐药菌株的传播是极其重要。