角质细胞生长因子对无排卵功血子宫内膜上皮细胞PCNA、ER和PR表达的影响

目的 观察角质细胞生长因子(keratinocyte growth factor,KGF)对离体培养的无排卵型功血子宫内膜上皮细胞EEC中增殖细胞核抗原PCNA、雌激素受体ER和孕激素受体PR表达的影响.方法 体外培养无排卵型功血子宫内膜上皮细胞,加入不同浓度的KGF作用后,免疫组化法检测PCNA、ER和PR的表达变化,RT-PCR检测ER和PR mRNA表达的变化.结果 免疫组化染色结果,PCNA蛋白表达位于细胞核,ER和PR蛋白表达主要位于细胞核内,少数可见细胞质着色;50 ng/ml KGF作用后,正常组和功血组PCNA表达分别较作用前的对照组显著增高,ER和PR表达分别较作用前的对照组显著增高(P＜0.05);PCNA和ER表达的增加幅度在正常组和功血组之间无显著差异(P>0.05);而功血组PR表达的增加幅度显著高于正常组(P＜0.05);50.ng/ml KGF作用后,RT-PCR方法检测正常组和功血组ER和PR的mRNA表达,分别较作用前的对照组显著增高(P＜0.05).结论 KGF对体外培养的无排卵型功血和正常的子宫内膜上皮细胞均有增加PCNA、ER和PR表达的作用,但增加程度有差异,提示两组的子宫内膜上皮细胞生长均受KGF的影响,但无排卵功血可能存在与正常的子宫内膜上皮细胞不同的生长机制.     

补肾活血中药对无排卵功血患者子宫内膜雌孕激素受体的影响

[目的]探讨中西药物治疗无排卵功能失调性子宫出血(功血)的机理。[方法]采用酶联免疫分析技术和 SP免疫组化半定量检测技术,对37例无排卵功血患者经补肾活血中药宫血饮(主要由补骨脂、川续断、山茱萸、蒲黄、三七、党参、生龙骨、生牡蛎、白花蛇舌草等组成)或西药黄体酮治疗前后进行血清雌、孕激素(E_2、P)及子宫内膜雌、孕激素受体(ER、PR)测定。[结果]无排卵功血患者血清E_2水平和子宫内膜ER、PR水平均较对照组高,且ER、PR含量依子宫内膜的增生程度和类型的不同呈现下降趋势,即单纯增殖症>复杂增生>增生期。经合成孕激素治疗后,血清E_2水平和子宫内膜ER、PR水平均降低。补肾活血中药宫血饮亦能降低ER、PR水平,但对血清E_2影响不大。【结论】中药与合成孕激素治疗无排卵功血的作用机理不同,它并非通过降低血清雌激素的水平而达到治疗目的,推测它可能是通过非甾体激素途径,启动了各方面的因素影响ER、PR的合成而发挥其治疗作用的。     

补肾活血方对去卵巢大鼠子宫ER及Cyclin B表达影响的实验研究

目的观察补肾活血方对去卵巢大鼠子宫的雌激素受体及周期蛋白(Cyclin)B表达的影响,探讨其治疗围绝经期综合征的作用机制。方法选择SD雌性大鼠54只,随机分为假手术组、模型组、雌二醇组、补肾活血方组、联合用药组、补肾活血方+假手术组,每组9只。以双侧卵巢切除法建立大鼠围绝经期模型。各组灌胃给药40 d后取血清和子宫称重;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清中雌二醇(E2)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)浓度;HE染色观察子宫组织病理改变并测定子宫内膜厚度;免疫组化法观察雌激素受体(ER)α、ERβ在子宫组织中分布与表达情况;蛋白质印迹法(Western blot)法检测子宫组织中周期蛋白(Cyclin B)蛋白表达。结果补肾活血方治疗40 d后,与模型组比较,血清LH、FSH明显降低(P0.05或P0.01),血清E2水平升高(P0.05);同时,子宫脏器指数、子宫内膜厚度、子宫组织中ERα、ERβ和Cyclin B蛋白表达均明显升高(P0.05),与雌激素组呈现相似的作用,但作用强度均低于雌激素;补肾活血方+假手术组大鼠各项指标与假手术组比较无明显差异。结论补肾活血方具有雌激素样作用,但作用强度弱于雌激素,对正常大鼠子宫组织无显著影响。     

补肾化瘀方对PCOS大鼠卵巢颗粒细胞FSHR、LHR蛋白表达的影响

目的 通过观察补肾化瘀方对大鼠卵巢颗粒细胞上卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)蛋白的表达,探讨中药对多囊卵巢综合征(PCOS)卵巢局部的影响及作用机制.方法 应用补肾化瘀方作用于以丙酸睾酮联合HCG诱导PCOS大鼠模型,采用免疫组化法,检测PCOS大鼠颗粒细胞FSHR、LHR蛋白表达.结果 与正常组相比,模型组大鼠卵巢体质量增加,呈多囊性改变,卵泡颗粒细胞减少而膜细胞层增加,补肾化瘀方组卵巢形态接近正常组.补肾化瘀方能明显提高PCOS大鼠颗粒细胞FSHR、LHR蛋白表达,补肾化瘀方各剂量组与模型组和妈富隆阳性对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05或0.01),而中剂量组与正常对照组比较,差异均无统计学意义.结论 补肾化瘀方能提高PCOS大鼠卵巢颗粒细胞FSHR、LHR蛋白表达,可能与补肾化瘀方具有促进卵泡发育和排出的作用机制有关.     

补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠卵巢转化生长因子β1及其受体表达的影响

目的：观察补肾调经方对雄激素致无排卵大鼠卵巢转化生长因子β1／转化生长因子pI型受体（TGF-β1／TGF—βRⅠ）表达的影响，探讨其治疗无排卵性疾病的作用机制。方法：建立雄激素致无排卵大鼠模型，设乌鸡白风口服液为阳性对照药，分为正常组、模型组、阳性药对照组和中药治疗组，采用HE染色观察卵巢组织形态学变化，采用免疫组化法检测卵巢颗粒细胞、间质细胞TGF—β1／TGF—βRⅠ的表达强度。结果：补肾调经方可改善病理状态下模型大鼠卵巢的形态结构，使模型大鼠卵巢颗粒细胞高表达的TGF-β1、间质细胞高表达的TGF-β1／TGF-βRⅠ恢复接近正常。结论：补肾中药可通过对卵巢TGF-β1及其受体TGF—βRⅠ表达的影响，促进卵泡发育。     

ER、PR、VEGF及其受体在原因不明月经过少发病机制中的作用

目的:通过对子宫内膜组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、血管内皮生长因子((VEGF)及其受体(KDR)表达的研究,探讨原因不明月经过少的发病机制.方法:2004年9月至2005年12月重庆医科大学附属第一医院以前瞻性方法观察月经过少组(观察组)和正常月经组(对照组)患者各40例,采用酶联免疫测定法,测定两组血清6项性激素,包括卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌激素(E2)、催乳素(PRL)、孕酮(P)及睾酮(T),通过免疫组化半定量测定两组子宫内膜组织中ER、PR、VEGF、KDR的表达水平.结果:两组血清性激素水平FSH、LH、E2、PRL、P及T差异无显著性意义(P＞0.05);观察组子宫内膜ER、VEGF和KDR的表达明显低于对照组(P值分别为＜0.05);两组子宫内膜腺上皮细胞PR的表达差异无显著性意义(P＞0.05).结论:子宫内膜组织中ER、VEGF和KDR的异常表达可能导致原因不明的月经过少.     

异位妊娠子宫内膜与输卵管的雌孕激素受体表达关系

目的 研究异位妊娠患者子宫内膜及输卵管内膜的雌激素受体(ER)及孕激素受体(PR)的表达水平和关系,分析异位妊娠时不同部位激素受体水平的相关性.方法 收集病例资料403例,包括早孕患者子宫内膜、异位妊娠患者子宫内膜及双侧输卵管组织、正常输卵管组织,采用SP法染色,检测ER及PR的表达水平.结果 子宫内膜的ER和PR阳性表达水平明显高于输卵管组织,五组比较差异均有显著性(P＜0.05);子宫内膜组ER和PR阳性表达正常宫内早孕组最高,输卵管妊娠组较低,两组差异有显著性(P＜0.05);输卵管组ER和PR阳性表达水平在输卵管妊娠组中较高,均高于异位妊娠患者正常侧输卵管及正常输卵管组,三组间两两比较差异均有显著性(P＜0.05).异位妊娠患者子宫内膜与输卵管组织的ER、PR表达水平呈正相关.结论 ER及PR在妊娠输卵管黏膜组织中含量较低,导致输卵管上皮发育及肌层蠕动功能与生殖活动不相适应,可能是发生输卵管妊娠的因素之一;通过诊断性刮宫检测子宫内膜的ER、PR水平可以间接了解异位妊娠者患侧输卵管ER和PR的表达水平,决定最佳的治疗方案,缩短治疗时限.     

雌、孕激素受体在子宫肌瘤、子宫腺肌病中的表达及其意义

目的 探讨雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)在子宫肌瘤、子宫腺肌病病灶及其在位内膜组织中的表达情况.方法 采用免疫组织化学染色法(Evision二步法)分别检测38例子宫肌瘤(肌瘤组)的肌瘤病灶和在位内膜及30例子宫腺肌病(腺肌病组)的腺肌病病灶和在位内膜中ER、PR的表达水平.结果 肌瘤组和腺肌病组病灶的ER、PR表达水平明显低于在位内膜组织;肌瘤组中ER、PR表达均符合增生期高于分泌期的变化规律,腺肌病组ER、PR除在位内膜PR外均丧失周期性变化规律.结论 子宫肌瘤的发生与雌、孕激素水平及其受体含量的周期性变化有关,腺肌病病灶ER、PR的低表达和缺乏周期性变化及相应在位内膜ER也丧失周期性变化的特点可能与子宫内膜异位症的发生、发展有关.     

米非司酮对不同月经周期异位和在位子宫内膜雌激素受体α和孕激素受体表达的影响

目的 探讨米非司酮对雌激素受体α(ERα)和孕激素受体(PR)在不同月经周期的子宫腺肌症中表达的影响.方法 47例行全子宫切除术的子宫腺肌症患者分为米非司酮组(n=24)和未用药组(n=23);无腺肌症的正常子宫内膜作为对照组(n=15).运用免疫组化的方法测定异位和在位子宫内膜及正常子宫内膜在不同月经周期的腺上皮及间质细胞中ERα和PR水平.结果 未用药组ERα和PR在异位子宫内膜腺上皮及间质细胞中的表达均低于在位内膜及对照组正常内膜(P<0.05).对照组及未用药组ERα和PR在在位内膜腺上皮细胞中的表达,增生期高于分泌期(P<0.05),而在未用药组异位内膜,差异无统计学意义(P>0.05).ERα和PR在异位和在位子宫内膜中的表达,米非司酮组低于未用药组(P<0.05).结论 ERα和PR在异位子宫内膜中的表达与在位子宫内膜不同;异位内膜丧失了正常内膜的周期性变化规律;米非司酮通过下调其性激素受体(ERα和PR)含量治疗子宫腺肌症.     

中药穴位敷贴对实验性乳腺增生模型大鼠雌、孕激素受体表达的影响

【目的】探讨中药穴位敷贴疗法对实验性乳腺增生模型大鼠的作用机制。【方法】将30只SD(远交群)大鼠随机分为正常组、模型组、穴位敷贴组,每组10只。采用雌激素诱导法复制大鼠实验性乳腺增生模型,以中药穴位敷贴治疗。采用免疫组织化学染色方法,观察各组大鼠乳腺组织细胞中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的分布或含量。【结果】与正常组比较,模型组ER、PR表达水平显著升高(P0.01)。与模型组比较,穴位敷贴组ER、PR表达水平显著降低(P0.01)。【结论】中药穴位敷贴疗法可能通过下调乳腺组织ER、PR表达,从而起到抑制乳腺增生的作用。     

健脾益气止血方对脾气虚大鼠血清E2、P及下丘脑、子宫ER、PR的影响

探讨健脾益气止血方对脾气虚模型大鼠血清雌二醇(E2)、孕酮(P)及下丘脑、子宫ER、PR的影响.以游泳加番泻叶水浸剂造脾气虚大鼠模型,用放射免疫分析方法检测血清E2、P,用免疫组织化学方法结合图像分析检测下丘脑及子宫ER、PR,并观察健脾益气止血方对脾气虚大鼠模型的作用.健脾益气止血方可恢复脾气虚大鼠E2、P的分泌水平,并使子宫、下丘脑ER水平升高,下丘脑PR进一步下降.健脾益气止血方可以改善脾气虚模型大鼠生殖系统功能.     

对-壬基酚的幼雌SD大鼠子宫营养试验敏感指标探讨

目的　探究典型的外源性雌激素对 -壬基酚 (p- NP)的幼雌 SD大鼠子宫营养试验敏感指标及其机理。方法　用 2 1d龄 SD雌性大鼠 5 0只 ,随机分为花生油溶剂对照组 ,p- NP6 0 mg/ kg、90 mg/ kg和 12 0 mg/ kg,苯甲酸雌二醇 (E2 B,0 .4 mg/ kg)阳性对照组共 5组 ,每天灌胃一次给药 ,连续 3d。于末次给药后 2 4 h处死动物 ,取子宫称湿质量。用免疫组化技术检测子宫雌激素基因产物孕激素受体 (PR)、雌激素受体 (ER)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。结果　 E2 B0 .4 m g/ kg、p- NP90 mg/ kg和 12 0 m g/ kg组的子宫湿质量、子宫 /体质量比与溶剂对照组相比 ,均有显著性差异 (P<0 .0 1) ,且有明显的剂量效应关系。而 p- NP6 0 mg/ kg组的子宫固有层和肌层细胞核有 PR,ER及 PCNA表达 ,且有随剂量递增趋势。结论　子宫营养试验检测雌激素基因产物比其它指标敏感 ,固有层和肌层细胞增生是子宫湿质量增加的原因。     

被动吸烟对雌鼠卵巢功能的影响

目的 利用Wistar大鼠烟雾吸入模型,观察被动吸烟对Wistar大鼠雌激素（E2）、孕激素（P4）水平及卵巢雌激素受体α（ERα、孕激素受体（PR）蛋白及mRNA的影响,为提倡生育期妇女避免被动吸烟提供新的理论依据.方法 32只健康雌性Wistar大鼠,随机分为对照组和实验组,每组16只.实验组吸烟3个月,对照组正常饲养.3个月后处死两组大鼠.酶联免疫吸附试验方法（ELISA）检测大鼠血清中E2,P4的水平;免疫组织化学及免疫印迹法检测大鼠卵巢中ERα,PR蛋白的表达,RT-PCR检测大鼠卵巢中ERα,PRmRNA的表达.结果 ELISA结果显示实验组大鼠血清E2,P4水平显著低于对照组;实验组大鼠卵巢组织中ERα表达明显低于对照组.PR主要表达在大鼠卵巢组织卵泡颗粒细胞的细胞质和细胞核中,呈棕黄色颗粒状分布,对照组大鼠卵巢组织中PR的表达明显低于对照组.实验组卵巢组织中ERα及PR蛋白表达明显低于对照组.实验组卵巢组织中ERα及PR mRNA的表达也低于对照组.结论 被动吸烟可引起大鼠血清中E2及P4水平下降,卵巢中ERα及PR的表达减少,提示被动吸烟可破坏卵巢的功能,引起卵巢生殖内分泌失调.     

Study on mechanism of Bushen Yugong Granule in treating uterine dysgenesiain treating uterine dysgenesia

Objective: To explore the therapeutic mechanism of Bushen Yugong Granule (BSYGG, a Chinese medicinal preparation) in treating infertility due to uterine dysgenesia.Methods: (1) Clinical study: Serum level of sex hormone and endometrial contents of estradial receptor (ER) and progesterone receptor (PR) in follicle period of 60 patients (the tested group) were measured and compared before and after treatment, and also compared with those of 70 normal women (the control group). (2) Experimental study: Rats were divided into the control group and 3 tested groups fed with different doses of BSYGG. Pathologic examination of pituitary, ovary and uterus of rats after BSYGG treatment were performed, and serum levels of ER, PR measured. Also, an estrogen activity experiment was conducted in some young oophorectomized rats.Results: (1) Clinical study showed the difference of serum sex hormone levels between the tested and control group was insignificant. The percentage of patients in the tested groups with endometrial ER content over ++ was lower than that in the control group (46.9 % vs 72.4 %) significantly (P < 0.05), after treatment, it rose to 65.4 %, and the change was significant, P<0.05. (2) Experimental study showed that the number of follicle, weight of uterus and serum E₂ level increased significantly after BSYGG treatment. The endometrial content of ER in the control group was 29.25±17.03%, while in the tested groups, it was 67.75 ± 24.56% to 83.00 ± 9.87% after treatment, the difference between the two groups was significant (P<0.005).Conclusion: BSYGG has an estrogen-like activity, it could increase the endometrial content of ER, enhance the effect of estrogen on uterus and promote the development of uterus, so as to elevate fertilization rate.     

促性腺激素释放激素激动剂对卵巢癌大鼠化疗效果的影响

目的 研究促性腺激素释放激素激动剂(GnRHa)对大鼠卵巢组织中雌激素受体α(ERa),ERB,孕激素受体(PR)和雄激素受体(AR)的表达的影响以及对环磷酰胺在卵巢癌大鼠模型中治疗效果的影响。方法 (1)80只Fischer-344大鼠分为4组,分别接受生理盐水、环磷酰胺((3TX)、GnRHa和CTX GnRHa治疗,采用免疫组化和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)的方法比较各组大鼠卵巢组织中ERα,ERB,PR和AR的表达水平;(2)使用NuTu-19卵巢癌细胞系在20只Fischer-344大鼠上建立卵巢癌模型,分为3组,分别接受生理盐水、CTX和CTX GnRHa治疗,比较各组大鼠的生存时间。结果(1)4组大鼠卵巢组织中ERct、ERβ、PR、AR mRNA强度分别为0．24～0．29、1．13～1．35、0．68～0．88、1．39～1．63,免疫组化评分结果分别为4．7～5．1、15．1～15．5、8．5～9．1、17．9～19．0,各组大鼠的受体表达水平差异没有统计学意义;(2)(3TX组和联合治疗组大鼠的生存时间分别为76．0d和79．6d,两者差异没有统计学意义。结论 在大鼠模型中应用GnRHa的过程中不会改变大鼠卵巢组织中ERα、ERβ、PR、AR的表达水平,也不会影响CTX对卵巢癌大鼠模型的治疗效果。     

输卵管结礼术对大鼠子宫胞液雌二醇受体和孕酮受体的影响

本实验观察了９只正常大鼠及１４只输卵管结扎术后大鼠动情期和动情后期子宫胞液雌二醇受体（ＥＲ）和孕酮受体（ＰＲ）的变化。结果表明：输卵管结扎术对大鼠子宫胞液ＥＲ和ＰＲ有明显影响，在动情期结扎术组大鼠子宫胞液ＥＲ较对照组明显减少（Ｐ＜０．０１），而在动情后期ＥＲ较对照组显著增高（Ｐ＜０．０１）；结扎术组动情期子宫胞液ＰＲ与对照组相比无明显变化，但动情后期ＰＲ较对照组增加（Ｐ＜０．０５）。以上结果提示，输卵管结扎术后月经紊乱的发生可能与子宫内膜ＥＲ、ＰＲ的功能受到干扰有关。     

卵巢功能障碍的中医证治探讨

结合中医生殖理论及卵巢的功能特点,从卵泡发育、成熟、排卵不同阶段的功能异常论述卵巢功能障碍的病机特点和治疗特色,尤其对卵巢早衰、无排卵性功能失调性子宫出血、多囊卵巢综合征、未破裂卵泡黄素化综合征等疑难疾病的治疗特色进行了探讨。     

脾不统血证大鼠模型子宫内膜细胞凋亡及细胞周期的研究

观察比较泻下加劳倦的脾气虚证模型、出血因素、两者复合的脾不统血证模型和卵巢摘除各组大鼠卵巢、子宫重量和子宫内膜细胞凋亡及细胞周期的变化,以及益气止血中药对卵巢摘除组的影响.结果表明,复合因素的脾不统血证模型卵巢、子宫重量的下降较脾气虚模型显著,细胞周期中G1期细胞较正常组显著增多,而中药治疗组G1期细胞显著减少,S期、G2期增多,说明益气止血中药能促进子宫内膜细胞的增殖.     

子宫肌瘤中ER、PR和IGF-1受体表达的研究

目的：探讨人子宫肌瘤及周围正常子宫平滑肌细胞中胰岛素样生长因子-1受体（IGF-1R）的变化及其与雌、孕激素受体的关系。方法：免疫组织化学SABC法检测雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、IGF-1R的表达,并对其进行图像分析。结果：子宫肌瘤细胞中ER、PR、IGF-1R的表达明显高于子宫肌层细胞的表达。结论：子宫肌瘤的生长与子宫肌瘤组织ER、PR、IGF-1R的表达增强有关。     

Bcl-2基因、雌激素受体和孕酮受体在子宫内膜的表达

目的 探讨bcl-2、雌激素受体（ER）和孕酮受体（PR）在子宫肌层、卵巢、输卵管壁的异位内膜与子宫正位内膜的表达及春意义。方法 用免疫组化S－P法对子宫肌层内的异位内膜15例，卵巢内膜异位15例，输卵管壁内膜异位5例及子宫正位内膜25例进行bcl-2、ER和PR检测。结果 bcl-2在子宫肌层内和输卵管内的异们丙膜阳性表达率为100％，卵巢异位内膜阳性表达率为86．6％，子宫正位内膜阳性表达率为52％。ER在子宫肌层的内膜异位阳性表达率为6．7％，卵巢内膜异位为33．0％，而4例输卵管内膜异位无阳性表达。PR在子宫肌层有内膜异位阳性表达率为86．6％，卵巢内膜异位为20．0％，5例输卵管内膜异位均表达阳性。结论 异位的子宫内膜细胞凋亡明显少于正位内膜，细胞生长有一定活跃性。异位子宫内膜的增生、分泌与正位子宫内膜不同步，表现为不规则性。卵巢、输卵管异位内膜的发生，可能与原始间叶细胞异分化有关。