护肝煎剂抑制鸭肝炎病毒的实验研究

鸭乙型肝炎病毒(DHBV)是1980年才发现的嗜肝DNA病毒,与人乙型肝炎病毒(HBV)的生物学特征及其与宿主肝脏疾病的关系十分相似。国内外近10年来的研究表明,DHBV感染的鸭子可以用作研究人乙型肝炎和肝癌较为理想的动物模型。本研究是用含有DHBV的麻鸭血清注射一日龄鸭足静脉造成人工感染,用具有抗HBV、活血化瘀、调节免疫功能等作用中药制成护肝煎剂进行实验治疗,以检测鸭血清中DHBeAg的P/n值作为疗效指标,研究结果报告如下。     

护肝灵抑制DHBV的实验研究

本文采用护肝灵治疗人工感染鸭乙型肝炎病毒的模型动物。通过斑点酶免疫测定法(Dot Engyme Immunoassay,Dot EIA)检测实验感染鸭血清中DHBsAg和ELISA法检测DHBeAg的动态变化,结果显示护肝灵对DHBV有抑制作用,其抑制作用呈药物浓度依赖性关系。     

鸭乙肝病毒感染和鸭肝病相关关系的研究

为探索嗜肝DNA病毒同肝病之间的关系,对启东鸭的鸭乙肝病毒(DHBV)感染和鸭肝病进行研究。用分子杂交手段检测鸭子对DHBV的感染,用Southern blot技术分析DHBV-DNA在鸭肝细胞中存在状态,同时做鸭肝病理学研究,分析病理学结果与DHBV感染之间的相关关系。结果表明,65.7%的启东鸭有DHBV感染的证据,肝病发生率是70%,而对照组长春鸭无DHBV感     

广西麻鸭乙型肝炎感染病毒动物模型的实验研究

目的探讨广西麻鸭作为乙型肝炎病毒感染动物模型的可能性。方法应用广西1 d龄雏麻鸭经腹腔感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV),13 d后采用实时荧光定量PCR法检测麻鸭血清DHBV含量,筛选出DHBV强阳性鸭。结果共检测148份麻鸭血清标本,其中DHBV阳性标本136份,阳性率为91.9%。结论广西麻鸭可作为乙型肝炎病毒感染动物模型。实时荧光定量PCR法检测DHBV敏感性较高,重复性好,可用于DHBV检测。     

重庆麻鸭乙肝动物模型的建立及应用——21种中药抗鸭乙型肝炎病毒初筛研究

采用斑点杂交法检测了重庆地区263份2～3月龄麻鸭血清中的DHBV DNA,用筛选出的阳性病毒血清经腹腔感染1～2日龄的血清DHBV DNA阴性雏鸭,并用该模型进行了21种中药抗乙肝病毒初(?)。结果表明:(1)重庆地区2～3日龄麻鸭DHBV自然感染率为25.48％.(2)经腹腔感染的1～2日龄雏鸭的血清DHBV DNA阳性率1周后为82.90％,并可持续至少2个月。(3)抗乙肝病毒中药初(?)发现用广西叶下珠、苦参治疗2周可使DHBV DNA滴度下降,其余的经体外实验认为有效的抗乙肝病毒中药,动物实验并未获证实。     

鸭乙肝病毒基因探针和表面抗原抗体检测系统已制备成功

白求恩医科大学肝病研究所名誉所长叶维法教授继1982年与日美两国协作,在我国肝癌高发区江苏启东县和广西扶绥县的家鸭中检出鸭乙肝病毒(DHBV)感染后,该所于1986年制备了检测DHBV-D NA的基因探针,并建立了检测DHBV感染的表面抗原抗体系统。用以上手段已对300余只流行区和非流行区的家鸭,进行了DHBV感染与肝病的相关关系的研究,并分析了DHBV     

鸭乙型肝炎动物模型的研究进展

自1980年Mason等报道在中国鸭血清中发现鸭乙型肝炎病毒(DHBV)以来,国内外学者相继进行了鸭乙型肝炎的研究。现已得出结论:DHBV与人乙型肝炎病毒(HBV)在生物学特性和致宿主肝脏疾病方面,二者非常相似;鸭乙型肝炎动物模型是研究人病毒性肝炎的较理想模型。有关国内对该模型的研究情况,尚未见综述,故参阅相关文献,概述于下。     

肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的：用鸭乙肝模型研究肝康栓对鸭乙型肝炎病毒（DHBV）的体内抗病毒作用。方法：用DHBV阳性血清感染1日龄的樱桃谷鸭，制备鸭乙型肝炎模型。随机分成5组：肝康栓大、中、小3个剂量治疗组，生理盐水模型组和阿昔洛韦（ACV）对照组，每组12只，均连续给药4周。分别于给药前，给药14天、28天，停药7天时取血清，用real-timePCR法检测鸭血清中DHBV DNA拷贝数的变化情况。结果：肝康栓大剂量组给药14天、28天及停药7天，中剂量组给药14天、28天，小剂量组给药28天，鸭血清中DHBV DNA拷贝数的对数值均较给药前降低（〉2个对数级），差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：肝康栓具有有效抑制鸭体内DHBV DNA复制的作用。     

鸭血清中鸭乙型肝炎病毒表面抗原与肝脏病理变化

用超速离心方法从启东鸭血清中分离和纯化了鸭乙型肝炎病毒(DHBV),提示了DHBsAg有亚型存在的可能性。纯化的DHBsAg免疫动物,制备了特异性抗血清,并用戊二醛二步法建立了检测DHBsA巴的灵敏、特异、简便的反向间接血凝法。通过对江苏启东、山东日照、广西扶绥、长春各地鸭血清中DHBsAg的检测和启东、长春鸭肝脏病理学检查,示检测血清中DHBsAg标志     

三种鸭乙肝病毒感染情况的研究

DHBV的感染与肝病的关系还不甚明了。本文用斑点杂交法,液闪法和光镜病理分别对92只从市场采购的家鸭进行研究发现:A组(绍兴麻鸭)46只中有28只DHBVDNA(+)(60.8%),B组(昆山麻鸭)18只中有7只DHBV DNA(+)(38.9%),二组比较(P>0.05)无显著性差异,C组(天津白鸭)28只无一只DHBV DNA阳性,说明南方鸭比天津鸭易感。同时用DHBVDNA探针与人HBV DNA阳性的血清行杂交和用HBVDNA探针与鸭DHBV DNA阳性的血清行杂交结果均为阴性,说明二者之基因序列无同源性。DNA聚合酶(DNA-p)的检测发现其阳性率为6.5%并同时伴有DHBV DNA(+),说明DNA-p的检测     

感染鸭乙型肝炎病毒鸭外周血CD4~+和CD8~+T淋巴细胞水平变化

目的了解实验感染鸭乙型肝炎I型病毒(DHBV)的实验鸭外周血CD4+T和CD8+T淋巴细胞数变化及意义。方法采用经外周静脉注射含DHBV血清制备感染鸭,应用流式细胞仪检测感染DHBV实验鸭外周血CD4+T和CD8+T淋巴细胞数。结果在感染DHBV 7日后,实验鸭血清HBs Ag、鸭HBe Ag和抗-鸭HBc均阳性,说明感染成功,感染动物肝功能损害明显,血清ALT、AST水平急剧升高,与健康对照组比,差异显著(P0.01);感染动物外周血CD4+T细胞和CD8+T细胞分别为(38.41±9.59)%和(23.80±6.44)%,均显著高于对照组[分别为(23.06±12.30)%和(17.65±10.83)%,P0.01]。结论当HBV侵入机体时就会激发细胞免疫反应,大量的CD4+T和CD8+T细胞被释放入血,参与病毒清除和肝损伤过程。     

919糖浆抗鸭乙型肝炎病毒的实验研究

目的:研究919糖浆时鸭乙型肝炎的体内抗病毒作用。方法:以感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的武汉麻鸭为实验动物模型。使1d龄武汉麻鸭感染DHBV,7d后用Dot-EIA法筛选出DHBsAg强阳性鸭。随机分组后给予919糖浆治疗14d,于感染后第7d(为用药前)、用药7d、14d及停药后3d分别采血,采用斑点杂交方法检测血清DHBVDNA。结果。用药919糖浆7d、14d鸭血清DHBV DNA OD值均明显低于给药前,有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。停药3d后没有反跳现象。结论:919糖浆有一定的抑制DHBV DNA复制作用。     

肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒和改善肝脏病理的作用

[目的]用鸭乙型肝炎（乙肝）模型研究肝康栓抗鸭乙型肝炎病毒（DHBV）和改善肝脏病理的作用。[方法]用DHBV阳性血清感染1d龄的樱桃谷雏鸭，制备鸭乙肝模型。将其中36只感染阳性鸭随机分成3组：肝康栓治疗组，0．85％氯化钠模型组和阿昔洛韦（ACV）对照组，每组12只，均连续给药4周。分别于给药前，给药14、28d和停药7d时取血清，用实时定量PCR法检测鸭血清中DHIWDNA拷贝数。于停药7d时，处死各组雏鸭，取肝脏病理切片苏木精一伊红染色后，观察肝脏炎症情况和肝细胞变性程度。[结果]肝康栓治疗组给药14、28d及停药7d时鸭血清中DHBVDNA拷贝数的对数值均较给药前降低（均P〈0.01）。肝康栓治疗组雏鸭肝脏的肝细胞肿胀率、空泡变率、嗜酸性变率均较同期模型组降低，差异有统计学意义（P〈0.05，〈20．01）。[结论]肝康栓能有效地抑制鸭体内DHBVDNA的复制，并具有改善肝脏病理的作用。     

小分子肽抗乙型肝炎病毒的实验研究

目的:应用2.2.15细胞株和鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染模型,评价小分子肽CMS 017抗乙肝病毒作用.方法:①CMS 017以倍比稀释浓度加入2.2.15细胞培养中,作用8天后吸取培养上清,PCR法检测HBVDNA.②建立DHBV感染模型,CMS017以60、200、600μg/kg·d-13个剂量腹腔注射给药28天,检测用药前、后血清DHBV DNA、DHBsAg变化.结果:①CMS 017体外抑制DHBV呈量效关系,IC50为2.3μg/ml.②鸭体内实验中,CMS 017中、高剂量组用药7天、14天开始出现血清DHBV DNA降低(P＜0.01,P＜0.05),持续至停药后7天.CMS 017中剂量组用药后血清DHBsAg降低的时效关系与DHBV DNA完全一致.结论:CMS017具有抗乙肝病毒作用,其体内作用的量效关系待确定.     

我国家禽戊型肝炎病毒感染情况的调查

目的了解我国家禽戊型肝炎病毒(HEV)感染情况。方法自我国15个省份采集鸡和鸭血清共计1647份,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测血清中HEV抗原和抗体;通过Nested PCR对陕西、西藏和海南的全部血清样本及其它抗原阳性样本分别进行HEV及禽HEV核酸检测。结果 1507份鸡血清中有54份为HEV抗体阳性,26份为HEV抗原阳性,抗原和抗体的阳性率分别为3.58%和1.73%;140份鸭血清中10份为HEV抗体阳性,2份为HEV抗原阳性,阳性率分别为7.14%和1.43%;鸡和鸭HEV抗原、抗体阳性率无统计学差异。在鸡、鸭血清标本中没有检测到HEVRNA。结论我国家禽存在HEV感染,但还需要进一步研究以确定感染的病毒是否为禽HEV或1-4型HEV跨种感染。     

鸭乙型肝炎病毒对鸭心肌细胞超微结构的影响

将鸭乙型肝炎病毒(DHBV)感染雏鸭制作的鸭乙型肝炎模型已被广泛用于研制抗乙肝病毒新药,为探索DHBV感染对雏鸭心脏有何影响,我们观察了被DHBV感染的雏鸭其心肌的超微结构,现报道如下。 1 材料与方法 1.1 动物及分组 20只1日龄武汉麻鸭(购自华中农业大学种禽厂),随机分为对照组和感染组,每组10只。 1.2 造模方法及标本制作 雏鸭喂养1周后,分成2组:感染组每只鸭自胫静脉注射DHBV阳性血清     

重庆麻鸭乙型肝炎病毒基因组克隆及序列分析

目的 克隆重庆麻鸭乙型肝炎病毒(DHBV)全基因组并进行序列分析。方法 从自然感染DHBV的重庆麻鸭血清中提取DHBV基因组DNA,以聚台酶链反应扩增DHBV基因组DNA,克隆人PGEM—T载体,鉴定后行测序分析。结果 序列分析表明,重庆麻鸭HBV基因组全长3024 bp,由P、S/PreS及PreC/C基因组成。该DHBV株与GenBank中公布的HPUS5CG(M32990)同源性最高(94.9％),与DHBVCG(X74623)同源性最低(89.8％),其各个开放读码框起止位点与HPUGA相同,DNA和蛋白质序列中含有与基因调控和蛋白质功能相关的保守区。结论 成功克隆重庆麻鸭HBV全基因组,序列分析为进一步研究提供了有益的信息。     

中药复方乙肝解毒丸抗DHBV的实验研究

以人工感染鸭乙型肝炎病毒(DHBV)的雏鸭为实验模型,以斑点杂交试验检测 DHBV DNA 为实验指标,用乙肝解毒丸1号(由大黄、虎杖、羊蹄根、山豆根等组成)、Ⅱ号(由土茯苓、红藤、苦参、猪苓等组成)连续给药二个月进行抗 DHBV 实验治疗。结果:Ⅰ号方治疗组转阴率为29.54％(13/44);Ⅱ号方治疗组转阴率为34.04％(16/47);对照组转阴率为7.89％(3/38),P 分别<0.05和 P<0.01.提示两中药复方均具有抗 DHBV 治疗作用。     

鸭血清中鸭乙型肝炎病毒感染标志的检测及其意义

本文采用ＥＬＩＳＡ技术成功地检测鸭血清中乙型肝炎病毒感染标志。发现鸭感染ＤＨＢＶ后会出现类似人感染ＨＢＶ后的免疫反应，这种免疫反应在麻鸭与北京鸭间具有一定差异。ＤＨＢＶ不仅表面成分，而且核心成分都与ＨＢＶ之间存在一定交叉反应。这些结果不仅对鸭作为ＨＢＶ感染的实验模型，而且对鸭业生产和人类乙型肝炎的防治具有意义。     

三种方法诱发鸭肝纤维化模型的对比研究

采用鸭乙型肝炎病毒(DHBV)强毒株感染1日龄鸭,结果85天后均出现纤维增生(6/6),120天有3/5出现肝纤维化,与感染十四氯化碳注射组(65天3/4出现纤维增生,85天3/6出现肝纤维化)、感染 牛血清白蛋白攻击组(85天3/5出现纤维增生,120天8/12出现肝纤维化)相比,均无统计学差异。提示强毒株DHBV是引起肝脏特异性病变的主要原因,造成DHBV持续感染和延长观察时间,可望进一步提高鸭肝纤维化的造模成功率。